GENETIC VARIABILITY AND REPRODUCTIVE CHARACTERISTICS OF ZEBRAFISH (Cyprinidae Danio rerio) STOCKS / Variabilidad genética y características reproductivas de poblaciones de pez cebra (Cyprinidae Danio rerio)

ABSTRACT Specimens of cultured zebrafish acquired from different fish farms in Brazil may show genetic variability and alteration in allele frequency due to genetic drift and selective pressure in a captive environment, resulting in the differentiation of productive and reproductive characteristics. The aim of this study was to evaluate the genetic variability and reproductive characteristics of 180 zebrafish specimens from six Brazilian fish farms. A deviation from the Hardy-Weinberg equilibrium was observed in all evaluated stocks. Differentiation among stocks was observed in the amount of genetic variability with respect to observed heterozygosity and the inbreeding coefficient (FIS). Genetic distance between stocks was determined through the Fst index, and the formation of four distinct groups was observed by plotting the dendrogram based on Nei's genetic distance. Differences were observed among reproductive parameters, such as the average number of eggs per female and hatchability. This second parameter proved to be related to the level of inbreeding of the population, whereas this effect was not observed for spawning frequency. We conclude that zebrafish stocks from the 6 different Brazilian fish farms present significant genetic and phenotypic variability. The genetic structure affects fecundity and should be considered when carrying out work where reproductive rates are evaluated.

RESUMEN Especímenes de pez cebra adquiridos en diferentes piscifactorías pueden mostrar variabilidad genética y alteración en la frecuencia de los alelos debido a la deriva genética y presión selectiva llevada a cabo en un ambiente cautivo, lo que resulta en la diferenciación de las características productivas y reproductivas. Este estudio busco evaluar la variabilidad genética y las características reproductivas de 180 especímenes de pez cebra adquiridos de seis piscifactorías brasileras. Hubo una desviación en el equilibrio de Hardy-Weinberg en todas las poblaciones evaluadas. Se encontró diferenciación en términos del grado de variabilidad dentro de las poblaciones, en vista de los resultados de la heterocigosidad observada y el coeficiente de endogamia (Fis). La distancia genética entre ellos se verificó usando el índice Fst, y se observó la formación de cuatro grupos distintos al trazar el dendrograma basado en la distancia genética de Nei. Se observó una diferencia en relación con los parámetros reproductivos, como el número promedio de huevos por hembra y la incubabilidad. Este segundo parámetro demostró estar relacionado con el nivel de consanguinidad de la población, y este efecto no se verificó para la frecuencia de desove. Se puede considerar que las existencias de pez cebras de diferentes lugares tienen variabilidad genética y fenotípica. La estructura genética influye principalmente en la fertilización y debe tenerse en cuenta al realizar trabajos donde se evalúan los índices reproductivos.

A breeding program for Nile tilapia in Brazil: Results from nine generations of selection to increase the growth rate in cages.

Variance components and heritabilities for daily weight gain (DWG) were estimated for Nile tilapia farmed in cages across nine generations (G1-G9) of selection in a breeding program in Brazil. DWG was measured in 16,272 accumulated tagged animals representing 535 full- and half-sib families of Nile tilapia under cage farming. The additive genetic variance showed a slight variation (0.051-0.066), and heritability estimates ranged from 0.20 to 0.33. The common environmental effect accounted for a higher proportion of the total variance in DWG, especially in the last generations (6%-24%). A genetic trend based on all data available showed a substantial increase in the DWG (about 3.3% per generation) of Nile tilapia across nine generations of selection. Furthermore, our results demonstrate ample scope for further genetic improvement.

Efeito do produto homeopático HomeoAqua Mega 3(R) no desempenho e no perfil lipídico da cabeça de tilápia do nilo (Oreochromis niloticus) / Effect of a homeopathic product HomeoAqua Mega 3(R) on performance and lipid profile of the nile tilapia head (Oreochromis niloticus)

Duas dietas foram avaliadas, uma controle (T1), com adição de 40 mL de solução hidroalcoólica a cada kg de ração e outra (T2), com adição de 40 mL do produto Homeopático a cada kg de ração em tilápias do Nilo. Foram distribuídos 200 peixes em 10 aquários, totalizando 20 animais em cada aquário, onde permaneceram por 63 dias. Foi realizado o monitoramento dos parâmetros físicos e químicos da água, desempenho dos animais, determinação da composição centesimal e a composição de ácidos graxos em cabeças de tilápia do Nilo. Não houve diferença estatística significativa entre os tratamentos em relação aos parâmetros da água, desempenho, determinação de umidade, cinzas, proteína bruta, lipídios totais. As tilápias do Nilo que receberam o produto homeopático incorporado na ração apresentaram a razão AGPI/AGS superior ao do tratamento controle, apresentado diferença significativa. As cabeças das tilápias analisadas constituem uma excelente fonte de lipídios totais.(AU)

Two diets were evaluated, one control (T1), with the addition of 40 ml of hydroalcoholic solution to each kg of feed and other (T2) with 40 ml of the homeopathic product every kg of feed in Nile tilapia. 200 fish were distributed in 10 water tanks, totaling 20 animals in each of the boxes, where they remained for 63 days. During the experiment was carried out monitoring of the physical and chemical parameters of water, animal performance, determine the chemical composition and fatty acid composition in heads of Nile tilapia. there was no significant statistical difference between treatments in relation to physical and chemical water parameters, performance, moisture determination, ash, crude protein, total lipids. The Nile tilapia that received the homeopathic product incorporated in the feed showed the PUFA / SFA ratio higher than the control treatment presented significant difference. The heads of analyzed tilapia are an excellent source of total lipids.(AU)

Efeito do produto homeopático HomeoAqua Mega 3(R) no desempenho e no perfil lipídico da cabeça de tilápia do nilo (Oreochromis niloticus) / Effect of a homeopathic product HomeoAqua Mega 3(R) on performance and lipid profile of the nile tilapia head (Oreochromis niloticus)

Duas dietas foram avaliadas, uma controle (T1), com adição de 40 mL de solução hidroalcoólica a cada kg de ração e outra (T2), com adição de 40 mL do produto Homeopático a cada kg de ração em tilápias do Nilo. Foram distribuídos 200 peixes em 10 aquários, totalizando 20 animais em cada aquário, onde permaneceram por 63 dias. Foi realizado o monitoramento dos parâmetros físicos e químicos da água, desempenho dos animais, determinação da composição centesimal e a composição de ácidos graxos em cabeças de tilápia do Nilo. Não houve diferença estatística significativa entre os tratamentos em relação aos parâmetros da água, desempenho, determinação de umidade, cinzas, proteína bruta, lipídios totais. As tilápias do Nilo que receberam o produto homeopático incorporado na ração apresentaram a razão AGPI/AGS superior ao do tratamento controle, apresentado diferença significativa. As cabeças das tilápias analisadas constituem uma excelente fonte de lipídios totais.

