On the interactions involving serine proteases obtained from Monacrosporium thaumasium (Ascomycota: Orbiliomycetes) and deoxyribonucleic acid (DNA): biological macromolecules in action.

The use of force spectroscopy approaches performed with optical tweezers can be very useful in determining the binding modes and the physical chemistry of DNA interactions with ligands, from small drugs to proteins. Helminthophagous fungi, on the other hand, have important enzyme secretion mechanisms for various purposes, and the interactions between such enzymes and nucleic acids are very poorly studied. Therefore, the main goal of the present work was to investigate, at the molecular level, the mechanisms of interaction between fungal serine proteases and the double-stranded (ds) DNA molecule. Experimental assays performed with this single molecule technique consist in exposing different concentrations of the protease of this fungus to dsDNA until saturation while monitoring the changes on the mechanical properties of the macromolecular complexes formed, from where the physical chemistry of the interaction can be deduced. It was found that the protease binds strongly to the double-helix, forming aggregates and changing the persistence length of the DNA molecule. The present work thus allowed us to infer information at the molecular level on the pathogenicity of these proteins, an important class of biological macromolecules, when applied to a target specimen.

Multi-enzyme complex of white rot fungi in saccharification of lignocellulosic material

ABSTRACT The multi-enzyme complex (crude extract) of white rot fungi Pleurotus ostreatus, Pleurotus eryngii, Trametes versicolor, Pycnosporus sanguineus and Phanerochaete chrysosporium were characterized, evaluated in the hydrolysis of pretreated pulps of sorghum straw and compared efficiency with commercial enzyme. Most fungi complexes had better hydrolysis rates compared with purified commercial enzyme.

Biometric, histomorphometric, and biochemical profile in atorvastatin calcium treatment of female rats with dexamethasone-induced osteoporosis / Perfil biométrico, histomorfométrico e bioquímico no tratamento com atorvastatina cálcica de ratas com osteoporose induzida com dexametasona

ABSTRACT Objective: To assess the effects of atorvastatin calcium in the treatment of dexamethasone-induced osteoporosis. Methods: Osteoporosis induction consisted of the administration of an intramuscular dose of 7.5 mg/kg of body weight of dexamethasone, once a week for four weeks, except for the control animals (G1). The animals were divided into the following groups: G1 (control group without osteoporosis), G2 (control group with untreated osteoporosis), G3 (control group with osteoporosis treated with sodium alendronate 0.2 mg/kg) and G4 (group with osteoporosis treated with atorvastatin calcium 1.2 mg/kg). Serum alkaline phosphatase, bone alkaline phosphatase, and biometric and bone histomorphometric assessments were performed after 30 and 60 days of treatment onset. Results: In relation to the biometric and histomorphometric analyses, at 60 days of treatment, G4 presented bone density (Seedor index), bone trabecular density, and cortical thickness of 0.222 ± 0.004 g/cm, 59.167 ± 2.401%, and 387,501 ± 8573 µm, respectively, with a positive and statistically significant difference (p < 0.05), in relation to G2. At 30 and 60 days of treatment, G4 presented statistically significant serum levels of alkaline phosphatase alkaline phosphatase (p < 0.05) that were higher than all groups (7.451 ± 0.173 µg/L and 7.473 ± 0.529 µg/L, respectively). Conclusion: Treatment with atorvastatin calcium demonstrated the ability of this drug to increase osteoblastic activity and bone tissue repair activity, acting differently from alendronate sodium, which demonstrated predominantly antirebsorptive activity.

RESUMO Objetivo: Avaliar os efeitos da atorvastatina cálcica no tratamento da osteoporose induzida com dexametasona. Métodos: A indução da osteoporose consistiu na administração de dexametasona na dose de 7,5 mg/kg de peso corporal, por via intramuscular, uma vez por semana durante quatro semanas, à exceção dos animais do grupo controle (G1). Os animais foram distribuídos nos seguintes grupos: G1 (grupo controle sem osteoporose), G2 (grupo controle com osteoporose sem tratamento), G3 (grupo controle com osteoporose tratado com alendronato de sódio 0,2 mg/kg) e G4 (grupo com osteoporose tratado com atorvastatina cálcica 1,2 mg/kg). Após 30 e 60 dias do início do tratamento dos animais, foram feitas as dosagens dos níveis séricos de fosfatase alcalina, fosfatase alcalina óssea, avaliação biométrica e histomorfométrica óssea. Resultados: Em relação às análises biométricas e histomorfométricas, aos 60 dias de tratamento o G4 apresentou densidade óssea (índice Seedor), densidade trabecular óssea e espessura da cortical de 0,222 ± 0,004 g/cm, 59,167 ± 2,401% e 387,501 ± 8,573 µm, respectivamente, com diferença positiva, estatisticamente significativa (p < 0,05), em relação ao grupo G2. Aos 30 e 60 dias de tratamento, o G4 apresentou níveis séricos de fosfatase alcalina óssea estatisticamente significativos (p < 0,05) e superiores a todos os grupos (7,451 ± 0,173 µg/L e 7,473 ± 0,529 µg/L, respectivamente). Conclusão: O tratamento com atorvastatina cálcica demonstrou a capacidade desse fármaco de aumentar a atividade osteoblástica e a atividade reparadora tecidual óssea, atuar de forma diferente do alendronato de sódio, que demonstrou atividade preponderantemente antirreabsortiva.

