Immunolocalization of alpha(1A)-adrenoceptors in rat and human epididymis.

Immunohistochemistry was conducted to analyze the cellular localization of alpha(1A)-adrenoceptors along rat and human epididymis. ADR-A, a polyclonal antibody that recognizes the specific C-terminal region of alpha(1A)-adrenoceptors, immunostained this adrenoceptor subtype in smooth muscle cells surrounding the epididymal tubules and interstitial blood vessels and in subpopulations of epithelial cells from adult rat and human caput and cauda epididymidis. The same cell types from rat epididymidis were immunostained by ADR-1, a polyclonal antibody that recognizes a common region of the three alpha(1)-adrenoceptor subtypes, alpha(1A), alpha(1B), and alpha(1D). Immunostaining with both antibodies was also conducted in adult rat and human vas deferens and seminal vesicle used as positive controls because of the abundance of alpha(1A)-adrenoceptors in these tissues. ADR-A- and ADR-1-positive immunostaining was differentially distributed depending on the antibody, method of tissue fixation (Bouin-fixed and fresh frozen tissues), species (rat and human), tissue (caput and cauda epididymidis), and age (immature and adult rats) analyzed. This is the first report immunolocalizing alpha(1A)-adrenoceptor along rat and human epididymis. The presence of this adrenoceptor subtype in epididymal smooth muscle and epithelial cells indicates their contribution to smooth muscle contractile responses and a possible role in the absorptive and/or secretory activities of the epithelium lining the epididymal duct. Taken together, our results should contribute to a better understanding of the physiological role of alpha(1)-adrenoceptors in the epididymidis and the importance of the sympathetic nervous system for male (in)fertility.

Distribuição de adrenoreceptores alfa-1 e caracterização de elementos neurais ao longo do epidídimo de ratos / Distribuition of alpha 1-adrenoceptors and characterization of neuronal elements along rat epididymis

No presente) trabalho I a distribuição dos adrenoceptores ai e', a caracterização de elementos neuronais foi analisada ao longo do epidídimo de ratos em com 40 dias (animais imaturos) e 120 dias de idade (animais adultos). Foram, realizados ensaios' de Westem blot, imunohistoquímica ei de imunofluorescência com anticorpos seletivos (AMA, ADR-B e ADR-D) ou não seletivo (ADR-1) para os adrenoceptores a,A, a,,3 e a,p. O anticorpo ADR-A foi o único anticorpo seletivo efetivo para os ensaios utilizados em epidídimo de ratos Este anticorpo, em ensaios de Westem blot, reconheceu de forma específica uma banda com aproximadamente 70 kDa na cabeça e cauda do epidídimo de ratos com 40 dias e 120 dias de idade e uma banda, de aproximadamente 46 kDa, na cabeça e cauda dos animais imaturos., Ensaios de imunohistoquímica e, posteriormente, de imunofluorescência com o anticorpo ADR-A indicaram imunomarcação das células da musculatura lisa e células epiteliais presentes da cabeça e cauda do epidídimo de ratos nas duas idades analisadas. Na camada muscular a imunomarcação não foi homogênea, apresentando-se concentrada na região mais periférica da célula muscular lisa, associada a membrana celular. Nas células epiteliais a imunorreatividade ocorreu predominantemente na região nuclear. Os ensaios de imunofluorescência, juntamente com o marcador fluorescente DAPI, confirmaram a co-localização da marcação do adrenoceptor a1A com a região nuclear das células epiteliais. Além disso, observou-se que nem, todas) as I células) epiteliais expressavam positivamente o adrenoceptor 1A. Qualitativamente o número de elementos positivos ao anticorpo ADR-A foi maior na cauda do que na cabeça do epidídimo de ratos com 40 e 120 dias…(au)