Sustained deficit irrigation on yield and fruit water quality of dwarf green coconut / Efeito da irrigação com déficit hídrico sustentado sobre a produtividade e qualidade da água dos frutos do coqueiro anão verde

This study evaluated the effects of sustained deficit irrigation (SDI) on fruit yield and fruit water quality of dwarf green coconut trees. The experiment was carried out in a commercial orchard located in Camocim, Ceará, Brazil. Four years old coconut trees were irrigated during 29 months, using micro-sprinklers, at irrigation depths equivalent to 55%, 77%, 100% and 131% of crop evapotranspiration (ETc). Green coconut fruits were harvested six months after flower aperture and evaluated for number of fruits per plant, volume of coconut water per fruit and total soluble solids of the coconut water. SDI reduced coconut fruit yield, fruit water volume and coconut water yield. Conversely, SDI increased total soluble solids of the coconut water and irrigation water productivity in terms of fruits and coconut water. Deficit irrigation showed no economic advantage over full irrigation due to the small reduction in irrigation costs compared to the substantial reduction in gross revenue.

Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da irrigação com déficit sustentado (SDI) sobre a produção e a qualidade da água de frutos do coqueiro Anão Verde. O experimento foi realizado em um pomar comercial localizado em Camocim, Ceará, Brasil. Plantas com quatro anos de idade foram irrigadas por microaspersão, durante 29 meses, com lâminas de irrigação equivalentes a 55%, 77%, 100% e 131% da evapotranspiração da cultura (ETc). Os frutos foram colhidos seis meses após a abertura das flores e avaliados quanto ao número de frutos por planta, volume de água de coco por fruto e sólidos solúveis totais da água de coco. A SDI reduziu a produtividade de frutos, o volume de água do fruto e a produção de água de coco por planta. Por outro lado, a SDI aumentou os sólidos solúveis totais da água de coco e a produtividade da água de irrigação em termos de frutas e água de coco. A SDI não apresentou vantagem econômica sobre a irrigação plena devido à pequena redução nos custos de irrigação em comparação à redução substancial da receita bruta.

Human cornea conservation in coconut water solution / Conservação de córneas humanas em solução de água de coco

ABSTRACT Purpose: The aim of this study was to evaluate the physical and chemical characteristics of coconut water and to analyze the use of coconut water solution for the conservation of human corneas. Methods: This was an experimental and controlled study performed at the Eye Bank of the General Hospital of Fortaleza. The coconut water-based solution was prepared at the Goat Seed Technology Laboratory of the Department of Veterinary Medicine of the State University of Ceará. Discarded corneas from the Eye Bank were divided into two groups for sequential experiments: G1, coconut water-based solution (experimental group), and G2, conservative treatment with OPTISOL GS® (control group). The osmolality of corneas in G1 was analyzed sequentially at 275, 300, 325, 345, 365, and 400 mOsm/L. The viability of the corneas was determined by specular microscopy and biomicroscopy on the first, third, and seventh days. Results: Corneas preserved in a solution of 365 and 345 mOsm/L had a transparency of 8 mm until the third day and had diffuse edema in the periphery, central folds, and partial epithelium loss until the seventh day. The 365-mOsm/L solution was associated with the worst results during follow-up. Corneas placed in Optisol-GS retained their original aspects. Conclusions: Coconut water-based preservative partially maintained corneal transparency and epithelial integrity, especially during the first three days of follow-up. The coconut water-based solutions used were not effective for use as preservatives in a human eye bank.(AU)

RESUMO Objetivos: As características físico-químicas e o baixo custo da água de coco foram fundamentais para o este estudo. Analisar o uso de solução a base de água de coco como meio de conservação de córneas humanas em banco de olhos. Métodos: Estudo experimental e controlado realizado no Banco de Olhos do Hospital Geral de Fortaleza. Utilizou-se solução à base de água de coco preparada no laboratório de Tecnologia de Sêmen de Caprinos do Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Estadual do Ceará. Foram usadas córneas de descartes divididas em dois grupos: G1 (Conservante com água de coco) - grupo experimental e G2 (grupo Conservante com OPTISOL GS®) grupo controle, em experimentos sequenciais. A osmolaridade do G1 foi analisada sequencialmente com 275, 300, 325, 345, 365 e 400 mOsm/L. A viabilidade das córneas foram realizadas por microscopia especular e biomicroscopia nos 1º, 3º e 7º dias. Resultados: As córneas em solução de 365 e 345 mOsm/L apresentavam transparência nos 8mm centrais até o 3º dia, com edema em toda periferia, dobras centrais e edema 2+, com perda parcial do epitélio até 7º dia, sendo o de maior osmolaridade com melhor transparência durante o seguimento. Grupo com 275, 300 e 400 mOsm/L, córnea opaca, edema difuso, perda total do epitélio no 3º dia. As córneas em Optisol mantiveram seus aspectos. Conclusões: O conservante à base de água de coco manteve em parte a transparência corneana e a integridade epitelial, especialmente nos primeiros 3 dias de seguimento. A solução conservante com água de coco nas formulações utilizadas não se mostrou eficaz para o uso em banco de olhos humanos.(AU)

Effect of refrigeration at -1°C on spermatozoa quality of domestic cats / Efeito da refrigeração a -1°C na qualidade de espermatozoides de gatos domésticos

The objective of this study was to evaluate the sperm quality obtained of domestic cats by electroejaculation and recovery of the tail of the epididymis after cooling at -1°C and 4°C for 24 and 48 hours. Twenty-nine adult cats (2 to 6kg) were used. Sperm collection was performed by electroejaculation (EEJ), and after 48 hours, the cats were orchiectomized, and sperm sample was obtained from the vas deferens and epididymis tail (EPD). The samples were diluted in ACP-117® extender, and the sperm characteristics were evaluated at three different moments: when still fresh, 24 and 48 hours after cooling. The objective of this study was to evaluate the sperm quality obtained of domestic cats by electroejaculation and recovery of the tail of the epididymis after cooling at -1°C and 4°C for 24 and 48 hours. Twenty-nine adult cats (2 to 6kg) were used. Sperm collection was performed by electroejaculation (EEJ), and after 48 hours, the cats were orchiectomized, and sperm sample was obtained from the vas deferens and epididymis tail (EPD). The samples were diluted in ACP-117® extender, and the sperm characteristics were evaluated at three different moments: when still fresh, 24 and 48 hours after cooling. In order to compare the two refrigeration temperatures, the first stage was to analyze if there was a difference between the harvesting techniques. After this, two experiments were conducted: in the first, sperm sample from 14 cats were used and the cooling was performed at -1°C; and in the second, sample from 15 cats were used and the sperm were refrigerated at 4°C. Sperm kinetics were evaluated by computerized analysis (CASA) and concentration by Neubauer chamber, spermatic morphology was evaluated by modified Karras staining, and membrane integrity was evaluated by eosin nigrosine. The results obtained were analyzed in R software, version 3.2.5 using the Mann-Whitney test for variables with abnormal distributions, considering significance at the level of 5%...(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade espermática de gatos domésticos obtidos por eletroejaculação e recuperação da cauda do epidídimo após a refrigeração a -1°C e a 4°C por 24 e 48 horas. Vinte e nove gatos adultos (2 a 6kg) foram utilizados. A colheita de espermatozoides foi realizada por eletroejaculação (EEJ) e, após 48 horas, os gatos foram orquiectomizados, e as amostras espermáticas foram obtidas a partir do ducto deferente e da cauda do epidídimo (EPD). As amostras foram diluídas em ACP-117® e as características espermáticas foram avaliadas em três momentos distintos: fresco, 24 e 48 horas após a refrigeração. Para ser possível comparar as duas temperaturas de refrigeração, a primeira etapa foi analisar se havia diferença entre as técnicas de colheita. Após isto, dois experimentos foram conduzidos: no primeiro, espermatozoides de 14 gatos foram utilizados e a refrigeração foi realizada a -1°C; e no segundo, amostras de 15 gatos foram utilizados e os espermatozoides foram refrigerados a 4°C. A cinética espermática foi avaliada por análise computadorizada (CASA), a concentração por câmara de Neubauer, a morfologia espermática foi avaliada pela coloração de Karras modificada, e a integridade da membrana foi avaliada por eosina nigrosina. Os resultados obtidos foram analisados no software R, versão 3.2.5, utilizando o teste de Mann-Whitney para variáveis com distribuições anormais, considerando significância ao nível de 5%...(AU)