Biometric, histomorphometric, and biochemical profile in atorvastatin calcium treatment of female rats with dexamethasone-induced osteoporosis.

OBJECTIVE: To assess the effects of atorvastatin calcium in the treatment of dexamethasone-induced osteoporosis. METHODS: Osteoporosis induction consisted of the administration of an intramuscular dose of 7.5 mg/kg of body weight of dexamethasone, once a week for four weeks, except for the control animals (G1). The animals were divided into the following groups: G1 (control group without osteoporosis), G2 (control group with untreated osteoporosis), G3 (control group with osteoporosis treated with sodium alendronate 0.2 mg/kg) and G4 (group with osteoporosis treated with atorvastatin calcium 1.2 mg/kg). Serum alkaline phosphatase, bone alkaline phosphatase, and biometric and bone histomorphometric assessments were performed after 30 and 60 days of treatment onset. RESULTS: In relation to the biometric and histomorphometric analyses, at 60 days of treatment, G4 presented bone density (Seedor index), bone trabecular density, and cortical thickness of 0.222 ± 0.004 g/cm, 59.167 ± 2.401%, and 387,501 ± 8573 µm, respectively, with a positive and statistically significant difference (p < 0.05), in relation to G2. At 30 and 60 days of treatment, G4 presented statistically significant serum levels of alkaline phosphatase alkaline phosphatase (p < 0.05) that were higher than all groups (7.451 ± 0.173 µg/L and 7.473 ± 0.529 µg/L, respectively). CONCLUSION: Treatment with atorvastatin calcium demonstrated the ability of this drug to increase osteoblastic activity and bone tissue repair activity, acting differently from alendronate sodium, which demonstrated predominantly antirebsorptive activity.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos da atorvastatina cálcica no tratamento da osteoporose induzida com dexametasona. MÉTODOS: A indução da osteoporose consistiu na administração de dexametasona na dose de 7,5 mg/kg de peso corporal, por via intramuscular, uma vez por semana durante quatro semanas, à exceção dos animais do grupo controle (G1). Os animais foram distribuídos nos seguintes grupos: G1 (grupo controle sem osteoporose), G2 (grupo controle com osteoporose sem tratamento), G3 (grupo controle com osteoporose tratado com alendronato de sódio 0,2 mg/kg) e G4 (grupo com osteoporose tratado com atorvastatina cálcica 1,2 mg/kg). Após 30 e 60 dias do início do tratamento dos animais, foram feitas as dosagens dos níveis séricos de fosfatase alcalina, fosfatase alcalina óssea, avaliação biométrica e histomorfométrica óssea. RESULTADOS: Em relação às análises biométricas e histomorfométricas, aos 60 dias de tratamento o G4 apresentou densidade óssea (índice Seedor), densidade trabecular óssea e espessura da cortical de 0,222 ± 0,004 g/cm, 59,167 ± 2,401% e 387,501 ± 8,573 µm, respectivamente, com diferença positiva, estatisticamente significativa (p < 0,05), em relação ao grupo G2. Aos 30 e 60 dias de tratamento, o G4 apresentou níveis séricos de fosfatase alcalina óssea estatisticamente significativos (p < 0,05) e superiores a todos os grupos (7,451 ± 0,173 µg/L e 7,473 ± 0,529 µg/L, respectivamente). CONCLUSÃO: O tratamento com atorvastatina cálcica demonstrou a capacidade desse fármaco de aumentar a atividade osteoblástica e a atividade reparadora tecidual óssea, atuar de forma diferente do alendronato de sódio, que demonstrou atividade preponderantemente antirreabsortiva.

Multi-enzyme complex of white rot fungi in saccharification of lignocellulosic material.

The multi-enzyme complex (crude extract) of white rot fungi Pleurotus ostreatus, Pleurotus eryngii, Trametes versicolor, Pycnosporus sanguineus and Phanerochaete chrysosporium were characterized, evaluated in the hydrolysis of pretreated pulps of sorghum straw and compared efficiency with commercial enzyme. Most fungi complexes had better hydrolysis rates compared with purified commercial enzyme.

Avaliação dos níveis séricos de glicose e insulina no uso de alendronato de sódio e atorvastatina cálcica na osteoporose induzida com dexametasona / Evaluation of serum levels of glucose and insulin in the use of sodium alendronate and atorvastatin calcium in dexamethasone-induced osteoporosis

