RESUMO
El presente estudio valora la capacidad biomecanica del neotejido cartilaginoso, sintetizado por condrocitos sembrados en una matriz alogenica. El cartilago se extrae de articulaciones de corderos jovenes y se corta en discos que seran desvitalizados mediante sucesivos ciclos de congelamiento y descongelamiento. Los condrocitos articulares fueron aislados por digestion enzimatica y cultivados durante 3 semanas con los discos desvitalizados. Los discos portadores de condrocitos fueron colocados yuxtapuestos de a pares y envueltos por un gel de adhesivo de fibrina. Luego se trasplantaron al tejido subcutaneo de ratones atimicos. Los animales fueron sacrificados a la primera y cuarta semanas y los compuestos cartilaginosos fueron evaluados mediante el examen macroscopico e histologico y sometidos a tests biomecanicos. Los resultados obtenidos en este estudio demostraron diferencias significativas en los valores de esfuerzo elastico maximo, deformacion maxima, energia de fractura y modulo de elasticidad de los compuestos experimentales en relacion con las muestras control, constituidas por discos desvitalizados cultivados en ausencia de condrocitos. El examen histologico demostro que los condrocitos sembrados en los discos de cartilago desvitalizado permiten la adhesion de las muestras de matriz mediante la formacion de un neotejido cartilaginoso
Assuntos
Animais , Camundongos , Condrócitos , Cartilagem Articular , Fenômenos BiomecânicosRESUMO
El presente estudio valora la capacidad biomecanica del neotejido cartilaginoso, sintetizado por condrocitos sembrados en una matriz alogenica. El cartilago se extrae de articulaciones de corderos jovenes y se corta en discos que seran desvitalizados mediante sucesivos ciclos de congelamiento y descongelamiento. Los condrocitos articulares fueron aislados por digestion enzimatica y cultivados durante 3 semanas con los discos desvitalizados. Los discos portadores de condrocitos fueron colocados yuxtapuestos de a pares y envueltos por un gel de adhesivo de fibrina. Luego se trasplantaron al tejido subcutaneo de ratones atimicos. Los animales fueron sacrificados a la primera y cuarta semanas y los compuestos cartilaginosos fueron evaluados mediante el examen macroscopico e histologico y sometidos a tests biomecanicos. Los resultados obtenidos en este estudio demostraron diferencias significativas en los valores de esfuerzo elastico maximo, deformacion maxima, energia de fractura y modulo de elasticidad de los compuestos experimentales en relacion con las muestras control, constituidas por discos desvitalizados cultivados en ausencia de condrocitos. El examen histologico demostro que los condrocitos sembrados en los discos de cartilago desvitalizado permiten la adhesion de las muestras de matriz mediante la formacion de un neotejido cartilaginoso
Assuntos
Animais , Camundongos , Condrócitos , Fenômenos Biomecânicos , Cartilagem ArticularRESUMO
La reparacion de los defectos condrales mediante el implante de condrocitos autologos presupone la sintesis por los condrocitos de matriz cartilaginosa con capacidad de adherirse a la superficie de la lesion. En este estudio, se evaluo la capacidad adhesivo-reparativa de condrocitos articulares aislados enzimaticamente, cultivados in vitro sobre matriz cartilaginosa desvitalizada y trasplantados in vivo en bolsillos subcutaneos de ratones atimicos. Se utilizaron 50 ratones atimicos, cada uno portador de dos muestras experimentales y dos de control, subdivididos en 5 tiempos experimentales, que correspondian 7, 14, 21, 28 y 42 dias desde el implante. El analisis de adhesividad en las muestras experimentales mostro valores siempre crecientes con el transcurso del tiempo hasta alcanzar un valor maximo entre los dias 28 y 42; mientras que las muestras de control registraron valores nulos durante todo el estudio. El analisis histologico de los preparados mostro que el adhesivo biologico en las muestras experimentales estaba constituido por cartilago neoformado capaz de promover la adhesion-reparacion de la matriz desvitalizada. Los resultados de este estudio demostraron que los condrocitos aislados y cultivados sobre matriz alogenica desvitalizada se encuentran en condiciones de producir in vivo neotejido cartilaginoso, con una propiedad adhesiva tal que permite la adhesion reciproca en la matriz de soporte
Assuntos
Animais , Camundongos , Condrócitos , Cartilagem Articular , Argentina , Adesão CelularRESUMO