Two diets were evaluated, one control (T1), with the addition of 40 ml of hydroalcoholic solution to each kg of feed and other (T2) with 40 ml of the homeopathic product every kg of feed in Nile tilapia. 200 fish were distributed in 10 water tanks, totaling 20 animals in each of the boxes, where they remained for 63 days. During the experiment was carried out monitoring of the physical and chemical parameters of water, animal performance, determine the chemical composition and fatty acid composition in heads of Nile tilapia. there was no significant statistical difference between treatments in relation to physical and chemical water parameters, performance, moisture determination, ash, crude protein, total lipids. The Nile tilapia that received the homeopathic product incorporated in the feed showed the PUFA / SFA ratio higher than the control treatment presented significant difference. The heads of analyzed tilapia are an excellent source of total lipids.

Vitamin A supplemented diet for pacu fingerlings / Vitamina A na dieta de alevinos de pacu

Vitamins are present in small amounts in food and are essential for the organic balance of fish. Liposoluble vitamins are stored in the liver and may lead to hypo or hypervitaminosis which in both cases can generate complications to animal homeostasis. This study aimed to evaluate the effects of vitamin A supplementation in the diet of pacu fingerlings (Piaractus mesopotamicus). A total of 240 fingerlings with the initial average weight of 17.55 ± 3.22 g were randomly distributed in 20 500 L-circular tanks. Diets were supplemented with retinol acetate (1,000,000 IU of vitamin A g-1) to contain 0, 3,000, 6,000, 9,000, and 12,000 IU of vitamin A kg-1 of diet. The fish were fed ad libitum. Productive performance, carcass yield, visceral fat, hepatosomatic ratio, carcass chemical composition, hematology blood parameters, and liver histology were evaluated. The quadratic effect was observed on final weight and apparent feed conversion with optimum levels at 6,583 and 5,555 IU of vitamin A kg-1 of feed, respectively. There was no influence of vitamin A supplementation on survival, carcass chemical composition, hematology, and liver histology. The minimum supplementation of 5,555 IU of vitamin A kg-1 of ration is indicated to obtain enhanced results in weight gain and apparent feed conversion in pacu fingerlings.

As vitaminas estão presentes em pequenas quantidades nos alimentos e são essenciais para o equilíbrio orgânico dos peixes. As vitaminas lipossolúveis são armazenadas no fígado, podem apresentar sinais clínicos de hipovitaminose ou hipervitaminose, e que em ambos os casos podem trazer complicações a homeostase animal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a suplementação de vitamina A em dietas para alevinos de pacu (Piaractus mesopotamicus). Foram utilizados 240 alevinos com peso inicial médio de 17,55 ± 3,22, distribuídos aleatoriamente em 20 caixas circulares de 500 L. As dietas foram suplementadas com acetato de retinol (1.000,000 IU of vitamin A g-1), de forma a conter 0, 3.000, 6.000, 9.000 e 12.000 UI de vitamina A/kg de dieta. Foi observado efeito quadrático sobre os parâmetros de ganho de peso e conversão alimentar aparente com níveis ótimos de 6.583 e 5.555 UI de vitamina A kg-1 de ração, respectivamente. Não foram observadas influencias da suplementação de vitamina A sobre sobrevivência, composição da carcaça, hematologia e histologia do fígado do pacu. Para obtenção de melhores resultados de ganho de peso e conversão alimentar indica-se a suplementação mínima de 5,555 UI de vitamina A kg-1 de ração para o pacu.

Vitamin A supplemented diet for pacu fingerlings / Vitamina A na dieta de alevinos de pacu

Vitamins are present in small amounts in food and are essential for the organic balance of fish. Liposoluble vitamins are stored in the liver and may lead to hypo or hypervitaminosis which in both cases can generate complications to animal homeostasis. This study aimed to evaluate the effects of vitamin A supplementation in the diet of pacu fingerlings (Piaractus mesopotamicus). A total of 240 fingerlings with the initial average weight of 17.55 ± 3.22 g were randomly distributed in 20 500 L-circular tanks. Diets were supplemented with retinol acetate (1,000,000 IU of vitamin A g-1) to contain 0, 3,000, 6,000, 9,000, and 12,000 IU of vitamin A kg-1 of diet. The fish were fed ad libitum. Productive performance, carcass yield, visceral fat, hepatosomatic ratio, carcass chemical composition, hematology blood parameters, and liver histology were evaluated. The quadratic effect was observed on final weight and apparent feed conversion with optimum levels at 6,583 and 5,555 IU of vitamin A kg-1 of feed, respectively. There was no influence of vitamin A supplementation on survival, carcass chemical composition, hematology, and liver histology. The minimum supplementation of 5,555 IU of vitamin A kg-1 of ration is indicated to obtain enhanced results in weight gain and apparent feed conversion in pacu fingerlings.(AU)

As vitaminas estão presentes em pequenas quantidades nos alimentos e são essenciais para o equilíbrio orgânico dos peixes. As vitaminas lipossolúveis são armazenadas no fígado, podem apresentar sinais clínicos de hipovitaminose ou hipervitaminose, e que em ambos os casos podem trazer complicações a homeostase animal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a suplementação de vitamina A em dietas para alevinos de pacu (Piaractus mesopotamicus). Foram utilizados 240 alevinos com peso inicial médio de 17,55 ± 3,22, distribuídos aleatoriamente em 20 caixas circulares de 500 L. As dietas foram suplementadas com acetato de retinol (1.000,000 IU of vitamin A g-1), de forma a conter 0, 3.000, 6.000, 9.000 e 12.000 UI de vitamina A/kg de dieta. Foi observado efeito quadrático sobre os parâmetros de ganho de peso e conversão alimentar aparente com níveis ótimos de 6.583 e 5.555 UI de vitamina A kg-1 de ração, respectivamente. Não foram observadas influencias da suplementação de vitamina A sobre sobrevivência, composição da carcaça, hematologia e histologia do fígado do pacu. Para obtenção de melhores resultados de ganho de peso e conversão alimentar indica-se a suplementação mínima de 5,555 UI de vitamina A kg-1 de ração para o pacu.(AU)