Introdução: Além da indução da osteoporose, os glicocorticoides ocasionam aumento da resistência à insulina e gliconeogênese hepática, tendo como consequência a hiperglicemia. Objetivo: Avaliar comparativamente os efeitos do alendronato de sódio e da atorvastatina cálcica nos níveis séricos de glicose e insulina na osteoporose induzida com dexametasona. Métodos: A indução da osteoporose consistiu na administração de dexametasona na dose de 7,5 mg/kg de peso corporal, uma vez por semana durante 4 semanas, à exceção dos animais do grupo controle (G1). Os animais foram distribuídos nos seguintes grupos: G1 (grupo controle sem osteoporose), G2 (controle com osteoporose sem tratamento), G3 (com osteoporose tratado com alendronato de sódio 0,2 mg/kg) e G4 (com osteoporose tratado com atorvastatina cálcica 1,2 mg/kg). No período de 30 e 60 após o início do tratamento, foram coletadas amostras de sangue para as dosagens dos níveis séricos de glicose e insulina. Resultados: Os grupos G2 e G3, quando comparados com o grupo normal G1, apresentaram aumento da glicemia e insulinemia durante todo o período experimental. O grupo G4 apresentou, com 30 dias, aumento da glicemia e insulinemia e, com 60 dias, aumento da glicemia e queda da insulinemia. Conclusão: Os resultados demonstraram o quadro de hiperglicemia consequente do aumento da resistência à insulina, presentes na indução da osteoporose pela dexametasona. O alendronato de sódio não ocasionou nenhuma melhora da glicemia e insulinemia. A atorvastatina cálcica ocasionou agravamento da hiperglicemia e hiperinsulinemia, potencializando o quadro de resistência à insulina e levando a uma insuficiência relativa de insulina característica do diabetes mellitus tipo 2.

Introduction: In addition to the induction of osteoporosis, glucocorticoids cause increased insulin resistance and hepatic gluconeogenesis resulting in hyperglycemia. Objective: Evaluate the effects of sodium alendronate and atorvastatin calcium on serum glucose and insulin levels in osteoporosis induced by dexamethasone. Methods: The induction of osteoporosis consisted of the administration of dexamethasone at a dose of 7.5 mg / kg body weight, once a week for 4 weeks, except for the control animals (G1). The animals were divided into the following groups: G1 (control group without osteoporosis), G2 (control with untreated osteoporosis), G3 (with osteoporosis treated with sodium alendronate 0.2 mg / kg) and G4 (with osteoporosis treated with atorvastatin calcium 1,2 mg / kg). In the 30 and 60 period after the start of the treatment blood samples were collected for dosages of serum glucose and insulin levels. Results: The G2 and G3 groups, when compared with the normal group G1, presented increased glycemia and insulinemia throughout the experimental period. The G4 group presented a 30-day increase in glycemia and insulinemia and at 60 days increased glycemia and decreased insulinemia. Conclusion: The results demonstrated the hyperglycaemia associated with the increase in insulin resistance present in the induction of osteoporosis by dexamethasone. Sodium alendronate did not cause any improvement in glycemia and insulinemia. Atorvastatin calcium caused worsening of hyperglycemia and hyperinsulinemia enhancing insulin resistance, leading to a relative insufficiency of insulin characteristic of type 2 diabetes mellitus.

Neuroprotective effect of Sapucaia nuts (Lecythis pisonis) on rats fed with high-fat diet / Efecto neuroprotector de la castaña de sapucaia (Lecythis pisonis) en ratones sometidos a la dieta de cafetería

Background: Lecythis pisonis Cambess is commonly known as «castanha de sapucaia» in Brazil. Chemical composition studies revealed that this nut is an excellent source of anti-oxidant minerals and of essential lipids. Objective: The aim of the present study is to assess the anti-oxidant and anti-inflammatory effect of Lecythis pisonis Cambess on the brain tissue of Wistar rats. Material and methods: The animals were divided in four experimental groups (n = 6), total of forty-eight rats. Treatments included the standard diet (AIN-93G) and high-fat food, supplemented with Sapucaia nut from 14 to 28 days. The gene expression markers TNF-α, NFkB, ZnSOD and HSP-72 were defined through reverse transcriptase polymerase chain reaction (rtPCR). The anti-oxidant effect was assessed through the thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) and the measurement of the activity performed by superoxide dismutase enzymes. Results: Accordingly, the gene expression of the inflammatory markers NFkB (p65) and TNF-α was lower in rats fed on diets supplemented with «sapucaia», and they presented significant difference in the Tukey test (p < 0.05). The heat-shock HSP-72 protein and the ZnSOD enzyme raised the gene expression and showed significant statistical difference (p < 0.05) in both groups fed on Sapucaia nut-based diet. Conclusion: Thus, the nutritional properties of the Sapucaia nuts perform important neuroprotective activities because they modulated the anti-oxidant activity and the brain tissue inflammatory process in the assessed animals (AU)

Introducción: la Lecythis pisonis Cambess es conocida popularmente en Brasil como «castaña de sapucaia». Estudios de su composición química revelaron que esta castaña es una excelente fuente de minerales antioxidantes y de lípidos esenciales. Objetivo: evaluar los efectos antioxidantes y anti inflamatorios en el tejido cerebral de ratones Wistar. Material y métodos: los animales fueron distribuidos aleatoriamente en cuatro grupos experimentales (n = 6) totalizando 48 ratones. Los tratamientos fueron conducidos por un periodo de 14 a 28 días con dietas estándar AIN-93G y de cafetería con castaña de sapucaia. La expresión génica de los marcadores TNF-α, NFkB, ZnSOD y HSP-72 fue determinada por la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa tras transcripción inversa (qPCR). La actividad antioxidante también fue verificada por la determinación de las especies reactivas del ácido tiobarbitúrico (TBARS) y por mensuración de la actividad de la enzima superoxido dismutasa. Resultados: la expresión génica de los marcadores inflamatorios NFkB (p65) y TNF-α fue menor para los grupos de ratones que consumieron las dietas enriquecidas con sapucaia con diferencia significativa por el test de Tukey (p < 0,05). La proteína de choque térmico HSP-72 y la enzima ZnSOD presentaron aumento de la expresión génica con diferencia estadística significativa (p < 0,05) para ambos grupos que consumieron sapucaia en sus dietas. Conclusión: las propiedades nutricionales de la castaña de sapucaia ejercieron importante actividad neuroprotectora por modular la actividad antioxidante y el proceso inflamatorio en los tejidos cerebrales de los animales evaluados (AU)

