Aislamiento y caracterizacion parcial de fracciones con actividad ribonucleasa a partir del latex de calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton y pedilanthus tithymaloides (L.) poit / Isolation and partial characterization of fractions with ribonuclease activity from latex of calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton and pedilanthus tithymaloides (L.) poit

Con el objetivo de aislar y caracterizar parcialmente las enzimas ribonucleasas (RNasas) contenidas en el látex de Calotropis procera y Pedilanthus tithymaloides, se colectaron muestras de plantas adultas. Las proteínas solubles fueron extraídas con acetato de sodio y centrifugación a 16.000 x g durante 15 min y fraccionadas por cromatografía de intercambio iónico. Se estimó la masa molecular a través de ecuaciones de regresión lineal. Se realizaron pruebas de glicosilación. En ambas especies, las proteínas con actividad RNasa presentaron una masa molecular entre 28 y 30 kDa. No existe evidencia de proteínas glicosiladas en el látex de C. procera. En P. tithymaloides la RNasa es una proteína glicosilada.

In order to isolate and characterize partially ribonucleases (RNases) enzymes contained in the latex from Calotropis procera and Pedilanthus tithymaloides, samples were collected from mature plants. Soluble proteins were extracted with sodium acetate and centrifugation at 16,000 xg for 15 min and fractionated by ion exchange chromatography. Molecular mass was estimated by linear regression equations. Glycosylation tests were conducted. In both species, proteins with RNase activity showed a molecular mass between 28 and 30 kDa. No evidence of glycosylated proteins in latex from C. procera. In P. tithymaloides, RNase may be a glycosylated protein.

Recuperación del genoma del padre recurrente en un programa de retrocruzas asistido por marcadores en arroz / Recurrent parent genome recovery in a marker assisted backcross breeding program in rice

La piricularia (Pyricularia grisea (Cooke) Sacc.) es una de las enfermedades más destructivas del arroz a nivel mundial. El uso de cultivares resistentes es la vía más efectiva y económica de controlar la enfermedad. El método de la retrocruza es el más empleado para la incorporación de genes simples de resistencia. Sin embargo, el proceso se dificulta cuando existe ligamiento de estos genes con características indeseables, el cual puede ser difícil de romper, aún después de muchas generaciones de retrocruzas. La selección asistida por marcadores (SAM) contribuye a facilitar la recuperación del genoma del padre recurrente (PR) en un menor número de generaciones. El objetivo del presente estudio fue la recuperación del genoma del PR utilizando marcadores moleculares en generaciones tempranas de un programa de retrocruzas para la incorporación de un gen de resistencia a P. grisea. En los parentales se evaluaron 36 microsatélites ubicados en los 12 cromosomas del arroz; aquellos que mostraron polimorfismo se evaluaron en plantas de las generaciones RC2F2 y RC3F1. La SAM permitió identificar plantas 100 por ciento similares al PR para los loci evaluados en ambas generaciones de retrocruzas; sin embargo, la proporción fue mayor en la RC3F1 que en RC2F2. Se identificaron regiones cromosómicas candidatas en los cromosomas 4 y 7 para la futura identificación del gen de resistencia incorporado. La aplicación de SAM en el programa de retrocruzas permitió la recuperación del genoma del PR en pocas generaciones, reduciendo el tiempo necesario en el proceso de mejoramiento para incorporar resistencia a piricularia

Herencia de tres sistemas isoenzimaticos en arroz (Oryza sativa L) / Inheritance of three isoenzyme systems in rice (Oryza sativa L)

El presente trabajo buscó establecer el control genético de tres sistemas isoenzimáticos altamente polimórficos en arroz, asociados con el uso de nitrógeno. Conocer el control genético de las isoenzimas bajo estudio es importante porque nos permite establecer el modo de herencia y el grado de ligamiento existente entre los factores genéticos, así como realizar asociaciones con características morfológicas y agronómicas de interés en el cultivo. Para ello, se realizaron cruzamientos entre genotipos de arroz eficientes y no eficientes en el uso de nitrógeno, a fin de obtener los híbridos F1, y por autofecundación la población F2 de cada cruce. Los sistemas isoenzimáticos evaluados fueron: a-esterasa (a-Est), B-esterasa B-esterasa (B-Est) y shikimato deshidrogenasa (Sdh). La mayor actividad enzimática de las esterasas estuvo bajo la acción de dos loci (a-Est. y B-Est) y un locus para Sdh-1. El locus B-Est.-2 fue el único que mostró una segregación típica mendeliana para un carácter codominante de 1:2:1. En contraposición, se observó una distorsión en la segregación mendeliana de algunos loci, principalmente en los cruces donde participaban las líneas experimentales ‘D-48´ y ‘D-83´, probablemente debido a una incompatibilidad gametofítica entre los genes de los cultivares japónica presentes en estas líneas y los cultivares “indica”. Con el estadístico G se detectó ligamiento entre los loci de esterasa: a-Est-1 x a-Est-2 para el cruce entre las variedades `Fonaiap-1`x`Palmar`, y B-Est-1 x B-Est-2 para el cruce entre la línea ‘D-48´ y la variedad ‘Cimarrón´. La segregación de Est y Sdh fue independiente.