Effect of refrigeration at -1°C on spermatozoa quality of domestic cats / Efeito da refrigeração a -1°C na qualidade de espermatozoides de gatos domésticos

The objective of this study was to evaluate the sperm quality obtained of domestic cats by electroejaculation and recovery of the tail of the epididymis after cooling at -1°C and 4°C for 24 and 48 hours. Twenty-nine adult cats (2 to 6kg) were used. Sperm collection was performed by electroejaculation (EEJ), and after 48 hours, the cats were orchiectomized, and sperm sample was obtained from the vas deferens and epididymis tail (EPD). The samples were diluted in ACP-117® extender, and the sperm characteristics were evaluated at three different moments: when still fresh, 24 and 48 hours after cooling. The objective of this study was to evaluate the sperm quality obtained of domestic cats by electroejaculation and recovery of the tail of the epididymis after cooling at -1°C and 4°C for 24 and 48 hours. Twenty-nine adult cats (2 to 6kg) were used. Sperm collection was performed by electroejaculation (EEJ), and after 48 hours, the cats were orchiectomized, and sperm sample was obtained from the vas deferens and epididymis tail (EPD). The samples were diluted in ACP-117® extender, and the sperm characteristics were evaluated at three different moments: when still fresh, 24 and 48 hours after cooling. In order to compare the two refrigeration temperatures, the first stage was to analyze if there was a difference between the harvesting techniques. After this, two experiments were conducted: in the first, sperm sample from 14 cats were used and the cooling was performed at -1°C; and in the second, sample from 15 cats were used and the sperm were refrigerated at 4°C. Sperm kinetics were evaluated by computerized analysis (CASA) and concentration by Neubauer chamber, spermatic morphology was evaluated by modified Karras staining, and membrane integrity was evaluated by eosin nigrosine. The results obtained were analyzed in R software, version 3.2.5 using the Mann-Whitney test for variables with abnormal distributions, considering significance at the level of 5%. In ejaculate samples, higher values of total morphological defects were observed after 24 and 48 hours of refrigeration at 4°C (P<0.022) compared to refrigeration at -1°C, using Friedman test. To quantify the decrease in sperm quality, parameter reductions were calculated among time points (F-24h/F-48h/24h-48h). In EPD samples, a greater reduction in sperm quality was detected after 24 hours of refrigeration at 4°C, both in motility and sperm kinetics and in the movement and velocity indices, compared to refrigeration at -1°C. Based on the results, it can be concluded that cooling of feline spermatozoa at -1°C for up to 48 hours was efficient in maintaining spermatic quality collected by EEJ and EPD, and it could be an alternative to spermatozoa cryopreservation in domestic felines.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade espermática de gatos domésticos obtidos por eletroejaculação e recuperação da cauda do epidídimo após a refrigeração a -1°C e a 4°C por 24 e 48 horas. Vinte e nove gatos adultos (2 a 6kg) foram utilizados. A colheita de espermatozoides foi realizada por eletroejaculação (EEJ) e, após 48 horas, os gatos foram orquiectomizados, e as amostras espermáticas foram obtidas a partir do ducto deferente e da cauda do epidídimo (EPD). As amostras foram diluídas em ACP-117® e as características espermáticas foram avaliadas em três momentos distintos: fresco, 24 e 48 horas após a refrigeração. Para ser possível comparar as duas temperaturas de refrigeração, a primeira etapa foi analisar se havia diferença entre as técnicas de colheita. Após isto, dois experimentos foram conduzidos: no primeiro, espermatozoides de 14 gatos foram utilizados e a refrigeração foi realizada a -1°C; e no segundo, amostras de 15 gatos foram utilizados e os espermatozoides foram refrigerados a 4°C. A cinética espermática foi avaliada por análise computadorizada (CASA), a concentração por câmara de Neubauer, a morfologia espermática foi avaliada pela coloração de Karras modificada, e a integridade da membrana foi avaliada por eosina nigrosina. Os resultados obtidos foram analisados no software R, versão 3.2.5, utilizando o teste de Mann-Whitney para variáveis com distribuições anormais, considerando significância ao nível de 5%. No ejaculado, maiores valores de defeitos morfológicos totais foram observados após 24 e 48 horas de refrigeração a 4°C (P<0,022) em comparação com refrigeração a -1°C, usando o teste de Friedman. Para quantificar a diminuição na qualidade espermática, as reduções dos parâmetros foram calculadas entre os pontos de tempo (F-24h/F-48h/24h-48h). Na EPD, uma maior redução na qualidade espermática foi detectada após 24 horas de refrigeração a 4°C, tanto na motilidade e na cinética espermática quanto nos índices de movimento e velocidade, em comparação com a refrigeração a -1°C. Com base nos resultados, pode concluir-se que a refrigeração dos espermatozoides felino a -1°C, até 48 horas, foi eficaz na manutenção da qualidade espermático colhidos por EEJ e EPD, e pode ser uma alternativa para a criopreservação de espermatozoides em felinos domésticos.(AU)

Biotecnologias como ferramentas para o desenvolvimento do Nordeste do Brasil / Biotechnologies as tools for the development of northeast Brazil

