Trypanosoma vivax infection in sheep: Different patterns of virulence and pathogenicity associated with differentially expressed proteomes.

Cattle trypanosomosis caused by Trypanosoma vivax is a widely distributed disease in Africa and Latin America. It causes significant losses in the livestock industry and is characterized by fluctuating parasitemia, anemia, fever, lethargy, and weight loss. In this study we evaluated the virulence (capacity to multiply inside the host and to modulate the host response) and pathogenicity (ability to produce disease and/or mortality) patterns of two T. vivax strains (TvMT1 and TvLIEM176) in experimentally-infected sheep and determined the proteins differentially expressed in the proteomes of these two strains. Hematological and clinical parameters were monitored in experimentally-infected versus non-infected sheep for 60 days. All the infected animals developed discernable parasitemia at 3 days post-infection (dpi), and the first parasitemia peak was observed at 6 dpi. The maximum average value of parasitemia was 1.3×107 (95% CI, 7.9×105-2×108) parasites/ml in TvLIEM176-infected animals, and 2.5×106 (95% CI, 1.6×105-4×107) parasites/ml in TvMT1-infected ones. Anemia and clinical manifestations were more severe in the animals infected by TvMT1 strain than in those infected by TvLIEM176. In the proteomic analysis, a total of 29 proteins were identified, of which 14 exhibited significant differences in their expression levels between strains. Proteins with higher expression in TvLIEM176 were: alpha tubulin, beta tubulin, arginine kinase, glucose-regulated protein 78, paraflagellar protein 3, and T-complex protein 1 subunit theta. Proteins with higher expression in TvMT1 were: chaperonin HSP60, T-complex protein 1 subunit alpha, heat shock protein 70, pyruvate kinase, glycerol kinase, inosine-5'-monophosphate dehydrogenase, 73kDa paraflagellar rod protein, and vacuolar ATP synthase. There was a difference in the virulence and pathogenicity between the T. vivax strains: TvLIEM176 showed high virulence and moderate pathogenicity, whereas TvMT1 showed low virulence and high pathogenicity. The proteins identified in this study are discussed for their potential involvement in strains' virulence and pathogenicity, to be further defined as biomarkers of severity in T. vivax infections.

Trypanosoma vivax infection in sheep: Different patterns of virulence and pathogenicity associated with differentially expressed proteomes.

Cattle trypanosomosis caused by Trypanosoma vivax is a widely distributed disease in Africa and Latin America. It causes significant losses in the livestock industry and is characterized by fluctuating parasitemia, anemia, fever, lethargy, and weight loss. In this study we evaluated the virulence (capacity to multiply inside the host and to modulate the host response) and pathogenicity (ability to produce disease and/or mortality) patterns of two T. vivax strains (TvMT1 and TvLIEM176) in experimentally-infected sheep and determined the proteins differentially expressed in the proteomes of these two strains. Hematological and clinical parameters were monitored in experimentally-infected versus non-infected sheep for 60 days. All the infected animals developed discernable parasitemia at 3 days post-infection (dpi), and the first parasitemia peak was observed at 6 dpi. The maximum average value of parasitemia was 1.3 × 107 (95% CI, 7.9 × 105-2 × 108) parasites/ml in TvLIEM176-infected animals, and 2.5 × 106 (95% CI, 1.6 × 105-4 × 107) parasites/ml in TvMT1-infected ones. Anemia and clinical manifestations were more severe in the animals infected by TvMT1 strain than in those infected by TvLIEM176. In the proteomic analysis, a total of 29 proteins were identified, of which 14 exhibited significant differences in their expression levels between strains. Proteins with higher expression in TvLIEM176 were: alpha tubulin, beta tubulin, arginine kinase, glucose-regulated protein 78, paraflagellar protein 3, and T-complex protein 1 subunit theta. Proteins with higher expression in TvMT1 were: chaperonin HSP60, T-complex protein 1 subunit alpha, heat shock protein 70, pyruvate kinase, glycerol kinase, inosine-5'-monophosphate dehydrogenase, 73 kDa paraflagellar rod protein, and vacuolar ATP synthase. There was a difference in the virulence and pathogenicity between the T. vivax strains: TvLIEM176 showed high virulence and moderate pathogenicity, whereas TvMT1 showed low virulence and high pathogenicity. The proteins identified in this study are discussed for their potential involvement in strains' virulence and pathogenicity, to be further defined as biomarkers of severity in T. vivax infections.

Case report: Molecular evidence of Anaplasma platys infection in two women from Venezuela.

