RESUMO
Methylation of CpG islands in promoter gene regions is frequently observed in lymphomas. DNA methylation is established by DNA methyltransferases (DNMTs). DNMT1 maintains methylation patterns, while DNMT3A and DNMT3B are critical for de novo DNA methylation. Little is known about the expression of DNMTs in lymphomas. DNMT3A and 3B genes can be regulated post-transcriptionally by miR-29 family. Here, we demonstrated for the first time the overexpression of DNMT1 and DNMT3B in Burkitt lymphoma (BL) tumor samples (69% and 86%, respectively). Specifically, the treatment of two BL cell lines with the DNMT inhibitor 5-aza-dC decreased DNMT1 and DNMT3B protein levels and inhibited cell growth. Additionally, miR-29a, miR-29b and miR-29c levels were significantly decreased in the BL tumor samples. Besides, the ectopic expression of miR-29a, miR-29b and miR-29c reduced the DNMT3B expression and miR-29a and miR-29b lead to increase of p16(INK4a) mRNA expression. Altogether, our data suggest that deregulation of DNMT1, DNMT3B and miR29 may be involved in BL pathogenesis.
Assuntos
Linfoma de Burkitt/genética , DNA (Citosina-5-)-Metiltransferases/biossíntese , MicroRNAs/biossíntese , Adolescente , Azacitidina/análogos & derivados , Azacitidina/farmacologia , Linfoma de Burkitt/patologia , Linhagem Celular Tumoral , Criança , Pré-Escolar , Inibidor p16 de Quinase Dependente de Ciclina/biossíntese , Inibidor p16 de Quinase Dependente de Ciclina/genética , Citidina Trifosfato/análogos & derivados , Citidina Trifosfato/farmacologia , DNA (Citosina-5-)-Metiltransferase 1 , DNA (Citosina-5-)-Metiltransferases/antagonistas & inibidores , Metilação de DNA , Feminino , Regulação Neoplásica da Expressão Gênica , Humanos , Masculino , Regiões Promotoras Genéticas , RNA Mensageiro/biossíntese , DNA Metiltransferase 3BRESUMO
Using MTT, Annexin V/flow cytometry, immunocytochemistry, subcellular fractionation, and Western blotting assays we analyzed the effect of imatinib in two blast phase of chronic myeloid leukemia (CML) cell lines: K562 P-glycoprotein (Pgp)-negative, and Lucena, Pgp-positive. In K562 cell line, the high apoptosis index induced by imatinib was associated with the survivin predominantly in the nucleus. In the Lucena cell line, the low apoptosis index induced by imatinib was associated with a cytoplasmatic survivin localization. Pgp and survivin might be subject to the same molecular regulation, and therefore represent a therapeutic target in the blast phase of CML.
Assuntos
Antineoplásicos/farmacologia , Apoptose/efeitos dos fármacos , Crise Blástica/patologia , Proteínas Inibidoras de Apoptose/genética , Piperazinas/farmacologia , Pirimidinas/farmacologia , Membro 1 da Subfamília B de Cassetes de Ligação de ATP/genética , Membro 1 da Subfamília B de Cassetes de Ligação de ATP/metabolismo , Anexina A5/metabolismo , Apoptose/genética , Benzamidas , Crise Blástica/tratamento farmacológico , Crise Blástica/genética , Western Blotting , Núcleo Celular/metabolismo , Núcleo Celular/patologia , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Citoplasma/metabolismo , Citoplasma/patologia , Citometria de Fluxo , Regulação Neoplásica da Expressão Gênica , Humanos , Mesilato de Imatinib , Imuno-Histoquímica , Proteínas Inibidoras de Apoptose/metabolismo , Células K562 , Leucemia Mielogênica Crônica BCR-ABL Positiva/tratamento farmacológico , Leucemia Mielogênica Crônica BCR-ABL Positiva/genética , Leucemia Mielogênica Crônica BCR-ABL Positiva/patologia , SurvivinaRESUMO
Leucemia mielóide crônica (LMC) é uma doença mieloproliferativa com expansão clonal de células malignas. O cromossomo Philadelphia, derivado da translocação recíproca entre os cromossomos 9 e 22, resulta em um gene quimérico chamado BCR-ABL, encontrado em 90 (por cento) dos pacientes com LMC, sendo atribuída a essa quimera a patogênese da LMC. Imatinibe, um fármaco alvo-específico, liga-se e estabiliza a forma inativa da Bcr-Abl impedindo os efeitos da proteína. O desenvolvimento de resistência ao Imatinibe e a persistência de doença residual mínima tem desanimado os investigadores, além disso, respostas ao Imatinibe são menos freqüentes e mais curtas em pacientes que se encontram nos estágios mais avançados da LMC. Levando em conta que a resistência ao Imatinibe poder ser multifatorial, a identificação dos mecanismos de envolvidos na resistência pode levar a ganhos em sobrevida para os pacientes...