A biotecnologia tem sido um ramo de estudo diferencial para diversos setores da sociedade, apresentando, através de bioprodutos e bioprocessos, melhorias para o avanço e desenvolvimento da região Nordeste do Brasil. Vale pontuar que um importante meio que traz anualmente acréscimos inovadores à área biotecnológica é o setor acadêmico, que através de cursos stricto sensu a nível de mestrado e doutorado, promovem pesquisas relevantes para vários setores como economia, agroindústria, saúde, dentre outros. Exemplos disso são: o curso de Doutorado em Biotecnologia da RENORBIO) e o Programa Profissional de Pós-Graduação em Biotecnologia em Saúde Humana e Animal (PPGBiotec). O presente artigo se sobre o percurso trilhado pelos cursos stricto sensu mencionados, bem como ressalta a relevância da Biotecnologia para a região Nordeste do Brasil, em seus diferentes campos de investigação, com ênfase nos Recursos Naturais, Agropecuária e Saúde. Exemplificamos as biotecnologias utilizando a água de coco que vêm sendo trabalhadas desde os anos 1980s e sua evolução até os dias atuais. Com base em toda a potencialidade da Região Nordeste para a geração de bioprodutos e bioprocessos, ressaltamos que os mesmos só serão úteis se realmente forem tratados como inovação tecnológica, gerarem nota fiscal e impactarem positivamente para o bem estar da sociedade.(AU)

Biotechnology has been a branch of differential study for various sectors of society, presenting, through bioproducts and bioprocesses, improvements for the advancement and development of the Northeast region of Brazil. It is worth noting that an important means that annually brings innovative additions to the biotechnological area is the academic sector, which through stricto sensu courses at the master's and doctoral level, promote relevant research for various sectors such as economics, agribusiness, health, among others. Examples of this are: the Doctorate course in Biotechnology (RENORBIO) and the Professional Graduate Program in Biotechnology in Human and Animal Health (PPGBiotec). This article is about the path taken by the stricto sensu courses mentioned, as well as emphasizing the relevance of Biotechnology for the Northeast region of Brazil, in its different research fields, with emphasis on Natural Resources, Agriculture and Health. We exemplify biotechnologies using coconut water that has been worked since the 1980's and its evolution to the present day. Based on all the potential of the Northeast Region for the generation of bioproducts and bioprocesses, we emphasize that they will only be useful if they are really treated as technological innovation, generate invoices and have a positive impact on society's well-being.(AU)

Biotecnologias como ferramentas para o desenvolvimento do Nordeste do Brasil / Biotechnologies as tools for the development of northeast Brazil

A biotecnologia tem sido um ramo de estudo diferencial para diversos setores da sociedade, apresentando, através de bioprodutos e bioprocessos, melhorias para o avanço e desenvolvimento da região Nordeste do Brasil. Vale pontuar que um importante meio que traz anualmente acréscimos inovadores à área biotecnológica é o setor acadêmico, que através de cursos stricto sensu a nível de mestrado e doutorado, promovem pesquisas relevantes para vários setores como economia, agroindústria, saúde, dentre outros. Exemplos disso são: o curso de Doutorado em Biotecnologia da RENORBIO) e o Programa Profissional de Pós-Graduação em Biotecnologia em Saúde Humana e Animal (PPGBiotec). O presente artigo se sobre o percurso trilhado pelos cursos stricto sensu mencionados, bem como ressalta a relevância da Biotecnologia para a região Nordeste do Brasil, em seus diferentes campos de investigação, com ênfase nos Recursos Naturais, Agropecuária e Saúde. Exemplificamos as biotecnologias utilizando a água de coco que vêm sendo trabalhadas desde os anos 1980’s e sua evolução até os dias atuais. Com base em toda a potencialidade da Região Nordeste para a geração de bioprodutos e bioprocessos, ressaltamos que os mesmos só serão úteis se realmente forem tratados como inovação tecnológica, gerarem nota fiscal e impactarem positivamente para o bem estar da sociedade.

Biotechnology has been a branch of differential study for various sectors of society, presenting, through bioproducts and bioprocesses, improvements for the advancement and development of the Northeast region of Brazil. It is worth noting that an important means that annually brings innovative additions to the biotechnological area is the academic sector, which through stricto sensu courses at the master's and doctoral level, promote relevant research for various sectors such as economics, agribusiness, health, among others. Examples of this are: the Doctorate course in Biotechnology (RENORBIO) and the Professional Graduate Program in Biotechnology in Human and Animal Health (PPGBiotec). This article is about the path taken by the stricto sensu courses mentioned, as well as emphasizing the relevance of Biotechnology for the Northeast region of Brazil, in its different research fields, with emphasis on Natural Resources, Agriculture and Health. We exemplify biotechnologies using coconut water that has been worked since the 1980's and its evolution to the present day. Based on all the potential of the Northeast Region for the generation of bioproducts and bioprocesses, we emphasize that they will only be useful if they are really treated as technological innovation, generate invoices and have a positive impact on society's well-being.

Use of the ACP® and BTS extenders for cooling at 15°C white-lipped peccary (Tayassu pecari) semen / Uso dos diluidores ACP® e BTS para refrigeração a 15°C de sêmen de queixada (Tayassu pecari)

Knowledge about reproduction of white-lipped peccary is of great importance to assist with the conservation of this species and enable its rational use in captivity. This study aimed to evaluate the effect of ACP-103®, ACP-116® and BTS semen extenders on sperm viability during cooling of Tayassu pecari semen. Five ejaculates from four adult males were chilled. The animals were submitted to the protocols of sedation and anesthesia for semen collection by the electroejaculation method. After collection, the semen was macro- and microscopically assessed and diluted to reach 35x106 spermatozoa/mL in each of the three different extenders tested. The fresh-extended semen was packed in a BotuFLEX® thermal box to keep samples at 15°C for 24 hours. After cooling, the following semen parameters were analyzed: sperm motility, functional and structural integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, chromatin condensation, and the thermoresistance test was performed. The parameters sperm motility, structural and functional integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, and chromatin condensation were preserved after use of the extenders tested, and were similar to those of in natura semen (p>0.05). Curvilinear velocity (VCL) (p<0.05) was the only parameter with reduced values after cooling regardless of the extender used. The percentage of sperm with normal morphology was greater in samples cooled using the BTS extender (p<0.05). The ACP-103®, ACP-116® and BTS extenders can be used for the cooling and preservation of white-lipped peccary semen at 15°C for 24 hours.(AU)

