Development of a Novel Peptide Nucleic Acid Probe for the Detection of Legionella spp. in Water Samples.

Legionella are opportunistic intracellular pathogens that are found throughout the environment. The Legionella contamination of water systems represents a serious social problem that can lead to severe diseases, which can manifest as both Pontiac fever and Legionnaires' disease (LD) infections. Fluorescence in situ hybridization using nucleic acid mimic probes (NAM-FISH) is a powerful and versatile technique for bacterial detection. By optimizing a peptide nucleic acid (PNA) sequence based on fluorescently selective binding to specific bacterial rRNA sequences, we established a new PNA-FISH method that has been successfully designed for the specific detection of the genus Legionella. The LEG22 PNA probe has shown great theoretical performance, presenting 99.9% specificity and 96.9% sensitivity. We also demonstrated that the PNA-FISH approach presents a good signal-to-noise ratio when applied in artificially contaminated water samples directly on filtration membranes or after cells elution. For water samples with higher turbidity (from cooling tower water systems), there is still the need for further method optimization in order to detect cellular contents and to overcome interferents' autofluorescence, which hinders probe signal visualization. Nevertheless, this work shows that the PNA-FISH approach could be a promising alternative for the rapid (3-4 h) and accurate detection of Legionella.

Stepwise strategy for monitoring toxic cyanobacterial blooms in lentic water bodies.

Climate change has been causing the increase in frequency, severity, and duration of harmful algal blooms, which makes the establishment of water management strategies indispensable. For cyanobacteria, several methods are currently used in monitoring programs. However, these methods are time-consuming and require specialists, and results are usually not provided within an adequate timeframe for taking timely mitigation actions. This work proposes a strategy for a faster, easier, and more cost-effective monitoring of cyanobacterial blooms, using a stepwise approach based on fluorometric determination of phycocyanin at an early stage. Complementary parameters (chlorophyll a, enumeration of dominant cyanobacterial species and cyanotoxin potential and quantification) are determined when necessary, thus progressively allocating human and financial resources within the monitoring program. This strategy was applied and validated using nine lentic eutrophic freshwater bodies prone to the occurrence of cyanobacterial blooms. Samples were sequentially evaluated, and the study ended up with two samples that showed high health risks. However, according to WHO guidelines, eight of the nine samples would be classified as having "moderate risk of adverse health effects" and could lead to preventive measures that would have an important regional economic impact. Therefore, the present approach proved to be a promising alternative to increase the effectiveness and accuracy of the risk assessment process in water bodies where cyanobacterial blooms occur.

Correction to: Stepwise strategy for monitoring toxic cyanobacterial blooms in lentic water bodies.

Unfortunately, the name of the third author was incorrectly captured in the published online paper.

Evaluation of angiogenesis in 77 pituitary adenomas using endoglin as a marker.

Angiogenesis, a fundamental process for the development and growth of a tumor, is less expressive in adenomas than in the normal pituitary tissue. There is controversy about the behavior of angiogenesis as a function of hormonal secretion or other characteristics of pituitary tumors. Endoglin (CD105) is a proliferation-associated antigen on endothelial cells, as well as an endothelial progenitor cell marker. We used the anti-endoglin antibody, a glycoprotein expressed in endothelial cells and conjunctive tissue, as a new marker particularly associated with neovascularization, in order to determine microvascular density (MVD) in pituitary adenomas. There were 77 samples, 31 males and 46 females, carriers of micro- (n = 24) or macroadenomas (n = 53). No significant difference was found in MVD concerning the variables of age, clinical presentation, and immunohistochemical phenotype or tumor size. MVD in males (median 5.4) was significantly higher (P = 0.001) than in females (median 3.0). Cell proliferation, as evaluated by the MIB-1 antibody (a cellular proliferation index [Ki-67 antigen], which is present in all stages of the cellular cycle except for the resting cells), ranged from 0% to 19.58%. No correlation was found between MIB-1 and MVD. It is possible to infer that the lower MVD found in pituitary adenomas in females reflects an inhibitory estrogen action on TGF-beta1, a protein involved in vascular remodeling. Because of its role as a TGF receptor ligand, endoglin proved to be sensitive in detecting this gender difference in pituitary tumor angiogenesis.

Immunohistochemical detection of estrogen receptor alpha in pituitary adenomas and its correlation with cellular replication.

