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Nature ; 518(7539): 376-80, 2015 Feb 19.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-25652824

RESUMO

The conserved co-activator complex Mediator enables regulated transcription initiation by RNA polymerase (Pol) II. Here we reconstitute an active 15-subunit core Mediator (cMed) comprising all essential Mediator subunits from Saccharomyces cerevisiae. The cryo-electron microscopic structure of cMed bound to a core initiation complex was determined at 9.7 Å resolution. cMed binds Pol II around the Rpb4-Rpb7 stalk near the carboxy-terminal domain (CTD). The Mediator head module binds the Pol II dock and the TFIIB ribbon and stabilizes the initiation complex. The Mediator middle module extends to the Pol II foot with a 'plank' that may influence polymerase conformation. The Mediator subunit Med14 forms a 'beam' between the head and middle modules and connects to the tail module that is predicted to bind transcription activators located on upstream DNA. The Mediator 'arm' and 'hook' domains contribute to a 'cradle' that may position the CTD and TFIIH kinase to stimulate Pol II phosphorylation.


Assuntos
Microscopia Crioeletrônica , Complexo Mediador/química , Complexo Mediador/ultraestrutura , RNA Polimerase II/química , RNA Polimerase II/ultraestrutura , Saccharomyces cerevisiae/química , Saccharomyces cerevisiae/ultraestrutura , Regulação Alostérica , Sítios de Ligação , DNA/química , DNA/metabolismo , Ativação Enzimática , Complexo Mediador/metabolismo , Modelos Moleculares , Fosforilação , Estabilidade Proteica , Estrutura Terciária de Proteína , Subunidades Proteicas/química , Subunidades Proteicas/metabolismo , RNA Polimerase II/metabolismo , Proteínas de Saccharomyces cerevisiae/química , Proteínas de Saccharomyces cerevisiae/metabolismo , Proteínas de Saccharomyces cerevisiae/ultraestrutura , Fator de Transcrição TFIIB/química , Fator de Transcrição TFIIB/metabolismo , Fator de Transcrição TFIIH/química , Fator de Transcrição TFIIH/metabolismo , Iniciação da Transcrição Genética
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