Para auxiliar na conservação da espécie e permitir o uso racional do queixada em cativeiro é de grande importância o conhecimento sobre a reprodução da espécie. Objetivou-se avaliar o efeito dos diluidores de sêmen ACP-103®, ACP-116® e BTS na viabilidade espermática durante a refrigeração do sêmen do Tayassu pecari. Foram refrigerados cinco ejaculados provenientes de quatro machos adultos. Os animais foram contidos com auxílio de puçá e submetidos ao protocolo de sedação e anestesia para realização da coleta de sêmen pelo método da eletroejaculação. Depois da coleta, o sêmen foi avaliado macro e microscopicamente e diluído para atingir 35x106 espermatozoides/mL em cada um dos três diferentes diluidores testados. O sêmen diluído foi acondicionado em caixa térmica BotuFLEX® para manter as amostras a 15°C por um período de 24 horas. Depois da refrigeração, os espermatozoides foram avaliados quanto aos parâmetros de movimento espermático, integridade funcional e estrutural das membranas espermáticas, atividade mitocondrial, condensação da cromatina e teste de termorresistência. Os diluidores testados preservaram as características cinéticas, a integridade estrutural e funcional das membranas espermáticas, a atividade mitocondrial e a condensação da cromatina semelhante ao sêmen in natura (P>0,05). O único parâmetro que reduziu com o processo de refrigeração independente do diluidor utilizado foi a Velocidade Curvilinear (VCL) (P<0,05). Foi observado aumento do percentual de espermatozoides morfologicamente normais nas amostras refrigeradas em BTS (P<0,05). Os diluidores ACP-103®, ACP-116® e BTS podem refrigerar e conservar o sêmen de queixada a 15°C por 24 horas.(AU)

Use of the ACP® and BTS extenders for cooling at 15°C white-lipped peccary (Tayassu pecari) semen / Uso dos diluidores ACP® e BTS para refrigeração a 15°C de sêmen de queixada (Tayassu pecari)

Knowledge about reproduction of white-lipped peccary is of great importance to assist with the conservation of this species and enable its rational use in captivity. This study aimed to evaluate the effect of ACP-103®, ACP-116® and BTS semen extenders on sperm viability during cooling of Tayassu pecari semen. Five ejaculates from four adult males were chilled. The animals were submitted to the protocols of sedation and anesthesia for semen collection by the electroejaculation method. After collection, the semen was macro- and microscopically assessed and diluted to reach 35x106 spermatozoa/mL in each of the three different extenders tested. The fresh-extended semen was packed in a BotuFLEX® thermal box to keep samples at 15°C for 24 hours. After cooling, the following semen parameters were analyzed: sperm motility, functional and structural integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, chromatin condensation, and the thermoresistance test was performed. The parameters sperm motility, structural and functional integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, and chromatin condensation were preserved after use of the extenders tested, and were similar to those of in natura semen (p>0.05). Curvilinear velocity (VCL) (p<0.05) was the only parameter with reduced values after cooling regardless of the extender used. The percentage of sperm with normal morphology was greater in samples cooled using the BTS extender (p<0.05). The ACP-103®, ACP-116® and BTS extenders can be used for the cooling and preservation of white-lipped peccary semen at 15°C for 24 hours.(AU)

Para auxiliar na conservação da espécie e permitir o uso racional do queixada em cativeiro é de grande importância o conhecimento sobre a reprodução da espécie. Objetivou-se avaliar o efeito dos diluidores de sêmen ACP-103®, ACP-116® e BTS na viabilidade espermática durante a refrigeração do sêmen do Tayassu pecari. Foram refrigerados cinco ejaculados provenientes de quatro machos adultos. Os animais foram contidos com auxílio de puçá e submetidos ao protocolo de sedação e anestesia para realização da coleta de sêmen pelo método da eletroejaculação. Depois da coleta, o sêmen foi avaliado macro e microscopicamente e diluído para atingir 35x106 espermatozoides/mL em cada um dos três diferentes diluidores testados. O sêmen diluído foi acondicionado em caixa térmica BotuFLEX® para manter as amostras a 15°C por um período de 24 horas. Depois da refrigeração, os espermatozoides foram avaliados quanto aos parâmetros de movimento espermático, integridade funcional e estrutural das membranas espermáticas, atividade mitocondrial, condensação da cromatina e teste de termorresistência. Os diluidores testados preservaram as características cinéticas, a integridade estrutural e funcional das membranas espermáticas, a atividade mitocondrial e a condensação da cromatina semelhante ao sêmen in natura (P>0,05). O único parâmetro que reduziu com o processo de refrigeração independente do diluidor utilizado foi a Velocidade Curvilinear (VCL) (P<0,05). Foi observado aumento do percentual de espermatozoides morfologicamente normais nas amostras refrigeradas em BTS (P<0,05). Os diluidores ACP-103®, ACP-116® e BTS podem refrigerar e conservar o sêmen de queixada a 15°C por 24 horas.(AU)

Perfil proteico do plasma seminal ovino e sua relação com a criopreservação nos diluentes TRIS e Água de Coco em Pó / Protein profile of ram seminal plasm and its relation relationship with cryopreservation in TRIS and Powdered Coconut Water extender

O objetivo deste trabalho foi avaliar a relação entre a concentração de proteínas no plasma seminal ovino com parâmetros de qualidade do sêmen criopreservado em diluentes TRIS e em Água de Coco em Pó (ACP102c). Um total de 12 colheitas/animal em ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n=2) foram realizadas, para obtenção do plasma seminal e para criopreservação nos diluentes testados. Foi utilizado o método de Bradford para determinação da concentração de proteína. Para avaliação do sêmen fresco e criopreservado foram utilizados os testes de viabilidade por eosina-nigrosina e teste hiposmótico (HOST), além dos parâmetros de motilidade em sistema de análise de sêmen auxiliada por computador (CASA). Baseado no valor médio da concentração de proteína, os ejaculados foram agrupados em alta (AP) e baixa (BP) concentração proteica. Correlações significativamente positivas foram encontradas entre a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva (PROG) e congelabilidade (CONGEL) e negativa para deslocamento lateral de cabeça (ALH) nas amostras criopreservadas em ambos diluentes, além de correlação positiva para motilidade total (MOT) em TRIS. Sêmen de ejaculados do grupo AP criopreservados em TRIS apresentaram MOT, PROG e CONGEL significativamente superiores ao grupo BP e inferiores para ALH. Quando criopreservado em ACP102c, sêmen do grupo AP foi superior ao BP para PROG e CONGEL. Variações na qualidade do sêmen criopreservado entre ejaculados podem estar associados à concentração de proteínas do plasma seminal, e estas podem atuar na manutenção da progressividade de espermatozoides ovinos criopreservados em diluentes TRIS e ACP102c.(AU)

The objective of this study was to evaluate the relation between the protein concentration in ram seminal plasma and quality parameters of the semen cryopreserved in TRIS and Powdered Coconut Water (ACP102c) extenders. A total of 12 semen collections/animal of Santa Ines (n=2) and Dorper (n=2) rams were performed to obtain seminal plasma and semen cryopreservation in work extenders. The protein content was determined using the Bradford's method. The eosin-nigrosine and hyposmotic (HOST) viable tests and motility parameters obtained by computer assisted semen analysis were evaluated for fresh and cryopreserved semen. The ejaculates were grouped in high (AP) and low (BP) protein content, based on the mean value of protein concentration. Significantly positive correlations were found between the protein content and progressive motility (PROG), freezability (CONGEL) and negative for lateral head displacement (ALH) in the semen cryopreserved in both extenders. Therefore, positive correlation was found for total motility (MOT) in TRIS. Semen samples from AP group cryopreserved in TRIS extender were significantly better than BP group for MOT, PROG and CONGEL, and inferior for ALH. When cryopreserved in ACP102c, the AP group were better than BP group for PROG and CONGEL. Variations in the quality of cryopreserved semen from different ejaculates may be associated with the concentration of seminal plasma proteins and may act to maintain the progressiveness of ram sperm cryopreserved in TRIS and ACP102c extenders.(AU)

