Quimerismo donante-receptor como origen del desarrollo de bronquiolitis obliterante en un modelo experimental de retrasplante de tráquea en ratas / Donor-receiver chimerism as the ori gin of obliterative bronchiolitis in an experimental model for trachea re transplant in rats

OBJETIVOS: 1. Desarrollar un modelo de bronquiolitis obli-terante en ratas (BO), mediante trasplante heterotópico de tráquea; 2. Eliminar el componente de rechazo alogénico me-diante el reimplante del injerto en un animal isogénico; y 3. Estudiar la respuesta inflamatoria persistente que podría auto-perpetuar la lesión.MÉTODOS: Se utilizaron ratas de las razas Lewis (LW), Wistar (W) y Brown Norway (BN). Se realizaron trasplantes singéni-cos (LW-LW, n=14; W-W, n=6; y BN-BN, n=6) y alogénicos AB (LW-W, n=6; BN-LW, n=6; y W-LW, n=6), alojando el injerto en el tejido celular subcutáneo cervical. Tras 15 días, se explantó el injerto e implantó en una tercera rata singéni-ca o alogénica por otros 15 días, estableciendo un modelo de retrasplante A-B-A y A-B-B. Los injertos se procesaron para realizar estudios histológicos e inmunohistoquímicos. El ori-gen de las células epiteliales se analizó mediante PCR.RESULTADOS: El retrasplante de tráquea, tanto en el diseño A-B-B como A-B-A, dió lugar a la aparición de una rápida respuesta inflamatoria compatible con un proceso de BO, en aquellos animales que habían desarrollado rechazo por tras-plante alogénico previo. En trasplantes ♀-♂-♀, se detectaron células con el cromosoma Y en tráqueas del 2º receptor ♀.CONCLUSIONES: En el modelo de retrasplante de tráquea en ratas, junto a los hallazgos típicos de BO se produce una res-puesta inflamatoria leve-moderada compatible con un recha-zo celular MHC incompatible. Células procedentes del primer receptor se integrarían en la tráquea del segundo trasplante, produciéndose un quimerismo donante receptor, que sería el responsable, en último término, del desarrollo de BO

OBJECTIVES: 1. Develop an obliterative bronchiolitis (OB) model in rats, by means of heterotopic trachea transplant; 2. Eliminate the allogenic rejection component by re-implanting a graft in an isogenic animal; and 3. Study the persistent in-flammatory response that could self-perpetuate the injury. METHODS: The following rat breeds were used: Lewis (LW), Wistar (W) and Brown Norway (BN). Syngenic (LW-LW, n=14; W-W, n=6; and BN-BN, n=6) and allogenic AB (LW-W, n=6; BN-LW, n=6; and W-LW, n=6) transplants were performed, housing the graft in the cervical subcutaneous ce-llular tissue. After 15 days, the graft was removed and implan-ted into a third syngenic or allogenic rat for another 15 days, to establish a re-transplant model A-B-A and A-B-B. The grafts were processed to carry out histological and immunohistoche-mical studies. The origin of the epithelial cells was analyzed using PCR. RESULTS: The tracheal re-transplant, both in the A-B-B and A-B-A design, gave rise to the appearance of a rapid inflam-matory response compatible with OB process, in those ani-mals that rejected the transplant due to previous allogenic transplant. In ♀ -♂ -♀ transplants, cells were detected with the Y chromosome in trachea of the 2nd ♀ receiver. CONCLUSIONS: In the trachea re-transplant model in rats, together with typical OB discoveries, a compatible slight-moderate inflammatory response takes place with an MHC incompatible cellular rejection. Cells from the first receiver became integrated into the trachea of the second transplant, producing a donor-receiver chimerism that would, in the final location, be responsible for the development of OB. Key words: Lung transplant, chronic rejection, obliterative bronchiolitis, chronic dysfunction of the lung graft

[Guidelines for quality management of dialysis solutions]. / Guías de gestión de calidad del líquido de diálisis (LD).

