Inmunohistoquímica de la proteína p16INK4a en biopsias y extendidos cervicovaginales y su relación con HPV por PCR / Immunohistochemistry of p16INK4a in biopsies and cervicovaginal smears, and its correlation with HPV detected by PCR

Estudios recientes sugieren que la sobreexpresión de p16, determinada por inmunohistoquímica, sería un marcador específico de células escamosas displásicas y neoplásicas con alta asociación con HPV de alto riesgo. Nuestro objetivo fue correlacionar los hallazgos cito/histológicos con la expresión de p16 y el subtipo de HPV por PCR. Seleccionamos 95 biopsias de cuello uterino y 4 legrados endocervicales de 99 individuos, y 30 extendidos cervicovaginales de otros 30 individuos, que se dividieron según el diagnóstico morfológico. Inmunomarcamos cortes del material incluido en parafina y los extendidos con el kit CINtecT p16INK4a (DAKO). Evaluamos HPV por PCR utilizando 25/99 biopsias con lesión intraepitelial escamosa de bajo grado. Observamos marcación positiva para p16 en 1/35 biopsias (2.9%) y 1/11 extendidos (9%) en los grupos sin HPV ni displasia; 16/25 biopsias (64%) y 6/10 extendidos (60%) en aquellos con lesión de bajo grado y 38/39 biopsias (97.4%) y 8/9 extendidos (89%) en los grupos con lesión de alto grado y carcinoma escamoso. Todas las muestras con HPV-6/11 fueron negativas o positivas focales para p16, en tanto que aquellas con HPV-18 u otros subtipos fueron mayoritariamente positivas de tipo difuso. Concluimos que la expresión de p16 presenta alta correlación con el diagnóstico cito/histológico y alta asociación entre la marcación difusa y la presencia de HPV de alto riesgo, aportando mayor objetividad en casos dudosos y ayudando a seleccionar grupos de individuos con riesgo de progresión de enfermedad, con un costo aceptable para estudiar grandes grupos.

Recent studies suggest that p16 overexpression determined by immunohistochemistry would be a specific marker for neoplastic and dysplastic squamous cells associated with high-risk HPV. The purpose of this study was to assess the correlation between cyto-histological findings, p16 expression and HPV subtype. A total of 99 biopsies were selected, 4 endocervical curettages and 95 uterine cervix biopsies, as well as 30 cervicovaginal smears from other 30 patients. The samples were divided according to the morphological diagnosis. Paraffin-embedded sections and cervicovaginal smears were immunostained using the CINtecT p16INK4a Cytology Kit (DAKO). HPV was analyzed by PCR in 25 of the 99 biopsies with low-grade squamous intraepithelial lesion. Among those patients with neither HPV nor dysplasia, 1 of 35 (2.9%) biopsies and 1 of 11 (9%) smears were positive for p16. Sixteen of 25 (64%) biopsies and 6 of 10 (60%) smears of the low-grade lesion cases, and 38 of 39 (97.4%) biopsies and 8 of 9 (89%) smears of the high-grade lesion and squamous carcinoma were positive for p16. All cases of HPV-6/11 were negative or focally positive for p16. Most cases of HPV-18 or other subtypes were diffusely positive. Our results indicate that p16 expression is highly correlated with cyto-histological diagnosis, and is associated with diffuse staining and high-risk HPV. This technique provides greater objectivity in doubtful cases, and helps select patients at risk of disease progression at an acceptable cost when used in large populations.

[Immunohistochemistry of p16INK4a in biopsies and cervicovaginal smears, and its correlation with HPV detected by PCR]. / Inmunohistoquímica de la proteina p16INK4a en biopsias y extendidos cervicovaginales y su relación con HPV por PCR.

Recent studies suggest that p16 overexpression determined by immunohistochemistry would be a specific marker for neoplastic and dysplastic squamous cells associated with high-risk HPV. The purpose of this study was to assess the correlation between cyto-histological findings, p16 expression and HPV subtype. A total of 99 biopsies were selected, 4 endocervical curettages and 95 uterine cervix biopsies, as well as 30 cervicovaginal smears from other 30 patients. The samples were divided according to the morphological diagnosis. Paraffin-embedded sections and cervicovaginal smears were immunostained using the CINtec p16INK4a Cytology Kit (DAKO). HPV was analyzed by PCR in 25 of the 99 biopsies with low-grade squamous intraepithelial lesion. Among those patients with neither HPV nor dysplasia, 1 of 35 (2.9%) biopsies and 1 of 11 (9%) smears were positive for p16. Sixteen of 25 (64%) biopsies and 6 of 10 (60%) smears of the low-grade lesion cases, and 38 of 39 (97.4%) biopsies and 8 of 9 (89%) smears of the high-grade lesion and squamous carcinoma were positive for p16. All cases of HPV-6/11 were negative or focally positive for p16. Most cases of HPV-18 or other subtypes were diffusely positive. Our results indicate that p16 expression is highly correlated with cyto-histological diagnosis, and is associated with diffuse staining and high-risk HPV. This technique provides greater objectivity in doubtful cases, and helps select patients at risk of disease progression at an acceptable cost when used in large populations.

AgNORs as an early marker of sensitivity to radiotherapy in gynecologic cancer.

