Usefulness of a murine model of hepatic cystic echinococcosis for preclinical drug trials: efficacy of albendazole vs albendazole nanocrystals.

Cystic echinococcosis is a zoonotic infection caused by the larval stage of Echinococcus granulosus sensu lato. The disease is characterized by the long-term growth of cysts, most commonly in the liver and lungs. Although an ideal model of cystic echinococcosis should induce the development of cysts in the liver and imitate the natural infection route, the murine model of intraperitoneal is still widely used in the field of experimental theraphy. The aim of the present work was to evaluate the usefulness of the murine model of hepatic CE for preclinical drug trials. The effectiveness of albendazole could also be assessed by measuring the diameter of the hepatic cyst. The albendazole significantly reduced the size of the cysts. The ultrastructural alterations of the germinal layer of hepatic cysts provoked by albendazole coincided with those observed in the intraperitoneal model. Similar results were obtained with both albendazole doses. Therefore, the efficacy of albendazole nanocrystals in the murine model of hepatic cystic echinococcosis was carried out at albendazole doses of 25 mg/kg. The abdominal ultrasound allows us to assess the response of cysts to drugs only in a qualitative manner. Although the size of cysts in the albendazole nanocrystal group was not significantly lower than that observed with albendazole, at the ultrastructural level, a greater extent of damage was observed. The murine model of hepatic cystic echinococcosis can be effectively used for assessing the effect of novel formulations or compounds. The main advantage of this model is that cysts are located in the orthotopic organ, which resembles the location most commonly found in human cases. In future studies, the usefulness of the model for pharmacokinetics studies in hepatic cysts will be evaluated.

In vivo tumor growth inhibition by Solanum tuberosum aspartic protease 3 (StAP3) treatment.

Solanum tuberosum aspartic Proteases (StAPs) show selective plasma membrane permeabilization, inducing cytotoxicity of cancer cells versus normal cells in vitro. Herein, we aimed to evaluate both StAP3 systemic toxicity and antitumoral activity against human melanoma in vivo. The toxicity of a single high dose of StAP3 (10 µg/g body weight, intraperitoneally) was assessed in a Balb/c mice model. Subcutaneous A375 human melanoma xenografts in athymic nude (nu/nu) mice were induced. Once tumors developed (mean larger dimension = 3.8 ± 0.09 mm), mice were StAP3-treated (6 µg/g body weight, subcutaneously under the tumor at a single dose). For both models, controls were treated with physiologic saline solution. StAP3-treated mice showed a significant inhibition of tumor growth (p < 0.05) compared with controls. No signs of toxicity were detected in StAP3-treated mice in both models. These results suggest the potential of these plant proteases as anticancer agents.

Correction: Metformin exhibits preventive and therapeutic efficacy against experimental cystic echinococcosis.

[This corrects the article DOI: 10.1371/journal.pntd.0005370.].

Metformin exhibits preventive and therapeutic efficacy against experimental cystic echinococcosis.

Metformin (Met) is an anti-hyperglycemic and potential anti-cancer agent which may exert its anti-proliferative effects via the induction of energetic stress. In this study we investigated the in vitro and in vivo efficacy of Met against the larval stage of Echinococcus granulosus. Metformin showed significant dose- and time-dependent killing effects on in vitro cultured protoscoleces and metacestodes. Notably, the combination of Met together with the minimum effective concentration of ABZSO had a synergistic effect after days 3 and 12 on metacestodes and protoscoleces, respectively. Oral administration of Met (50 mg/kg/day) in E. granulosus-infected mice was highly effective in reducing the weight and number of parasite cysts, yet its combination with the lowest recommended dose of ABZ (5 mg/kg/day) was even more effective. Coincidentally, intracystic Met accumulation was higher in animals treated with both drugs compared to those administered Met alone. Furthermore, the safe plant-derived drug Met exhibited remarkable chemopreventive properties against secondary hydatidosis in mice. In conclusion, based on our experimental data, Met emerges as a promising anti-echinococcal drug as it has proven to efficiently inhibit the development and growth of the E. granulosus larval stage and its combination with ABZ may improve the current anti-parasitic therapy.

[Oncogenic osteomalacia. Report of two cases]. / Osteomalacia oncogénica. Presentación de dos casos.

