[Epidemiologic and molecular study of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar strains in pacients with diarrhea in Cumana, Sucre state, Venezuela]. / Estudio epidemiológico y molecular de cepas de Entamoeba histolytica y Entamoeba dispar en pacientes con diarrea en Cumaná, estado Sucre, Venezuela.

An epidemiological and molecular study on E. histolytica and E. dispar was carried out in 428 patients with gastrointestinal symptomatology of diarrhea from different health centers in Cumana, Sucre state. The samples were processed through: direct examination with 0.85% physiological saline solution, temporal lugol staining, trichromic staining and the Ritchie method of concentration; a sucrose gradient was used for cyst isolation. The small subunit of the 16S RNA was amplified by nested, multiplex PCR for the molecular detection. The E. histolytica/E. dispar prevalences according to the direct, Ritchie and trichromic staining methods were 20.09, 13.79 and 12.15%, respectively; while prevalences according to PCR for E. histolytica and E. dispar were 6.31% and 4.44%, respectively, also detecting four cases of mixed infection. Sequencing of the amplified fragments of E. histolytica showed 100% homology with the sequences with strains from Merida (Venezuela), USA, Brazil, Mexico and GenBank. The infections by E. histolytica and E. dispar were statistically associated with age but not with sex. The presence of mucus, blood and abdominal pain were only associated to E. histolytica infection. The moderate prevalence of E. histolytica shows the endemic status of this population and warns about the potential problem as a morbidity and mortality in Sucre state. The frequency of E. dispar in this population suggests the existence of an overestimation problem in the diagnosis of amoebiasis with its clinical and epidemiological implications, and shows the poor knowledge about the true prevalences of this protozoan. The PCR allowed for the differential identification of E. histolytica and E. dispar, as well as the presence of mixed infections, making a great tool for epidemiological amoebiasis studies.

[Amebiasis: importance of the diagnosis and treatment. Minireview]. / Amibiasis: importancia de su diagnóstico y tratamiento. Mini-revisión.

The protozoa E. histolytica is the etiologic agent of human amebiasis, the identification of its pathogenicity has been of great aid in the search of important antigens for immunodiagnostic and inmunoprofilaxis. In 1995 the isolation and axenization of the first two strains of Venezuelan E. histolytica were described from symptomatic patients, which were denominated: IULA 1092:1 and IULA: 0593:2 These strains have been evaluated through studies of electrophoretic profiles, demonstrating the presence of type II zymodemes, characteristic of pathogenic strains. Also, they have shown to be of high virulence, they present a complex pattern of reactivity and the presence of a marker antigen of pathogenicity. The isoenzymatic analysis has shown correlation with the genotypic analysis, showing a genotypic organization typical of a pathogenic strain. With this strain, it has been possible to evaluate all the amebiasis cases sent to the Institute of Clinical Immunology of Universidad de Los Andes, in Merida, Venezuela. These strains have been useful, here, as well as in other sites, when using their antigens to evaluate urban and even indigenous populations. They can be used, like native strains of reference, in diagnostic tests and prophylaxis for this parasitosis. The limitations of the microscopic analysis, specifically, the false amebiasis diagnosis and its inability to discriminate between infections caused by E. histolytica and E. dispar have led to the development of laboratory procedures that allow for the detection of components of the species present. The success of such procedures would result in a diminution of unnecessary treatments, which could be the cause of antiamoebic drug resistance.

Amibiasis: importancia de su diagnóstico y tratamiento: mini-revisión / Amebiasis: importance of the diagnosis and treatment: minireview

