RESUMO
OBJECTIVE: To demonstrate the potential clinical applicability of the PCR technique to the early detection of bacterial resistance in Streptococcus pneumoniae. METHODS: We studied 153 samples of S. pneumoniae, isolated from different anatomic sites, using polymerase chain reaction (PCR) for the detection of specific amplicons from genes that code for penicillin-binding proteins (PBP) 1a, 2b and 2x, which are responsible for penicillin resistance in this organism. The occurrence of these mutated genes was correlated with the minimum inhibitory concentration (MIC) of penicillin, determined by the agar dilution test. RESULTS: The rate of penicillin resistance in S. pneumoniae in Porto Alegre, Brazil was 22.8% (16.3% intermediate resistance and 6.5% high resistance). In a statistically significant proportion of cases (p < 0.05), penicillin-susceptible samples had no amplicons, intermediate samples had only one (generally from PBP 2x), and highly resistant samples had amplicons from all three PBPs investigated. CONCLUSION: These results suggest that penicillin resistance in S. pneumoniae in southern Brazil is on the increase, but is still lower than in other countries, and that PCR could be used for its early detection.
Assuntos
Resistência às Penicilinas , Proteínas de Ligação às Penicilinas/genética , Infecções Pneumocócicas/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Streptococcus pneumoniae/efeitos dos fármacos , Adolescente , Adulto , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Brasil , Distribuição de Qui-Quadrado , Criança , Pré-Escolar , Contagem de Colônia Microbiana , Humanos , Lactente , Testes de Sensibilidade Microbiana/métodos , Pessoa de Meia-Idade , Resistência às Penicilinas/genética , Infecções Pneumocócicas/diagnóstico , Infecções Pneumocócicas/tratamento farmacológico , Reprodutibilidade dos Testes , Streptococcus pneumoniae/genética , Streptococcus pneumoniae/isolamento & purificaçãoRESUMO
BACKGROUND: The role of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene polymorphisms as risk factors for the occurrence of Alzheimer's disease (AD) is still controversial. OBJECTIVE: To verify the association between MTHFR and apolipoprotein E (APOE) polymorphisms and Alzheimer's disease. METHOD: This work was conducted as a case-control study. Cases included thirty patients with probable AD. Controls were constituted by 29 individuals without dementia according to neuropsychological tests paired to age, sex, race and educational level. DNA was isolated from peripheral leukocytes of anticoagulated venous blood. Genotyping of APOE and MTHFR were performed by DNA amplification and digestion. The frequences of APOE and MTHFR genotypes were submitted by chi-square test corrected by Fisher test; the APOE genotypes, to chi-square linear tendency test and the frequences of MTHFR mutant and AD, by stratificated analysis adjust by Mantel-Haenszel method. RESULTS: There was significant difference about APOE4 and APOE2 in the groups. (p=0.002) The odds ratio increased exponentially with the increased number of E4 allele (chi2 linear tendency test). No significant difference was detected on MTHFR genotypes in both case and control groups. CONCLUSION: The APOE4 is a risk factor and demonstrated a dose-dependent effect while APOE2 allele conferred a protection to AD. The MTHFR mutation had no correlation with AD.
Assuntos
Doença de Alzheimer/genética , Apolipoproteínas E/genética , Metilenotetra-Hidrofolato Redutase (NADPH2)/genética , Polimorfismo Genético/genética , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Alelos , Apolipoproteína E4 , Estudos de Casos e Controles , Feminino , Marcadores Genéticos , Genótipo , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Mutação , Técnicas de Amplificação de Ácido Nucleico , Fatores de RiscoRESUMO
INTRODUÇÃO: O papel do polimorfismo do gene da metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) como um fator de risco para demência de Alzheimer (DA) é controverso ainda. OBJETIVO: Verificar a associação entre os polimorfismos da MTHFR e apolipoproteína E (APOE) e DA. MÉTODO: O trabalho foi conduzido como um estudo caso-controle. Trinta pacientes com DA provável foram incluídos no grupo caso. Vinte e nove indivíduos sem demência comprovadas por testes neuropsicológicos, emparelhados pela idade, sexo, cor e nível educacional constituíram o grupo controle. DNA foi isolado de leucócitos periféricos extraídos de sangue venoso anticoagulado. Genótipos de APOE e MTHFR foram realizados por amplificação de DNA e digestão. As freqüências dos genótipos da APOE e MTHFR foram submetidas ao teste do chi-quadrado corrigido pelo teste de Fisher; os genótipos da APOE, ao teste do chi-quadrado com tendência linear e as freqüências da MTHFR mutante e DA à análise estratificada corrigida pelo método de Mantel-Haenszel. RESULTADOS: Houve diferença significativa entre APOE4 e APOE2 nos grupos (p=0,002). O odds ratio aumentou exponencialmente com o aumento do número de alelo E4 (teste c2 com tendência linear). Nenhuma diferença significativa foi detectada nos genótipos da MTHFR em ambos grupos caso e controle. CONCLUSÃO: O alelo APOE4 é um fator de risco e demonstrou efeito dose-dependente enquanto o alelo E2 conferiu proteção para DA. A mutação da MTHFR não teve correlação dom DA.