Oncogenic osteomalacia is a rare disease. It is caused by a tumor that produces fibroblast growth factor 23, a hormone that decreases the tubular phosphate reabsorption and impairs renal hydroxylation of vitamin D. This leads to hyperphosphaturia with hypophosphatemia and low calcitriol levels. About 337 cases have been reported and we studied two cases; 44 and 70 year-old men who sought medical attention complaining of suffering diffuse bone pain over a period of approximately one year. In both cases, a laboratory test showed biochemical alterations compatible with a hypophosphatemic osteomalacia. In the first case, a soft tissue tumor of the right foot was removed, one year after the diagnosis. The patient was allowed to diminish the phosphate intake, but symptoms reappeared at this time. Eight years later, a local recurrence of the tumor was noted. A complete excision was now performed. The patient was able to finally interrupt the phosphate intake. In the second case, an F-18 fluorodeoxyglucose positron emission tomography, with computed tomography revealed a 2.26 cm diameter hypermetabolic nodule in the soft tissue of the right forefoot. After its removal, the patient discontinued the phosphate intake. Both patients are asymptomatic and show a regular phosphocalcic laboratory evaluation. The histopathological diagnosis was, in both cases, a phosphaturic mesenchymal tumor, a mixed connective tissue variant. This is the prototypical variant of these tumors.

Osteomalacia oncogénica. Presentación de dos casos. / [Oncogenic osteomalacia. Report of two cases].

Oncogenic osteomalacia is a rare disease. It is caused by a tumor that produces fibroblast growth factor 23, a hormone that decreases the tubular phosphate reabsorption and impairs renal hydroxylation of vitamin D. This leads to hyperphosphaturia with hypophosphatemia and low calcitriol levels. About 337 cases have been reported and we studied two cases; 44 and 70 year-old men who sought medical attention complaining of suffering diffuse bone pain over a period of approximately one year. In both cases, a laboratory test showed biochemical alterations compatible with a hypophosphatemic osteomalacia. In the first case, a soft tissue tumor of the right foot was removed, one year after the diagnosis. The patient was allowed to diminish the phosphate intake, but symptoms reappeared at this time. Eight years later, a local recurrence of the tumor was noted. A complete excision was now performed. The patient was able to finally interrupt the phosphate intake. In the second case, an F-18 fluorodeoxyglucose positron emission tomography, with computed tomography revealed a 2.26 cm diameter hypermetabolic nodule in the soft tissue of the right forefoot. After its removal, the patient discontinued the phosphate intake. Both patients are asymptomatic and show a regular phosphocalcic laboratory evaluation. The histopathological diagnosis was, in both cases, a phosphaturic mesenchymal tumor, a mixed connective tissue variant. This is the prototypical variant of these tumors.

Angioma serpiginoso / angioma serpiginosum

El angioma serpiginoso (AS) es un desorden vascularadquirido poco frecuente. Actualmente es consideradocomo una malformación vascular o una neoplasia benignacon diferenciación endotelial.Clínicamente se caracteriza por múltiples y diminutasmáculas puntiformes de color rojo purpúrico que se disponenadoptando un patrón serpiginoso.El diagnóstico se realiza por el patrón clínico y el estudiohistopatológico.El tratamiento ideal es la terapia con láser. El láser de colorantepulsado se ha utilizado con excelentes resultados...

Angioma serpiginosum is an uncommon acquired vasculardisorder. It is clasified as a vascular malformation or abenign neoplasm with endothelial cell proliferation.Clinically, the lesion is characterized by multiple,minute, red to purple macules that adopt serpiginouspatterns.The diagnosis must be made by its clinical and histopathologicalfeatures.Vascular dye lasers are the best treatment option. Excellentresults have been reported with the use of pulseddyelaser...

Programa nacional de diagnóstico de la sobreexposición de HER2 en pacientes con cáncer de mama / National program for the diagnosis of HER2 overexpression in breast cancer patients