This article presents two case reports of Anaplasma platys detection in two women from Venezuela. Both patients were exposed to Rhipicephalus sanguineus, the presumed tick vector, and experienced chronic, nonspecific clinical signs including headaches and muscle pains. Intra-platelet inclusion bodies resembling A. platys were observed in buffy coat smears and A. platys DNA was amplified and sequenced from whole blood; however, treatment with doxycycline did not alleviate their symptoms. These cases provide further support for A. platys as a zoonotic tick-borne pathogen, most likely of low pathogenicity; nonetheless, the cause of illness in humans by A. platys is yet to be confirmed.

Prevalencía de helmintos gastrointestinales en gatos admitidos en la policlínica veterinaria de la Universidad del Zulia / Prevalence of gastrointestinal helminths in cats admitted at the veterinary policlinic

Se realizó esta investigación con el objetivo de determinar la prevalencia de helmintos gastrointestinales en gatos (Felis catus) que asistieron al Servicio de Consulta Externa de la Policlínica Veterinaria de la Universidad del Zulia (PVU), durante el período de enero a diciembre 2004. Para ello se recolectaron directamente del recto, heces de 64 gatos, procesándose mediante el método de flotación fecal con solución salina saturada, obteniéndose una prevalencia general de helmintos gastrointestinales de 46,9%. Los helmintos observados fueron Ancylostoma spp. (29,7 por ciento), Trichuris spp. (10,9 por ciento), Toxocara spp. (7,8 por ciento) y Physaloptera spp. (6,3 por ciento). No se observaron diferencias estadísticamente significativas de los valores de prevalencia entre sexos (42,9 por ciento en hembras y 50 por ciento en machos), ni entre grupos raciales (48,1 por ciento en gatos mestizos y 41,7 por ciento en gatos de razas puras). En referencia a los grupos etarios, la prevalencia general fue: animales menores de 1 año, 52,6 por ciento; entre 1 y 2 años, 50 por ciento; entre 2 y 4 años, 35,7 por ciento y mayores de 4 años, 47,1 por ciento, sin observarse diferencias estadísticamente significativas (P>0,05) entre los grupos. Toxocara spp. sólo se observó en animales menores de 1 año de edad y Trichuris spp. se detectó en animales mayores de 2 años.

This investigation was carried out in order to determinate the prevalence of gastrointestinal helminths in cats (Felis catus) attended at the Veterinary Policlinic of the University of Zulia (PVU), during the period of January to December 2004. Fecal samples were collected directly from the rectum of 64 cats, and then were processed by the method of fecal flotation with saturated saline solution, obtaining a general prevalence of gastrointestinal helminths of 46.9%. The following helminths were observed: Ancylostoma spp. (29.7%), Trichuris spp. (10.9%), Toxocara spp. (7.8%) and Physaloptera spp. (6.3%). Significant statistical differences of the prevalence values were not observed among sex (42.9% in females and 50% in males) neither among racial groups (48.1% in mixed-breed cats and 41.7% in pure-breed cats). General prevalence in cats by age was: cats younger than 1 year old, 52.6%; between 1 and 2 years, 50%; between 2 and 4 years, 35.7%; and older than 4 years old, 47.1%. Statistical differences were not observed between ages. Toxocara spp. was only found in animals younger than 1 year old and Trichuris spp. was detected in animals older than 2 years.

Expression and distribution of the complement receptor gC1qR bovine sperm

El gC1qR, un receptor para el dominio globular del C1q, es una proteína multicompartamental y multifuncional, cuya intervención en el proceso de fecundación en humanos se ha demostrado recientemente. Los objetivos de esta investigación fueron describir la distribución de gC1qR y valorar su expresión en la membrana plasmática de espermatozoides bovinos antes y después del tratamiento con heparina. La capacitación de espermatozoides provenientes de semen descongelado bovino se indujo con una incubación con heparina y su efectividad se evaluó con la tinción CTC. Posteriormente, se realizaron ensayos de inmunofluorescencia indirecta con el anticuerpo monoclonal 60.11 (anti-gC1qR). El análisis de los datos demostró que el gC1qR es una molécula ubicada en la membrana plasmática de los espermatozoides bovinos que presentauna redistribución tras la capacitación, concentrándose en la región acrosomal: 175 espermatozoides en las alícuotas incubadas con heparina vs. 109 en el control (P<0,05; n=300) presentaron fluorescencia en la región acrosomal; esta distribución es semejante a la documentada en humanos. Igualmente, el nivel de expresión o de accesibilidad de gC1qR en el espermatozoide bovino aumentó tras la capacitación, hecho que se ha observado también en humanos. Estos resultados sugieren que el gC1qR podría participar en la interacción primaria entre el espermatozoide y el ovocito en bovinos.