Nematicidal activity of Paecilomyces marquandii proteases on infective larvae of Ancylostoma spp

ABSTRACT The present study aimed to evaluate the action of Paecilomyces marquandii proteases on Ancylostoma spp L3. White halos in the zymogram confirmed the proteolytic action. Difference (p <0.01) between the number of L3 in the differents groups was found, with 41.4% of reduction of Ancylostoma spp. L3 before 24 hours.

The nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium and its nematicidal activity on Angiostrongylus vasorum / El hongo nematófago Monacrosporium thaumasium y su actividad nematicida frente a Angiostrongylus vasorum

Background. The dog acts as a reservoir and environmental disseminator of potentially zoonotic parasites. Aims. The objective of this work was to study the fungus Monacrosporium thaumasium regarding its nematicidal potential in laboratory trials and its proteolytic profile. Methods. The in vitro test was carried out through two assays (A and B). In assay A, conidia of the fungus N34a were added in positive coprocultures for Angiostrongylus vasorum. In assay B, crude extract (treated group) and distilled water (control group) were added to coprocultures. Next, the proteolytic profile of crude extract of the nematophagous fungus M. thaumasium (NF34a) was revealed by performing a zymogram. Results. There was a reduction (p < 0.01) in the averages of larvae recovered from the treated groups (conidia and crude extract) in relation to control groups. The zymogram suggested that the nematophagous fungus M. thaumasium produces a protease of approximately 40 kDa. Conclusions. The results of this work confirm that the conidia as well as the crude extract of the fungus M. thaumasium may be used to control A. vasorum L1. The proteolytic profile suggested the presence of one protease (Mt1) of approximately 40 kDa that in the future may be used in biological control of L1 of this nematode (AU)

Antecedentes. El perro actúa como reservorio y propagador ambiental de los parásitos potencialmente zoonóticos. Objetivos. El objetivo del presente estudio fue examinar el potencial nematicida del hongo Monacrosporium thaumasium en pruebas de laboratorio, al igual que su perfil proteolítico. Métodos. El examen in vitro se efectuó mediante 2 ensayos (A y B). En el análisis A, se añadieron conidias del hongo N34a a coprocultivos positivos para Angiostrongylus vasorum. En el ensayo B, se añadieron extracto bruto (grupo tratado) y agua destilada (grupo de control) a los coprocultivos. A continuación, se puso de relieve el perfil proteolítico de extracto bruto del hongo nematófago M. thaumasium (NF34a) mediante la realización de un zimograma. Resultados. Se observó una reducción (p < 0,01) en el número medio de larvas recuperadas de los grupos tratados (conidias y extracto bruto) en relación con los grupos de control. El zimograma evidenció que el hongo nematófago M. thaumasium produce una proteasa de aproximadamente 40 kDa. Conclusiones. Los resultados del presente estudio confirman que las conidias, así como el extracto bruto del hongo M. thaumasium, pueden utilizarse para el control de A. vasorum L1. El perfil proteolítico mostró la presencia de una proteasa (Mt1) de alrededor de 40 kDa que, en el futuro, se puede utilizar en el control biológico de L1 de este nematodo (AU)

Uso do extrato de folhas de Mangifera indica L. e da mangiferina na lesão aterosclerótica em camundongos ApoE-/- / Use of Mangifera indica L. leaves extract and mangiferin on the atherosclerotic lesion in ApoE-/- mice

As folhas de Mangifera indica L são importantes como fonte de compostos fenólicos, especialmente mangiferina, que apresentam propriedades antidiabética, hipolipemiante, antioxidante e anti-inflamatória. O estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do extrato etanólico de folhas de M. indica e da mangiferina isolada sobre a lesão aterosclerótica em camundongos ApoE-/-. Métodos: Camundongos ApoE-/- com 15 semanas de idade foram divididos aleatoriamente em 4 grupos de acordo com o tratamento, por gavagem, durante 56 dias: controle (veículo, dimetil sulfóxido); E200 (200 mg/kg/dia de extrato da folha de M. indica), E400 (400 mg/kg/dia de extrato da folha de M. indica); M40 (40 mg/kg/dia de mangiferina). Parâmetros sanguíneos foram dosados utilizando-se kits enzimáticos e as lesões ateroscleróticas foram avaliadas pelo método en face. Resultados: O extrato seco apresentou 17% de mangiferina. Os níveis sanguíneos de colesterol total, frações HDLc e LDLc e triacilgliceróis, bem como o percentual de deposição lipídica no arco aórtico e aorta torácica não diferiram significativamente entre os grupos (p>0,05). Conclusão: A administração do extrato de folhas de M. indica e da mangiferina em camundongos ApoE-/- não afetou a lipidemia e não diminuiu as lesões ateroscleróticas pré-existentes.

