JM-20, a novel benzodiazepine­dihydropyridine hybrid molecule, protects mitochondria and prevents ischemic insult-mediated neural cell death in vitro.

The ischemic stroke cascade is composed of several pathophysiological events, providing multiple targets for pharmacological intervention. JM-20 (3-ethoxycarbonyl-2-methyl-4-(2-nitrophenyl)-4,11-dihydro-1H-pyrido[2,3-b][1,5]benzodiazepine) is a novel hybrid molecule, in which a benzodiazepine portion is covalently linked to a dihydropyridine ring, forming a new chemical entity with potential multisite neuroprotective activity. In the present study, JM-20 prevented PC-12 cell death induced either by glutamate, hydrogen peroxide or KCN-mediated chemical hypoxia. This molecule also protected cerebellar granule neurons from glutamate or glutamate plus pentylenetetrazole-induced damage at very low micromolar concentrations. In rat liver mitochondria, JM-20, at low micromolar concentrations, prevented the Ca2+-induced mitochondrial permeability transition, as assessed by mitochondrial swelling, membrane potential dissipation and organelle release of the pro-apoptotic protein cytochrome c. JM-20 also inhibited the mitochondrial hydrolytic activity of F1F0-ATP synthase and Ca2+ influx. Therefore, JM-20 may be a multi-target neuroprotective agent, promoting reductions in neuronal excitotoxic injury and the protection of the mitochondria from Ca2+-induced impairment as well as the preservation of cellular energy balance.

The trypsin inhibitor panulirin regulates the prophenoloxidase-activating system in the spiny lobster Panulirus argus.

The melanization reaction promoted by the prophenoloxidase-activating system is an essential defense response in invertebrates subjected to regulatory mechanisms that are still not fully understood. We report here the finding and characterization of a novel trypsin inhibitor, named panulirin, isolated from the hemocytes of the spiny lobster Panulirus argus with regulatory functions on the melanization cascade. Panulirin is a cationic peptide (pI 9.5) composed of 48 amino acid residues (5.3 kDa), with six cysteine residues forming disulfide bridges. Its primary sequence was determined by combining Edman degradation/N-terminal sequencing and electrospray ionization-MS/MS spectrometry. The low amino acid sequence similarity with known proteins indicates that it represents a new family of peptidase inhibitors. Panulirin is a competitive and reversible tight-binding inhibitor of trypsin (Ki = 8.6 nm) with a notable specificity because it does not inhibit serine peptidases such as subtilisin, elastase, chymotrypsin, thrombin, and plasmin. The removal of panulirin from the lobster hemocyte lysate leads to an increase in phenoloxidase response to LPS. Likewise, the addition of increasing concentrations of panulirin to a lobster hemocyte lysate, previously depleted of trypsin-inhibitory activity, decreased the phenoloxidase response to LPS in a concentration-dependent fashion. These results indicate that panulirin is implicated in the regulation of the melanization cascade in P. argus by inhibiting peptidase(s) in the pathway toward the activation of the prophenoloxidase enzyme.

Oral Zinc Sulphate Supplementation for Six Months in SCA2 Patients: A Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Trial

Cuban patients with Spinocerebellar Ataxia type 2 (SCA2) have reduced concentrations of zinc in serum and cerebrospinal fluid (CSF). To assess the effect and safety of zinc supplementation, 36 Cuban SCA2 patients were randomly assigned to receive daily either 50 mg ZnSO4 or placebo, together with neurorehabilitation therapy in a randomized, double-blind, placebo-controlled clinical trial during 6 months. Outcome measures included the changes of zinc levels in CSF and serum, ataxia score, oxidative stress and saccadic eye movements. At the end of the study, the Zinc-treated group showed: (i) a significant increase of the Zn levels in the CSF, (ii) mild decrease in the ataxia scale subscores for gait, posture, stance and dysdiadochocinesia (iii) reduction of lipids oxidative damage, and (iv) reduction of saccadic latency when compared with the placebo group. The treatment was safe and well tolerated by all subjects. This study demonstrated the efficacy and safety of Zn supplementation, combined with neurorehabilitation for SCA2 patients and therefore it may encourage further studies on the clinical effect of zinc supplementation in SCA2 based in the conduction of future clinical trials with higher number of subjects(AU)

Oral zinc sulphate supplementation for six months in SCA2 patients: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial.

Cuban patients with Spinocerebellar Ataxia type 2 (SCA2) have reduced concentrations of zinc in serum and cerebrospinal fluid (CSF). To assess the effect and safety of zinc supplementation, 36 Cuban SCA2 patients were randomly assigned to receive daily either 50 mg ZnSO(4) or placebo, together with neurorehabilitation therapy in a randomized, double-blind, placebo-controlled clinical trial during 6 months. Outcome measures included the changes of zinc levels in CSF and serum, ataxia score, oxidative stress and saccadic eye movements. At the end of the study, the Zinc-treated group showed: (i) a significant increase of the Zn levels in the CSF, (ii) mild decrease in the ataxia scale subscores for gait, posture, stance and dysdiadochocinesia (iii) reduction of lipid's oxidative damage, and (iv) reduction of saccadic latency when compared with the placebo group. The treatment was safe and well tolerated by all subjects. This study demonstrated the efficacy and safety of Zn supplementation, combined with neurorehabilitation for SCA2 patients and therefore it may encourage further studies on the clinical effect of zinc supplementation in SCA2 based in the conduction of future clinical trials with higher number of subjects.