La reparacion de los defectos condrales mediante el implante de condrocitos autologos presupone la sintesis por los condrocitos de matriz cartilaginosa con capacidad de adherirse a la superficie de la lesion. En este estudio, se evaluo la capacidad adhesivo-reparativa de condrocitos articulares aislados enzimaticamente, cultivados in vitro sobre matriz cartilaginosa desvitalizada y trasplantados in vivo en bolsillos subcutaneos de ratones atimicos. Se utilizaron 50 ratones atimicos, cada uno portador de dos muestras experimentales y dos de control, subdivididos en 5 tiempos experimentales, que correspondian 7, 14, 21, 28 y 42 dias desde el implante. El analisis de adhesividad en las muestras experimentales mostro valores siempre crecientes con el transcurso del tiempo hasta alcanzar un valor maximo entre los dias 28 y 42; mientras que las muestras de control registraron valores nulos durante todo el estudio. El analisis histologico de los preparados mostro que el adhesivo biologico en las muestras experimentales estaba constituido por cartilago neoformado capaz de promover la adhesion-reparacion de la matriz desvitalizada. Los resultados de este estudio demostraron que los condrocitos aislados y cultivados sobre matriz alogenica desvitalizada se encuentran en condiciones de producir in vivo neotejido cartilaginoso, con una propiedad adhesiva tal que permite la adhesion reciproca en la matriz de soporte
Assuntos
Animais , Camundongos , Argentina , Condrócitos , Cartilagem Articular , Adesão CelularRESUMO
El trasplante de matrices alogenicas desvitalizadas portadoras de condrocitos autologos, previamente aislados y sembrados sobre ellas, podria ser una solucion al problema de la reparacion de las lesiones del cartilago articular. El presente estudio analiza la actividad mitotica de los condrocitos sembrados en cartilago alogenico desvitalizado e implantados en animales vivos. Se aislaron enzimaticamente condrocitos de cartilago articular de cordero, y se sembraron "in vitro" sobre matriz cartilaginosa alogenica desvitalizada durante 3 semanas. Al final del periodo de cocultivo, se trasplantaron los compuestos de matriz y condrocitos en bolsillos subcutaneos de ratones atimicos. Las muestras experimentales y las de control fueron evaluadas luego de extraidas mediante el estudio histologico y tras la incorporacion de timidina tritiada. Los resultados obtenidos mostraron una disminucion importante de los valores de incorporacion de timidina a partir del tiempo experimental cero (evaluacion preimplante) hasta el dia 28 del implante, seguido por un leve aumento hacia el dia 42 del estudio. La experiencia ha demostrado la tendencia de los condrocitos articulares (cultivados "in vitro" y sucesivamente trasplantados "in vivo" sobre un soporte de matriz cartilaginosa alogenica desvitalizada) de modificar su propia actividad mitotica desde valores muy altos, correspondiendo a los primeros dias experimentales (tipico de las fases "in vitro" de expansion celular) hasta valores muy bajos, similares a la conducta de los condrocitos articulares "in vivo"
Assuntos
Animais , Técnicas In Vitro , Condrócitos , Cartilagem Articular , Transplante Homólogo , Argentina , PesquisaRESUMO
El trasplante de matrices alogenicas desvitalizadas portadoras de condrocitos autologos, previamente aislados y sembrados sobre ellas, podria ser una solucion al problema de la reparacion de las lesiones del cartilago articular. El presente estudio analiza la actividad mitotica de los condrocitos sembrados en cartilago alogenico desvitalizado e implantados en animales vivos. Se aislaron enzimaticamente condrocitos de cartilago articular de cordero, y se sembraron "in vitro" sobre matriz cartilaginosa alogenica desvitalizada durante 3 semanas. Al final del periodo de cocultivo, se trasplantaron los compuestos de matriz y condrocitos en bolsillos subcutaneos de ratones atimicos. Las muestras experimentales y las de control fueron evaluadas luego de extraidas mediante el estudio histologico y tras la incorporacion de timidina tritiada. Los resultados obtenidos mostraron una disminucion importante de los valores de incorporacion de timidina a partir del tiempo experimental cero (evaluacion preimplante) hasta el dia 28 del implante, seguido por un leve aumento hacia el dia 42 del estudio. La experiencia ha demostrado la tendencia de los condrocitos articulares (cultivados "in vitro" y sucesivamente trasplantados "in vivo" sobre un soporte de matriz cartilaginosa alogenica desvitalizada) de modificar su propia actividad mitotica desde valores muy altos, correspondiendo a los primeros dias experimentales (tipico de las fases "in vitro" de expansion celular) hasta valores muy bajos, similares a la conducta de los condrocitos articulares "in vivo"