Mangifera indica L leaf are an important source of phenolic compounds, especially mangiferin, that exhibits antidiabetic, hypolipidemic, anti-oxidant and anti-inflammatory activities. This study aimed to evaluate the effects of mangiferin and ethanolic extract of M. indica leaf on atherosclerotic lesions in mice ApoE-/-. Methods: Fifteenweek- old ApoE-/- mice were randomly divided into 4 groups according to the treatment giving by gavage during 56 days: control - vehicle (dimethyl sulfoxide); E200 - 200 mg/kg/day M. indica leaf extract; E400 - 400 mg/kg/day M. indica leaf extract, M40 - 40 mg/kg/day mangiferin. Administrations of vehicle, extracts and mangiferin were performed every day by gavage during 8 weeks. Blood parameters were measured using enzymatic kits and atherosclerotic lesions were evaluated by en face method. Results: The dired extract showed 17% of mangiferin. Total cholesterol, HDLc, LDLc and triglycerides blood levels, as well as the percentage of lipid deposition in the aortic arch and thoracic aorta were not significantly different between the groups (p> 0.05). Conclusion: The administration of M. indica leaf extract and mangiferin in ApoE-/- mice did not affect serum lipids and did not decreased pre-existing atherosclerotic lesions

Proteolytic action of the crude extract of Duddingtonia flagrans on cyathostomins (Nematoda: Cyathostominae) in coprocultures.

The objective of this study was to examine the action of the crude extract of Duddingtonia flagrans (isolates AC001 and CG722) on infective larvae (L3) of cyathostomins in coprocultures and to confirm its proteolytic activity by means of a zymogram. The following groups were formed in coprocultures: Group 1: 10 mL of crude extract of D. flagrans (AC001); group 2: 10 mL of crude extract of AC001 with 10 mM of Ca2+; group 3: 10 mL of crude extract of D. flagrans (CG722); group 4: 10 mL of crude extract of CG722 with 10 mM of Ca2+; and group 5: control group (distilled water). The third-stage larvae (L3) were obtained after eight days. The crude extract of D. flagrans was effective in reducing the number of L3, with the following percentage reductions: group 1, 49.5%; group 2, 52.5%; group 3, 36.8%; and group 4, 57.7%; in relation to the control group (p > 0.05). The proteolytic activity of the crude extract was confirmed through the zymogram. The results from this study confirmed that the crude extract of the fungus D. flagrans could be used for controlling cyathostomin L3, and suggested that at least one protease of approximately 38 kDa was present.

Optimization of protease production by the fungus Monacrosporium thaumasium and its action against Angiostrongylus vasorum larvae.

The objectives of this study were to optimize protease production from the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) and evaluate its larvicidal activity and biological stability. An isolate of the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) was used to produce the enzyme. The Plackett-Burman design was used in order to scan which components of the culture medium could have a significant influence on protease production by the fungus NF34a. An in vitro assay was also performed to evaluate the larvicidal activity of NF34a. It was observed that only one component of the culture medium (yeast extract), at the levels studied, had any significant effect (p < 0.05) on protease production. There was a reduction (p < 0.01) in the mean number of larvae recovered from the treated groups, compared with the control groups. The results confirm previous reports on the efficiency of nematophagous fungi for controlling nematode larvae that are potentially zoonotic. Thus, given the importance of biological control, we suggest that further studies should be conducted on the protease produced by the fungus Monacrosporium thaumasium.

Optimization of protease production by the fungus Monacrosporium thaumasium and its action against Angiostrongylus vasorum larvae / Otimização da produção de protease pelo fungo Monacrosporium thaumasium e sua ação contra larvas de Angiostrongylus vasorum

The objectives of this study were to optimize protease production from the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) and evaluate its larvicidal activity and biological stability. An isolate of the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) was used to produce the enzyme. The Plackett-Burman design was used in order to scan which components of the culture medium could have a significant influence on protease production by the fungus NF34a. An in vitro assay was also performed to evaluate the larvicidal activity of NF34a. It was observed that only one component of the culture medium (yeast extract), at the levels studied, had any significant effect (p < 0.05) on protease production. There was a reduction (p < 0.01) in the mean number of larvae recovered from the treated groups, compared with the control groups. The results confirm previous reports on the efficiency of nematophagous fungi for controlling nematode larvae that are potentially zoonotic. Thus, given the importance of biological control, we suggest that further studies should be conducted on the protease produced by the fungus Monacrosporium thaumasium.

O objetivo deste trabalho foi otimizar a produção de proteases do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a), avaliar sua atividade larvicida e sua estabilidade biológica. Foi utilizado um isolado do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a) para a produção de enzima. O delineamento Plackett-Burman foi utilizado com o objetivo de se escanear quais componentes do meio de cultura, poderiam ter influência significava na produção de protease pelo fungo NF34a. Foi realizado um ensaio in vitro para avaliar a atividade larvicida de NF34a. Observou-se que apenas um dos componentes do meio de cultura (extrato de levedura), nos níveis avaliados, apresentou um efeito significativo (p < 0,05) sobre a produção de protease. Houve redução (p < 0,01) entre as médias de larvas recuperadas dos grupos tratados em relação às dos grupos controle. Os resultados confirmam trabalhos anteriores da eficiência de fungos nematófagos no controle de larvas de nematóides potencialmente zoonóticos. Assim, devido a importância do controle biológico, os autores sugerem estudos mais aprofundados sobre a protease produzida pelo fungo Monacrosporium thaumasium.