El protozoario E. histolytica es el agente etiológico de la amibiasis humana; la identificación de su patogenicidad ha sido de gran ayuda en la búsqueda de antígenos importantes para su inmunodiagnóstico e inmunoprofilaxia. En 1995 se describió el aislamiento y axenización de las dos primeras cepas de E. histolytica venezolanas procedentes de pacientes sintomáticos, denominadas IULA: 1092:1 e IULA: 0593:2. Estas cepas han sido evaluadas a través de estudios de perfiles electroforéticos, demostrándose la presencia del zimodemo de tipo II característico de cepas patógenas. También han mostrado ser de alta virulencia. Además, presentan un complejo patrón de reactividad y la presencia de un antígeno marcador de patogenicidad; el análisis isoenzimático ha mostrado correlación con el análisis genotípico, indicando una organización genotípica propia de una cepa patógena. Con esta cepa se han podido evaluar todos los casos de amibiasis remitidos al Instituto de Inmunología Clínica de la Universidad de Los Andes, y han sido de utilidad en otras localidades al emplear sus antígenos para evaluar poblaciones urbanas e incluso indígenas, por lo que pueden ser usadas como cepas nativas de referencia en los ensayos de diagnóstico y profilaxis. Las limitaciones del examen microscópico, específicamente los falsos diagnósticos de amibiasis, y su incapacidad para discriminar entre infecciones por E. histolytica y E. dispar, han conducido al desarrollo de procedimientos de laboratorio que permiten la detección de componentes de las especies presentes. El éxito de tales procedimientos permitiría una disminución de tratamientos innecesarios, los cuales pueden llevar a resistencia ante las diferentes drogas antiamibianas.

Estudio epidemiológico y molecular de cepas de Entamoeba histolytica y Entamoeba dispar en pacientes con diarrea en Cumaná estado Sucre Venezuela / Epidemiologic and molecular study of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar strains in pacients with diarrhea in Cumana Sucre state Venezuela

Se realizó un estudio epidemiológico y molecular de cepas de E. histolytica y E. dispar en 428 pacientes con sintomatología gastrointestinal de diarrea, de distintos centros de salud en Cumaná, estado Sucre, Venezuela. Las muestras se procesaron a través de: examen directo con solución salina fisiológica al 0,85% y coloración temporal de lugol, coloración tricrómica y método de concentración de Ritchie, y para el asilamiento de quistes, se uso el gradiente de sacarosa. Para la detección molecular, se amplificó la subunidad pequeña de ARN 16S por Nested-Multiplex PCR. La prevalencia de E. histolytica/E. dispar por el método directo fue de 20,09 por ciento, mientras que por Ritchie se obtuvo un 13,79 por ciento y con coloración tricrómico un 12,15 por ciento. Por PCR la prevalencia para E. histolytica fue de 6,31 por ciento y de E. dispar de 4,44 por ciento, detectándose cuatro casos de infecciones mixtas. La secuenciación de los fragmentos amplificados de E. histolytica indicó un 100 por ciento de homología con las secuencias de cepas de Mérida (Venezuela), Estados Unidos, Brasil, México y del GenBank. Las infecciones por E. histolytica y E. dispar estuvieron asociadas estadísticamente con la edad, pero no con el sexo. La presencia de sangre, moco y dolor abdominal resultaron asociadas sólo en los infectados con E. histolytica. La moderada prevalencia de E. histolytica indica su carácter endémico en esta población y advierte sobre el potencial problema como factor de morbilidad y mortalidad en el estado Sucre. La frecuencia de E. dispar en esta población hace presumir que existe una sobreestimación en el diagnóstico de amibiasis con sus implicaciones clínicas y epidemiológicas y demuestra el poco conocimiento sobre las prevalencias reales de este protozoario. La PCR permitió la identificación diferencial de E. histolytica y E. dispar, así como la presencia de infecciones mixtas, por lo cual es una herramienta indispensable para estudios epidemiológicos.

Cysticercosis in chronic psychiatric inpatients from a Venezuelan community.

Cysticercosis due to Taenia solium infection is endemic in developing countries of the Americas, Asia, and Africa. This study was designed to establish the prevalence of cysticercosis in 158 inpatients of a psychiatric institution in the state of Tachira (Venezuela) and in 127 healthy control subjects. Positive blood tests for cysticercosis by Western blotting were recorded in 18.35% of the patients and in 1.57% of the controls. Individuals with mental retardation were found to carry an increased risk of cysticercosis (RR: 2.92; 1.22 < 2.92 > 7.0; P < 0.05) compared with patients with other psychiatric disorders. Taeniasis by Taenia spp. was not demonstrated in the patient group, although a high incidence of infection by other helminths (95.1%) was detected. The high prevalence of cysticercosis in the psychiatric inpatient group, compared with healthy individuals, and the lack of a differential diagnosis of neurocysticercosis suggest cerebral cysticercosis in a large proportion of these patients. Cysticercosis could be the origin of the psychiatric disorders of these patients and may also be due to contact with the parasite in an environment with poor hygiene conditions and a deficient health care system.