Cross-amplification of heterologous microsatellite markers in Piracanjuba / Amplificação cruzada de marcadores microssatélites heterólogos em piracanjuba

Brycon orbignyanus, popularly known in Brazil as piracanjuba, is a fish with great economic value but whose natural population drastically decreased in number during the last years. In this context, genetic variability studies of natural stocks and in restocking programs are fundamental for the adoption of conservation measures. Current analysis verifies the cross-amplification of heterologous primers in B. orbignyanus. Fifty-two primers of the species Brycon opalinus, Brycon hilarii, Brycon insignis, Prochilodus sp., Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum and Oreochromis niloticus were tested. Primers with the best reproducibility were applied to a sample of 20 individuals and the genetic parameters were calculated. Nine primers provided good results for cross-amplification with B. orbignyanus, involving (BoM5 and BoM13) of Brycon opalinus, (Bh5, Bh6, Bh8, Bh13 and Bh16) of Brycon hilarii, (Bc48-10) of Brycon insignis and (Par80) of Prochilodus argenteus. Primers of Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum and Oreochromis niloticus failed to provide amplification or provided non-specificity. Results demonstrated the possibility of using primers of different species and genera of B. orbignyanus, facilitating genetic studies on the species.(AU)

A piracanjuba (Brycon orbignyanus) é um peixe de grande valor econômico que nos últimos anos tem apresentado uma redução drástica em suas populações naturais. Nesse contexto, estudos de variabilidade genética dos estoques naturais e nos programas de repovoamento são fundamentais para adoção de medidas conservacionistas. O objetivo do presente trabalho foi verificar a amplificação cruzada de primers heterologos em B. orbignyanus. Foram avaliados um total de 52 primers das espécies Brycon opalinus, Brycon hilarii, Brycon insignis, Prochilodus sp., Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum e Oreochromis niloticus. Os primers com melhor reprodutibilidade foram aplicados a uma amostra de 20 indivíduos e os parâmetros genéticos foram calculados. Nove primers apresentaram resultados satisfatórios de amplificação cruzada com B. orbignyanus, sendo das espécies Brycon opalinus (BoM5 e BoM13), Brycon hilarii (Bh5, Bh6, Bh8, Bh13 e Bh16), Brycon insignis (Bc48-10) e Prochilodus argenteus (Par80). Os primers de Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum e Oreochromis niloticus não apresentaram amplificação ou apresentaram inespecificidade. Os resultados revelaram a possibilidade da utilização de primers de diferentes espécies e gênero em B. orbignyanus, o que facilita a realização de estudos genéticos nessa espécie.(AU)

Cross-amplification of heterologous microsatellite markers in Piracanjuba / Amplificação cruzada de marcadores microssatélites heterólogos em piracanjuba

Brycon orbignyanus, popularly known in Brazil as piracanjuba, is a fish with great economic value but whose natural population drastically decreased in number during the last years. In this context, genetic variability studies of natural stocks and in restocking programs are fundamental for the adoption of conservation measures. Current analysis verifies the cross-amplification of heterologous primers in B. orbignyanus. Fifty-two primers of the species Brycon opalinus, Brycon hilarii, Brycon insignis, Prochilodus sp., Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum and Oreochromis niloticus were tested. Primers with the best reproducibility were applied to a sample of 20 individuals and the genetic parameters were calculated. Nine primers provided good results for cross-amplification with B. orbignyanus, involving (BoM5 and BoM13) of Brycon opalinus, (Bh5, Bh6, Bh8, Bh13 and Bh16) of Brycon hilarii, (Bc48-10) of Brycon insignis and (Par80) of Prochilodus argenteus. Primers of Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum and Oreochromis niloticus failed to provide amplification or provided non-specificity. Results demonstrated the possibility of using primers of different species and genera of B. orbignyanus, facilitating genetic studies on the species.

A piracanjuba (Brycon orbignyanus) é um peixe de grande valor econômico que nos últimos anos tem apresentado uma redução drástica em suas populações naturais. Nesse contexto, estudos de variabilidade genética dos estoques naturais e nos programas de repovoamento são fundamentais para adoção de medidas conservacionistas. O objetivo do presente trabalho foi verificar a amplificação cruzada de primers heterologos em B. orbignyanus. Foram avaliados um total de 52 primers das espécies Brycon opalinus, Brycon hilarii, Brycon insignis, Prochilodus sp., Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum e Oreochromis niloticus. Os primers com melhor reprodutibilidade foram aplicados a uma amostra de 20 indivíduos e os parâmetros genéticos foram calculados. Nove primers apresentaram resultados satisfatórios de amplificação cruzada com B. orbignyanus, sendo das espécies Brycon opalinus (BoM5 e BoM13), Brycon hilarii (Bh5, Bh6, Bh8, Bh13 e Bh16), Brycon insignis (Bc48-10) e Prochilodus argenteus (Par80). Os primers de Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum e Oreochromis niloticus não apresentaram amplificação ou apresentaram inespecificidade. Os resultados revelaram a possibilidade da utilização de primers de diferentes espécies e gênero em B. orbignyanus, o que facilita a realização de estudos genéticos nessa espécie.

Cross-amplification of heterologous microsatellite markers in Piracanjuba / Amplificação cruzada de marcadores microssatélites heterólogos em piracanjuba

ABSTRACT: Brycon orbignyanus, popularly known in Brazil as piracanjuba, is a fish with great economic value but whose natural population drastically decreased in number during the last years. In this context, genetic variability studies of natural stocks and in restocking programs are fundamental for the adoption of conservation measures. Current analysis verifies the cross-amplification of heterologous primers in B. orbignyanus. Fifty-two primers of the species Brycon opalinus, Brycon hilarii, Brycon insignis, Prochilodus sp., Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum and Oreochromis niloticus were tested. Primers with the best reproducibility were applied to a sample of 20 individuals and the genetic parameters were calculated. Nine primers provided good results for cross-amplification with B. orbignyanus, involving (BoM5 and BoM13) of Brycon opalinus, (Bh5, Bh6, Bh8, Bh13 and Bh16) of Brycon hilarii, (Bc48-10) of Brycon insignis and (Par80) of Prochilodus argenteus. Primers of Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum and Oreochromis niloticus failed to provide amplification or provided non-specificity. Results demonstrated the possibility of using primers of different species and genera of B. orbignyanus, facilitating genetic studies on the species.

