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Methods Enzymol ; 570: 539-65, 2016.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-26921961

RESUMO

The diverse roles of chemokines in normal immune function and many human diseases have motivated numerous investigations into the structure and function of this family of proteins. Recombinant chemokines are often used to study how chemokines coordinate the trafficking of immune cells in various biological contexts. A reliable source of biologically active protein is vital for any in vitro or in vivo functional analysis. In this chapter, we describe a general method for the production of recombinant chemokines and robust techniques for efficient refolding that ensure consistently high biological activity. Considerations for initiating development of protocols consistent with Current Good Manufacturing Practices (cGMPs) to produce biologically active chemokines suitable for use in clinical trials are also discussed.


Assuntos
Engenharia de Proteínas/métodos , Proteínas Recombinantes/química , Proteínas Recombinantes/isolamento & purificação , Quimiotaxia , Cromatografia de Afinidade , Cromatografia Líquida de Alta Pressão/métodos , GMP Cíclico/metabolismo , Dissulfetos/química , Escherichia coli/genética , Ressonância Magnética Nuclear Biomolecular , Processamento de Proteína Pós-Traducional , Redobramento de Proteína , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas Recombinantes/metabolismo , Reprodutibilidade dos Testes
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