In order to determine the genetic control of three isozyme systems in rice, F1 and F2 generations were obtained from crosses between rice genotypes that were efficient and not efficient in the use of nitrogen. The isozyme genetic control is very important since the inheritance and linkage among genetic characteristics and agronomic traits can be established. The highest enzyme activities were for the Esterase, with two loci (a-Est. y B-Est) and Sdh with one. The B-Est-2 locus showed a Mendelian ratio of 1:2:1; but a deviation from that segregation was observed when ‘D-48´ and ‘D-83´ crosses were combined, probably due to gametophitic incompatibility between “japónica” and “indica” genes present in the crossed lines. According to G test, a linkage between a-Est-1 x a-Est-2 and B-Est-1 x B-Est-2 were detected in ‘Fonaiap-1´ x ‘Palmar´ and ‘D-48´ x ‘Cimarrón´ crosses, respectively. None linkage was observed for Est and Sdh loci.

Caracterización morfológica de frutos de onoto (Bixa orellana L. ) y su correspondencia con patrones de proteínas e isoenzimas / Morphological characterization of annatto fruits (Bixa orellana L. ) and its correspodence with protein and isozyme patterns

Para el estudio morfológico de cápsulas de onoto (Bixa orellana L.) fue utilizada una población de 32 accesiones procedente de cinco regiones del país (Oriente, Centro, Llanos, Andes y Amazonas) y del Brasil. Se encontró que las variables del fruto que tuvieron mayor peso en la separación de accesiones para la formación de grupos fueron el tamaño de cápsula, espinosidad y el tamaño de semilla. Por otra parte, se formó un grupo de asociación entre las variables espinosidad, longitud de espinas, dehiscencia y forma de ápice; así como una asociación proporcional entre las variables tamaño de cápsula y semilla y entre las cápsulas dehiscentes con semillas de color marrón. Adicionalmente, se estableció un conjunto de bandas proteicas e isoenzimáticas que permitieron discriminar los grupos de accesiones definidas previamente de acuerdo a las características del fruto, para inferir el comportamiento de las variables morfológicas estudiadas en función de las variables electroforéticas. Por tanto, los estudios morfológicos de las cápsulas permitieron establecer un sistema de clasificación del cultivo, aunque no se encontró una estrecha asociación entre estas y los patrones moleculares.

Identificación y variabilidad genética de genotipos de onoto (Bixa orellana L. ) mediante el uso de proteínas hidrosolubles e isoenzimas / Identification and genetic variability of annatto genotypes (Bixa orellana L. ) by means of hydrosoluble proteins and isozymes

Para la identificación y determinación de la variabilidad genética de una población de 36 genotipos de onoto (Bixa orellana L. ) colectados de cinco regiones del país (Oriente, Centro, Llanos, Andes y Amazonas) y del Brasil; se utilizaron patrones de proteínas hidrosolubles e isoenzimáticos específicos (beta-esterasa, beta-esterasa y peroxidasa), partiendo de semillas germinadas de onoto, con radículas de 10 a 15 mm de longitud. Cada sistema electroforético permitió la discriminación de genotipos con patrones de bandeo únicos: las proteínas hidrosolubles y el sistema electroforético beta-esterasa con nueve patrones cada uno, mientras que beta-esterasa y peroxidasa, discriminaron ocho y tres genotipos, respectivamente. Por otra parte, la combinación de todos los sistemas electroforéticos permitió una mayor discriminación lográndose identificar a 34 de los 36 genotipos de onoto evaluados. Con el análisis de agrupamiento se logró la formación de ocho grupos muy heterogéneos, con una divergencia genética de un 40 a 60 %, no existiendo correspondencia entre el agrupamiento geográfico y el enzimático, posiblemente debido a la influencia antrópica en la distribución aleatoria de este cultivo. Los resultados obtenidos indicaron que con los patrones electroforéticos, se puede establecer un sistema de clasificación para identificar genotipos y determinar la variabilidad genética existente en esta especie.