RESUMO: A piracanjuba (Brycon orbignyanus) é um peixe de grande valor econômico que nos últimos anos tem apresentado uma redução drástica em suas populações naturais. Nesse contexto, estudos de variabilidade genética dos estoques naturais e nos programas de repovoamento são fundamentais para adoção de medidas conservacionistas. O objetivo do presente trabalho foi verificar a amplificação cruzada de primers heterologos em B. orbignyanus. Foram avaliados um total de 52 primers das espécies Brycon opalinus, Brycon hilarii, Brycon insignis, Prochilodus sp., Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum e Oreochromis niloticus. Os primers com melhor reprodutibilidade foram aplicados a uma amostra de 20 indivíduos e os parâmetros genéticos foram calculados. Nove primers apresentaram resultados satisfatórios de amplificação cruzada com B. orbignyanus, sendo das espécies Brycon opalinus (BoM5 e BoM13), Brycon hilarii (Bh5, Bh6, Bh8, Bh13 e Bh16), Brycon insignis (Bc48-10) e Prochilodus argenteus (Par80). Os primers de Piaractus mesopotamicus, Colossoma macropomum e Oreochromis niloticus não apresentaram amplificação ou apresentaram inespecificidade. Os resultados revelaram a possibilidade da utilização de primers de diferentes espécies e gênero em B. orbignyanus, o que facilita a realização de estudos genéticos nessa espécie.

Genetic diversity of pacu for restocking programs in the Tietê and Grande rivers, Brazil / Diversidade genética de pacu utilizado em programas de repovoamento nos rios Tietê e Grande, Brasil

Piaractus mesopotamicus is a tropical fish under threat because of declines in the number of wild populations. Restocking programs have been developed as a conservation method, and the genetic monitoring of populations and broodstocks is important to ensure the viability of such programs. The objective of the current, unprecedented experiment was to evaluate the genetic diversity of P. mesopotamicus wild populations (WPs) and broodstocks (BSs) using microsatellites markers for supplying the restocking programs in the Tietê and Grande rivers. Six microsatellite loci were amplified using the DNA obtained from the caudal fin of 279 adult fish. The observed intrapopulation genetic variability was high with mean heterozygosity ranging from 0.203 to 0.833. The number of alleles per locus ranged from three (loci Pme28 and Pme32) to thirteen (loci Pme4, Pme5 and Pme14), and there were allele differences between WPsxWPs and WPsxBSs. This differentiation was confirmed by the dendrogram analysis that showed three specific clusters. Four alleles were shared in the WPs2012xBSs. Positive FIS values indicated the presence of endogamy in seven out of ten samples obtained from the WPs. The AMOVA analysis and FST values indicated moderate and high genetic differences in WPsxWPs and high genetic differences in WPsxBSs. The genetic distance and genetic identity values and number of migrants...(AU)

Piaractus mesopotamicus é um peixe tropical que nos últimos anos tem apresentado uma diminuição no número de populações naturais. Programas de repovoamento vêm sendo utilizados como método de conservação, entretanto, o monitoramento genético das populações e dos estoques de reprodutores é importante para conferir a viabilidade desse tipo de programas. O objetivo do presente estudo foi avaliar de forma inédita a diversidade genética de populações selvagens (WPs) e estoques de reprodutores (BSs) de P. mesopotamicus utilizados em programas de repovoamento dos rios Tietê e Grande, através de marcadores microssatélite. Seis loci microssatélite foram amplificados usando DNA extraído de nadadeira caudal de 279 indivíduos adultos. Foi observada alta variabilidade genética intra-populacional, com medias de heterozigosidade observada entre 0.203 e 0.833. O número de alelos por locus foi de três (locus Pme28 e Pme32) a 13 (locus Pme4, Pme5 e Pme14) e houve diferenciação de alelos entre WPsxWPs e WPsxBSs. Essa diferenciação foi confirmada pela análise do dendrograma que mostrou a formação de três agrupamentos específicos. Observaram-se quatro alelos compartilhados entre WPs2012xBSs. Valores positivos de FIS mostraram a presença de endogamia em sete das 10 coletas realizadas nas WPs. A análise de AMOVA e do FST indicou moderada e muito alta diferenciação genética entre WPsxWPs...(AU)

Prevalence of ectoparasites and bacteriological diagnosis in Nile tilapia bred in net-tanks in the Corvos River, Paraná, Brazil / Prevalência de ectoparasitos e diagnóstico bacteriológico em tilápia do Nilo criadas em tanques-rede no Rio do Corvo, Paraná, Brasil

Predominance of ectoparasites and bacteria diagnosis were identified in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), GIFT strain, bred in net-tanks at different densities. Current experiment was performed in the Corvos river, State of Paraná, Brazil, in two cycles: cycle A installed in August 2010 with 155 days, and cycle B, installed in February 2011 with 128 days. Twenty 6.8 m-3 (2.0 x 2.0 x 1.7 m) net-tanks were employed, using 6.0 m-3 and five densities (150, 175, 200, 225 and 250 fish/m-3), with four replications each. No significant difference was registered with regard to the prevalence of ectoparasites due to densities in the two experimental cycles. In the months of September to November cycle A displayed increase in the predominance of Trichodina and a decrease in the prevalence of Monogenoidea and mixed parasites. Further, an inverse relationship with a decrease in the prevalence of Trichodina and an increase in the prevalence of Monogenoidea and mixed parasites occurred during October and November. Trochodina prevalence occurred in October and November. Cycle B showed a significant difference in total prevalence of ectoparasites due to months. There was an increase in tricodinid infestation between March and June in proportion to increase of density and throughout the experiment. More care should be taken with regard to densities during the period. No positive result was...(AU)