Introducción: Por medio de la realización del testeo de la sobreexpresión y/o amplificación de HER2 los médicos pueden seleccionar adecuadamente a las pacientes que se beneficiarán de la terapia anti HER2. En Argentina, antes de 2003 sólo pocos patólogos realizaban la prueba de HER2 utilizando métodos no estandarizados de inmunohistoquímica (IHQ) con resultados dudosos y no reproducibles y además existiendo algunas partes del país sin posibilidades de diagnóstico. Objetivo: Generar un Programa Nacional de Detección de la sobreexpresión de HER2 que permita el acceso al diagnóstico en todo el país, mediante una técnica estandarizada y validada. Integrar un equipo de patólogos entrenados en IHC, que pudieran satisfacer las demandas realizando en forma rápida y fidedigna la detección de la sobreexpresión de HER2. Materiales y método: En agosto de 2003 se formó una red de trece patólogos; dentro del grupo se designó un coordinador, responsable del entrenamiento y la evaluación de los centros participantes, y dos consultores técnicos a cargo del control de calidad (interno y externo) y la estandarización de la técnica. Desde febrero de 2004 hasta diciembre de 2010 se realizaron las determinaciones de la sobreexpresión de HER2 mediante la técnica de IHC, con un anticuerpo policlonal anti HER2 (Dako), recuperación antigénica en microondas, sistema de detección EnVision (Dako) y revelado con diaminobenzidina. Para interpretar los resultados se usó el score de 0 a 3+, considerándose positivos tumores que muestren intensidad moderada (2+) o intensa (3+) en toda la membrana celular, en más del 30% de las células evaluadas. Resultados: Se realizaron 34.640 casos (Figura 5). Conclusiones: La formación del Programa Nacional de HER2 permitió el acceso al test de HER2 en todo el país con una técnica estandarizada y reproducible en todos los centros participantes. La prevalencia de HER2 en nuestra muestra fue del 13,2% (4.573) y similar a las publicadas en otras poblaciones.

Histoplasmosis diseminada / Disseminated histoplasmosis

La histoplasmosis clásica es una micosis sistémica causada por el hongo dimorfo Histoplasma capsulatum var. Capsulatum. Es una enfermedad endémica, mundialmente distribuida con fuerte predominio en América. Presenta un amplio espectro de manifestaciones clínicas. Las formas diseminadas se observan en pacientes con distintos tipos de inmunodeficiencias, particularmente sujetos con SIDA. La certeza diagnóstica se basa en el cultivo del material de biopsia en medios apropiados. La observación microscópica del organismo en escarificaciones de lesiones cutáneo-mucosas permite ver las levaduras intracelulares. El tratamiento inicial se efectúa con anfotericina B IV o con itraconazol vía oral. La tendencia actual en el tratamiento inicial de la histoplasmosis diseminada es la anfotericina B liposomal. El itraconazol VO es además la droga de elección para la profilaxis 2º en pacientes HIV positivos. Presentamos el caso de una paciente HIV seropositivo con manifestaciones cutáneo-mucosas de histoplasmosis diseminada.

Correlation of immunocytochemical and immunohistochemical determination of estrogen and progesterone receptors in breast cancer.

OBJECTIVE: To evaluate prospectively the degree of correlation between immunocytochemical (ICC) and immunohistochemical (IHC) determination of estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) in breast cancer. STUDY DESIGN: Fine needle aspiration cytology (FNAC) of 101 primary breast cancers were immunostained for ER and PR. They were compared with similar determinations in formalin-fixed paraffin sections of biopsies from the same patients. In cases of discrepancy, the histologic result was considered the gold standard. RESULTS: For ER a cytohistologic correlation of 94%, with a sensitivity of 96.1% and specificity of 86.9%, was found. For PR the cytohistologic correlation was 71.2%, with a sensitivity of 65.7% and specificity of 83.8%. CONCLUSION: ICC determination of hormone receptors in routinely fixed smears obtained by FNAC is a simple method that correlates adequately with the results of IHC determinations, especially for ER.

Expresion de p53 y de bcl-2 en adenomas y carcinomas colorrectales / Expression of p53 and bcl-2 in colorectal adenomas and carcinomas