Proteolytic action of the crude extract of Duddingtonia flagrans on cyathostomins (Nematoda: Cyathostominae) in coprocultures / Ação proteolítica do extrato bruto de Duddingtonia flagrans sobre ciatostomíneos (Nematoda: Cyathostominae) em coproculturas

The objective of this study was to examine the action of the crude extract of Duddingtonia flagrans (isolates AC001 and CG722) on infective larvae (L3) of cyathostomins in coprocultures and to confirm its proteolytic activity by means of a zymogram. The following groups were formed in coprocultures: Group 1: 10 mL of crude extract of D. flagrans (AC001); group 2: 10 mL of crude extract of AC001 with 10 mM of Ca2+; group 3: 10 mL of crude extract of D. flagrans (CG722); group 4: 10 mL of crude extract of CG722 with 10 mM of Ca2+; and group 5: control group (distilled water). The third-stage larvae (L3) were obtained after eight days. The crude extract of D. flagrans was effective in reducing the number of L3, with the following percentage reductions: group 1, 49.5%; group 2, 52.5%; group 3, 36.8%; and group 4, 57.7%; in relation to the control group (p > 0.05). The proteolytic activity of the crude extract was confirmed through the zymogram. The results from this study confirmed that the crude extract of the fungus D. flagrans could be used for controlling cyathostomin L3, and suggested that at least one protease of approximately 38 kDa was present.

O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato bruto de Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) sobre larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos em coproculturas e confirmar a sua atividade proteolítica por meio de um zimograma. Foram formados os seguintes grupos em coproculturas: grupo 1: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (AC001); grupo 2: 10 mL de extrato bruto de AC001 com íons Ca2+ 10 Mm; grupo 3: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (CG722); grupo 4: 10 mL de extrato bruto de CG722 com íons Ca2+ 10 Mm; e grupo 5 como controle (água destilada), obtendo-se as L3 ao final de 8 dias. O extrato bruto de D. flagrans foi eficiente na redução do número de L3 com os seguintes percentuais de redução: grupo 1 (49,5%); grupo 2 (52,5%); grupo 3 (36,8%) e grupo 4 (57,7%) em relação ao grupo controle (p > 0,05). Confirmou-se a atividade proteolítica por meio do zimograma. Os resultados do presente trabalho confirmam a utilização do extrato bruto do fungo D. flagrans no controle de L3 de ciatostomíneos e sugere a presença de pelo menos uma protease de aproximadamente 38 kDa.

Efeito da ingestão da polpa de manga (Mangifera indica L. ) sobre os parâmetros bioquímicos séricos e integridade hepática em ratos / Effect of mango (Mangifera indica L. ) pulp ingestion on serum biochemical parameters and liver integrity in rats

O: Antioxidantes presentes em frutas e hortaliças contribuem para a redução de doenças crônicas não transmissíveis. A manga (Mangifera indica L.) destaca-se por ser fonte de ácido ascórbico, carotenóides e compostos fenólicos que apresentam grande potencial antioxidante. Este trabalho teve como objetivo avaliar, em ratos Wistar, o efeito da ingestão, por 25 dias, de dietas com 3% e 10% de polpa de manga Ubá liofilizada nos parâmetros bioquímicos séricos, nos marcadores de injúria hepática (aminotransferases e malondialdeído) e na morfologia do fígado. Os parâmetros bioquímicos foram analisados a partir de kits colorimétricos, o teor de malondialdeído obtido por meio do teste de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e a morfologia hepática analisada a partir de cortes do tecido incluídos em parafina e corados com eosina-hematoxilina. Os resultados demonstraram que a ingestão de dieta com 3 e 10% de polpa de manga não interferiu sobre os parâmetros bioquímicos séricos. A análise do marcador de peroxidação lipídica demonstrou que os animais que receberam a dieta com 10% de polpa de manga apresentaram concentração de malondialdeído maior que os que receberam a dieta controle e polpa de manga 3%. De acordo com a histologia hepática não houve diferença entre os grupos. Portanto, os resultados obtidos neste trabalho indicam que a suplementação da dieta com 10% de polpa de manga Ubá liofilizada pode interferir sobre o fígado, uma vez que, além de aumentar a peroxidação lipídica mostrou uma tendência em elevar as enzimas relacionadas à integridade hepática em ratos Wistar saudáveis demonstrando possível efeito pró-oxidativo.