Foram identificados a prevalência de ectoparasitos e o diagnóstico de bactérias em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) da variedade GIFT, criadas em tanques-rede, utilizando diferentes densidades. O experimento foi conduzido no Rio do Corvo, PR, em dois ciclos: ciclo A, implantado em agosto de 2010 com duração de 155 dias e ciclo B, implantado em fevereiro de 2011 com duração de 128 dias. Para cada ciclo foram instalados 20 tanques-rede de 6,8 m-3 (2,0 x 2,0 x 1,7 m), com 6,0 m-3 úteis, adotando cinco densidades (150, 175, 200, 225 e 250 peixes/m-3), com quatro repetições. Não houve diferença significativa na prevalência de ectoparasitos em relação às densidades nos dois ciclos de experimento. Observou-se no nos meses de setembro a novembro do ciclo A um aumento na prevalência de Trichodina e decréscimo na prevalência de Monogenoidea e parasitismo misto, nos meses de outubro e novembro observou-se uma relação inversa com uma diminuição na prevalência de Trichodina e aumento na prevalência de Monogenoidea e parasitismo misto. Os meses de outubro e novembro apresentaram a maior prevalência de Trichodina do ciclo A. No ciclo B ocorreu uma diferença significativa na prevalência total de ectoparasitos em relação aos meses. Em relação à categoria de infestação por tricodinídeos, nos meses de março a junho houve um aumento na medida em que aumentava-se a densidade e no decorrer...(AU)

Genetic diversity of pacu for restocking programs in the Tietê and Grande rivers, Brazil / Diversidade genética de pacu utilizado em programas de repovoamento nos rios Tietê e Grande, Brasil

Piaractus mesopotamicus is a tropical fish under threat because of declines in the number of wild populations. Restocking programs have been developed as a conservation method, and the genetic monitoring of populations and broodstocks is important to ensure the viability of such programs. The objective of the current, unprecedented experiment was to evaluate the genetic diversity of P. mesopotamicus wild populations (WPs) and broodstocks (BSs) using microsatellites markers for supplying the restocking programs in the Tietê and Grande rivers. Six microsatellite loci were amplified using the DNA obtained from the caudal fin of 279 adult fish. The observed intrapopulation genetic variability was high with mean heterozygosity ranging from 0.203 to 0.833. The number of alleles per locus ranged from three (loci Pme28 and Pme32) to thirteen (loci Pme4, Pme5 and Pme14), and there were allele differences between WPsxWPs and WPsxBSs. This differentiation was confirmed by the dendrogram analysis that showed three specific clusters. Four alleles were shared in the WPs2012xBSs. Positive FIS values indicated the presence of endogamy in seven out of ten samples obtained from the WPs. The AMOVA analysis and FST values indicated moderate and high genetic differences in WPsxWPs and high genetic differences in WPsxBSs. The genetic distance and genetic identity values and number of migrants...

Piaractus mesopotamicus é um peixe tropical que nos últimos anos tem apresentado uma diminuição no número de populações naturais. Programas de repovoamento vêm sendo utilizados como método de conservação, entretanto, o monitoramento genético das populações e dos estoques de reprodutores é importante para conferir a viabilidade desse tipo de programas. O objetivo do presente estudo foi avaliar de forma inédita a diversidade genética de populações selvagens (WPs) e estoques de reprodutores (BSs) de P. mesopotamicus utilizados em programas de repovoamento dos rios Tietê e Grande, através de marcadores microssatélite. Seis loci microssatélite foram amplificados usando DNA extraído de nadadeira caudal de 279 indivíduos adultos. Foi observada alta variabilidade genética intra-populacional, com medias de heterozigosidade observada entre 0.203 e 0.833. O número de alelos por locus foi de três (locus Pme28 e Pme32) a 13 (locus Pme4, Pme5 e Pme14) e houve diferenciação de alelos entre WPsxWPs e WPsxBSs. Essa diferenciação foi confirmada pela análise do dendrograma que mostrou a formação de três agrupamentos específicos. Observaram-se quatro alelos compartilhados entre WPs2012xBSs. Valores positivos de FIS mostraram a presença de endogamia em sete das 10 coletas realizadas nas WPs. A análise de AMOVA e do FST indicou moderada e muito alta diferenciação genética entre WPsxWPs...

Prevalence of ectoparasites and bacteriological diagnosis in Nile tilapia bred in net-tanks in the Corvos River, Paraná, Brazil / Prevalência de ectoparasitos e diagnóstico bacteriológico em tilápia do Nilo criadas em tanques-rede no Rio do Corvo, Paraná, Brasil

Predominance of ectoparasites and bacteria diagnosis were identified in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), GIFT strain, bred in net-tanks at different densities. Current experiment was performed in the Corvos river, State of Paraná, Brazil, in two cycles: cycle A installed in August 2010 with 155 days, and cycle B, installed in February 2011 with 128 days. Twenty 6.8 m-3 (2.0 x 2.0 x 1.7 m) net-tanks were employed, using 6.0 m-3 and five densities (150, 175, 200, 225 and 250 fish/m-3), with four replications each. No significant difference was registered with regard to the prevalence of ectoparasites due to densities in the two experimental cycles. In the months of September to November cycle A displayed increase in the predominance of Trichodina and a decrease in the prevalence of Monogenoidea and mixed parasites. Further, an inverse relationship with a decrease in the prevalence of Trichodina and an increase in the prevalence of Monogenoidea and mixed parasites occurred during October and November. Trochodina prevalence occurred in October and November. Cycle B showed a significant difference in total prevalence of ectoparasites due to months. There was an increase in tricodinid infestation between March and June in proportion to increase of density and throughout the experiment. More care should be taken with regard to densities during the period. No positive result was...

Foram identificados a prevalência de ectoparasitos e o diagnóstico de bactérias em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) da variedade GIFT, criadas em tanques-rede, utilizando diferentes densidades. O experimento foi conduzido no Rio do Corvo, PR, em dois ciclos: ciclo A, implantado em agosto de 2010 com duração de 155 dias e ciclo B, implantado em fevereiro de 2011 com duração de 128 dias. Para cada ciclo foram instalados 20 tanques-rede de 6,8 m-3 (2,0 x 2,0 x 1,7 m), com 6,0 m-3 úteis, adotando cinco densidades (150, 175, 200, 225 e 250 peixes/m-3), com quatro repetições. Não houve diferença significativa na prevalência de ectoparasitos em relação às densidades nos dois ciclos de experimento. Observou-se no nos meses de setembro a novembro do ciclo A um aumento na prevalência de Trichodina e decréscimo na prevalência de Monogenoidea e parasitismo misto, nos meses de outubro e novembro observou-se uma relação inversa com uma diminuição na prevalência de Trichodina e aumento na prevalência de Monogenoidea e parasitismo misto. Os meses de outubro e novembro apresentaram a maior prevalência de Trichodina do ciclo A. No ciclo B ocorreu uma diferença significativa na prevalência total de ectoparasitos em relação aos meses. Em relação à categoria de infestação por tricodinídeos, nos meses de março a junho houve um aumento na medida em que aumentava-se a densidade e no decorrer...