A Best Practice Guideline about Dialysis fluid purity has been developed under the leadership of the Spanish Society of Nephrology. The Guideline has established recommendations for standards for preparing dialysate: water, concentrates and hemodialysis proportioning systems. The Guideline was based on the European pharmacopoeia, the Real Farmacopea Española, the AAMI Standards and Recommended Practices, European Best Practice Guidelines for Haemodialysis (Section IV), literature reviews, according to their level of evidence, and the opinion of the expert spanish group. Two levels of quality of water were defined: purified water and high purified water (Ultra pure) and for dialysate: standard dialysate and ultra pure dialysate. Regular use of ultra pure dialysate is necessary for hemofiltration and hemodiafiltration on-line and desirable for high-flux hemodialysis to prevent and delay the occurrence of complications: inflammation, malnutrition, anemia and amyloidosis. Water, concentrates and dialysate quality requirements are defined as maximum allowable contaminant levels: chemicals (1.1.2), microbial and endotoxins: [table: see text] Monitoring frequency, maintenance and corrective actions were specified. Methods of sampling and analysis were described in appendix (Anexos). For microbiological monitoring, TSA or R2A medium are recommended, incubated during 5 days at a temperature of 30-35 degrees C. The dialysate quality assurance process involves all dialysis staff members and requires strict protocols. The physician in charge of hemodialysis has the ultimate responsibility for dialysate quality. All suggestions and questions about this Guideline are wellcome to www.senefro.org

Guías de Gestión de Calidad del Líquido de Diálisis (LD) / No disponible

La Sociedad Española de Nefrología ha elaborado una Guía sobre la calidad del líquido de diálisis. La guía establece recomendaciones sobre los estándares necesarios para preparar el dializado: agua, concentrado y los sistemas necesarios para su elaboración.. Esta guía se fundamenta en la Farmacopea Europea, la Real Farmacopea Española, los estándares y recomendaciones prácticas de la AAMI, las Guías Europeas para hemodiálisis (sección VI) y revisión de la literatura acompañado de su nivel de evidencia, así como la opinión del Comité de expertos que ha elaborado la guía. Se han definido dos niveles de calidad del agua: purificada y altamente purificada (ultrapura) y para el dializado: dializado estandar y dializado ultrapuro. La utilización de un dializado ultrapuro es necesario para la hemofiltración y hemodiafiltración en línea y deseable en la hemodiálisis de alto flujo para prevenir complicaciones: inflamación, malnutrición, anemia y amiloidosis. Se definen los niveles máximos de contaminantes requeridos en la calidad del agua, concentrados y dializados: químicos (1.1.2), microbiológicos y endotoxinas. Simultáneamente se especifican la frecuencia de monitorización, mantenimiento, así como los mecanismos para su corrección. En los apéndices se describen los métodos de recogida de las muestras y su análisis. Para la monitorización microbiológica se recomiendan los medios TSA o R2A, con un periodo de incubación de 5 días a una temperatura de 30-35 ºC. La calidad del dializado involucra a todo el personal de diálisis y su control requiere protocolos estrictos. Los nefrólogos encargados de la diálisis tienen la última responsabilidad en la calidad del dializado. Todas las sugerencias y preguntas relacionadas con esta guía serán atendidas en www.senefro.org (AU)

A Best Practice Guideline about Dialysis fluid purity has been developed under the leadership of the Spanish Society of Nephrology. The Guideline has established recommendations for standards for preparing dialysate: water, concentrates and hemodialysis proportioning systems. The Guideline was based on the European pharmacopoeia, the Real Farmacopea Espa- ñola, the AAMI Standards and Recommended Practices, European Best Practice Guidelines for Haemodialysis (Section IV), literature reviews, according to their level of evidence, and the opinion of the expert spanish group. Two levels of quality of water were defined: purified water and high purified water (Ultra pure) and for dialysate: standard dialysate and ultra pure dialysate. Regular use of ultra pure dialysate is neccessary for hemofiltration and hemodiafiltration on-line and desirable for high-flux hemodialysis to prevent and delay the occurrence of complications: inflammation, malnutrition, anemia and amyloidosis. Water, concentrates and dialysate quality requirements are defined as maximum allowable contaminant levels: chemicals (1.1.2), microbial and endotoxins microbiological monitoring, TSA or R2A medium are recommended, incubated during 5 days at a temperature of 30-35º C. The dialysate quality assurance process involves all dialysis staff members and requires strict protocols. The physician in charge of hemodialysis has the ultimate responsibility for dialysate quality. All suggestions and questions about this Guideline are wellcome to www.senefro.org (AU)

[Valoration of the FAS in the contralateral testis after unilateral testicular torsion. Experimental study in rats]. / Valoración de la molécula FAS en el testículo contralateral tras torsión testicular unilateral. Estudio experimental en ratas.

