Immunohistochemical assessment of HRAS Q61R mutations in breast adenomyoepitheliomas.

AIMS: Breast adenomyoepitheliomas (AMEs) are uncommon tumours. Most oestrogen receptor (ER)-positive AMEs have mutations in phosphoinositide 3-kinase (PI3K) pathway genes, whereas ER-negative AMEs usually harbour concurrent mutations affecting the HRAS Q61 hotspot and PI3K pathway genes. Here, we sought to determine the sensitivity and specificity of RAS Q61R immunohistochemical (IHC) analysis for detection of HRAS Q61R mutations in AMEs. METHODS AND RESULTS: Twenty-six AMEs (14 ER-positive; 12 ER-negative) previously subjected to massively parallel sequencing (n = 21) or Sanger sequencing (n = 5) of the HRAS Q61 hotspot locus were included in this study. All AMEs were subjected to IHC analysis with a monoclonal (SP174) RAS Q61R-specific antibody, in addition to detailed histopathological analysis. Nine ER-negative AMEs harboured HRAS mutations, including Q61R (n = 7) and Q61K (n = 2) mutations. Five of seven (71%) AMEs with HRAS Q61R mutations were immunohistochemically positive, whereas none of the AMEs lacking HRAS Q61R mutations (n = 17) were immunoreactive. RAS Q61R immunoreactivity was restricted to the myoepithelium in 80% (4/5) of cases, whereas one case showed immunoreactivity in both the epithelial component and the myoepithelial component. RAS Q61R immunohistochemically positive AMEs were associated with infiltrative borders (P < 0.001), necrosis (P < 0.01) and mitotic index in the epithelial (P < 0.05) and myoepithelial (P < 0.01) components. RAS Q61R IHC assessment did not reveal Q61K mutations (0/2). CONCLUSIONS: IHC analysis of RAS Q61R shows high specificity (100%) and moderate sensitivity (71%) for detection of HRAS Q61R mutations in breast AMEs, and appears not to detect HRAS Q61K mutations. IHC analysis of RAS Q61R may constitute a useful technique in the diagnostic workup of ER-negative AMEs.

HER2-expressing breast tumors are associated with breast cancer stem-cell phenotype CD44+/CD24- / Tumores de mama que superexpressam HER2 estão associados ao fenótipo de células-tronco tumorais CD44+/CD24-

ABSTRACT INTRODUCTION: According to the cancer stem-cell theory, tumors originate from a small population of cancer stem cells, which lose the mechanism of self-regulation and begin to differentiate and proliferate indefinitely. The CD44+/CD24- phenotype may be considered a stem-cell marker in breast cancer. OBJECTIVE: To evaluate the correlation between CD44+/CD24- phenotype and different molecular subtypes of breast cancer in invasive ductal carcinoma samples. METHODS: The expression of CD44, CD44v6, and CD24 markers was investigated in 133 cases of invasive mammary carcinoma with immunohistochemistry. CD44+/CD24- phenotype was identified and correlated with the molecular subtypes and classical prognostic factors such as age, histological grade, tumor size, and lymph node status. RESULTS: Eighteen (14%) cases were positive for CD44+/CD24- (CD44+/CD24- or CD44v6+/CD24-) phenotype; among these, 11.1%, 27.8%, 38.9%, and 22.2% were luminal, luminal B-human epidermal growth factor receptor 2 (HER2), HER2, and triple-negative subtype, respectively. CD44+/ CD24- phenotype was more common in HER2 subgroup (p = 0.0197). CONCLUSION: CD44+/CD24- phenotype was correlated with molecular subtypes of breast cancer. The highest expression of CD44+/CD24- phenotype was reported in patients with HER2+ disease, a molecular subtype associated with more aggressive behavior and worse prognosis.

RESUMO INTRODUÇÃO: De acordo com a teoria das células-tronco tumorais, os tumores são originários de uma pequena população de células-tronco que perdem o mecanismo de autorregulação e começam a se diferenciar e proliferar indefinidamente. O fenótipo CD44+/CD24- pode ser considerado um marcador de células-tronco tumorais no câncer de mama. OBJETIVO: Avaliar a correlação entre o fenótipo CD44+/CD24- e os diferentes subtipos moleculares do câncer de mama em amostras de carcinoma ductal invasor. MÉTODOS: A expressão dos marcadores CD44, CD44v6 e CD24 foi investigada em 133 casos de carcinoma mamário invasor por meio de imuno-histoquímica. O fenótipo CD44+/CD24- foi identificado e correlacionado com os subtipos moleculares e os fatores prognósticos clássicos, como idade, grau histológico, tamanho do tumor e status do linfonodo. RESULTADOS: Dezoito (14%) casos foram positivos para o fenótipo CD44+/CD24- (CD44+/CD24- ou CD44v6+/CD24-), sendo 11, 1%, 27, 8%, 38, 9% e 22, 2% dos subtipos luminal, luminal B-human epidermal growth factor receptor 2 (HER2), HER2 e triplo negativo, respectivamente. O fenótipo CD44+/CD24- foi mais comum no subgrupo HER2 (p = 0, 0197). CONCLUSÃO: O fenótipo CD44+/CD24- foi correlacionado com os subtipos moleculares do câncer de mama. A maior expressão do fenótipo CD44+/CD24- foi encontrada em pacientes com doença HER2+, subtipo molecular associado a um comportamento mais agressivo e a um pior prognóstico.