Effects of a homeopathic complex on the performance and cortisol levels in Nile tilapia (Oreochromis niloticus).

BACKGROUND: Intensive fish farming results in stress adversely effecting the performance of farmed fish. Plasma cortisol is a validated measure of stress in fish. We evaluated the effect of a homeopathic complex on the cortisol level of Nile tilapias (Oreochromis niloticus). METHOD: 60 animals with approximate average weight of 100 g each at the start of experiment were randomly distributed in six glass fiber water tanks, capacity 1000 liters, with a daily water renewal rate of 20%. They received one of two treatments: 30 animals in control treatment and 30 animals receiving the homeopathic complex Homeopatila 100. On days 1, 30 and 60, all fish were anesthetized and blood was collected by puncture on the caudal vein, to determine the levels of circulating cortisol. RESULTS: At the end of the experiment the fish receiving a homeopathic complex, had significantly lower circulating cortisol level (17.96 ng/mL ± 0.95) than the control group (38.68 ng/mL ± 1.21) (p < 0.05). CONCLUSIONS: Cortisol levels were significantly lower in the treated group than control, and the fish were larger in the treated group.

Genetic diversity and paternity of Brycon orbignyanus offspring obtained for different reproductive systems / Diversidade genética e paternidade de progênies de Brycon orbignyanus obtidas por diferentes sistemas reprodutivos

The objective of this study was to estimate the genetic diversity and the paternity of Brycon orbignyanus offsprings obtained with the extrusion and semi-natural reproductive systems, by microsatellites markers. The four loci used produced 11 alleles, being observed three alleles (BoM1, BoM5 and BoM7) and two alleles (BoM2) for locus present in the parental and in the offspring of both reproductive systems. In the offspring of the extrusion system low frequency alleles was observed for the locus BoM5 (allele B = 0.095) and BoM7 (allele C = 0.059) and there was a decrease of genetic variability (observe heterozygosity-Ho = 0.900 and 0.823; Shannon index-IS = 0.937 and 0.886; Nei genetic diversity-DGN = 0.604 and 0.566, respectively). For the offspring of the semi-natural system the allele frequencies stayed stable being verified an unequal frequency for each locus. The genetic variability in the offspring was preserved, being corroborated by the Ho values (0.975 and 0.945), IS (0.927 and 0.924) and DGN (0.593 and 0.581) for parental and offspring, respectively. Deviations were observed (P 0.01) in the Hardy-Weinberg equilibrium and linkage disequilibrium for the two reproductive systems. The inbreeding coefficient (Fis) it showed deficit of heterozygote in the offspring of the extrusion system. Multiple paternity and differed reproductive contributions in the composition of the families in the offspring in the two reproductive systems was observed, with the presence of reproductive dominance in the semi-natural system.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar a diversidade genética e a paternidade de progênies de Brycon orbignyanus obtidas pelos sistemas reprodutivos por extrusão e seminatural, através do marcador microssatélite. Os quatro loci utilizados produziram 11 alelos, sendo observados três alelos (BoM1, BoM5 e BoM7) e dois alelos (BoM2) por locus presentes nos parentais e na progênie de ambos sistemas reprodutivos. Na progênie do sistema por extrusão foram observados alelos de baixa frequência para os locus BoM5 (alelo B = 0,095) e BoM7 (alelo C = 0,059) e houve uma diminuição da variabilidade genética (Heterozigosidade observada-Ho = 0,900 e 0,823; Índice de Shannon-IS = 0,937 e 0,886; diversidade genética de Nei-DGN = 0,604 e 0,566, respectivamente). Na progênie do sistema seminatural as frequências dos alelos se mantiveram estáveis, sendo verificada uma frequência desigual para cada locus. A variabilidade genética foi preservada, sendo corroborado pelos valores de Ho (0,975 e 0,945), IS (0,927 e 0,924) e DGN (0,593 e 0,581) para parentais e progênie, respectivamente. Observaram-se desvios (P 0.01) no equilíbrio de Hardy-Weinberg e desequilíbrio de ligação nos dois sistemas reprodutivos. O coeficiente de endogamia (Fis) mostrou déficit de heterozigotos na progênie do sistema por extrusão. Observou-se paternidade múltipla e contribuição reprodutiva diferenciada na composição das famílias na progênie nos dois sistemas reprodutivos, com a presença de dominância reprodutiva no sistema seminatural.(AU)

Genetic diversity and paternity of Brycon orbignyanus offspring obtained for different reproductive systems / Diversidade genética e paternidade de progênies de Brycon orbignyanus obtidas por diferentes sistemas reprodutivos