The role the FAS and BCL-2 in the apoptosis of testicular cells in the contralateral testis after unilateral testicular torsion, was investigated. We compared with control group. These experiments were performed in male Wistar rats prepuberal old. FAS and BCL-2 determination is realized in cells cultures of contralateral testis. Flow cytometry and immunohistochemistry studies, using a FAS and BCL-2 specific monoclonal antibody, were utilized to value FAS y BCL-2 expression on testiculaires cells following unilateral testicular torsion. We observed an increase of expression of FAS and decrease of BCL-2 in the contralateral testis in comparison with control group. The present results may indicate that the expression of this molecules is implicated in cellular apoptosis.

[Apoptosis in the cryptorchidism. Role of the FAS protein in it's modulation]. / Apoptosis en el testículo criptorquídico. Implicación de la molécula FAS en su modulación.

The cellular degeneration, present at the criptorchidism leads to a malfunction in the spermatogenosis and it's due to cellular apoptosis (programed cellular death). This process is turned on and modulated by different ways. One of then is mediated by Ag-Ac reactions and a protein called FAS seems to have an important role in it's modulation. We studied the relation between FAS an the increased apoptosis in undescended testics. Testicular biopsies were done in criptorchid patients during orchidopexy and FAS was measured by immune-techniques. Our results seem to dismiss FAS as a modulation apoptosis factor in the cryptorchidism.

Valoración de la molécula FAS en el testículo contralateral tras torsión testicular unilateral. Estudio experimental en ratas / Valoration of the fas in the contralateral testis after unilateral testicular torsion. Experimental study in rat

Investigamos la implicación de la molécula FAS y BCL2en la apoptosis de células testiculares que ocurre en el testículo contralateral tras torsión testicular unilateral. Se compara con un grupo control. El estudio se realiza en ratas macho Wistar en edad prepuberal. La determinación de FAS y BCL-2 se realiza en co-cultivos celulares obtenidos del testículo contralateral y de los testículos controles. La valoración de las moléculas se realiza por técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) con la aplicación de anticuerpos monoclonales específicos y su expresión se determina en citometría de flujo según protocolo. Observamos un incremento de la expresión de FAS y disminución de BCL-2 en el testículo contralateral con respecto al grupo control. Este estudio indica que la expresión de FAS y BCL-2 puede estar implicada en la apoptosis celular que ocurre en el testículo contralateral en la torsión testicular unilatera (AU)

Apoptosis en el testículo criptorquídico. Implicación de la molécula FAS en su modulación / Apoptosis in the cryptorchidism. Role of the fas protein in it's modulation

La degeneración celular que ocurre en la criptorquidia con alteración de la espermatogénesis normal se produce por un mecanismo de «apoptosis» o muerte celular programada. Son varias las vías que activan o modulan dicha apoptosis y entre ellas la vía mediada inmunológicamente por reacción antígeno-anticuerpo. Cuando la muerte por apoptosis se produce por vía inmnológica, una molécula «FAS» es la implicada en la modulación de dicha apoptosis. En este trabajo investigamos el papel que la molécula FAS tiene en el incremento de apoptosis en el artículo criptorquídico. El estudio se realiza en biopsias testiculares de pacientes criptorquídicos tomadas durante la orquidopexia, y la determinación de FAS se realiza por técnicas de inmunohistoquímica. Los resultados obtenidos indican que la molécula FAS no parece tener una clara implicación en la modulación de la apoptosis en el testículo criptorquídico (AU)

Aqueous humor and serum tumor necrosis factor-alpha in clinical uveitis.

OBJECTIVE: To study the local and systemic behavior of the tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) in patients with active uveitis. METHODS: TNF-alpha levels were measured in aqueous humor and peripheral blood samples using an enzyme-linked immunosorbent assay from 23 patients with uveitis and 16 control patients who had been operated on for uncomplicated cataracts. RESULTS: Aqueous humor and sera of patients with uveitis showed higher levels of TNF-alpha than those of controls (p < 0.001). A comparison of cytokine levels between aqueous humor and sera showed significantly higher levels of TNF-alpha in serum than aqueous humor (p < 0.001). Correlation studies using the regression test for successive steps showed that serum TNF-alpha levels correlated with recurrent uveitis (r = 0.4150; p = 0.0489). CONCLUSIONS: TNF-alpha is a cytokine that participates actively in the pathogenesis of clinical uveitis. Our data emphasize the greater systemic than local participation of TNF-alpha. Finally, an elevated serum TNF-alpha seems to be associated with a recurrent pattern of uveitis.

[Aqueous humor and serum interleukin-6 in patients with uveitis]. / Interleucina-6 en humor acuoso y suero de pacientes con uveítis.