Inmunodiagnóstico de la neurocisticercosis: estudio comparativo de extractos antigénicos de Cysticercus cellulosae y Taenia crassiceps / Immunodiagnosis of neurocysticercosis: comparative study of antigenic extracts from Cysticercus cellulosae and Taenia crassiceps

Different antigenic extracts of Taenia solium and Taenia crassiceps were evaluated in connection with the detection of antibodies in patients with neurocysticercosis aimed at selecting immunorelevant antigens for the diagnosis of neurocysticercosis by means of the immunoenzymatic assay and immunoblotting. The vesicular fluid of T. crassiceps proved to be more sensitive (100) and specific (86). On using the immunoblotting technique it was also observed that this extract was the most sensitive and specific. Within the protein profile of the antigen the band of 18 kDa was mostly recognized by the serum and cerebrospinal fluid of patients with neurocysticercosis. The vesicular fluid of T. crassiceps represents an alternative in the optimization of the diagnosis of neurocysticercosis in the serum and cerebrospinal fluid and in the substitution of T. solium antigens due to its high sensitivity and specificity and to its easy obtention under controlled laboratory conditions.

Estudio comparativo entre el Secnidazol y el Metronidazol en el tratamiento de la amibiasis intestinal / Comparative study between secnidazole and metronidazole in intestinal amebiasis

Se llevó a cabo un estudio comparativo para evaluar la eficacia clínica entre el tratamiento con secnidazol en dosis única de 2g, frente al metronidazol en dosis oral 1.5 gr. diario por ocho días. Se incluyeron 126 pacientes de un área rural venezolana donde la amibiasis es endémica. La amibiasis fue confirmada por medio de la identificación inmunoenzimática de antígenos de membrana de E histolytica con un anticuerpo monoclonal (HU5-11) y por medio del estudio coproparasitológico. Los pacientes fueron evaluados parasitológicamente los días 0,15 y 60 después del tratamiento. A los 15 días se observaron tasas de cura parasitológica de 97.6 por ciento de los pacientes del grupo secnidazol y 87.3 por ciento de los pacientes del grupo metronidazol. El secnidazol fue mejor tolerado que el metronidazol. El secnidazol demostró ser un tratamiento muy adecuado para la amibiasis en campañas epidemiológicas, debido a: que puede ser usado en dosis única, a su alta tasa de curación, fácil administración, bajo costo y muy pocos efectos secundarios

Tratamiento antimibiano con medicación de dosis única: primera experiencia en Venezuela / Anti entamoeba treatment with a single dose medication: first Venezuelan experience

El presente estudio realizado en una población rural venezolana en 68 sujetos de ambos sexos con edades entre 15 y 76 años a los cuales se le diagnosticó amebiasis intestinal mediante la identificación de antígenos parasitarios en heces por medio de un anticuerpo monoclonal HU-511 dirigido contra una proteína de Entamoeba histolytica. A todos los sujetos se le administró un antimibiano de dosis única (secnidazol) de 2 gr. por vía oral; a 43 de los pacientes se les hicieron controles de heces a las dos semanas y a los restantes a los dos meses después. Los resultados permitieron demostrar que a los quince días del tratamiento hubo negativización en los 43 sujetos controlados (43/43) y a los dos meses permanecían negativos 62 pacientes (62/68). Pudo demostrarse la alta eficiencia del mediacmento aplicado y una baja ocurrencia de reacciones indeseables. El hecho de poder ser administrado en una sóla dosis hace del secnidazol una modalidad terapéutica cómoda para su administración y especialmente aplicable en campañas epidemiológicas en comunidades numerosas

Isolation and axenization of two entamoeba hitolytica strains / Aislamiento y axenización de dos capas de entamoeba histolytica