Congelação do sêmen de pequenos ruminantes sem uso de gema de ovo utilizando bases vegetais em substituição à gema de ovo / Small ruminants sperm freezing without egg yolk using vegetable bases instead of egg yolk

Na conservação seminal é necessária a utilização de diluentes que forneçam nutrientes e protejam as células espermáticas contra o choque térmico. Os aditivos de origem animal, como a gema de ovo e o leite, amplamente empregados na preservação do sêmen, representam um risco potencial de contaminação. Com o intuito de reduzir esses impactos quanto ao uso de substâncias de origem animal, esta revisão teve como objetivo abordar os principais pontos acerca da utilização de diluentes para congelação do sêmen de pequenos ruminantes livres de gema de ovo, um diluente constituído 100% por produtos de origem vegetal.(AU)

For semen conservation, it is necessary to use extenders that provide nutrients and protect the spermatozoa against thermal shock. Animal source additives, such as egg yolk and milk, widely used in semen preservation, represent a potential contamination risk. To reduce impacts related to the use of animal origin substances, this review aimed to address the main points about the use of extenders for small ruminant sperm freezing free of egg yolk, an extender composed by 100% vegetable origin products.(AU)

Perfil proteico do plasma seminal ovino e sua relação com a criopreservação nos diluentes TRIS e Água de Coco em Pó / Protein profile of ram seminal plasm and its relation relationship with cryopreservation in TRIS and Powdered Coconut Water extender

O objetivo deste trabalho foi avaliar a relação entre a concentração de proteínas no plasma seminal ovino com parâmetros de qualidade do sêmen criopreservado em diluentes TRIS e em Água de Coco em Pó (ACP102c). Um total de 12 colheitas/animal em ovinos Santa Inês (n=2) e Dorper (n=2) foram realizadas, para obtenção do plasma seminal e para criopreservação nos diluentes testados. Foi utilizado o método de Bradford para determinação da concentração de proteína. Para avaliação do sêmen fresco e criopreservado foram utilizados os testes de viabilidade por eosina-nigrosina e teste hiposmótico (HOST), além dos parâmetros de motilidade em sistema de análise de sêmen auxiliada por computador (CASA). Baseado no valor médio da concentração de proteína, os ejaculados foram agrupados em alta (AP) e baixa (BP) concentração proteica. Correlações significativamente positivas foram encontradas entre a concentração de proteína com os parâmetros motilidade progressiva (PROG) e congelabilidade (CONGEL) e negativa para deslocamento lateral de cabeça (ALH) nas amostras criopreservadas em ambos diluentes, além de correlação positiva para motilidade total (MOT) em TRIS. Sêmen de ejaculados do grupo AP criopreservados em TRIS apresentaram MOT, PROG e CONGEL significativamente superiores ao grupo BP e inferiores para ALH. Quando criopreservado em ACP102c, sêmen do grupo AP foi superior ao BP para PROG e CONGEL. Variações na qualidade do sêmen criopreservado entre ejaculados podem estar associados à concentração de proteínas do plasma seminal, e estas podem atuar na manutenção da progressividade de espermatozoides ovinos criopreservados em diluentes TRIS e ACP102c.

The objective of this study was to evaluate the relation between the protein concentration in ram seminal plasma and quality parameters of the semen cryopreserved in TRIS and Powdered Coconut Water (ACP102c) extenders. A total of 12 semen collections/animal of Santa Ines (n=2) and Dorper (n=2) rams were performed to obtain seminal plasma and semen cryopreservation in work extenders. The protein content was determined using the Bradford's method. The eosin-nigrosine and hyposmotic (HOST) viable tests and motility parameters obtained by computer assisted semen analysis were evaluated for fresh and cryopreserved semen. The ejaculates were grouped in high (AP) and low (BP) protein content, based on the mean value of protein concentration. Significantly positive correlations were found between the protein content and progressive motility (PROG), freezability (CONGEL) and negative for lateral head displacement (ALH) in the semen cryopreserved in both extenders. Therefore, positive correlation was found for total motility (MOT) in TRIS. Semen samples from AP group cryopreserved in TRIS extender were significantly better than BP group for MOT, PROG and CONGEL, and inferior for ALH. When cryopreserved in ACP102c, the AP group were better than BP group for PROG and CONGEL. Variations in the quality of cryopreserved semen from different ejaculates may be associated with the concentration of seminal plasma proteins and may act to maintain the progressiveness of ram sperm cryopreserved in TRIS and ACP102c extenders.

Congelação do sêmen de pequenos ruminantes sem uso de gema de ovo utilizando bases vegetais em substituição à gema de ovo / Small ruminant’s sperm freezing without egg yolk using vegetable bases instead of egg yolk

Na conservação seminal é necessária a utilização de diluentes que forneçam nutrientes e protejam as células espermáticas contra o choque térmico. Os aditivos de origem animal, como a gema de ovo e o leite, amplamente empregados na preservação do sêmen, representam um risco potencial de contaminação. Com o intuito de reduzir esses impactos quanto ao uso de substâncias de origem animal, esta revisão teve como objetivo abordar os principais pontos acerca da utilização de diluentes para congelação do sêmen de pequenos ruminantes livres de gema de ovo, um diluente constituído 100% por produtos de origem vegetal.

For semen conservation, it is necessary to use extenders that provide nutrients and protect the spermatozoa against thermal shock. Animal source additives, such as egg yolk and milk, widely used in semen preservation, represent a potential contamination risk. To reduce impacts related to the use of animal origin substances, this review aimed to address the main points about the use of extenders for small ruminant sperm freezing free of egg yolk, an extender composed by 100% vegetable origin products.