Trabajos recientes han asociado a los genes p53 y bcl-2 en el proceso de la transformación neoplásica. Dado que la secuencia adenoma-carcinoma en el colon y recto es un buen modelo natural de carcinogénesis, consideramos de interes analizar la expresión de bcl-2 y de p53 en estas neoplasias. Se estudiaron 73 pólipos adenomatosos (adenomas) y 60 adenocarcinomas de colon y recto. De los adenomas 16 tenían displasia leve, 27 moderada, 15 severa y en 15 había carcinoma focal. Todos los adenocarcinomas sobrepasaban la muscular propia y eran moderadamente diferenciados. La expresión de los genes se analizó por inmunohistoquímica utilizando al anticuerpo bcl-2 de Dako y el anticuerpo p53 de Novocastra. Los resultados mostraron que hubo acumulación de proteína p53 en 34/73 (46 por ciento)del total de los adenomas y en 47/60 (78 por ciento) de los adenocarcinomas ( p= 0,0001). El conjunto de adenomas con displasia mostró una reactividad de 26/58 (45 por ciento), similar a 8/15 (53 por ciento, p = 0,4) de los adenomas con carcinoma focal, aunque diferente a la de los adenocarcinomas, 47/60 (78 por ciento, p = 0,0001). Con referencia al bcl-2, 53/73 (73 por ciento) del total de los adenomas lo expresaban mientras que en los adenocarciomas la expresión se observó en 14/60 (23 por ciento, p = 0,0000). En los adenomas sin carcinoma se encontró una expresión de 47/58 (81 por ciento) que comparada con la observada en los adenomas con carcinoma focal, 6/15 (40 por ciento), y con adenocarcinoma, 14/60 (23 por ciento), mostraron diferencias estadísticamente significativas (p = 0,001 y p + 0,0000 respectivamente). Cuando se analizó la frecuencia de expresión de los dos genes estudiados en las diferentes neoplasias se observó entre ellos una relación inversa. Este trabajo permite concluir que la expresión de bcl-2 es un evento temprano en la carcinogénesis y que es reemplazado por la mutación de p53 al progresar la neoplasia.

Expresion de p53 y de bcl-2 en adenomas y carcinomas colorrectales / Expression of p53 and bcl-2 in colorectal adenomas and carcinomas

Trabajos recientes han asociado a los genes p53 y bcl-2 en el proceso de la transformación neoplásica. Dado que la secuencia adenoma-carcinoma en el colon y recto es un buen modelo natural de carcinogénesis, consideramos de interes analizar la expresión de bcl-2 y de p53 en estas neoplasias. Se estudiaron 73 pólipos adenomatosos (adenomas) y 60 adenocarcinomas de colon y recto. De los adenomas 16 tenían displasia leve, 27 moderada, 15 severa y en 15 había carcinoma focal. Todos los adenocarcinomas sobrepasaban la muscular propia y eran moderadamente diferenciados. La expresión de los genes se analizó por inmunohistoquímica utilizando al anticuerpo bcl-2 de Dako y el anticuerpo p53 de Novocastra. Los resultados mostraron que hubo acumulación de proteína p53 en 34/73 (46 por ciento)del total de los adenomas y en 47/60 (78 por ciento) de los adenocarcinomas ( p= 0,0001). El conjunto de adenomas con displasia mostró una reactividad de 26/58 (45 por ciento), similar a 8/15 (53 por ciento, p = 0,4) de los adenomas con carcinoma focal, aunque diferente a la de los adenocarcinomas, 47/60 (78 por ciento, p = 0,0001). Con referencia al bcl-2, 53/73 (73 por ciento) del total de los adenomas lo expresaban mientras que en los adenocarciomas la expresión se observó en 14/60 (23 por ciento, p = 0,0000). En los adenomas sin carcinoma se encontró una expresión de 47/58 (81 por ciento) que comparada con la observada en los adenomas con carcinoma focal, 6/15 (40 por ciento), y con adenocarcinoma, 14/60 (23 por ciento), mostraron diferencias estadísticamente significativas (p = 0,001 y p + 0,0000 respectivamente). Cuando se analizó la frecuencia de expresión de los dos genes estudiados en las diferentes neoplasias se observó entre ellos una relación inversa. Este trabajo permite concluir que la expresión de bcl-2 es un evento temprano en la carcinogénesis y que es reemplazado por la mutación de p53 al progresar la neoplasia. (AU)

Reproducibilidad del grado nuclear en el cáncer de mama: una experiencia multicéntrica / Reproducibility of nuclear grade in breast neoplasm: a multicenter experience

