Identificação e variabilidade genética de isolados de Colletotrichum causando antracnose em inflorescências de plantas ornamentais tropicais

Anthracnose affects inflorescences quality of ornamentals tropical plants and the fungi specie Colletotrichum gloeosporioides has been related with this disease based only on morphology. Therefore, the objectives of this research was to identify Colletotrichum isolates collected on anthurium (Anthurium andraeanum), torch ginger (Etlingera elatior) and heliconia (Heliconia spp.) plants by means of morphology and polymerase chain reaction (PCR) and also verify the genetic variability using arbitrary-primed PCR (AP-PCR). All isolates were identified as C. gloeosporioides by conidium and appressorium size. A fragment of 450bp specific for C. gloeosporioides was amplified for all isolates analyzed, except for C 23 and C 35 isolates. The molecular characterization yielded three groups of isolates with different band patterns by using (GACAC)3, (GACA)4 and (CAG)5 AP-PCR. The employed methodologies were efficient to identify the C. gloeosporioides isolates collected on ornamental plants and there isn't relation between similarity of band patterns and geographic region or plant specie on the isolates analyzed.

A antracnose afeta a qualidade de inflorescências de plantas ornamentais tropicais, e a espécie fúngica Colletotrichum gloeosporioides tem sido relacionada a essa doença apenas por análises morfológicas. Por isso, o presente trabalho teve como objetivos identificar isolados de Colletotrichum coletados em plantas de antúrio (Anthurium andraeanum), bastão do imperador (Etlingera elatior) e helicônia (Heliconia spp.), por meio de caracteres morfológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR), e avaliar a variabilidade genética por meio de oligonucleotídeos arbitrários (AP-PCR). Pelas características morfológicas de tamanho de conídio e de apressório, todos os isolados foram identificados como C. gloeosporioides. Um fragmento de 450pb específico para C. gloeosporioides foi amplificado em todos os isolados analisados, com exceção de C 23 e C 35. A caracterização molecular realizada com três oligonucleotídeos arbitrários ((GACAC)3, (GACA)4 e (CAG)5) possibilitou a formação de três grupos de isolados, com padrões de bandas distintos. Portanto, conclui-se que as metodologias utilizadas foram eficientes na identificação de isolados de C. gloeosporioides provenientes das espécies ornamentais avaliadas e que, nos isolados analisados, não existe relação entre a similaridade observada no padrão de bandas obtido por AP-PCR e a área de coleta ou a planta hospedeira.

Identificação e variabilidade genética de isolados de Colletotrichum causando antracnose em inflorescências de plantas ornamentais tropicais

Anthracnose affects inflorescences quality of ornamentals tropical plants and the fungi specie Colletotrichum gloeosporioides has been related with this disease based only on morphology. Therefore, the objectives of this research was to identify Colletotrichum isolates collected on anthurium (Anthurium andraeanum), torch ginger (Etlingera elatior) and heliconia (Heliconia spp.) plants by means of morphology and polymerase chain reaction (PCR) and also verify the genetic variability using arbitrary-primed PCR (AP-PCR). All isolates were identified as C. gloeosporioides by conidium and appressorium size. A fragment of 450bp specific for C. gloeosporioides was amplified for all isolates analyzed, except for C 23 and C 35 isolates. The molecular characterization yielded three groups of isolates with different band patterns by using (GACAC)3, (GACA)4 and (CAG)5 AP-PCR. The employed methodologies were efficient to identify the C. gloeosporioides isolates collected on ornamental plants and there isn't relation between similarity of band patterns and geographic region or plant specie on the isolates analyzed.