We describe the isolation and axenization of two E. histolyca strains, obtained from the stools of two patienst with the clinical diagnosis of dysentery. We used Pavlova's medium for initial polixenic culture, and TYI-S-33 (Diamond's) medium for monoxenic and axenic cultures. In order to eliminate the microorganism contaminating the stools the following antibiotics were used: penicillin, streptomicin, ampicillin, chloramphenicol, kanamycin, nistatin, ceftriaxone and amphoterycin B. Both starins grew in similar culture conditions with a yield of 2 x 10 elevation a 6 microorganism per tube of 15 ml. Both strains belog to pathogenic zymodemes, and virulence was determined by the capacity for producing hepatic abscesses in 100 percentage of the hamsters inoculated intrahepatically

Entamoeba histolytica: detection of coproantigens by purified antibody in the capture sandwich ELISA

Foi desenvolvido um teste de ELISA de Captura usando anticorpos policlonais purificados obtidos em coelhos contra tres diferentes cepas axenicas de Entamoeba Histolystica(ICB-CSP and ICB-462 do Brasil e HM1 do Mexico)para deteccao de coproantigenos em amostras de fezes de individuos: a) sintomaticos, b)assintomaticos, c)com outros parasitos intestinais, e d)sadios. Imunoglobina G (IgG) contra E. histolystica foi isolada de imune soro de coelho, em duas etapas: cromatografia de afinidade em uma coluna contendo antigenos de E. histolystica unidos a Sepharose 4B, seguido por outra cromatogradia em Sepharose 4B Proteina A. O teste de ELISA usando anticorpos purificados, foi capaz de detectar ate um so trofozoito por lamina ou 70 ng de proteina de ameba por orificio, apresentando uma sensibilidade de 93 por cento e uma especificidade de 94 por cento. A combinacao do exame microscopico com o metodo ELISA de Captura teve uma concordancia e discordancia de 93,25 por cento e 6,75 por cento, respectivamente. Pode-se concluir que o teste de ELISA de Captura utilizando anticorpo purificado e altamente especifico para a deteccao de coproantigenos de E. histolystica em fezes de pacientes infectados, rapido, facil e mais sensivel que o exame microscopico.

Estudio de la presencia de anticuerpos anti-toxoplasma gondii en beneficiadores de carnes de Trujillo, Venezuela / Study of the presence of anti-toxoplasma gondii antibodies in animal meat from Trujillo-Venezuela

Se realizó un estudio comparativo sobre la toxoplasmosis en los distritos Trujillo y Valera del estado Trujillo, entre 115 personas con oficios relacionados con la manipulación de carnes y 115 personas de la población general, por medio de técnica de la Hemaglutinación indirecta (HAI). Obteniendo los siguientes resultados: 87,0 por ciento de los carniceros y 68,7 por ciento de personas de la población general presentaron anticuerpos antitoxoplasma. Los carniceros presentaron títulos de AAT mayores (18,3 por ciento) que las personas de la población general. 98 por ciento de los carniceros presentaron títulos iguales o menores a 1:2048. El mayor porcentaje depositividad entre los carniceros fue entre los titulos 1:1024 y 1:4096 mientras que las personas de la población general estuvieron entre 1:128 y 1:256. La cero positividad entre los beneficiadores de carnes de mamíferos y beneficiadores de aves es semejante

Toxoplasmosis: evaluación seroepidemiológica realizada en Trujillo, Venezuela / Toxoplasmosis: seroepidemiological evaluation in Trujillo state, Venezuela

Se realizó un estudio seroepidemilógico de toxoplasmosis en 605 personas del área urbana de la ciudad de trujillo, Venezuela, en edades comprrendidas entre 0-45 años. Dicho estudio, arrojó los suiguientes resultados: 65,5 porciento de los encuestado, resultaron positivos a titulos mayores o iguales a la dilución 1:16; 94;2porciento de los positivos presentaron titulos menores o iguales a la dilución 1:2048, el riesgo de infección es mayor en los niños de menos de cinco años de edad, la seropositividad se incrementa con la edad, el sexo no influye en la presencia de anticuerpos antitoxoplasma, la tasa de positividad a la toxoplasmosis fue mayor en las personas que conviven con gastos y el mayor porcrntaje de positividad lo presntaron las personas de menores ingresos económicos. Se sugiere una alta endemicidad de la toxoplasmosis en la zona estudiada