El grado nuclear es considerado uno de los elementos de valor pronóstico en el carcinoma de mama. Resulta de interés verificar cuál es el grado de reproducibilidad de los patólogos generales al consignar el grado nuclear considerando que la mayor parte de los estudios anatomopatológicos de los carcinomas de mama los realizan patólogos "no expertos". Para ello se tomó una serie de 15 carcinomas de mama de los cuales 10 fueron seleccionados al azar y 5 por su particular dificultad para clasificar el grado nuclear. Diez patólogos generales trabajando en forma separada examinaron los casos y les asignaron el grado nuclear. Se hizo una primera asignación de acuerdo al criterio que cada observador utilizaba habitualmente para sus informes y una segunda siguiendo a una guía escrita. e estudiaron los datos por medio del análisis de la varianza. Los resultados mostraron que tanto para los casos seleccionados al azar como para la serie total no hubo diferencias significativas entre los observadores. La guía escrita, sorprendentemente, en lugar de disminuir las diferencias las aumentó. Un análisis del comportamiento individual de los observadores permitió detectar que dos de ellos tenían una gran variación entre ambas asignaciones, lo que se consideró como una influencia determinante para los resultados de todo el grupo. Cuando se analizó la diferencia interobservador para discriminar los tumores de alto grado (G3) del resto, se observó una buena reproducibilidad en todo el grupo participante. Estos resultados nos permiten concluir que, en esta serie examinada por patólogos generales, se obtuvo una aceptable reproducibilidad, en especial cuando se trató de identificar a los tumores con mayor riesgo.

Reproducibilidad del grado nuclear en el cáncer de mama: una experiencia multicéntrica / Reproducibility of nuclear grade in breast neoplasm: a multicenter experience

El grado nuclear es considerado uno de los elementos de valor pronóstico en el carcinoma de mama. Resulta de interés verificar cuál es el grado de reproducibilidad de los patólogos generales al consignar el grado nuclear considerando que la mayor parte de los estudios anatomopatológicos de los carcinomas de mama los realizan patólogos "no expertos". Para ello se tomó una serie de 15 carcinomas de mama de los cuales 10 fueron seleccionados al azar y 5 por su particular dificultad para clasificar el grado nuclear. Diez patólogos generales trabajando en forma separada examinaron los casos y les asignaron el grado nuclear. Se hizo una primera asignación de acuerdo al criterio que cada observador utilizaba habitualmente para sus informes y una segunda siguiendo a una guía escrita. e estudiaron los datos por medio del análisis de la varianza. Los resultados mostraron que tanto para los casos seleccionados al azar como para la serie total no hubo diferencias significativas entre los observadores. La guía escrita, sorprendentemente, en lugar de disminuir las diferencias las aumentó. Un análisis del comportamiento individual de los observadores permitió detectar que dos de ellos tenían una gran variación entre ambas asignaciones, lo que se consideró como una influencia determinante para los resultados de todo el grupo. Cuando se analizó la diferencia interobservador para discriminar los tumores de alto grado (G3) del resto, se observó una buena reproducibilidad en todo el grupo participante. Estos resultados nos permiten concluir que, en esta serie examinada por patólogos generales, se obtuvo una aceptable reproducibilidad, en especial cuando se trató de identificar a los tumores con mayor riesgo. (AU)

Chronic myocardial damage in experimental T. cruzi infection of a new world primate, Cebus sp. monkey

Dezoito macacos Cebus apella (jovens e adultos de ambos os sexos) foram inoculados há 5 anos atrás, com 3 cepas de T. cruzi (CA1, n=10; Colombiana, n=4 e Tulahuen, n=4) seja por via conjuntiva ou intraperitonial, uma única vez ou repetidamente. Os achados parasitológicos, hematológicos, sorológicos, enzimáticos, radiográficos, eletro e ecocardiográficos foram anteriormente publicados e säo semelhantes aqueles vistos no homem. O achado eletrocardiográfico mais freqüente foi o bloqueio do ramo direito. Seis animais, escolhidos ao acaso, foram sacrficados. Aqueles sacrificados 20 e 25 meses após a primeira inoculaçäo mostraram acúmulos focais de leucócitos com miocitólise. Focos de fibrose intersticial difusa com pequeno infiltrado de leucócitos entre as fibras foram observados em animais sacrificados 36 a 47 meses após a inoculaçäo. Näo foram encontrados parasitas. As lesöes foram mais proeminentes nas paredes ventrículares e no septo. O achado de infiltrados predominantemente, nos animais sacrificados em tempo mais curto em relaçäo à primeira inoculaçäo e a fibrose mais severa naqueles sacrificados após um tempo maior sugere que existe uma progressäo das lesöes infiltrativas até a fibrose, com atividade leucocítica indicativa de fase crônica