Comparative evaluation between the extenders TES-TRIS and ACP-112® and the association of Sálva Marajó oil (Lippia origanoides) in the quality of cryopreserved buffalo sperm / Avaliação comparativa entre os diluidores TES-TRIS e ACP-112® e a associação com o óleo da Sálva do Marajó (Lippia origanoides) na qualidade do sêmen bubalino criopreservado

For artificial insemination, it is essential to use frozen semen, however the freezing process causes deleterious changes to the structure and integrity of sperm membranes that compromise the function of sperm. To avoid this cellular damage, extenders and suitable substrates must be used to recover the highest possible number of viable cells post-thaw. To this end, in the first experiment, we evaluated three different extenders: TES-TRIS, which is widely used for buffaloes; and an extender composed of powdered coconut water-based (ACP-112®) with or without milk (ACP-112®-milk) for buffalo semen freezing. In the second experiment, we evaluated the effect of Lippia origanoides oil extract on protecting buffalo sperm against cryoinjury arising from freezing semen. Semen was collected from ten buffalo bulls (10 ejaculates/bull) and diluted in TES-TRIS (control), ACP-112® or ACP-112®-Milk in the first experiment. In the second experiment, the samples were diluted in the diluent with the best results for sperm quality obtained in experiment I, and 2.5 μg mL-1, 5 μg mL-1 or 10 μg mL-1 of the plant extract was added to treatments; and a control group containing only the diluent was also included. The fresh semen was analyzed for conventional features such as motility, concentration, morphology and viability. After thawing, the samples were evaluated again for motility, vigor and supra-vital staining, and then, were performed the of thermal-resistance test, hypoosmotic test and evaluated sperm membrane integrity with the fluorescent probes PI, FITC-PSA and JC-1 using flow cytometry. The data were submitted to ANOVA, and the results were compared by Tukeys test at a significance of 5%.(AU)

Para a implantação da inseminação artificial é indispensável à utilização de sêmen congelado, que pode provocar mudanças deletérias na estrutura e na integridade das membranas espermáticas, comprometendo sua função. Para evitar estes danos celulares, há a necessidade de se utilizar meios diluidores e substratos adequados que recuperem o maior número possível de células viáveis pós-descongelação. Para isso, foram avaliados, no experimento I, três diferentes diluidores, o diluidor TES-TRIS, bastante utilizado para bubalinos, e um diluidor a base de água de coco em pó (ACP-112), associado ou não ao leite (ACP-112-Leite), na congelação do sêmen de bubalinos; e no experimento II, foi avaliado o efeito do óleo extraído da Lippia origanoides na proteção dos espermatozóides contra as crioinjúrias decorrentes da congelação do sêmen bubalino. Foram utilizados 10 touros bubalinos para as colheitas de sêmen (10 ejaculados/touro), sendo os ejaculados diluídos em TES-TRIS (controle), ACP-112 e ACP-112-Leite no experimento I; e no experimento II, os ejaculados foram diluídos no melhor diluidor obtido no experimento I, acrescido de 2.5 μg mL-1, 5 μg mL-1 e 10 μg mL-1 da planta e o grupo controle, constituído somente do diluidor. O sêmen recém colhido foi analisado quanto as características convencionais, tais como, motilidade, concentração, morfologia e viabilidade. Após a descongelação das amostras foram avaliados novamente, motilidade e viabilidade espermática, e posteriormente, foram realizados os testes de termo-resistência, hiposmótico e de avaliação das membranas dos espermatozóides, através das sondas fluorescentes PI, FITC-PSA e JC-1, utilizando a citometria de fluxo. Os dados obtidos foram submetidos à ANOVA e ao Teste de Tukey a 5%.(AU)

Comparative evaluation between the extenders TES-TRIS and ACP-112® and the association of Sálva Marajó oil (Lippia origanoides) in the quality of cryopreserved buffalo sperm / Avaliação comparativa entre os diluidores TES-TRIS e ACP-112® e a associação com o óleo da Sálva do Marajó (Lippia origanoides) na qualidade do sêmen bubalino criopreservado

For artificial insemination, it is essential to use frozen semen, however the freezing process causes deleterious changes to the structure and integrity of sperm membranes that compromise the function of sperm. To avoid this cellular damage, extenders and suitable substrates must be used to recover the highest possible number of viable cells post-thaw. To this end, in the first experiment, we evaluated three different extenders: TES-TRIS, which is widely used for buffaloes; and an extender composed of powdered coconut water-based (ACP-112®) with or without milk (ACP-112®-milk) for buffalo semen freezing. In the second experiment, we evaluated the effect of Lippia origanoides oil extract on protecting buffalo sperm against cryoinjury arising from freezing semen. Semen was collected from ten buffalo bulls (10 ejaculates/bull) and diluted in TES-TRIS (control), ACP-112® or ACP-112®-Milk in the first experiment. In the second experiment, the samples were diluted in the diluent with the best results for sperm quality obtained in experiment I, and 2.5 μg mL-1, 5 μg mL-1 or 10 μg mL-1 of the plant extract was added to treatments; and a control group containing only the diluent was also included. The fresh semen was analyzed for conventional features such as motility, concentration, morphology and viability. After thawing, the samples were evaluated again for motility, vigor and supra-vital staining, and then, were performed the of thermal-resistance test, hypoosmotic test and evaluated sperm membrane integrity with the fluorescent probes PI, FITC-PSA and JC-1 using flow cytometry. The data were submitted to ANOVA, and the results were compared by Tukey’s test at a significance of 5%.

Para a implantação da inseminação artificial é indispensável à utilização de sêmen congelado, que pode provocar mudanças deletérias na estrutura e na integridade das membranas espermáticas, comprometendo sua função. Para evitar estes danos celulares, há a necessidade de se utilizar meios diluidores e substratos adequados que recuperem o maior número possível de células viáveis pós-descongelação. Para isso, foram avaliados, no experimento I, três diferentes diluidores, o diluidor TES-TRIS, bastante utilizado para bubalinos, e um diluidor a base de água de coco em pó (ACP-112), associado ou não ao leite (ACP-112-Leite), na congelação do sêmen de bubalinos; e no experimento II, foi avaliado o efeito do óleo extraído da Lippia origanoides na proteção dos espermatozóides contra as crioinjúrias decorrentes da congelação do sêmen bubalino. Foram utilizados 10 touros bubalinos para as colheitas de sêmen (10 ejaculados/touro), sendo os ejaculados diluídos em TES-TRIS (controle), ACP-112 e ACP-112-Leite no experimento I; e no experimento II, os ejaculados foram diluídos no melhor diluidor obtido no experimento I, acrescido de 2.5 μg mL-1, 5 μg mL-1 e 10 μg mL-1 da planta e o grupo controle, constituído somente do diluidor. O sêmen recém colhido foi analisado quanto as características convencionais, tais como, motilidade, concentração, morfologia e viabilidade. Após a descongelação das amostras foram avaliados novamente, motilidade e viabilidade espermática, e posteriormente, foram realizados os testes de termo-resistência, hiposmótico e de avaliação das membranas dos espermatozóides, através das sondas fluorescentes PI, FITC-PSA e JC-1, utilizando a citometria de fluxo. Os dados obtidos foram submetidos à ANOVA e ao Teste de Tukey a 5%.