The complement receptor gC1qR/p33, which recognizes the globular heads of C1q, is a multicompartmental and multifunctional protein and has been shown to play a role in reproduction in humans. The objective of this research was to determine the gC1qR distribution and expression on plasma membrane in bovine sperm before and after heparin treatment. Thus, capacitation of sperm derived from frozen-thawed bovine semen was induced through heparin incubation and its effectiveness was assessed with a CTC stain. Subsequently, indirect immunofluorescence assays were conducted with mAb (60.11, anti-gC1qR) to assess gC1qR distribution and expression. Data analysis demonstrated that gC1qR is expressed on the plasma membrane of bovine sperm. gC1qR showed a capacitation-related redistribution, migrating to the acrosome region: 175 sperm in heparin-incubated aliquots vs. 109 in control (P<0.05, n=300) showed fluorescence over the acrosome region. This distribution is similar to that reported in humans. Similarly, either gC1qR expression or its accessibility to antibodies increased after capacitation. This also correlates with what has been observed in humans. These results suggest that gC1qR could participate in primary sperm-oocyte interaction in bovines.

Isolation and identification of microorganisms present in 53 dogs suffering otitis externa

La otitis extrema es una enfermedad de etiología multifactorial que comúnmente afecta a los caninos. Representa una patología compleja que se asocia a infecciones causadas por bacterias y levaduras, y que muchas veces no responden a los tratamientos. El objetivo de este estudio fue aislar e identificar los microorganismos patógenos y no patógenos presentes en pacientes con otitis extrema. Esta investigación fue realizada sobre 53 pacientes caninos con otitis extrema que fueron atendidos en el Servicio de Consulta Extrema de la Policlínica Veterinaria de la Universidad del Zulia, los mismos presentaron signos clínicos tales como: eritema del canal auditivo, aumento de las secreciones, dolor, sacudidas constantes de la cabeza y prurito, siendo las secreciones purulentas y el prurito los más resaltantes. Las muestras fueron colectadas de los exudados presentes en la porción horizontal del canal auditivo. Diferentes grupos de bacterias fuerona aisladas en medios de cultivos, presentándose con mayor frecuencia Pseudonoma aeruginosa (22,22%), Proteus mirabilis (13,89%), Staphyloccocus aureus (12,50%), Staphylococcus epidermis (8,33%), Escherichia coli (5,56%) y Staphylococcus coagulada negativa (5,56 %). Por medio de la evaluación citológica se evidenció que Malassezia pachydermatis se encontró presente en un 68,80% de los casos estudiados. Las razas mayormente afectadas fueron Poodle (30,19%), mestizos (26,42%), Cockers spaniel (16,98%) y pastor alemán (9,49%); así mismo se observó mayor incidencia de otitis en caninos entre los 2 y 5 meses de edad (43,40%).

Efecto de la infección experimental con Trypanosoma vivax sobre parámetros hematológicos en ovinos / Effect of experimental trypanosoma vivax infection on hematological parameters in sheep

El propósito de esta investigación fue conocer el efecto de la infección experimental de una cepa de Trypanosoma vivax, aislada en el estado Zulia, Venezuela, sobre los parámetros hematológicos en ovinos. Se utilizaron ocho ovinos. Se utilizaron ocho ovinos mestizos West-African, con edades comprendidas entre 6 meses y 1 año, los cuales fueron separados en dos grupos. El grupo experimental, conformado por cuatro animales fue inoculado por vía intravenosa con 2 mL de sangre fresca, conteniendo aproximadamente 1,3 x 10 elevado a la seis tripanosomas/mL, tomada de un ovino positivo; el grupo control, estuvo conformado por los cuatro ovinos restantes. Se evaluaron durante 90 días los parámetros: temperatura corporal parasitemia, hematocrito, emoglobina, leucocitos y proteínas totales. Todos los animales infectados presentaron tripanosomas en sangre a partir del día 2 post-inoculación, desarrollando una parasitemia de tipo ondulante y un cuadro de anemia severa que persistió hasta el final del ensayo. El curso de la infección experimental con T. vivax permitió la identificación de dos fases: la primera fase, observada en la primeras cuatro semanas del período post-infección, en la cual, los ovinos inoculados presentaron altos niveles de parasitemia, fiebre remitente y un descenso significativo (P<0,05) en los valores del hematocrito y hemoglobina con respecto al grupo control. El número total de leucocitos disminuyó principalmente en la primera semana post-infección, y permanecieron por debajo del grupo control durante todo el ensayo. La segunda fase evidenciada a partir de la quinta semana post-infección; en este período, los animales inoculados manifestaron niveles de parasitemia menores a los detectados en la fase anterior, fiebre remitente, persistencia de bajos valores del hematocrito y de la hemoglobina, además de un incremento significativo (P<0,05) de las proteínas plamáticas. Los cambios en los valores hematológicos y temperatura...

