Interlaboratory Evaluation of Multiple LC-MS/MS Methods and a Commercial ELISA Method for Determination of Tetrodotoxin in Oysters and Mussels.

BACKGROUND: Given the recent detection of tetrodotoxin (TTX) in bivalve molluscs but the absence of a full collaborative validation study for TTX determination in a large number of shellfish samples, interlaboratory assessment of method performance was required to better understand current capabilities for accurate and reproducible TTX quantitation using chemical and immunoassay methods. OBJECTIVE: The aim was to conduct an interlaboratory study with multiple laboratories, using results to assess method performance and acceptability of different TTX testing methods. METHODS: Homogenous and stable mussel and oyster materials were assessed by participants using a range of published and in-house detection methods to determine mean TTX concentrations. Data were used to calculate recoveries, repeatability, and reproducibility, together with participant acceptability z-scores. RESULTS: Method performance characteristics were good, showing excellent sensitivity, recovery, and repeatability. Acceptable reproducibility was evidenced by HorRat values for all LC-MS/MS and ELISA methods being less than the 2.0 limit of acceptability. Method differences between the LC-MS/MS participants did not result in statistically different results. Method performance characteristics compared well with previously published single-laboratory validated methods and no statistical difference was found in results returned by ELISA in comparison with LC-MS/MS. CONCLUSION: The results from this study demonstrate that current LC-MS/MS methods and ELISA are on the whole capable of sensitive, accurate, and reproducible TTX quantitation in shellfish. Further work is recommended to expand the number of laboratories testing ELISA and to standardize an LC-MS/MS protocol to further improve interlaboratory precision. HIGHLIGHTS: Multiple mass spectrometric methods and a commercial ELISA have been successfully assessed through an interlaboratory study, demonstrating excellent performance.

Validación de la metodología para la determinación de ácido domoico (biotoxina ASP) en moluscos bivalvos por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) / Methodology validation for domoic acid determination in bivalved mollusks by high performance liquid cromatography

El ácido domoico es una neurotoxina, competidora del glutamato, que se halla en los mares y océanos del mundo. Objetivo: Validar la metodología para determinar ácido domoico (biotoxina ASP) por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). Materiales y métodos: Se analizó una muestra de 1000 g de moluscos bivalvos (conchas de abanico) extraidos de la zona sur del Perú. Para la precisión del sistema se evaluó: tiempo de retención, área y altura; la exactitud del método se estimó en función de recuperación, analizándose el material de referencia (MUS 1B) y mediante la contaminación de moluscos con solución de ácidodomoico. La sensibilidad del método se evaluó por la determinación del límite de cuantificación (LOQ). Resultados: En la detección lineal se obtuvo un coeficiente de correlación r=0,99 y la precisión del método tuvo un coeficiente de correlación de 3,61 por ciento. Los porcentajes de recuperación fueron 92,52 por ciento y 91,10 por ciento respectivamente, obtuviéndose un límite de cuantificación (LOQ) de 1,30 mg/g AD. Conclusión: Nuestra validación demostró que el método en estudio es preciso, exacto, lineal altamente sensible para ser utilizado en el control de calidad de mosluscos bivalvos.

Estudio de validación de la metodología para la determinación de vitamina A en alimentos infantiles instantáneos por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) / Validation study of the determination of vitamin A in instant food for children through high performance liquid cromatography (HPLC) methodology

Con la finalidad de controlar la calidad alimentos infantiles instantáneos se efectuó la validación de la metodología para la determinación de la vitamina A por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPCL). Para la precisión del sistema se evaluaron tres parámetros: tiempo de retención, área y altura, hallándose una desviación estándar relativa (RSD) máxima de 1,78. En la linealidad se obtuvo un coeficiente de correlación r=0,99 y una precisión con un RSD de 2,70. La exactitud del método se evaluó en términos de recuperación mediante la adición de vitamina A al alimento obteniendose un porcentaje de recuperación de 97,98 ; y para la sensibilidad del método se obtuvo un límite de detección (LOD) de 0,06 ug/g y un límite de cuantificación (LOQ) de 0,58 ug/g. Con los resultados obtenidos se demuestra que el método en estudio es preciso, exacto, lineal y altamente sensible para ser utilizado en el control de calidad de alimentos infantiles instantáneos para la determinación de vitamina A