Situación y perspectivas para el desarrollo de materiales de referencia para la Industria Farmacéutica cubana / State and perspectives for reference material for Cuban Pharmaceutical Industry

La necesidad de contar con mediciones exactas es una premisa fundamental del desarrollo científico, tecnológico, económico y comercial de la sociedad moderna. La calidad de las mediciones químicas, físicas y biológicas pueden ser aseguradas mediante el uso de materiales de referencia (MR) fiables. En el caso de la industria farmacéutica, los MR son imprescindibles en el control de la calidad y aseguramiento de sus producciones; constituyen medios para evaluar cuantitativa y cualitativamente diferentes características de la composición de los ingredientes activos, los compuestos relacionados, los productos de degradación, las materias primas y las formas farmacéuticas, y establecen la trazabilidad del resultado obtenido o la asignación del valor de la muestra de ensayo. Además, su empleo es una herramienta esencial en el establecimiento de los sistemas de Gestión de la Calidad; para la evaluación de la conformidad y para la acreditación de laboratorios de ensayos, lo cual ha generado un incremento considerable en su demanda....

Determinación de atropina sulfato y difenoxilato clorhidrato en reasec tabletas. Validación / Determination of atropine sulphate and diphenoxilate chlorhydrate in Reasec tablets. Validation

El reasec es un antidiarreico cuyo efecto viene dado por la asociación de 2 principios activos, atropina sulfato y difenoxilato clorhidrato. La unión de ambos trae como resultado la inhibición del peristaltismo del tracto gastrointestinal que puede ser posible tanto a nivel central como local. De la literatura revisada para el caso del difenoxilato clorhidrato se escogió el método por cromatografía líquida de alta eficiencia por aprovechar la posibilidad de que se trataba del método propuesto en el registro de medicamentos para el estudio de estabilidad en la formulación de este principio activo. El método para la determinación de atropina sulfato se encuentra reportado en la USP 23 y el criterio de selección fue uno de los menos complejos en la cuantificación de esta. Teniendo en cuenta las regulaciones establecidas que aseguran el cumplimiento de las buenas prácticas de producción, el presente trabajo se propone la validación prospectiva de los métodos para la cuantificación de los principios activos componentes del reasec, por lo que se realizaron los estudios de especificidad, exactitud, precisión, linealidad y rango. En ambos casos se cumplieron con los requisitos establecidos a los métodos analíticos que se encuentran dentro de la categoría I por ser empleados para la cuantificación de los componentes activos de la formulación. Los resultados obtenidos demostraron que ambos métodos analíticos son fiables por permitir la cuantificación de los 2 principios activos y cumplir además, con los requisitos establecidos para los parámetros evaluados dentro de la categoría a la que pertenecen cada uno

Determinación de atropina sulfato y difenoxilato clorhidrato en reasec tabletas: validación / Determination of atropine sulfate and difenoxilato hydrochlorate in reasec pills: validation

El reasec es un antidiarreico cuyo efecto viene dado por la asociación de 2 principios activos, atropina sulfato y difenoxilato clorhidrato. La unión de ambos trae como resultado la inhibición del peristaltismo del tracto gastrointestinal que puede ser posible tanto a nivel central como local. De la literatura revisada para el caso del difenoxilato clorhidrato se escogió el método por cromatografía líquida de alta eficiencia por aprovechar la posibilidad de que se trataba del método propuesto en el registro de medicamentos para el estudio de estabilidad en la formulación de este principio activo. El método para la determinación de atropina sulfato se encuentra reportado en la USP 23 y el criterio de selección fue uno de los menos complejos en la cuantificación de esta. Teniendo en cuenta las regulaciones establecidas que aseguran el cumplimiento de las buenas prácticas de producción, el presente trabajo se propone la validación prospectiva de los métodos para la cuantificación de los principios activos componentes del reasec, por lo que se realizaron los estudios de especificidad, exactitud, precisión, linealidad y rango. En ambos casos se cumplieron con los requisitos establecidos a los métodos analíticos que se encuentran dentro de la categoría I por ser empleados para la cuantificación de los componentes activos de la formulación. Los resultados obtenidos demostraron que ambos métodos analíticos son fiables por permitir la cuantificación de los 2 principios activos y cumplir además, con los requisitos establecidos para los parámetros evaluados dentro de la categoría a la que pertenecen cada uno(AU)

Desarrollo de un método para obtener cera a partir del propoleos / Development of a method for obtaining wax from propolis

Se describe el desarrollo de un método a nivel de laboratorio para obtener cera a partir del propóleos mediante extracción con éter de petróleo 60-80oC y alcohol etílico clase C a partir del subproducto que queda después de obtenida la tintura del propóleos al 10 por ciento. Se obtuvo una cera con características fisicoquímicas similares a la cera de abejas

Desarrollo de un método para obtener cera a partir del propoleos / Development of a method for obtaining wax from propolis

Se describe el desarrollo de un método a nivel de laboratorio para obtener cera a partir del propóleos mediante extracción con éter de petróleo 60-80oC y alcohol etílico clase C a partir del subproducto que queda después de obtenida la tintura del propóleos al 10 por ciento. Se obtuvo una cera con características fisicoquímicas similares a la cera de abejas