Uso do diluidor ACP102® com e sem gema de ovo no sêmen resfriado de ovinos / Use of ACP102® extender with and without egg yolk in sheep cooled semen

This study aims to evaluate the fertility rate of sheep semen diluted and cooled to 4ºC in powdercoconut water (ACP-102®) with and without egg yolk in artificial insemination by cervical route in sheep. Tworam lambs and 72 ewe lambs were used, divided into 3 groups: ACP-102® without egg yolk and cooled to 4ºCfor 12 hours, ACP-102® with 2,5% egg yolk also cooled as the first group and a control group with fresh semendiluted in ACP-102® without egg yolk. Pregnancy diagnosis was performed 30 days later. Pregnancy rates weresignificantly different (P < 0.05) between ACP-SGF (58,3%) and ACP-SG4 (20,8%) groups. The ACP-CG4(37,5%) group did not differ in relation to the ACP-SGF. Therefore, the addition of egg yolk to ACP-102®extender favors the viability of sheep semen, cooled to 4ºC for 12 hours and fertility of artificially inseminatedsheep by cervical route.(AU)

Curvas de resfriamento do sêmen do varrão diluído em ACP®103 adicionado de gema de ovo em concentração fixa / Cooling curves of the boar semen diluted in ACP®103 extender added of powdered egg yolk in fixed concentration

The conservation of boar semen at lower temperatures might contribute to the further expansion of artificial insemination in this species. Egg yolk cryoprotectant properties have already been extensively tested on sperm cryopreservation of several species. This study aimed to test different temperature curves for the conservation of boar semen diluted with coconut milk powdered (ACP®-103) add 7% egg yolk and to verify which one better maintains sperm viability. For this, 36 ejaculates were diluted and stored at 17, 10 and 5 C. Daily analysis of vigor and motility were performed, and on days D0, D2, and D4 semen was evaluated regarding vitality, morphology, and osmotic resistance. For the statistical analysis we performed the tests of Kruska-Wallis with Dunns post-test (nonparametric data) and ANOVA and Tukey test (parametric data). The storage temperature of 10 C was the best one   to maintain spermatic motility at appropriate levels to be used in an artificial insemination program. Analyses of viability, morphology, and hypoosmotic test did not show statistical difference among the treatments. In conclusion, the best temperature curve was 10 C with diluted semen previously kept at 17 C to maintain the viability of sperm cells in pigs for a longer period.

A conservação do sêmen suíno em temperaturas mais baixas pode permitir uma maior expansão    da inseminação artificial nessa espécie. A gema de ovo apresenta propriedades crioprotetoras já amplamente testadas na conservação seminal de diversas espécies. Este trabalho teve por objetivo testar diferentes curvas de temperatura na conservação do sêmen suíno diluído em água de coco    em pó (ACP®-103) acrescido de 7% de gema de ovo e verificar qual delas mantém por mais tempo  a viabilidade espermática. Para tanto, o sêmen de 36 ejaculados foi diluído e conservado a 17,        10 e 5 C. Diariamente foram realizadas análises de vigor e motilidade e nos dias D0, D2 e D4 o sêmen foi avaliado quanto à sua viabilidade, morfologia acrossomal e resistência osmótica. Para a análise estatística foram utilizados os testes de Kruska-Wallis, com pós-teste de Dunns (dados não paramétricos) e Anova com teste de Tukey (dados paramétricos). A conservação à temperatura de 10 C foi a que melhor manteve o vigor espermático e a motilidade em níveis adequados para ser utilizado em um programa de inseminação artificial. As análises de vitalidade, morfologia e teste hiposmótico não apresentaram diferença estatística entre os tratamentos avaliados. Em conclusão, a melhor curva de temperatura foi a de 10 C com sêmen diluído por manter por um período maior a viabilidade da célula espermática suína.

Uso do diluidor ACP102® com e sem gema de ovo no sêmen resfriado de ovinos / Use of ACP102® extender with and without egg yolk in sheep cooled semen

This study aims to evaluate the fertility rate of sheep semen diluted and cooled to 4ºC in powdercoconut water (ACP-102®) with and without egg yolk in artificial insemination by cervical route in sheep. Tworam lambs and 72 ewe lambs were used, divided into 3 groups: ACP-102® without egg yolk and cooled to 4ºCfor 12 hours, ACP-102® with 2,5% egg yolk also cooled as the first group and a control group with fresh semendiluted in ACP-102® without egg yolk. Pregnancy diagnosis was performed 30 days later. Pregnancy rates weresignificantly different (P < 0.05) between ACP-SGF (58,3%) and ACP-SG4 (20,8%) groups. The ACP-CG4(37,5%) group did not differ in relation to the ACP-SGF. Therefore, the addition of egg yolk to ACP-102®extender favors the viability of sheep semen, cooled to 4ºC for 12 hours and fertility of artificially inseminatedsheep by cervical route.

Recovery of sperm after epididymal refrigeration from domestic cats using ACP-117c and Tris extenders / Recuperação de espermatozoides após refrigeração do epidídimo de gatos domésticos utilizando os diluidores ACP-117c e Tris

We aimed to compare fresh sperm and sperm cooled to 4ºC that had been recovered from the epididymides of cats using powdered coconut water (ACP-117c) and Tris extenders. Sixty epididymides were divided into 6 groups: 10 fresh epididymides were recovered using Tris (T0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using Tris (T2h); 10 were kept at 4°C/4h and recovered using Tris (T4h); 10 fresh were recovered using ACP-117c (A0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using ACP-117c (A2h), and 10 were kept at 4°C/4h and recovered using ACP-117c (A4h). The testis-epididymis complexes (TEC) control were not cooled. The others were cooled at 4°C for 2 or 4h. The epididymis was separated and the sperm was recovered by the modified flotation method. Sperm kinetic parameters were evaluated by a computer-system analysis, and vigor, viability, concentration, membrane function and morphology of the sperm were assessed under a light microscope. The progressive motility with ACP-117c declined after 2h of cooling, but did not differ between fresh and 4h. The vigor and membrane function were higher in A4h than A0h. The vigor at T2h and T4h were decreased compared to T0h. T0h was higher than A0h for vigor and sperm membrane function. However, after 4h of cooling, ACP-117c maintained a higher percentage of living cells. Feline epididymal sperm quality can be maintained to the degree necessary for artificial breeding programs following cooling and ACP-117c may be successfully used to recover cat sperm that have been cooled for up to 4h.(AU)

Objetivou-se comparar a qualidade de espermatozoides recuperados a fresco e após refrigeração a 4ºC do epidídimo de gatos domésticos utilizando-se os diluidores ACP-117c e Tris. Sessenta epidídimos foram distribuídos em seis grupos: 10 epidídimos a fresco com o Tris (T0h), 10 a 4°C/2h e recuperados com Tris (T2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com Tris (T4h), 10 epidídimos a fresco com o ACP-117c (A0h), 10 a 4 °C/2h e recuperados com ACP-117c (A2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com ACP-117c (A4h). Os complexos testículo-epidídimo (CTE) do controle não foram refrigerados. Os outros foram refrigerados a 4°C durante duas e quatro horas. Os epidídimos foram separados das demais estruturas, e os espermatozoides recuperados pela técnica de flutuação modificada. Os parâmetros cinéticos foram avaliados em um sistema computadorizado, e o vigor, a viabilidade, a concentração, a funcionalidade de membrana e a morfologia celular foram avaliados em microscopia de luz. A motilidade progressiva com ACP-117c declinou após duas horas de refrigeração, mas não diferiu entre a recuperação a fresco e após refrigeração por quatro horas. Vigor e integridade funcional da membrana celular foram significativamente superiores no grupo A4h em comparação ao A0h. O vigor espermático em T2h e T4h reduziu significativamente em comparação com T0h. T0h foi significativamente superior ao A0h quanto aos parâmetros de vigor e integridade funcional da membrana espermática, entretanto, após quatro horas de refrigeração, o ACP-117c apresentou um maior percentual de células vivas. Os espermatozoides epididimários de felinos domésticos conseguem manter a qualidade necessária para serem utilizados em programas de reprodução artificial após serem refrigerados e recuperados por meio da técnica de flutuação modificada, e o diluidor ACP-117c pode ser utilizado com sucesso para recuperação de células espermáticas refrigeradas de gatos por até quatro horas.(AU)

