RESUMO
Careful examination of occurrence of mixed mycobacterial cultures is important because most of them include at least one pathogenic agent. Among 8, 036 mycobacterial cultures samples received between 1999 and 2000 at the Mycobacteria Laboratory of Instituto Adolfo Lutz, 21 (0.26%) classified as mixed cultures were selected for being investigated. For this, the use of 7H11 plate was included for colonies isolation. The isolated colonies were then subcultured into Lowenstein-Jensen media and incubated at 37ºC. The isolates were identified by phenotypic tests and by PCR restriction enzyme analysis of hsp65 gene. The analysis of those 21 mixed cultures showed the occurrence of M. tuberculosis and non-tuberculous mycobacteria (NTM) in eight samples, three cultures with two species of NTM , and ten with only one specie of mycobacteria. The results of this study suggest that microbiology technicians should be aware of mixed cultures and apply every practical method available to separate and to identify the involved mycobacteria species.
A investigação de culturas mistas de micobactérias é importante pois geralmente estas incluem ao menos uma espécie patogênica ou potencialmente patogênica. Dentre 8.036 culturas recebidas entre 1999 e 2000, pelo Setor de Micobactérias do Instituto Adolfo Lutz, foram selecionadas 21 (0,26%) com resultados sugestivos de culturas mistas. Após o isolamento em meio 7H11 as colônias foram repicadas em Löwenstein Jensen e incubadas à 37º C. A identificação dos 32 subcultivos foi feita por métodos fenotípicos e pela analise do perfil de restrição do produto da amplificação de 440 pares de base do gene hsp65. Em oito subcultivos foi encontrada a espécie M. tuberculosis associada com MNT, em 3 subcultivos foram encontradas 2 espécies de MNT e nos demais foi identificado apenas um tipo de micobacteria. O tempo de crescimento lento das micobactérias inviabiliza o plaqueamento de todas as culturas pois este procedimento acarretaria demora na liberação do resultado final dos testes, além de representar gastos excessivos em áreas endêmicas, geralmente com escassos recursos econômicos. Embora as dificuldades mencionadas, os microbiologistas devem estar atentos quanto à presença de culturas mistas de micobactérias e usar todos os métodos disponíveis para separar e identificar as espécies.