RESUMO
ABSTRACT: The interactions between biological macromolecules have been important for biotechnology, but further understanding is needed to maximize the utility of these interactions. Calorimetric techniques provide information regarding these interactions through the thermal energy that is produced or consumed during interactions. Notable techniques include differential scanning calorimetry, which generates a thermodynamic profile from temperature scanning, and isothermal titration calorimetry that provide the thermodynamic parameters directly related to the interaction. This review described how calorimetric techniques can be used to study interactions between proteins and polysaccharides, and provided valuable insight into the thermodynamics of their interaction.
RESUMO: As interações entre macromoléculas biológicas têm tido importante aplicação na biotecnologia, mas, para sua devida utilização, estudos mais detalhados são necessários. As técnicas calorimétricas permitem estudá-las ao serem capazes de fornecer informações referentes a essas interações através da energia térmica que é gerada ou absorvida durante o processo de interação. Dentre as técnicas que mais se destacam estão a Calorimetria Exploratória Diferencial, que é capaz de fornecer um perfil termodinâmico a partir de uma varredura de temperatura, e a Calorimetria de Titulação Isotérmica, que fornece parâmetros termodinâmicos diretamente relacionados ao processo de interação. Nesta revisão, descrevemos como essas técnicas calorimétricas podem ser efetivamente aplicadas no estudo das interações entre proteínas e polissacarídeos, com o propósito de obter informações valiosas sobre a termodinâmica da interação.
RESUMO
The objective of this study was to determine the thermodynamic parameters (Delta(tr)G, Delta(tr)H and Delta(tr)S) associated with lysozyme and conalbumin partitioning in aqueous two-phases systems (ATPS). Influence of salt type and polyethylene glycol (PEG) concentrations on the partition coefficient of lysozyme and conalbumin from egg white was studied. The evaluated ATPS were composed of PEG 1500 and inorganic salts (sodium citrate and sodium sulfate) at a temperature of 25 degrees C and pH 7.0, with PEG 1500 g mol(-1) concentrations of 14%, 16% and 18% (mass basis). Partitioning of lysozyme in PEG-citrate ATPS was enthalpically driven, however the PEG-sulfate ATPS was entropically driven. The tested systems can be employed for the separation of these two proteins in egg white, due to the fact that lysozyme migrates toward the polymeric phase and conalbumin to the saline phase in both ATPS. A high recovery of conalbumin in the saline phase of the PEG-sulfate ATPS was determined to be enthalpically driven.
Assuntos
Conalbumina/química , Muramidase/química , Termodinâmica , Conalbumina/isolamento & purificação , Muramidase/isolamento & purificação , Polietilenoglicóis/química , SolubilidadeRESUMO
A presente revisäo da literatura teve por objetivo mostrar as diferentes técnicas que podem ser empregadas no processo de purificaçäo de biomoléculas. Além da seleçäo e combinaçäo de técnicas de separaçäo para o desenvolvimento da estratégia de purificaçäo foram abordadas a precipitaçäo, a centrifugaçäo, a tecnologia de membranas (osmose reversa, ultrafiltraçäo, diálise e microfiltraçäo), a extraçäo líquido-líquido usando sistemas aquosos bifásicos, as técnicas cromatográficas (troca iônica, interaçäo hidrofóbica, fase reversa, exclusäo molecular, leito expandido), as separaçöes biosseletivas (cromatografia por finidade, precipitaçäo por afinidade, partiçäo de proteínas por afinidade em sistemas aquosos bifásicos) e novas técnicas de separaçäo (leito móvel simulado), micelas reversas e cromatografia em contracorrente). Verificou-se que as técncias cromatográficas estäo presentes em todos os processos de purificaçäo de biomoléculas, embora ainda existam restriçöes técnicas e econômicas na aplicaçäo de alguns tipos de cromatografia em escala preparativa