Antioxidants in fruits and vegetables contribute to the reduction of chronic diseases. The mango (Mangifera indica L.) stands out for being a source of ascorbic acid, carotenoids and phenolic compounds that have great potential antioxidant in the body. This study aimed to evaluate in healthy Wistar rats, the intake for 25 days, of diets with 3% and 10% lyophilized pulp of mango Ubá in serum biochemical parameters, in markers of liver injury (aminotransferases and malondialdehyde) and in morphology of the liver. The serum biochemical parameters were obtained by colorimetric kits. Malondialdehyde analysis was performed using the test of thiobarbituric acid reactive substances. Liver morphology was analyzed from sections of tissue embedded in paraffin, stained with hematoxylin and eosin. The results showed that the ingestion of diet containing 3 and 10% of mango pulp did not affect the biochemical parameters. The analysis of lipid peroxidation marker demonstrated that the animals that received the diet with 10% of mango pulp showed concentration of malondialdehyde higher than those who received the control diet and mango pulp 3%. According to liver histology there was no significant difference between the different groups. Therefore, the results obtained in this study indicate that supplementation of the diet with 10% mango pulp lyophilized Uba can interfere with the liver, since, besides increasing lipid peroxidation showed a tendency to elevate liver enzymes related to integrity in healthy Wistar rats showing possible pro-oxidative effect.

Caracterização química da castanha de sapucaia (Lecythis pisonis Cambess. ) da região da zona da mata mineira / Chemical characterization of sapucaia nuts (Lecythis pisonis Cambess. ) from zona da mata mineira region

Atualmente as castanhas têm recebido atenção especial, pois são fontes naturais de vitaminas, minerais, proteínas e ácidos graxos essenciais, podendo assim contribuir para a dieta humana e de animais. Pesquisas recentes confirmam que esses alimentos são fontes ainda de compostos bioativos, os quais podem trazer benefícios significativos à saúde humana. Este trabalho teve como objetivo avaliar a composição química de castanhas da espécie sapucaia (Lecythis pisonis Cambess.) localizadas na zona da mata mineira. Foram analisadas a composição centesimal (lipídios, proteínas, carboidratos, cinzas e umidade), teor de minerais por espectrometria de plasma e perfil lipídico por cromatografia gasosa. A composição centesimal revelou 54,8% de lipídios; 26,82% de proteínas; 5,01% de carboidratos; 3,17% de cinzas e 10,2% de umidade. Quanto ao perfil lipídico, 43,1% eram ácidos graxos polinsaturados, 41,7% ácidos graxos monoinsaturados e 15,2% ácidos graxos saturados. Os minerais fósforo, magnésio e manganês se destacaram pelos elevados teores, 941; 343 e 4,8 mg.100-1, respectivamente. A castanha de sapucaia é uma potencial fonte energéticoprotéica e de minerais importantes para a saúde, mas deve ter sua toxicidade avaliada.

Currently the nuts have received special attention of researchers because they are natural sources of vitamins, minerals, protein and essential fatty acids, could also contribute to the diet of humans and animals. Recent research confirms that these foods are also sources of bioactive compounds, which can bring significant benefits to human health through regular consumption. This study evaluated the chemical composition of sapucaia nut (Lecythis pisonis Cambess.) of the state of Minas Gerais. We analyzed the chemical composition (lipids, proteins, carbohydrates, ash and moisture), and the mineral content by mass spectrometry, and the lipid profile by gas chromatography. The chemical composition showed 54,8% lipids; 26,82% protein; 5,01% carbohydrates; 3,17% ash and 10,2% moisture. The lipid, 43,1% were polyunsaturated fatty acids, monounsaturated fatty acids 41,7% and 15,2% saturated fatty acids. The minerals phosphorus, magnesium and manganese are highlighted by high levels, 941; 343 and 4,8 mg.100-1, respectively. Sapucaia nut is a potential protein-energy and minerals source, but its toxicity must be evaluated.

Efeito dos resíduos de café seco e fermentado por Monascus ruber no metabolismo de camundongos Apo E / Effect of dry coffee residues fermented with Monascus ruber on the metabolism of Apo E mice

FUNDAMENTO: A aterosclerose é uma doença inflamatória crônica de origem multifatorial que ocorre em resposta à agressão endotelial. O fungo Monascus ruber apresenta atividade hipocolesterolêmica e polifenóis presentes no resíduo de café apresentam atividade antioxidante, podendo auxiliar na prevenção de doenças cardiovasculares. O resíduo de café possui quantidade significativa de açúcares fermentescíveis, constituindo-se em substrato apropriado para o cultivo de fungos. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito dos resíduos de café seco e fermentado por Monascus ruber no metabolismo lipídico de camundongos knockout Apo E. MÉTODOS: O ensaio biológico foi realizado com 30 camundongos knockout para o gene Apo E, divididos em cinco grupos e submetidos a diferentes tratamentos. Foi realizada a prospecção fitoquímica e quantificação de compostos fenólicos dos resíduos fermentado e sem fermentar. O soro dos animais foi analisado utilizando kits enzimáticos e o tecido aórtico incluso em parafina e corado com H/E para realização da análise histopatológica. RESULTADOS: O resíduo de café sem fermentar 2%, em relação ao grupo controle, diminuiu em 42% o nível sérico de triacilgliceróis e em aproximadamente 41% a fração VLDL-c. Os grupos dos animais alimentados com 10% de resíduo não fermentado e 2% de resíduo fermentado diminuíram a área de lesão 10,5% e 15,4%, respectivamente, quando comparados ao controle. O resíduo fermentado apresentou um teor de compostos fenólicos superior ao resíduo não fermentado. CONCLUSÃO: O presente estudo mostra que a fermentação do resíduo de café apresenta potencial efeito benéfico sobre as doenças cardiovasculares, especialmente a aterosclerose.