With the aim of evaluating the relationship between pituitary tumorigenesis and the presence of estrogen receptor-alpha (ERalpha) by immunohistochemistry (IH) and their relevance to patients' clinical presentation, hormonal phenotypes of adenomas, preoperative neuroimaging findings, and the index of cellular replication MIB-1, a study was conducted with material from 91 women and 67 men with pituitary adenomas. The patients had acromegaly (29.7%), Cushing's disease (14.6%), hyperprolactinemic syndrome (20.9%), and clinically nonfunctioning tumors (34.8%). Of the patients, 14.6% had microadenomas, 52.5% had macroadenomas with or without suprasellar growth, 28.5% had invasive macroadenomas and in 4.4% the adenoma was not visualized. IH showed that 43 were positive for growth hormone (GH), 16 for corticotropin (ACTH), 18 for prolactin (PRL), 18 for PRL+GH, 6 for luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH), 15 had a plurihormonal reaction, and 42 had nonfunctioning adenomas. The presence of ERalpha was positive in 9/158 adenomas with a median value for the percentage of labeled cells of 42.89%, and in 6/16 controls (autopsy samples) with a median value for the percentage of labeled cells of 0.024%. ERalpha was significantly more prevalent in controls than in patients with adenomas (37.5 versus 5.7%; p = 0.001); however, the mean ERalpha concentration in adenomas was significantly greater than in controls (42.89 versus 0.024%; p < 0.001). No significant difference in the concentration of ERalpha was found across the clinical presentations, hormonal phenotypes or findings of preoperative CT. Among the ERalpha-positive adenomas, ERalpha values were significantly greater in invasive macroadenomas (80%) than in microadenomas (3.33%). MIB-1 values did not differ significantly between ERalpha-positive and -negative adenomas, nor did the correlation between ERalpha values and the MIB-1 index attain significance in the total sample, even when only ERalpha-positive adenomas and positive MIB-1 indexes were considered. It was concluded that, when present in pituitary tumors, ERalpha exhibits a high concentration, and is more common in nonfunctioning and invasive adenomas, but absent in ACTH-secreting ones.

Avaliaçäo do eixo hipotálamo-hipófise-gônada e prevalência de hipogonadismo central em homens e mulheres com cirrose hepática / Evaluation of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis and prevalence of hypogonadism in men and women with liver cirrhosis

A cirrose hepática (CH) é uma das doenças crônicas associadas ao hipogonadismo (HG), o qual tem etiologia variada em relaçäo ao órgäo-alvo do eixo gonadal que é acometido. Neste estudo avaliamos o HG intercorrente na CH de diferentes etiologias, em 82 pacientes (49 M/33 F). O diagnóstico de HG foi estabelecido em bases clínicas e hormonais e correlacionado com a gravidade da doença hepática. HG näo fisiológico foi diagnosticado em 63 casos (76,8 por cento). Nos homens, detectou-se diminuiçäo da libido (68,8 por cento), disfunçäo erétil (53,8 por cento), pêlos de distribuiçäo ginecóide (53,1 por cento), atrofia testicular (55,3 por cento) e ginecomastia (48 por cento); entre as mulheres, 18 (78,2 por cento) apresentavam amenorréia em idade fértil. HG foi confirmado por níveis baixos de testosterona livre nos homens e de estradiol nas mulheres. Níveis altos de gonadotrofinas basais estabeleceram a etiologia gonadal do HG. O diagnóstico de alteraçäo hipotálamo-hipofisária só foi possível através do teste do GnRH, onde o valor de pico do LH foi significativamente menor nos hipogonádicos. HG central foi predominante: 90,4 por cento dos casos. A duraçäo da hepatopatia näo diferiu entre hipo e eugonádicos. A gravidade da CH, avaliada através da classificaçäo de CHILD, mostrou correlaçäo significativa com o HG. Näo houve associaçäo significativa entre HG e sintomas isolados como diminuiçäo da libido ou ginecomastia, concomitância de outras doenças, hiperprolactinemia ou uso de drogas. Em conclusäo, foram proeminentes os achados em relaçäo à freqüência de HG, especialmente nas mulheres, e a predominância da etiologia central do mesmo, possivelmente em resposta às más condições metabólicas dos pacientes. O diagnóstico de HG nos pacientes com CH demanda atençäo médica contínua

Hiperprolactinemia e distúrbios psiquiátricos / Hyperprolactinemia and psychiatric disturbance