OBJECTIVE: To evaluate the changes induced in silver-stained nucleolar organizer regions (AgNORs) by the first fraction of a radiotherapy protocol for gynecologic cancer on exfoliated cytologic samples to predict the therapeutic success of the full protocol. STUDY DESIGN: Thirteen gynecologic cancer patients who were scheduled for radiotherapy were included in the study. Cell smears were taken from the affected area before and after the first fraction of a radiotherapy protocol and silver stained for AgNORs. AgNORs per nucleus were counted under a light microscope. Local disease control by the full radiotherapy protocol was assessed at one year by the Papanicolaou technique. RESULTS: Local success of radiotherapy was greater for lesions with higher pretreatment AgNOR counts and for lesions that underwent a greater percentage reduction in AgNOR counts after the first fraction. We correlated local success of the full radiotherapy protocol with a predictive index based on AgNOR counts obtained before and after the first fraction. CONCLUSION: A predictive index based on AgNOR counts can predict, as early as after the first fraction, the local control of disease by a full radiotherapy protocol. Knowledge of the probability of success long before the protocol is completed would allow reevaluation of therapeutic options.

Citología del lavado pleural intraoperatorio en patología sin derrame, con especial referencia al cáncer del pulmón / Citology of the intraoperatory pleural lavage in pathology without effusion, specially in lung cancer

Objetivo: determinar la existencia de células neoplásicas en la cavidad pleural de pacientes sin derrame. Diseño: estudio prospectivo y ciego en 50 toracotomías sucesivas. Población: tres grupos de pacientes: Grupo I, control, con enfermedades no neoplásicas (n = 19); Grupo II con cáncer del pulmón (n = 22) y Grupo III, otras enfermedades neoplásicas (n = 9). Método: una vez abierta la cavidad pleural, antes de cualquier maniobra, se virtió 300 cc de solución fisiológica. Luego se repitió el procedimiento antes del cierre de la toracotomía. Se estudió la citología de ambos lavados. Se clasificó a los resultados de la citología en positivos, sospechosos y negativos. Resultados: en el Grupo I, todos los controles fueron negativos. En el Grupo II, hubo 7 positivos, 31,8 por ciento (p = 0,007). En el Grupo III, hubo un lavado +, 11 por ciento (p = 0,03) y 3 sospechosos (33 por ciento). Luego de una observación media de 11 meses (rango 7-15 meses), excluyendo la mortalidad por causas ajenas al cáncer, cursan la enfermedad todos los que presentaron citología + y el 14 por ciento de los pacientes con citología negativa (p = 0,0007). Conclusión: el estudio citológico intraoperatorio permite con un bajo costo, agregar una evaluación de extensión de la enfermedad de aparente valor pronóstico. El método es confiable y disponible. Su aplicación sistemática constituiría un excelente complemento de la estadificación habitual

Citología del lavado pleural intraoperatorio en patología sin derrame, con especial referencia al cáncer del pulmón / Citology of the intraoperatory pleural lavage in pathology without effusion, specially in lung cancer

Objetivo: determinar la existencia de células neoplásicas en la cavidad pleural de pacientes sin derrame. Diseño: estudio prospectivo y ciego en 50 toracotomías sucesivas. Población: tres grupos de pacientes: Grupo I, control, con enfermedades no neoplásicas (n = 19); Grupo II con cáncer del pulmón (n = 22) y Grupo III, otras enfermedades neoplásicas (n = 9). Método: una vez abierta la cavidad pleural, antes de cualquier maniobra, se virtió 300 cc de solución fisiológica. Luego se repitió el procedimiento antes del cierre de la toracotomía. Se estudió la citología de ambos lavados. Se clasificó a los resultados de la citología en positivos, sospechosos y negativos. Resultados: en el Grupo I, todos los controles fueron negativos. En el Grupo II, hubo 7 positivos, 31,8 por ciento (p = 0,007). En el Grupo III, hubo un lavado +, 11 por ciento (p = 0,03) y 3 sospechosos (33 por ciento). Luego de una observación media de 11 meses (rango 7-15 meses), excluyendo la mortalidad por causas ajenas al cáncer, cursan la enfermedad todos los que presentaron citología + y el 14 por ciento de los pacientes con citología negativa (p = 0,0007). Conclusión: el estudio citológico intraoperatorio permite con un bajo costo, agregar una evaluación de extensión de la enfermedad de aparente valor pronóstico. El método es confiable y disponible. Su aplicación sistemática constituiría un excelente complemento de la estadificación habitual (AU)

Punción citológica con aguja fina en tumores laterales de cuello / Aspiration biopsy cytology in lateral neck tumours

Se analizan los resultados obtenidos en 250 punciones citológicas con aguja fina, efectuadas a pacientes portadores de tumores laterales de cuello. La certeza de la serie fue del 94,8%, con una sensibilid del 92,7, y una especificidad del 97,9%. Se registraron 11 falsos negativos y 2 falsos positivos. No se observaron complicaciones significativas. Estos resultados coinciden con los publicados en el resto de la literatura mundial. Concordamos con los demás autores que han abordado el tema, en señalar que la punción citológica con aguja fina disminuye el número de biopsias ganglionares innecesarias, orienta en la búsqueda del tumor primario oculto, acelera el diagnóstico en los linfomas y carece de complicaciones de importancia. Es un método simple, rápido, de escaso costo y con resultados confiables en más del 90% de los casos

Punción citológica con aguja fina en tumores laterales de cuello / Aspiration biopsy cytology in lateral neck tumours

Se analizan los resultados obtenidos en 250 punciones citológicas con aguja fina, efectuadas a pacientes portadores de tumores laterales de cuello. La certeza de la serie fue del 94,8%, con una sensibilid del 92,7, y una especificidad del 97,9%. Se registraron 11 falsos negativos y 2 falsos positivos. No se observaron complicaciones significativas. Estos resultados coinciden con los publicados en el resto de la literatura mundial. Concordamos con los demás autores que han abordado el tema, en señalar que la punción citológica con aguja fina disminuye el número de biopsias ganglionares innecesarias, orienta en la búsqueda del tumor primario oculto, acelera el diagnóstico en los linfomas y carece de complicaciones de importancia. Es un método simple, rápido, de escaso costo y con resultados confiables en más del 90% de los casos (AU)