BACKGROUND: Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease of multifactorial origin, which occurs in response to endothelial injury. The fungus Monascus ruber has hypocholesterolemic activity, and the polyphenols present in coffee residue have an antioxidant activity and can help prevent cardiovascular diseases. Coffee residue has a significant amount of fermentable sugars, being an adequate substrate for growing fungi. OBJECTIVE: The objective of this study was to assess the effect of dry coffee residue fermented with Monascus ruber on the lipid metabolism of ApoE knockout mice. METHODS: The biological assay was performed with 30 ApoE knockout mice, divided into five groups and undergoing different treatments. The phytochemical prospection and quantification of phenolic compounds of the fermented and non-fermented coffee residues were performed. The sera of the animals were analyzed by using enzyme kits, and the aortic tissue was embedded in paraffin and stained with hematoxylin and eosin to undergo histopathological analysis. RESULTS: Comparing with the control group, the group receiving 2% non-fermented coffee residue showed a reduction of 42% in the serum levels of triacylglycerols and of approximately 41% in VLDL-c. The groups receiving 10% non-fermented coffee residue and 2% fermented coffee residue showed reductions in the lesion areas of 10.5% and 15.4%, respectively, as compared with the control group. The fermented coffee residue showed a higher content of phenolic compounds as compared with the non-fermented coffee residue. CONCLUSION: The present study showed that coffee residue fermentation has a potentially beneficial effect on cardiovascular diseases, especially atherosclerosis.

[Larvicidal activity of a crude enzyme extract of the fungus Duddingtonia flagrans on first-stage larvae of Angiostrongylus vasorum]. / Atividade larvicida do extrato bruto enzimático do fungo Duddingtonia flagras sobre larvas de primeiro estádio de Angiostrongylus vasorum.

INTRODUCTION: Angiostrongylus vasorum is a nematode parasite of domestic dogs and potentially of humans. METHODS: This study aimed to observe the predatory activity in vitro of a crude enzyme extract of the fungus Duddingtonia flagrans on first-stage larvae of A. vasorum in laboratory conditions on 2% water-agar. RESULTS: At the end of the experiment, the percentage reductions observed for A. vasorum L1 were 53.5% (24h) and 71.3% (48h). CONCLUSIONS: Crude enzyme extract of the fungus D. flagrans destroyed the L1 in vitro and can be used as a biological control for this nematode.

Teores de B-caroteno e vitamina C durante o amadurecimento da manga "UBÀ"(Mangifera indica L. var. Ubá)

A manga Ubá é uma fruta de custo reduzido, amplamente cultivada na Zona da Mata Mineira e muito apreciada pelos consumidores. Com o objetivo de avaliar o conteúdo de antioxidantes naturais ao longo do amadurecimento da fruta, este trabalho quantificou o conteúdo de β-caroteno e vitamina C total (ácido ascórbico-AA e ácido desidroascórbico-ADA) na fruta in natura em três estádios de maturação: verde, parcialmente madura e madura. As análises foram feitas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). O conteúdo médio de β-caroteno foi maior na manga madura, seguido pela manga parcialmente madura e manga verde. Para AA e vitamina C total, ao contrário, observou-se maior conteúdo na manga verde, seguido pela fruta parcialmente madura e menor conteúdo na manga verde. Para ADA não foi observada diferença entre os estádios de maturação. A manga Ubá apresentou-se como uma excelente fonte de antioxidantes naturais, com teores de β-caroteno e vitamina C superiores aos comumente encontrados em outras variedades de manga, o que pode contribuir para atender boa parte das necessidades diárias de vitaminas A e C.

Atividade larvicida do extrato bruto enzimático do fungo Duddingtonia flagras sobre larvas de primeiro estádio de Angiostrongylus vasorum / Larvicidal activity of a crude enzyme extract of the fungus Duddingtonia flagrans on first-stage larvae of Angiostrongylus vasorum

INTRODUÇÃO: Angiostrongylus vasorum é um nematóide que parasita cães domésticos e eventualmente o homem. MÉTODOS: O objetivo deste trabalho foi observar a atividade predatória in vitro do extrato bruto enzimático do fungo Duddingtonia flagrans sobre larvas de primeiro estádio A. vasorum em condições laboratoriais no meio ágar-água 2 por cento. RESULTADOS: Ao final do experimento, os percentuais de redução das L1 de A. vasorum observados foram de: 53,5 por cento (24h) e 71,3 por cento (48h) CONCLUSÕES: O extrato bruto enzimático do fungo D. flagrans destruiu in vitro as L1, podendo ser utilizado como controle biológico desse nematóide.

INTRODUCTION: Angiostrongylus vasorum is a nematode parasite of domestic dogs and potentially of humans. METHODS: This study aimed to observe the predatory activity in vitro of a crude enzyme extract of the fungus Duddingtonia flagrans on first-stage larvae of A. vasorum in laboratory conditions on 2 percent water-agar. RESULTS: At the end of the experiment, the percentage reductions observed for A. vasorum L1 were 53.5 percent (24h) and 71.3 percent (48h). CONCLUSIONS: Crude enzyme extract of the fungus D. flagrans destroyed the L1 in vitro and can be used as a biological control for this nematode.