A antracnose afeta a qualidade de inflorescências de plantas ornamentais tropicais, e a espécie fúngica Colletotrichum gloeosporioides tem sido relacionada a essa doença apenas por análises morfológicas. Por isso, o presente trabalho teve como objetivos identificar isolados de Colletotrichum coletados em plantas de antúrio (Anthurium andraeanum), bastão do imperador (Etlingera elatior) e helicônia (Heliconia spp.), por meio de caracteres morfológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR), e avaliar a variabilidade genética por meio de oligonucleotídeos arbitrários (AP-PCR). Pelas características morfológicas de tamanho de conídio e de apressório, todos os isolados foram identificados como C. gloeosporioides. Um fragmento de 450pb específico para C. gloeosporioides foi amplificado em todos os isolados analisados, com exceção de C 23 e C 35. A caracterização molecular realizada com três oligonucleotídeos arbitrários ((GACAC)3, (GACA)4 e (CAG)5) possibilitou a formação de três grupos de isolados, com padrões de bandas distintos. Portanto, conclui-se que as metodologias utilizadas foram eficientes na identificação de isolados de C. gloeosporioides provenientes das espécies ornamentais avaliadas e que, nos isolados analisados, não existe relação entre a similaridade observada no padrão de bandas obtido por AP-PCR e a área de coleta ou a planta hospedeira.

Identificação e variabilidade genética de isolados de Colletotrichum causando antracnose em inflorescências de plantas ornamentais tropicais

Anthracnose affects inflorescences quality of ornamentals tropical plants and the fungi specie Colletotrichum gloeosporioides has been related with this disease based only on morphology. Therefore, the objectives of this research was to identify Colletotrichum isolates collected on anthurium (Anthurium andraeanum), torch ginger (Etlingera elatior) and heliconia (Heliconia spp.) plants by means of morphology and polymerase chain reaction (PCR) and also verify the genetic variability using arbitrary-primed PCR (AP-PCR). All isolates were identified as C. gloeosporioides by conidium and appressorium size. A fragment of 450bp specific for C. gloeosporioides was amplified for all isolates analyzed, except for C 23 and C 35 isolates. The molecular characterization yielded three groups of isolates with different band patterns by using (GACAC)3, (GACA)4 and (CAG)5 AP-PCR. The employed methodologies were efficient to identify the C. gloeosporioides isolates collected on ornamental plants and there isn't relation between similarity of band patterns and geographic region or plant specie on the isolates analyzed.

A antracnose afeta a qualidade de inflorescências de plantas ornamentais tropicais, e a espécie fúngica Colletotrichum gloeosporioides tem sido relacionada a essa doença apenas por análises morfológicas. Por isso, o presente trabalho teve como objetivos identificar isolados de Colletotrichum coletados em plantas de antúrio (Anthurium andraeanum), bastão do imperador (Etlingera elatior) e helicônia (Heliconia spp.), por meio de caracteres morfológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR), e avaliar a variabilidade genética por meio de oligonucleotídeos arbitrários (AP-PCR). Pelas características morfológicas de tamanho de conídio e de apressório, todos os isolados foram identificados como C. gloeosporioides. Um fragmento de 450pb específico para C. gloeosporioides foi amplificado em todos os isolados analisados, com exceção de C 23 e C 35. A caracterização molecular realizada com três oligonucleotídeos arbitrários ((GACAC)3, (GACA)4 e (CAG)5) possibilitou a formação de três grupos de isolados, com padrões de bandas distintos. Portanto, conclui-se que as metodologias utilizadas foram eficientes na identificação de isolados de C. gloeosporioides provenientes das espécies ornamentais avaliadas e que, nos isolados analisados, não existe relação entre a similaridade observada no padrão de bandas obtido por AP-PCR e a área de coleta ou a planta hospedeira.

Isolation, morphological identification and pathogenicity of Cylindrocladium scoparium and C. clavatum isolates obtained from plants rhizosphere cultivated in Pernambuco State

Twelve isolates of Cylindrocladium scoparium and 4 isolates of C. clavatum were obtained from the rhizosphere of various species of plants by baiting with Ricinus communis leaves. The isolates of C. scoparium developed conidia of 32-(45)-60 x 3 -(4)-5 µm, and pyriform to ellipsoidal vesicles. C. clavatum showed conidia of 36-(44)-49 x 2-(4)-6 µm and clavate vesicles. All isolates induced necrosis on leaves and hypocotyls of eucalypt seedlings, with varying expression of symptoms.