The objective of this study was to estimate the genetic diversity and the paternity of Brycon orbignyanus offsprings obtained with the extrusion and semi-natural reproductive systems, by microsatellites markers. The four loci used produced 11 alleles, being observed three alleles (BoM1, BoM5 and BoM7) and two alleles (BoM2) for locus present in the parental and in the offspring of both reproductive systems. In the offspring of the extrusion system low frequency alleles was observed for the locus BoM5 (allele B = 0.095) and BoM7 (allele C = 0.059) and there was a decrease of genetic variability (observe heterozygosity-Ho = 0.900 and 0.823; Shannon index-IS = 0.937 and 0.886; Nei genetic diversity-DGN = 0.604 and 0.566, respectively). For the offspring of the semi-natural system the allele frequencies stayed stable being verified an unequal frequency for each locus. The genetic variability in the offspring was preserved, being corroborated by the Ho values (0.975 and 0.945), IS (0.927 and 0.924) and DGN (0.593 and 0.581) for parental and offspring, respectively. Deviations were observed (P 0.01) in the Hardy-Weinberg equilibrium and linkage disequilibrium for the two reproductive systems. The inbreeding coefficient (Fis) it showed deficit of heterozygote in the offspring of the extrusion system. Multiple paternity and differed reproductive contributions in the composition of the families in the offspring in the two reproductive systems was observed, with the presence of reproductive dominance in the semi-natural system.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a diversidade genética e a paternidade de progênies de Brycon orbignyanus obtidas pelos sistemas reprodutivos por extrusão e seminatural, através do marcador microssatélite. Os quatro loci utilizados produziram 11 alelos, sendo observados três alelos (BoM1, BoM5 e BoM7) e dois alelos (BoM2) por locus presentes nos parentais e na progênie de ambos sistemas reprodutivos. Na progênie do sistema por extrusão foram observados alelos de baixa frequência para os locus BoM5 (alelo B = 0,095) e BoM7 (alelo C = 0,059) e houve uma diminuição da variabilidade genética (Heterozigosidade observada-Ho = 0,900 e 0,823; Índice de Shannon-IS = 0,937 e 0,886; diversidade genética de Nei-DGN = 0,604 e 0,566, respectivamente). Na progênie do sistema seminatural as frequências dos alelos se mantiveram estáveis, sendo verificada uma frequência desigual para cada locus. A variabilidade genética foi preservada, sendo corroborado pelos valores de Ho (0,975 e 0,945), IS (0,927 e 0,924) e DGN (0,593 e 0,581) para parentais e progênie, respectivamente. Observaram-se desvios (P 0.01) no equilíbrio de Hardy-Weinberg e desequilíbrio de ligação nos dois sistemas reprodutivos. O coeficiente de endogamia (Fis) mostrou déficit de heterozigotos na progênie do sistema por extrusão. Observou-se paternidade múltipla e contribuição reprodutiva diferenciada na composição das famílias na progênie nos dois sistemas reprodutivos, com a presença de dominância reprodutiva no sistema seminatural.

Morpho-functional response of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) to a homeopathic complex.

BACKGROUND: This study evaluated the performance, prevalence of ectoparasites and morpho-functional response of the liver and the branchiae of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) raised on fish meal with added of the homeopathic complex Homeopatila 100(®) at different concentrations. METHODS: Post-reversed juvenile Nile tilapia (O. niloticus) of the GIFT (Genetic Improvement of Farmed Tilapia) strain were used in this study. The performance, ectoparasite prevalence and parasite load in the branchiae and skin as well as the liver and branchial histology. Fish were randomly assigned to receive one of four treatments: control, 20 mL hydroalcoholic solution (alcohol 30° GL); 20 mL Homeopatila 100(®) per kg of meal; 40 mL Homeopatila 100(®) per kg of meal; or 60 mL of Homeopatila 100(®) per kg of meal, compared to control with out the addition of the complex. There were four replications per treatment type (16 experimental units total) at a density of 40 fish per m(3) over a period of 57 days. The Kruskal-Wallis H test (p < 0.05) was employed to analyse the physical and chemical parameters of water as well as for parasite prevalence; whereas analysis of variance was used for liver performance. If the values were significant (p < 0.05), they were compared by Tukey's test. Multiple comparisons of averages were performed using Student's t test (p < 0.05). RESULTS: There were no significant between the physical and chemical parameters of the water between the different groups at the end of the experiment. Significant differences (p < 0.05) in the mixed parasite conditions were found within the different Homeopatila 100(®) treatments. The hepatosomatic ratio of fish treated with Homeopatila 100(®) was significantly lower than that of fish from the control group. The best results in the liver and branchiae occurred in fish receiving Homeopatila 100(®) at 40 mL/kg in terms of the number of hepatocytes/mm(2), the intercellular glycogenic behaviour, the rates of histological changes (hyperplasia, lamella fusion and telangiectasia) and the percentage of neutral and acidic mucin-producing cells. CONCLUSION: The addition of Homeopatila 100(®) at a concentration 40 mL per kg/meal to the diet of juvenile Nile tilapias resulted in improved hepatocytes and intracellular glycogen levels as well as the lowest mean rate of branchial histological changes with an increase in acidic mucin-producing cells compared to neutral mucin-producing cells, compared to control.

Genetic diversity of Piaractus mesopotamicus (Characiformes: Characidae) broodstocks using in the restocking program of Tietê river, Brazil / Diversidade genética de estoques de Piaractus mesopotamicus (Characiformes, Characidae) utilizados no programa de repovoamento do rio Tietê, Brasil

The restocking programs are being used more frequently as methods of fish conservation. However, the reduction in the genetic diversity can affect survival of juveniles used in this programs and cause effects on the wild populations. The aim of this study was assess the genetic diversity in three broodstocks (BA, BB and BC) of pacu Piaractus mesopotamicus of a Hydropower plant in São Paulo - Brazil, using in restocking program of Tietê River. Nine RAPD primers were amplified used extracted DNA from 89 fin-clipping samples. Sixty-nine fragments were polymorphic, 15 had frequencies with significant differences (P<0.05), seven were excluded, and six were fixed fragments. High values for polymorphic fragments (47.83% to 71.01%) and Shannon index (0.270 to 0.424) were observed. Most of the genetic variation was found within the groups through the AMOVA analysis, which was confirmed by the results of the identity and genetic distance. Ancestry levels (FST) among the groups values indicated little and moderate genetic differentiation. The estimate of number of migrants by generation (Nm) indicated levels of gene flow. Moderate genetic divergence between groups (0.214 to 0.259) was observed. The results indicate high (BA and BB) and moderate (BC) variability within broodstocks and genetic differentiation among them. The fish stocks analyzed represent a genetic base that will allow the fish technicians to release juveniles without genetic risks to wild populations present in the river. These genetics procedures can be used as models for other migratory species.

Os programas de repovoamento estão sendo usados com mais frequência como métodos de conservação de peixes. No entanto, a redução na diversidade genética pode afetar a sobrevivência dos juvenis usados nesses programas e causar efeitos sobre as populações selvagens. O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade genética de três estoques de reprodutores (BA, BB e BC) de pacu Piaractus mesopotamicus de uma hidrelétrica em São Paulo - Brasil, do programa de repovoamento do rio Tietê. Nove iniciadores RAPD amplificaram-se usando DNA extraído de 89 amostras de nadadeira. Sessenta e nove fragmentos foram polimórficos, 15 tiveram frequências com diferenças significativas (P<0.05), sete foram excluídos e seis foram fragmentos limitantes. Observaram-se altos valores de fragmentos polimórficos (47,83% a 71,01%) e de índice de Shannon. A maior variação genética observou-se dentro dos grupos através da análise de AMOVA, sendo confirmado com os resultados de identidade e distância genética. Os níveis de FST entre os grupos indicaram pequena e moderada diferenciação genética. O número de migrantes por geração (Nm) indicou níveis de fluxo gênico. Observou-se moderada divergência genética entre grupos (0,214 a 0,259). Os resultados indicaram alta (BA e BB) e moderada (BC) variabilidade dentro dos estoques e diferenciação genética entre eles. Os estoques de peixes analisados representam uma base genética que permitirá aos produtores liberar juvenis sem riscos genéticos para as populações naturais presentes no rio. Esses procedimentos genéticos podem ser utilizados como modelos para outras espécies migradoras.

