Deteccao da infecçäo pelo virus da artrite - encefalite caprina: imunodifusao em agar e reacao em cadeia da polimerase com primers degenerados / Detection of caprine arthritis-encephalitis virus infection: agar gel immunodiffusion and polymerase chain reaction with degenerated primers

O objetivo deste trabalho foi analisar amostras de soro e de células sangüíneas de caprinos para detecçäo de anticorpos e DNA proviral do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV), respectivamente. Utilizou-se a técnica de imunodifusäo em ágar (AGID) e a reaçäo em cadeia da polimerase (PCR) com "primers" degenerados. Foram analisadas amostras de diferentes procedências: 39 de Mato Grosso do Sul (MS), 19 de Säo Paulo (SP) e 22 do Ceará (CE), dessas últimas, 12 oriundas de animais importados do Canadá. Os resultados de AGID e PCR foram discordantes, pois o primeiro permitiu a detecçäo de 25 animais soropositivos, enquanto a PCR detectou DNA proviral de CAEV em 16 amostras. Pela PCR foi possível identificar animais infectados cujos testes sorológicos foram negativos pela AGID: oito amostras do MS e um do CE. Säo discutidos diferentes aspectos que poderiam estar envolvidos na discordância dos resultados

Detecção da infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina: imunodifusão em ágar e reação em cadeia da polimerase com "primers" degenerados

The purpose of this work was to analyse serum and blood cells from caprine origin to detect antibody and proviral DNA of caprine arthritis encephalitis virus (CAEV), respectively. Agar gel immunodiffusion (AGID) and polymerase chain reaction (PCR) with degenerated primers were used. Samples of different geographical regions were analysed: 39 from Mato Grosso do Sul (MS), 19 from São Paulo (SP), 22 from Ceará (CE) including 10 from Canada (imported animals), providing a total of 80 samples. The results obtained by AGID and PCR were discordants, as 25 samples were detected as seropositive, while 16 infected animals were detected by PCR. On the other hand, PCR allowed the identification of infected animals that did not have detectable antibodies by AGID: eight samples from MS and one from CE. Different aspects related to these discordant results are discussed.

O objetivo deste trabalho foi analisar amostras de soro e de células sangüíneas de caprinos para detecção de anticorpos e DNA proviral do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV), respectivamente. Utilizou-se a técnica de imunodifusão em ágar (AGID) e a reação em cadeia da polimerase (PCR) com "primers" degenerados. Foram analisadas amostras de diferentes procedências: 39 de Mato Grosso do Sul (MS), 19 de São Paulo (SP) e 22 do Ceará (CE), dessas últimas, 12 oriundas de animais importados do Canadá. Os resultados de AGID e PCR foram discordantes, pois o primeiro permitiu a detecção de 25 animais soropositivos, enquanto a PCR detectou DNA proviral de CAEV em 16 amostras. Pela PCR foi possível identificar animais infectados cujos testes sorológicos foram negativos pelo AGID: oito amostras do MS e um do CE. São discutidos diferentes aspectos que poderiam estar envolvidos na discordância dos resultados.

Clinical, pathological and antigenic aspects of bovine viral diarrhea virus (BVDV) type 2 isolates identified in Brazil.

Nucleotide sequencing and phylogenetic analysis of Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) field isolates identified four viruses belonging to the genotype 2. Comparison of 5' UTR sequences from these isolates to those of North American BVDV type 2 revealed genomic variations that correlated with the geographic origins of the isolates. Two of the Brazilian type 2 viruses were isolated from clinical cases of gastroenteric/respiratory disease and two were isolated from healthy bovine fetuses. The clinical cases affected young animals (8- and 18-months-old) and were characterized by diarrhea, respiratory signs, extensive oral and digestive tract erosions, conjunctival and vulvar congestion, occasional digestive bleeding and vulvar and heart petechial hemorrhage. Antigenic analysis of these isolates with a panel of 10 monoclonal antibodies revealed marked antigenic differences in the major envelope glycoprotein, gp53/E2, compared to standard laboratory and vaccine BVDV strains. In addition, virus-specific antisera raised to Brazilian BVDV type 2 viruses displayed very low serological cross-reactivity with standard BVDV type 1 strains. Differences up to 64-fold in cross-neutralization titers were observed between BVDV type 1 and Brazilian BVDV type 2 isolates. The identification of BVDV type 2 among Brazilian cattle may have important implications for epidemiological studies, diagnostic and immunization strategies. Furthermore, the low neutralizing activity of BVDV type 1 antisera against the recently identified Brazilian BVDV type 2 isolates raises the question about the degree of protection conferred by BVDV vaccines, most of them based on a single type 1 strain.