Doze isolados de Cylindrocladium scoparium e 4 isolados de C. clavatum foram obtidos da rizosfera de diversas plantas usando folhas de Ricinus communis como isca. A primeira espécie mostrou conídios com dimensões de 32-(45)-60 x 3 -(4)-5 µm e vesícula piriforme a elipsoidal. Os conídios de C. clavatum apresentaram dimensões entre 36-(44)-49 x 2-(4)-6 µm e vesícula clavada. Em plântulas de eucalipto todos os isolados induziram necrose em folhas e hipocótilos, variando apenas na expressão dos sintomas.

UTILIZAÇÃO DE DOIS MÉTODOS DE INOCULAÇÃO NA AVALIAÇÃO DA RESISTÊNCIA DE CULTIVARES E LINHAGENS DE FEIJOEIRO A Fusarium oxysporum F. SP. phaseoli

This experiment was conducted aiming to study the efficiency of two inoculation methods to evaluate the resistance of common bean to Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli. The reaction of 16 cultivars and lines tested, including resistant and suscetible patterns to the disease. In one of the methods, plants were inoculated by the soil perfuration method, which consists on the aplication of 10m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif"> of conidia suspension around, previously wounded plants. For the other method, named root immersion, the plants obtained in washed and warmed up sand (60ºC - 30min) were extracted, washed with running water, and tipped about one centimeter from their roots, which were submersed into conidia suspension for 05 minutes. Then, plants were replanted in plastic pots with treated soil. Two inoculation procedures were performed after seven days from plant emergence. A suspension containing 1 x 10(6) conidia/m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif"> was used in both inoculation methods. The experiment was performed in completely randomized split-plot design, with 04 replicates per treatment. Each replicate consisted of one plastic pot containing four plants. The evaluations were carried out 15, 20, 25 and 30 days after each inoculation procedure. A grading scale, proposed by CIAT, considering levels of infection ranging from 1 (highly resistant) to 9 (highly suscetible) was used. The data were converted to Mackinney disease index. The root immersion method presented better efficacy than soil perfuration method to assess commom bean resistance to Fusarium wilt, evidencing Goiano precoce, RH 3104 and IPA-9 cultivars as the most resistant genotypes, and LM 93204247, LM 93204296 and IPA-1 as the most susceptible ones.

Este trabalho foi conduzido com o objetivo de comparar a eficiência de dois métodos de inoculação na avaliação da resistência de plantas de feijoeiro a Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli. Avaliou-se a reação de 16 cultivares e linhagens, incluindo padrões de resistência e suscetibilidade à doença. Num dos métodos, o plantio foi realizado em solo tratado com brometo de metila (CH3Br). As plantas foram inoculadas através do método de perfuração do solo, que consistiu na aplicação de 10m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif"> de suspensão de conídios ao redor das plantas, previamente feridas. No outro método utilizado, denominado método de imersão de raízes, as plantas obtidas em areia lavada e aquecida (60ºC - 30min) foram retiradas e lavadas em água corrente e cortadas em cerca de 01cm do sistema radicular, o qual foi imerso em suspensão de conídios por 05 minutos. As plantas foram então replantadas em vasos contendo solo tratado com brometo de metila. Em ambos os métodos de inoculação, as plantas estavam com 07 dias de germinação, sendo inoculadas com a suspensão de inóculo a uma concentração de 1 x 10(6) conídios/m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif">. As plantas controle sofreram o mesmo tratamento, referente ao método de inoculação correspondente. O experimento foi delineado inteiramente ao acaso, em parcelas subdivididas, com 04 repetições por tratamento, sendo o método de inoculação locado na parcela principal e as cultivares e linhagens nas subparcelas. Cada repetição foi constituída por 01 vaso com 04 plantas. As avaliações foram realizadas aos 15, 20, 25 e 30 dias após a inoculação, baseadas em escala de notas, com 9 graus de infecção, proposta pelo CIAT. Os dados obtidos foram transformados para índice de doença de Mackinney. Observou-se uma maior eficiência do método de imersão das raízes, na avaliação da resistência do feijoeiro a murcha de Fusarium, evidenciando os genótipos Goiano precoce, RH 3104 e IPA-9 como resistentes, e LM 93204247, LM 93204296 e IPA-1 como suscetíveis.