Prevalencia de Anaplasma marginale en bovinos del sector La Piñata, municipio La Cañada de Urdaneta: estado Zulia Venezuela / Prevalence of anaplasma marginale in cattle from La Piñata sector La Cañada de Urdaneta county Zulia state Venezuela

Se realizó un estudio con la finalidad de determinar la prevalencia de Anaplasma marginale en bovinos del sector La Piñata, municipio La Cañada de Urdaneta, estado Zulia, Venezuela. Para ello fueron seleccionadas 12 fincas, con una población de 6.894 bovinos, evaluándose 174 muestras por medio de la técnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) y la observación de frotis de capa blanca. A través de la técnica de IFI, se obtuvo una prevalencia de 95,4 por ciento (166 animales positivos) para Anaplasma marginale; mientras que mediante la observación de frotis de capa blanca fue de 56,9 por ciento (99 animales positivos). No se encontraron diferencias significativas con relación a la presencia de Anaplasma marginale y el sexo o la edad de los animales. Todas las fincas incluidas en la investigación mostraron prevalencias de Anaplasma marginale iguales o mayores a 75 por ciento, indicando que la zona estudiada presenta una condición de estabilidad enzootica para este hemoparásito. La técnica de IFI resultó ser más efectiva con relación a la observación de frotis de capa blanca en la detección de animales infectados con Anaplasma marginale

Fine structural characterisation of a Rickettsia-like organism in human platelets from patients with symptoms of ehrlichiosis.

Since 1982, Ehrlichia platys infection has been diagnosed in canines from Venezuela by the use of buffy coat smears. In 1992, ehrlichia-like bodies were observed in platelets from a severely ill girl by light microscopy. The patient was seropositive to E. chaffeensis by the indirect fluorescent antibody test (IFAT). Tetracycline was administered and the patient recovered. More than 400 cases with such intra-platelet organisms have been studied at this laboratory over the past 6 years, and all the patients had a good response to the treatment. To determine whether the organisms in human blood platelets were truly platelet ehrlichiae, IFAT and transmission electron microscopy (TEM) studies were undertaken in four patients. Light microscopic examination of blood samples revealed the dense organism inside platelets, and a great reactivity of the blood cells. Sera from the four patients were seronegative against E. chaffeensis and E. platys antigens. Three of four samples contained the intra-platelet organisms when examined by TEM. Electron microscopy showed platelets with vacuoles containing pleomorphic organisms. These organisms had a thickened membrane, an electron-translucent inner area and an electron-dense granular component in the periphery. An abundant electron-dense material was observed surrounding them. The ultrastructure of such micro-organisms has not been reported previously, Based on the similarity of many of their characteristics with rickettsiae, we suggest that the microorganisms found in the present study might belong to the family Rickettsiaceae.

Ehrlichiosis humana: reporte del primer caso en Venezuela / Human ehrlichiosis: report of the first case in Venezuela

La ehrlichiosis humana es una enfermedad zoonótica, causada por una rickettsia leucocitaria descrita por primera vez en los Estados Unidos de Norteamérica en 1986. Más de 300 casos han sido reportados en ese país, así como un caso en Portugal, dos en Francia y uno en un turista procedente de Malí (Africa). En Venezuela, un país tropical, se reporta el primer caso en una niña de 17 meses de edad, quien presentó inicialmente sintomatología compatible con una virosis, progresando con exantema, complicaciones pulmonares, hepáticas, esplénicas, renales y hematológicas incluyendo pancitopenia y coagulación intravascular diseminada (CID). Diferentes diagnósticos fueron planteados antes de concluir que se trataba de una ehrliochiosis. Ante tal evidencia se indicó tratamiento con tretraciclina y se obtuvo rápida recuperación. El diagnóstico inicial fue realizado usando frotis de capa blanca teñido con Diff Quick Stain. La presencia de anticuerpos específicos contra Ehrlichia chaffeensis, fue demostrada utilizando la técnica Inmunofluorescencia indirecta (IFI). Estos hallazgos en humanos no se habían descritos con anterioridad. No se pudo demostrar que la enfermedad fue transmitida por pidaduras de garrapatas