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Nat Biotechnol ; 23(9): 1159-69, 2005 Sep.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-16127450

RESUMO

The tubular gland of the chicken oviduct is an attractive system for protein expression as large quantities of proteins are deposited in the egg, the production of eggs is easily scalable and good manufacturing practices for therapeutics from eggs have been established. Here we examined the ability of upstream and downstream DNA sequences of ovalbumin, a protein produced exclusively in very high quantities in chicken egg white, to drive tissue-specific expression of human mAb in chicken eggs. To accommodate these large regulatory regions, we established and transfected lines of chicken embryonic stem (cES) cells and formed chimeras that express mAb from cES cell-derived tubular gland cells. Eggs from high-grade chimeras contained up to 3 mg of mAb that possesses enhanced antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC), nonantigenic glycosylation, acceptable half-life, excellent antigen recognition and good rates of internalization.


Assuntos
Anticorpos Monoclonais/química , Animais , Southern Blotting , Western Blotting , Células CHO , Varredura Diferencial de Calorimetria , Carboidratos/química , Galinhas , Cricetinae , DNA/metabolismo , Clara de Ovo , Embrião de Mamíferos/citologia , Embrião não Mamífero , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Feminino , Vetores Genéticos , Genoma , Glicosilação , Humanos , Imunoglobulina G , Imuno-Histoquímica , Focalização Isoelétrica , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Modelos Genéticos , Monossacarídeos/química , Oligossacarídeos/química , Ovalbumina/genética , Ovalbumina/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase , Proteínas Recombinantes de Fusão/química , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Espectrometria de Massas por Ionização por Electrospray , Células-Tronco/citologia
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