Reação de cultivares de batata-doce à podridão-do-pé, em condições de campo

For selecting the resistance sources to sweet potato foot-rot, disease caused by the fungus Plenodomus destruens, the reaction of ten cultivars, inoculated under field conditions, were evaluated. The inoculum was produced on toothpick by the cultivation of fungi on PDA, for 06 days, under continuous light and room temperature ranging from 26 ± 2º C. The inoculation procedure was carried out 20 days after planting, by insertion of infected toothpick at the base of plant. The evaluation was performed 35 days after inoculation procedure, using a grading scale ranging from 1 (highly resistant) to 4 (highly susceptible). The Angico, Mãe de Família També and Carpinteira cultivars showed susceptibility reactions while RC 18, C O Branca and CR 71 cultivars were the most resistant to foot-rot, although it did not differed significantly from UFRPE 1-88, CNPH 004, Princesa cultivars. The high resistance level presented by these cultivars makes them suitable for the use of the same ones in management of this disease, and still, in programs of genetic improvement, as resistance sources to P.destruens.

Visando selecionar fontes de resistência em batata-doce à podridão-do-pé, doença causada pelo fungo Plenodomus destruens, estudou-se o comportamento de dez genótipos, inoculados em condições de campo. O inóculo foi produzido em palitos de madeira, previamente preparados e esterilizados, colonizados com micélio fúngico, mantidos em meio de cultura BDA, por 06 dias, em regime de luz contínua, a uma temperatura de 26 ± 2º C. A inoculação foi realizada 20 dias após o plantio das ramas através da inserção de palito contaminado na base da haste da planta. A avaliação foi realizada aos 35 dias após a inoculação, aplicando-se uma escala de notas, que variaram de 1 a 4, sendo nota igual a 1,0 para planta sem sintomas e nota 4,0 para plantas altamente suscetíveis (planta morta). As cultivares Angico, Mãe de Família També e Carpinteira apresentaram-se como suscetíveis enquanto as cultivares RC 18, C O Branca e CR 71 foram as mais resistentes, embora não diferindo significativamente das cultivares UFRPE 1-88, CNPH 004 e Princesa. O alto nível de resistência apresentado por estas cultivares as tornam indicadas para a utilização das mesmas no manejo desta doença, e ainda, em programas de melhoramento genético, como fontes de resistência a P. destruens.

Reação de cultivares de batata-doce à podridão-do-pé, em condições de campo

For selecting the resistance sources to sweet potato foot-rot, disease caused by the fungus Plenodomus destruens, the reaction of ten cultivars, inoculated under field conditions, were evaluated. The inoculum was produced on toothpick by the cultivation of fungi on PDA, for 06 days, under continuous light and room temperature ranging from 26 ± 2º C. The inoculation procedure was carried out 20 days after planting, by insertion of infected toothpick at the base of plant. The evaluation was performed 35 days after inoculation procedure, using a grading scale ranging from 1 (highly resistant) to 4 (highly susceptible). The Angico, Mãe de Família També and Carpinteira cultivars showed susceptibility reactions while RC 18, C O Branca and CR 71 cultivars were the most resistant to foot-rot, although it did not differed significantly from UFRPE 1-88, CNPH 004, Princesa cultivars. The high resistance level presented by these cultivars makes them suitable for the use of the same ones in management of this disease, and still, in programs of genetic improvement, as resistance sources to P.destruens.

Visando selecionar fontes de resistência em batata-doce à podridão-do-pé, doença causada pelo fungo Plenodomus destruens, estudou-se o comportamento de dez genótipos, inoculados em condições de campo. O inóculo foi produzido em palitos de madeira, previamente preparados e esterilizados, colonizados com micélio fúngico, mantidos em meio de cultura BDA, por 06 dias, em regime de luz contínua, a uma temperatura de 26 ± 2º C. A inoculação foi realizada 20 dias após o plantio das ramas através da inserção de palito contaminado na base da haste da planta. A avaliação foi realizada aos 35 dias após a inoculação, aplicando-se uma escala de notas, que variaram de 1 a 4, sendo nota igual a 1,0 para planta sem sintomas e nota 4,0 para plantas altamente suscetíveis (planta morta). As cultivares Angico, Mãe de Família També e Carpinteira apresentaram-se como suscetíveis enquanto as cultivares RC 18, C O Branca e CR 71 foram as mais resistentes, embora não diferindo significativamente das cultivares UFRPE 1-88, CNPH 004 e Princesa. O alto nível de resistência apresentado por estas cultivares as tornam indicadas para a utilização das mesmas no manejo desta doença, e ainda, em programas de melhoramento genético, como fontes de resistência a P. destruens.

