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Methods Mol Biol ; 1391: 427-43, 2016.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-27108334

RESUMO

Gymnema sylvestre R. Br. (Asclepiadaceae) is an endangered species extensively used in the management of diabetes, obesity, and treatment of various diseases. Uncontrolled exploitation to meet the increasing demand and low seed viability hastens the disappearance of the plant from its natural habitat. Hairy root culture provides a suitable alternative for the enhanced production of active principles. The current protocol provides the optimized culture conditions for the establishment of hairy root cultures and elicitation studies and also confirmation of stable integration of A. rhizogenes plasmid T-DNA into host genetic material by PCR and RT-PCR. Furthermore, it also discusses the suitable methods for the extraction procedures, and qualitative and quantitative analysis of gymnemic acid by HPTLC and HPLC.


Assuntos
Gymnema sylvestre/crescimento & desenvolvimento , Melhoramento Vegetal/métodos , Raízes de Plantas/crescimento & desenvolvimento , Saponinas/metabolismo , Triterpenos/metabolismo , Agrobacterium/genética , Agrobacterium/fisiologia , Cromatografia Líquida de Alta Pressão/métodos , Cromatografia em Camada Fina/métodos , DNA Bacteriano/genética , Gymnema sylvestre/genética , Gymnema sylvestre/microbiologia , Gymnema sylvestre/fisiologia , Raízes de Plantas/genética , Raízes de Plantas/microbiologia , Raízes de Plantas/fisiologia , Plasmídeos/genética , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Saponinas/análise , Saponinas/genética , Transformação Genética , Triterpenos/análise
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