Sintomas psicológicos, especialmente ansiedade e depressao, têm sido associados à hiperprolactinemia. Para avaliar a presença desses sintomas, foram submetidos à entrevista através do Composed International Diagnostic Interview, seguido pela escala de Hamilton para depressao, 32 pacientes (5 homens e 27 mulheres) com hiperprolactinemia de várias etiologias e 16 normoprolactinêmicos. A prolactina sérica na época da avaliaçao variou de 28 a 180 ng/mL, sendo que 11 dos pacientes usavam bromocriptina. Detectou-se presença atual de distúrbios de ansiedade em 18 pacientes (56,2 por cento) e 5 controles (31,2 por cento), depressao em 10 pacientes (31,2 por cento) e 2 controles (12,5 por cento), distmia em duas pacientes e outros diagnósticos psiquiátricos em 6 pacientes (18,7 por cento). Os escores da depressao variaram entre 16 e 31 nos pacientes e foram 12 e 16 nos controles. A frequência de sintomas psiquiátricos como um todo, foi significativamente maior nos hiperprolactinêmicos (teste do qui-quadrado), mas a diferença nao foi significativa na análise isolada de ansiedade ou depressao. A hiperprolactinemia representa um fator de risco de 3,57 para depressao, 3,32 para ansiedade e 3,84 para outros sintomas psiquiátricos. Nao houve diferença significativa na frequência de sintomas psiquiátricos entre portadores ou nao de adenomas hipofisários e usuários ou nao de bromocriptina. Nao houve correlaçao (r= 0,07) entre a prolactina e a frequência de sintomas psiquiátricos. Conclui-se pela necessidade de atentar para a concomitância de hiperprolactinemia e distúrbios psiquiátricos, cujo reconhecimento permitirá abordagem terapêutica específica

Ginecomastia transitória näo puberal: relato de três casos / Transient not pubertal gynecomastia: report of three cases

Os autores relatam os casos de 3 meninos com ginecomastia pré-puberal, de etiologias incomuns. No primeiro caso, ginecomastia bilateral teve início aos 5 anos e 10 meses de idade e foi relacionada com realimentação após doença celíaca. No segundo caso, ginecomastia unilateral foi constatada aos 8 anos e 5 meses de idade, após a introdução de análogo do GnRH, utilizando para tratamento de puberdade precoce verdadeira idiopática diagnosticada aos 5 anos. No terceiro caso, ginecomastia bilateral surgiu aos 5 anos e 9 meses e foi associada à contaminação com estrógeno de origem não estabelecida. Nos três casos, a evolução clínica foi benigna com regressão da ginecomastia. A apresentação dos casos confirma que, nesta faixa etária, a ginecomastia, embora rara, apresenta com freqüência dificuldades diagnósticas em relação ao processo desencadeante.

Avaliação dos hormônios tireóideos e sua relação com a função gonadal na cirrose hepática / Thyroid hormone evaluation and its relation to gonadal function in hepatic cirrhosis

Os testes tireóideos estão frequentemente alterados nas hepatopatias em consequência de alteração nas proteinas carreadoras do hormônio tireóideo. Neste estudo, foram determinadas as concentrações de T3 e T4 totais e TSH em pacientes cirróticos, as quais foram correlacionadas com a gravidade da hepatopatia e a presença de hipogonadismo secundário à cirrose...

Cranial bone mineral density in yuong hypogonadal patients and menopausal women

Bone mineral density (BMD) is reduced in the distal radius, proximal femur and lumbar spine of hypogonadal individuals. The objective of the present cross-sectional study was to assess cranial BMD by dual energy X-ray absorptiometry in patients with hypogonadism arising during the first two decades of life, submitted or not to hormone replacement, as well as in menopausal women not submitted to hormone replacement. Cranial BMD was significantly lower in hypogonadal without treatment (1.656 + 0.24 g/cm2; mean + SD) when compared to normal young individuals (1.996 + 0.17). The cranial bone mass did not differ significantly between untreated and treated young hypogonadal individuals (1.779 + 0.32 g/cm2). The values detected in both groups were significantly lower than those detected in the menopausal women (2.146 + 0.29 g/cm2; p<0.01). The cranial BMD of patients with primary hypogonadism did not differ from that of patients with central hypogonadism and confirmed growth hormone deficiency (1.654 + 0.23 versus 1.601 + 0.16 g/cm2). We conclude that hypogonadism of early onset is associated with a marked reduction in cranial BMD, a finding probably due to the high sensitivity of trobecular bone to sex steroid deficiency and to the interference of this deficiency with the achievement of bone mass peak.

Hyperprolactinemia associated to calcification of the pituitary stalk: case report

In this work, the authors report the case of a female patient with 24 years of age with hyperprolactinemia, who presented a pituitary stalk calcification as seen by CT scan. Once other possible etiologies were excluded, we concluded that the calcification was probably related to hyperprolactinemia caused by interruption of the input of dopamine to the pituitary gland.