UTILIZAÇÃO DE DOIS MÉTODOS DE INOCULAÇÃO NA AVALIAÇÃO DA RESISTÊNCIA DE CULTIVARES E LINHAGENS DE FEIJOEIRO A Fusarium oxysporum F. SP. phaseoli

This experiment was conducted aiming to study the efficiency of two inoculation methods to evaluate the resistance of common bean to Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli. The reaction of 16 cultivars and lines tested, including resistant and suscetible patterns to the disease. In one of the methods, plants were inoculated by the soil perfuration method, which consists on the aplication of 10m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif"> of conidia suspension around, previously wounded plants. For the other method, named root immersion, the plants obtained in washed and warmed up sand (60ºC - 30min) were extracted, washed with running water, and tipped about one centimeter from their roots, which were submersed into conidia suspension for 05 minutes. Then, plants were replanted in plastic pots with treated soil. Two inoculation procedures were performed after seven days from plant emergence. A suspension containing 1 x 10(6) conidia/m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif"> was used in both inoculation methods. The experiment was performed in completely randomized split-plot design, with 04 replicates per treatment. Each replicate consisted of one plastic pot containing four plants. The evaluations were carried out 15, 20, 25 and 30 days after each inoculation procedure. A grading scale, proposed by CIAT, considering levels of infection ranging from 1 (highly resistant) to 9 (highly suscetible) was used. The data were converted to Mackinney disease index. The root immersion method presented better efficacy than soil perfuration method to assess commom bean resistance to Fusarium wilt, evidencing Goiano precoce, RH 3104 and IPA-9 cultivars as the most resistant genotypes, and LM 93204247, LM 93204296 and IPA-1 as the most susceptible ones.

Este trabalho foi conduzido com o objetivo de comparar a eficiência de dois métodos de inoculação na avaliação da resistência de plantas de feijoeiro a Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli. Avaliou-se a reação de 16 cultivares e linhagens, incluindo padrões de resistência e suscetibilidade à doença. Num dos métodos, o plantio foi realizado em solo tratado com brometo de metila (CH3Br). As plantas foram inoculadas através do método de perfuração do solo, que consistiu na aplicação de 10m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif"> de suspensão de conídios ao redor das plantas, previamente feridas. No outro método utilizado, denominado método de imersão de raízes, as plantas obtidas em areia lavada e aquecida (60ºC - 30min) foram retiradas e lavadas em água corrente e cortadas em cerca de 01cm do sistema radicular, o qual foi imerso em suspensão de conídios por 05 minutos. As plantas foram então replantadas em vasos contendo solo tratado com brometo de metila. Em ambos os métodos de inoculação, as plantas estavam com 07 dias de germinação, sendo inoculadas com a suspensão de inóculo a uma concentração de 1 x 10(6) conídios/m img SRC="http:/img/fbpe/cr/v32n1/a01img01.gif">. As plantas controle sofreram o mesmo tratamento, referente ao método de inoculação correspondente. O experimento foi delineado inteiramente ao acaso, em parcelas subdivididas, com 04 repetições por tratamento, sendo o método de inoculação locado na parcela principal e as cultivares e linhagens nas subparcelas. Cada repetição foi constituída por 01 vaso com 04 plantas. As avaliações foram realizadas aos 15, 20, 25 e 30 dias após a inoculação, baseadas em escala de notas, com 9 graus de infecção, proposta pelo CIAT. Os dados obtidos foram transformados para índice de doença de Mackinney. Observou-se uma maior eficiência do método de imersão das raízes, na avaliação da resistência do feijoeiro a murcha de Fusarium, evidenciando os genótipos Goiano precoce, RH 3104 e IPA-9 como resistentes, e LM 93204247, LM 93204296 e IPA-1 como suscetíveis.