PURPOSE: A study on local and systemic behavior of interleukin-6 in patients with active uveitis. METHODS: IL-6 levels were measured in aqueous humor and peripheral blood samples using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) from 23 patients with uveitis and 16 control patients who had been operated for uncomplicated cataracts. RESULTS: Aqueous humor of patients with uveitis showed higher levels of interleukin-6 than those of controls (p<0.001). A comparison of cytokine levels between aqueous humor and serum from patients with uveitis showed significantly higher levels of interleukin-6 in aqueous than serum (p<0.001). Correlation studies using regression test for successive steps failed to demonstrate any association between interleukin-6 levels and the different clinical characteristics of uveitis patients (laterality, onset, patterns, visual damage, localization, inflammatory activity, etiology, and association with the B27 + histocompatibility antigen). CONCLUSIONS: IL-6 is a cytokine that actively participates in the pathogenesis of clinical uveitis. Our data emphasize the greater local than systemic participation of this cytokine.

Interleucina-6 en humor acuoso y suero de pacientes con uveítis / Aqueous humor and serum interleukin-6 in clinical uveitis

Objetivo: Estudiar el comportamiento local y sistémico de la interleucina-6 en pacientes con uveítis en actividad. Método: Se determinaron los niveles de interleucina-6 en humor acuoso y sangre periférica de 23 pacientes con uveítis en actividad y de 16 pacientes operados de catarata no complicada como grupo control, mediante la técnica inmunoenzimática ELISA. Resultados: Los pacientes con uveítis presentaron niveles superiores de interleucina-6 en humor acuoso respecto a controles (p<0,001). La comparación entre humor acuoso y suero de los pacientes con uveítis mostró unos niveles significativamente superiores de interleucina-6 en humor acuoso (p<0,001). El análisis mediante el test de regresión múltiple por pasos sucesivos no demostró ninguna asociación entre los niveles de interleucina-6 y las diferentes características clínicas de las uveítis (lateralidad, comienzo, patrón, daño visual, localización, actividad inflamatoria, etiología y asociación al antígeno HLAB27+).Conclusiones: La interleucina-6 es una citocina que participa activamente en la patogenia de la uveítis clínica. Nuestros datos demuestran una mayor participación local que sistémica de esta citocina (AU)

Apoptosis en el testículo contralateral tras lesión testicular unilateral. Estudio experimental * / Apoptosis in the contralateral testis after unilateral testicular torsion. Experimental, study

Introducción. Los resultados de estudios clínicos y experimentales demuestran que determinadas patologías testiculares unilaterales pueden causar infertilidad debido a la disrupción de la espermatogenésis. El mecanismo celular exacto responsable para estos cambios degenerativos no está claro. Objetivo. Estudiar la viabilidad celular en el testículo contralateral tras provocar, experimentalmente, diversas agresiones testiculares unilaterales, comparándolo con un testículo normal. Material y método. El estudio se realiza en seis grupos de 10 ratas macho Wistar en edad prepuberal, que fueron sometidas a agresión testicular unilateral y posterior orquiectomía del testículo contralateral a la lesión. Se valora la muerte celular por mecanismo de 'apoptosis', utilizando un método para la detección de la fragmentación del ADN en citometría de flujo. Resultados. Observamos un aumento de muerte celular por 'apoptosis' en el testículo contralateral tras agresión testicular unilateral (AU)

[Apoptosis of the contralateral testis after unilateral testicular injury. Experimental study]. / Apoptosis en el testículo contralateral tras lesión testicular unilateral. Estudio experimental.

INTRODUCTION: The results of both clinical and experimental studies suggest that some testicular unilateral lesions cause infertility due to disruption of spermatogenesis. The cellular mechanism responsible for the degenerative changes is still unclear. OBJECTIVE: Study of the cellular viability in the contralateral testis after unilateral testis injuries. MATERIAL AND METHOD: Six groups of 10 prepuberal Wistar rats subjected to unilateral testicular lesion. To identify the cellular death by "apoptosis" in situ, analysis of DNA fragmentation was performed in cytometric flow. RESULTS: The present study demonstrated an increase of the apoptosis in the contralateral testis after unilateral testicular lesion.

[Experimental testicular torsion: its effect on the contralateral testicle]. / Torsión testicular experimental: efecto en el testículo contralateral.

The purpose of this project is to determine the lesion in contralateral testis after unilateral testicular torsion. For that is reproduced the lesion in an experimental model animal using 35-45 days old Wistar rats. The study of the contralateral testis is performed 30-35 days after lesion, once orchiectomy with histopathological and ultrastructural analysis, was made. We observed zonal tubular atrophy, alteration of spermatogenesis, abnormal formation of spermatozoa and death cellular by apoptosis.