Diversidade genética de Salminus brasiliensis (Characiformes: Characidae) coletados na escada de transposição da Hidrelétrica de Canoas I, rio Paranapanema, Brasil / Genetic diversity of Salminus brasiliensis (Characiformes: Characidae) collected in the passage ladder of the Canoas I hydropower plant in the Paranapanema River, Brazil

O objetivo do presente estudo foi avaliar a diversidade genética de Salminus brasiliensis coletados em três períodos diferentes na escada de transposição da hidrelétrica de Canoas I no rio Paranapanema (Brasil). Os peixes foram coletados no dia 14 (CI14), 18 (CI18) e 25 (CI25) do mês de fevereiro de 2008. Foram avaliados oito iniciadores com a técnica de RAPD. Dos 105 fragmentos amplificados pelos iniciadores, 79 foram polimórficos (75,2%), 32 tiveram diferenças significativas (p 0,05) na frequência, 10 fragmentos tiveram baixa frequência, 25 fragmentos foram excluídos e quatro fragmentos foram fixados. Um fragmento exclusivo foi encontrado em CI14. Observaram-se altos valores de porcentagem de fragmentos polimórficos e índice de diversidade genética de Shannon em CI14 e CI18. O valor de Fst mostrou que existe uma baixa ancestralidade entre os agrupamentos sugerindo uma alta diferenciação genética entre os grupos amostrados. O valor de número de migrantes por geração (Nm) calculado foi baixo nos três grupos, sendo considerado como baixa presença de fluxo gênico. De acordo com a AMOVA, a maior parte da variação genética está dentro de cada grupo e não entre os grupos, sendo confirmado com as estimativas da identidade e da distância genética. Os resultados deste estudo indicam que existe uma alta variabilidade genética e diferenciação genética entre os grupos amostrados.

The aim of this study was to evaluate the genetic diversity of Salminus brasiliensis collected three times in the passage ladder of the hydropower plant Canoas I, in the Paranapanema River (Brazil). Fish samples were collected on 14 (CI14), 18 (CI18) and 25 (CI25) February 2008. Eight primers using RAPD technique were evaluated. Seventy-nine in 105 fragments amplified using these primers were polymorphic fragments (75.2%), 32 had frequencies with significant differences (P 0.05), 10 had low frequencies, 25 were excluded, and four were fixed fragments. One exclusive fragment was found in the CI14 sample. High values for polymorphic fragments and genetic diversity index of Shannon were observed for the CI14 and CI18. Low ancestry levels among the groups were indicated by the FST values that indicated high genetic differentiation. In all the three groups, the estimates of the number of migrants by generation (Nm) indicated low levels of gene flow. Most of the genetic variation was found within the groups through the AMOVA analysis, which was confirmed by the results of the identity and genetic distance. The results indicate high variability within the groups and genetic differentiation among them.

Diversidade genética de Salminus brasiliensis (Characiformes: Characidae) coletados na escada de transposição da Hidrelétrica de Canoas I, rio Paranapanema, Brasil / Genetic diversity of Salminus brasiliensis (Characiformes: Characidae) collected in the passage ladder of the Canoas I hydropower plant in the Paranapanema River, Brazil

O objetivo do presente estudo foi avaliar a diversidade genética de Salminus brasiliensis coletados em três períodos diferentes na escada de transposição da hidrelétrica de Canoas I no rio Paranapanema (Brasil). Os peixes foram coletados no dia 14 (CI14), 18 (CI18) e 25 (CI25) do mês de fevereiro de 2008. Foram avaliados oito iniciadores com a técnica de RAPD. Dos 105 fragmentos amplificados pelos iniciadores, 79 foram polimórficos (75,2%), 32 tiveram diferenças significativas (p 0,05) na frequência, 10 fragmentos tiveram baixa frequência, 25 fragmentos foram excluídos e quatro fragmentos foram fixados. Um fragmento exclusivo foi encontrado em CI14. Observaram-se altos valores de porcentagem de fragmentos polimórficos e índice de diversidade genética de Shannon em CI14 e CI18. O valor de Fst mostrou que existe uma baixa ancestralidade entre os agrupamentos sugerindo uma alta diferenciação genética entre os grupos amostrados. O valor de número de migrantes por geração (Nm) calculado foi baixo nos três grupos, sendo considerado como baixa presença de fluxo gênico. De acordo com a AMOVA, a maior parte da variação genética está dentro de cada grupo e não entre os grupos, sendo confirmado com as estimativas da identidade e da distância genética. Os resultados deste estudo indicam que existe uma alta variabilidade genética e diferenciação genética entre os grupos amostrados.

The aim of this study was to evaluate the genetic diversity of Salminus brasiliensis collected three times in the passage ladder of the hydropower plant Canoas I, in the Paranapanema River (Brazil). Fish samples were collected on 14 (CI14), 18 (CI18) and 25 (CI25) February 2008. Eight primers using RAPD technique were evaluated. Seventy-nine in 105 fragments amplified using these primers were polymorphic fragments (75.2%), 32 had frequencies with significant differences (P 0.05), 10 had low frequencies, 25 were excluded, and four were fixed fragments. One exclusive fragment was found in the CI14 sample. High values for polymorphic fragments and genetic diversity index of Shannon were observed for the CI14 and CI18. Low ancestry levels among the groups were indicated by the FST values that indicated high genetic differentiation. In all the three groups, the estimates of the number of migrants by generation (Nm) indicated low levels of gene flow. Most of the genetic variation was found within the groups through the AMOVA analysis, which was confirmed by the results of the identity and genetic distance. The results indicate high variability within the groups and genetic differentiation among them.