Avaliaçäo da funçäo tireóidea e presença de anticorpos antitireóideos em crianças com vitiligo / Evaluation of thyroid function and the presence of thyroid antibodies in children with vitiligo

Uma amostra de 32 crianças e adolescentes portadoras de vitiligo localizado ou generalizado, foi avaliada para a presença de história familiar de doenças auto-imunes, disfunçäo tireóidea e presença de anticorpos antitireóideos. História familiar para tireoidopatia foi encontrada em 15,6 por cento do total da amostra e para vitiligo em 18,7 por cento. A funçäo tireóidea, avaliada através das dosagens de T3, T4 e TSH medidos por quimioluminescência, foi normal em todos os casos. Os anticorpos antitireoglobulina e antiperoxidase foram positivos em, respectivamente, 2 pacientes (6,25 por cento) e 8 pacientes (25 por cento). Concluiu-se pela alta frequência de anticorpos antitireóideos em crianças com vitiligo, o que sugere a necessidade de avaliaçäo tireóidea inicial destas crianças e posterior acompanhamento, com a finalidade de detecçäo precoce de disfunçäo tireóidea clínica ou subclínica

Valores basais de LH e FSH em crianças e adolescentes normais determinados através do método da quimioluminescência / Basal values of LH and FSH in normal children and adolescents determined by chemiluminescence method

Com a finalidade de estabelecer valores referenciais para as concentraçöes basais de gonadotrofinas séricas avaliadas através do método de quimioluminescência, foram dosados o LH e o FSH em 148 crianças e adolescentes nos vários estágios puberais. Para os meninos, o valores de LH e FSH, em UI/L, expressos como média e intervalo de confiança, foram no estágio I 1,00 (0,47-1,53) e 1,78 (1,26-2,30); no estágio II, 1,16 (0,39-1,94) e 3,31 (2,08-4,53); no estágio III 2,28 (1,45-3,12) e 3,71 (2,56-4,85) e, nos estágios IV e V 4,10 (3,25-4,94) e 8,94 (4,48-13,40). Nas meninas, os valores foram no estágio 10,48 (0,34-0,62) e 3,50 (2,58-4,42); noestágio II, 1,92 (-0,12-3,96) e 5,93 (2,34-9,53); no estágio III 4,41 (1,85-6,96) e 8,40 (6,07-10,73) e, nos estágios IV e V 6,39 (4,00-8,78) e 7,57 (5,35-9,80). A porcentagem de valores indetectáveis foi de 9,45 para o LH e 3,37 para o FSH, todos os casos ocorrendo nos estágios I e II da puberdade. Foram observadas diferenças significativas entre os valores pré-puberais e os encontrados a partir do estágio III de puberdade. Constatou-se, no entanto, a ocorrência de sobreposiçäo de valores nos diferentes estágios do desenvolvimento puberal.

Diagnóstico etiológico do atraso de crescimento em uma amostra de crianças e adolescentes com baixa estatura em ambulatório de endocrinologia / Etiologic diagnosis of growth delay taken from a sample of children and adolescents with short stature in a general endocrinology ambulatory

Neste trabalho foram revisados os prontuários de crianças e adolescentes com baixa estatura, acompanhados em ambulatório de endocrinologia geral. A amostra final é composta por 29 pacientes nos quais a baixa estatura foi, na maior parte das vezes (21 casos, 72,4 por cento da amostra), associada a outra doenças e, em 8 casos, considerada como variante da normalidade (Baixa estatura genética, atraso constitucional do crescimento e puberdade e retardo de crescimento intra-uterino). Os pacientes com Síndrome de Turner foram os que apresentaram com idade mais avançada (194,8+/- 13,1 meses). Os resultados dos testes de estímulo do hormônio do crescimento confirmaram a baixa especificidade dos mesmos, já descrita na literatura. Foi tambem observado alto índice de repetência escolar nos pacientes com baixa estatura näo relacionada a deficiência hormonal

Hipotireoidismo primario associado a puberdade precoce: um caso com apresentacao incomum / Primary hypothyroidism associated with precocius puberty: a unusual case report

Relatamos o caso de uma menina de 7 anos, com associacao incomum de hipotireoidismo congenito e puberdade precoce. Esta puberdade, embora dependente de gonadotrofinas, nao envolve a maturacao do eixo hipotalamo-hipofisario. O que diferencia esse caso dos demais ja relatados e o fato puberdade ter se desenvolvido na presenca de reposicao hormonal do hipotireoidismo, embora insuficiente para a normalizacao do TSH

Osteoma osteóide: dor de fácil diagnóstico / Osteoid osteoma: pain of easy diagnosis

Os autores revisam sobre osteoma osteóide, neoplasia óssea benigna, ressaltando a necessidade de suspeitar desta patologia em crianças e adultos jovens firmando facilmente o diagnóstico diante de suas características clínicas e radiológicas próprias. Especial atençäo é dada ao diagnóstico e tratamento, promovendo alívio da dor e evitando complicaçöes