Comparison of cythopathology and frozen section methods in the intraoperative evaluation of breast sentinel lymph node / Comparação dos métodos de citopatologia e de cortes por congelação na avaliação intraoperatória do linfonodo sentinela de mama

ABSTRACT Introduction: Cytopathologic analysis (CP) and frozen section (FS) are available techniques for intraoperative evaluation of sentinel lymph node in surgeries for breast cancer treatment that will define the need for axillary lymphadenectomy. Objective: To compare CP and FS of axillary sentinel lymph nodes in metastasis detection of patients with breast cancer. Materials and methods: The electronic files from January 2010 and December 2014, from the Centro de Patologia de Curitiba, Parana, Brazil were reviewed, and were included all the cases in which the result of intraoperative exams by both methods, CP and FS, were recorded. The results of intraoperative exams were compared to the histopathology by hematoxylin and eosin (HE) staining. Results: A total of 183 sentinel lymph nodes from 94 patients were included. The mean age was 55 years and mean lymph node size was 11.70 mm. There was one false-positive case in both intraoperative methods and four false-negatives in FS, which were micrometastasis. FS's sensibility, specificity, positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) and accuracy were respectively 80%, 99.38%, 94.11%, 96.42% and 97.26%. Regarding CP, there were six false-negative in which four were micrometastasis. CP's sensibility, specificity, PPV and NPV and accuracy were respectively 70%, 99.38%, 93.33%, 96.42% and 97.26%. Conclusion: The results of the present study shows that both CP and FS are reliable techniques for metastasis detection in breast sentinel lymph nodes, and are equivalent in sensibility, specificity, accuracy, PPV and NPV.

RESUMO Introdução: A análise citopatológica (CP) e o método de corte por congelação (CC) são técnicas disponíveis de avaliação intraoperatória do linfonodo sentinela nas cirurgias para tratamento de câncer de mama que vão definir a necessidade de linfadenectomia axilar. Objetivo: Comparar a avaliação CP e os CCs de linfonodos sentinela axilares na pesquisa de metástases em pacientes com câncer mamário. Materiais e método: Foram revisados os arquivos eletrônicos do Centro de Patologia de Curitiba, Paraná, Brasil, de janeiro de 2010 a dezembro de 2014, sendo incluídos os casos em que constavam o resultado do exame intraoperatório por ambos os métodos, CP e CC. Os resultados dos exames intraoperatórios foram comparados com a histopatologia, corada por hematoxilina e eosina (HE). Resultados: Foram incluídos 183 linfonodos sentinelas de 94 pacientes. A idade média foi de 55 anos, e o tamanho médio dos linfonodos, de 11,70 mm. Houve um caso falso positivo nos dois métodos intraoperatórios e quatro falso negativos na CC, entre os quais todos eram micrometástases. Sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (VPN) e acurácia do CC foram, respectivamente, 80%, 99,38%, 94,11%, 96,42% e 97,26%. Já na CP, houve seis falso negativos, entre esses, quatro eram micrometástases. Sensibilidade, especificidade, VPP, VPN e acurácia da CP foram, respectivamente, 70%, 99,38%, 93,33%, 96,42% e 97,26%. Conclusão: Os resultados do presente estudo demonstraram que CP e CC são técnicas confiáveis para detecção de metástase em linfonodos sentinela de mama e se equivalem em sensibilidade, especificidade, acurácia, VPP e VPN.

Giant nodular pseudoangiomatous stromal hyperplasia of the breast with fibroadenomatoid myxoid changes: a potential pitfall in the differential diagnosis of phyllodes tumor / Hiperplasia estromal pseudoangiomatosa mamária nodular gigante com padrão fibroadenomatoide mixoide: diagnóstico diferencial problemático com tumor phyllodes

ABSTRACT A 21-year old woman presented with a 17-cm left breast mass. Physical examination and ultrasound revealed the mass to be well-circumscribed, homogeneous and freely mobile, suggestive of giant fibroadenoma or phyllodes tumor. The mass was surgically excised and initially interpreted as benign phyllodes tumor. Subsequent slide review established the diagnosis of nodular pseudoangiomatous stromal hyperplasia (PASH) associated with fibroadenomatoid areas and myxoid stromal changes. This case illustrates the difficulty encountered in recognizing nodular PASH. A thorough discussion of the histopathologic differential diagnosis of nodular PASH is provided.