Recovery of sperm after epididymal refrigeration from domestic cats using ACP-117c and Tris extenders / Recuperação de espermatozoides após refrigeração do epidídimo de gatos domésticos utilizando os diluidores ACP-117c e Tris

We aimed to compare fresh sperm and sperm cooled to 4ºC that had been recovered from the epididymides of cats using powdered coconut water (ACP-117c) and Tris extenders. Sixty epididymides were divided into 6 groups: 10 fresh epididymides were recovered using Tris (T0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using Tris (T2h); 10 were kept at 4°C/4h and recovered using Tris (T4h); 10 fresh were recovered using ACP-117c (A0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using ACP-117c (A2h), and 10 were kept at 4°C/4h and recovered using ACP-117c (A4h). The testis-epididymis complexes (TEC) control were not cooled. The others were cooled at 4°C for 2 or 4h. The epididymis was separated and the sperm was recovered by the modified flotation method. Sperm kinetic parameters were evaluated by a computer-system analysis, and vigor, viability, concentration, membrane function and morphology of the sperm were assessed under a light microscope. The progressive motility with ACP-117c declined after 2h of cooling, but did not differ between fresh and 4h. The vigor and membrane function were higher in A4h than A0h. The vigor at T2h and T4h were decreased compared to T0h. T0h was higher than A0h for vigor and sperm membrane function. However, after 4h of cooling, ACP-117c maintained a higher percentage of living cells. Feline epididymal sperm quality can be maintained to the degree necessary for artificial breeding programs following cooling and ACP-117c may be successfully used to recover cat sperm that have been cooled for up to 4h.(AU)

Objetivou-se comparar a qualidade de espermatozoides recuperados a fresco e após refrigeração a 4ºC do epidídimo de gatos domésticos utilizando-se os diluidores ACP-117c e Tris. Sessenta epidídimos foram distribuídos em seis grupos: 10 epidídimos a fresco com o Tris (T0h), 10 a 4°C/2h e recuperados com Tris (T2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com Tris (T4h), 10 epidídimos a fresco com o ACP-117c (A0h), 10 a 4 °C/2h e recuperados com ACP-117c (A2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com ACP-117c (A4h). Os complexos testículo-epidídimo (CTE) do controle não foram refrigerados. Os outros foram refrigerados a 4°C durante duas e quatro horas. Os epidídimos foram separados das demais estruturas, e os espermatozoides recuperados pela técnica de flutuação modificada. Os parâmetros cinéticos foram avaliados em um sistema computadorizado, e o vigor, a viabilidade, a concentração, a funcionalidade de membrana e a morfologia celular foram avaliados em microscopia de luz. A motilidade progressiva com ACP-117c declinou após duas horas de refrigeração, mas não diferiu entre a recuperação a fresco e após refrigeração por quatro horas. Vigor e integridade funcional da membrana celular foram significativamente superiores no grupo A4h em comparação ao A0h. O vigor espermático em T2h e T4h reduziu significativamente em comparação com T0h. T0h foi significativamente superior ao A0h quanto aos parâmetros de vigor e integridade funcional da membrana espermática, entretanto, após quatro horas de refrigeração, o ACP-117c apresentou um maior percentual de células vivas. Os espermatozoides epididimários de felinos domésticos conseguem manter a qualidade necessária para serem utilizados em programas de reprodução artificial após serem refrigerados e recuperados por meio da técnica de flutuação modificada, e o diluidor ACP-117c pode ser utilizado com sucesso para recuperação de células espermáticas refrigeradas de gatos por até quatro horas.(AU)

Evaluation of coconut water neutralized by different agents on the viability of human fibroblasts: an in vitro study / Avaliação da água de coco neutralizada por diferentes agentes na viabilidade de fibroblastos humanos: estudo in vitro

Objective: This study evaluated four types of pH adjustment of the coconut water (CW) on viability of human fibroblasts (HFF). Material and method: Natural and industrialized CW were adjusted to pH 7.0 using: (1) Sodium Hidroxide (NaOH), (2) Sodium bicarbonate (NaHCO3), (3) Triethanolamine (C6H15NO3), (4) 2-Amino-2-Methil-1-Propanol (C4H11NO). Fibroblasts were plated at 2×104/ well in 96 well plates and maintained in the CW solutions for 2 h and 4 h. Positive control was represented by HFF maintained in DMEM and the negative control by tap water. Cell viability was analyzed by MTT formazan method. Data were analyzed by 3-way ANOVA followed by Tukey's and Dunnet's test. Result: There are no significant effect on the cell viability regarding type of CW, period of evaluation, and the interactions between CW and period of evaluation, CW and pH adjustment method, pH adjustment method and period of evaluation (p>0.05). Conclusion The product used for CW pH adjustment did not influenced HFF viability, thought there are a tendency of better performance in natural CW.

Objetivo: Avaliar a eficácia de quatro tipos de substâncias usadas para ajuste do pH da água de coco (AC) sobre a viabilidade de fibroblastos humanos (HFF). Material e método: O pH da AC natural e industrializada foi ajustado para pH 7,0 utilizando: (1) Hidróxido de Sódio (NaOH), (2) bicarbonato de sódio (NaHCO3), (3) Trietanolamina (C6H15NO3), (4) 2-Amino-2- Methil-1-propanol (C4H11NO). Células HFF foram plaqueadas em 2×104 células/poço em placas de 96 poços e mantidas nas diferentes soluções de AC acima durante 2 h e 4 h. Controle positivo foi representado por HFF mantidas em DMEM e o controle negativo por água da torneira. A viabilidade celular foi avaliada pelo método de MTT Formazan. Os dados foram analisados por 3-way ANOVA seguido pelo teste de Tukey e Dunnett. Resultado: A viabilidade celular não é influenciada pelo período de avaliação, e as interações entre AC e período de avaliação, AC e método de ajuste de pH, método de ajuste de pH e período de avaliação (p> 0,05). Conclusão: O produto utilizado para ajuste do pH não interfere na viabilidade de FH, embora, haja uma tendência de melhor desempenho em AC natural.