RESUMO
OBJECTIVE: To demonstrate the potential clinical applicability of the PCR technique to the early detection of bacterial resistance in Streptococcus pneumoniae. METHODS: We studied 153 samples of S. pneumoniae, isolated from different anatomic sites, using polymerase chain reaction (PCR) for the detection of specific amplicons from genes that code for penicillin-binding proteins (PBP) 1a, 2b and 2x, which are responsible for penicillin resistance in this organism. The occurrence of these mutated genes was correlated with the minimum inhibitory concentration (MIC) of penicillin, determined by the agar dilution test. RESULTS: The rate of penicillin resistance in S. pneumoniae in Porto Alegre, Brazil was 22.8% (16.3% intermediate resistance and 6.5% high resistance). In a statistically significant proportion of cases (p < 0.05), penicillin-susceptible samples had no amplicons, intermediate samples had only one (generally from PBP 2x), and highly resistant samples had amplicons from all three PBPs investigated. CONCLUSION: These results suggest that penicillin resistance in S. pneumoniae in southern Brazil is on the increase, but is still lower than in other countries, and that PCR could be used for its early detection.
Assuntos
Resistência às Penicilinas , Proteínas de Ligação às Penicilinas/genética , Infecções Pneumocócicas/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Streptococcus pneumoniae/efeitos dos fármacos , Adolescente , Adulto , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Brasil , Distribuição de Qui-Quadrado , Criança , Pré-Escolar , Contagem de Colônia Microbiana , Humanos , Lactente , Testes de Sensibilidade Microbiana/métodos , Pessoa de Meia-Idade , Resistência às Penicilinas/genética , Infecções Pneumocócicas/diagnóstico , Infecções Pneumocócicas/tratamento farmacológico , Reprodutibilidade dos Testes , Streptococcus pneumoniae/genética , Streptococcus pneumoniae/isolamento & purificaçãoRESUMO
INTRODUÇAO: O Streptococcus pneumoniae é o mais freqüente agente etiológico de infecções respiratórias adquiridas na comunidade e sua resistência aos antimicrobianos tem aumentado nos últimos anos. A determinação da resistência é feita rotineiramente por método lento que depende do crescimento em cultura e determinação da concentração inibitória mínima (CIM). A reação em cadeia da polimerase (PCR) detecta os genes responsáveis pela resistência do Streptococcus pneumoniae a penicilina em cerca de 8 horas. OBJETIVO: Comparar a PCR com o método da CIM no diagnóstico da resistência da Streptococcus pneumoniae a penicilina. MÉTODO: Foram estudadas 153 amostras de Streptococcus pneumoniae, isoladas de diferentes sítios anatômicos, usando-se para detecção de mutações nos genes que codificam as proteínas ligadoras de penicilina 1a, 2b e 2x, responsáveis pela resistência à penicilina. A ocorrência das mutações foi correlacionada com a CIM de penicilina, determinada pelo teste de difusão em ágar. RESULTADOS: A resistência global à penicilina do Streptococcus pneumoniae foi de 22,8 por cento (16,3 por cento de resistência intermediária e 6,5 por cento de resistência alta). Em proporções estatisticamente significativas, as amostras sensíveis à penicilina não tinham mutações, as intermediárias apenas uma, geralmente na proteína ligadora de penicilina 2x, e as altamente resistentes tinham mutações nas três proteínas investigadas. CONCLUSAO: A PCR é um método rápido para a detecção da resistência à penicilina do Streptococcus pneumoniae, que poderá vir a ser utilizado na prática clínica.