RESUMO Uma mulher de 21 anos desenvolveu uma massa mamária de grandes dimensões (17 cm). Exame físico e ultrassonografia revelaram um nódulo bem delineado, homogêneo e móvel, com características sugestivas de fibroadenoma gigante ou tumor phyllodes. O nódulo foi excisado e inicialmente interpretado como tumor phyllodes benigno. Subsequente revisão de lâminas estabeleceu o diagnóstico de hiperplasia estromal pseudoangiomatosa nodular associada a áreas de padrão fibroadenomatoide e focos de degeneração mixoide do estroma. Este caso ilustra a dificuldade encontrada no diagnóstico dessa entidade. Segue uma discussão detalhada do diagnóstico diferencial de hiperplasia estromal pseudoangiomatosa nodular.

Down regulation of ADAM33 as a Predictive Biomarker of Aggressive Breast Cancer.

Breast cancer is a heterogeneous disease with differences in its clinical, molecular and biological features. Traditionally, immunohistochemical markers together with clinicopathologic parameters are used to classify breast cancer and to predict disease outcome. Triple-negative breast cancer (TNBC) is a particular type of breast cancer that is defined by a lack of expression of hormonal receptors and the HER2 gene. Most cases of TNBC also have a basal-like phenotype (BLBC) with expression of cytokeratin 5/6 and/or EGFR. A basal marker alone is insufficient for a better understanding of the tumor biology of TNBC. In that regard, the ADAM33 gene is silenced by DNA hypermethylation in breast cancer, which suggests that ADAM33 might be useful as a molecular marker. In the present study, we have produced monoclonal antibodies against the ADAM33 protein and have investigated the role of ADAM33 protein in breast cancer. We used 212 breast tumor samples and lower levels of ADAM33 were correlated with TNBC and basal-like markers. A lower level of ADAM33 was also correlated with shorter overall survival and metastasis-free survival and was considered an independent prognostic factor suggesting that ADAM33 is a novel molecular biomarker of TNBC and BLBC that might be useful as a prognostic factor.

Achados histológicos na parede posterior da laringe em pacientes com refluxo gastroesofageano (GERD) / Histological findings in the posterior wall of larynx in patients with GERD

Introdução: O mecanismo de manifestações otorrinolaringológicas da doença do refluxo gastroesofageano é provavelmente o resultado de refluxo faringogastroesofageano noturno intermitente. O contato da faringe e laringe com o suco gástrico resulta em inflamação e edema, mesmo com pouca ou mínima exposição ácida. Porém, estudos histológicos na parede posterior da laringe, em pacientes com exposição crônica ao suco gástrico, não têm sido realizados mas podem representar importante informação diagnóstica. Este estudo tem como objetivo descrever biópsias de parede posterior de laringe em pacientes portadores de doença do refluxo gastroesofageano. Forma de estudo: Prospectivo não randomizado. Material e método: No período compreendido entre junho de 1998 a setembro de 1998, foram realizadas biópsias da parede posterior da laringe em sete pacientes portadores de doença do refluxo gastroesofageano (GERD), que apresentavam sintomas crônicos de faringe e laringe. Todos os pacientes realizaram investigação do refluxo gastroesofageano através da endoscopia digestiva alta, e também laringoscopias diretas na procura de lesões laringológicas sugestivas de etiologia relacionada à GERD,e foram classificados em grupo I e grupo II, respectivamente: grupo com laringoscopia normal e grupo com laringoscopia com lesão. Resultados: Os resultados mostraram que 42,85 por cento dos pacientes estudados apresentavam epitélio escamoso como revestimento da parede posterior da laringe; 42,85 por cento apresentaram áreas de metaplasia escamosa em permeio ao epitélio pseudoestratificado respiratório; e apenas 28,57 por cento dos pacientes apresentaram epitélio respiratório. Além do mais, 71,4 por cento dos pacientes apresentaram alterações histológicas decorrentes da GERD que são encontradas no esôfago. Conclusões: Os resultados deste estudo sugerem que o refluxo gastroesofageano pode estar relacionado com a mudança do epitélio da parede posterior da laringe, assim como estar também relacionado com alterações histológicas inflamatórias dessa região.