RESUMO
La acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD, very long chain acyl-Co A dehydrogenase) es considerada una enzima limitante en el sistema de beta-oxidación de ácidos grasos de cadena muy larga. Con base en la clínica presentada en esta deficiencia se han informado 3 fenotipos: VLCAD-C por presentar cardiomiopatía dilatada, VLCAD-H caracterizada por episodios de hipoglicemia y VLCAD-M en la cual se presentan episodios de miopatía con rabdomiólisis. Los estudios in vitro, que buscan intermediarios de la degradación mitocondrial de ácidos grasos, facilitan el diagnóstico de alteraciones hereditarias o adquiridas de la actividad de esta enzima. En el presente trabajo se analiza la producción de metabolitos en fibroblastos de pacientes con deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga con hipoglicemia (VLCAD-H), incubados con ácido oleico deuterado. Se incubaron fibroblastos de cinco pacientes con deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD) con hipoglicemia y de diez controles en presencia de ácido oleico deuterado. Se encontró un perfil característico luego de la incubación de fibroblastos con esta deficiencia. Los valores de D²C12:1 fueron similares entre los pacientes y los controles, mientras que los valores de D²C14:1 y D²C16:1 fueron encontrados significativamente más elevados en los fibroblastos de los pacientes. Este sustrato podría ser usado para realizar diagnóstico in vitro de la deficiencia de VLCAD-H.(AU)
Very-long-chain acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD) is considered a rate-limit-ing enzyme in a very-long-chain fatty acid beta-oxidation system. Based on clinical presentation three phenotypes have been reported for this deficien-cy, as follows: VLCAD-C presenting cardiomiopathy, VLCAD-H characterized by episodes of hypoglycemia, and VLCAD-M including episodes of myopathy with rhabdomyolysis. In vitro studies, searching for intermediates of mitochondrial fatty acid degradation, are a tool for diagnosis of inherited or acquired alterations of this enzyme activity. The present work analizes the metabolite production in fbroblasts from patientes with VLCAD-H deficiency, incubated with deuterated oleic acid. Fibroblasts from ten controls and fve patients with VLCAD deficiency with hypoglycemia (VLCAD-H) were incubated in the presence of deuterated oleic acid. A characteristic profle was found after incuba-tion of fbroblasts with this deficiency. D²C12:1 values were similar between patients and controls, while values of D²C14:1 and D²C16:1 were significantly higher in the fbroblasts of patients. Therefore, this substrate could be used for in vitro diagnosis of VLCAD-H deficiency.(AU)
A acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD, very long chain acyl-Co A dehydrogenase) é considerada uma enzima limitante no sistema de beta-oxidaþÒo de ácidos graxos de cadeia muito longa. Com base na clínica apresentada nesta deficiÛncia, foram informados trÛs fenótipos: VLCAD-C por apre-sentar cardiomiopatia dilatada, VLCAD-H caracterizada por episódios de hipoglicemia e VLCAD-M em que ocorrem episódios de miopatia com rabdomiólise. Os estudos in vitro, em busca de intermediários da degradaþÒo mitocondrial de ácidos graxos, sÒo uma ferramenta para o diagnóstico de alteraþ§es here-ditárias ou adquiridas da atividade desta enzima. O presente trabalho analisa a produþÒo de metabólitos em fibroblastos de pacientes com deficiÛncia de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa, com hipoglicemia (VLCAD-H), incubadas com ácido oleico deuterado. Foram incubados fibroblastos de cinco pacientes com deficiÛncia de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD) com hipoglicemia, e de dez controles em presenþa de ácido oleico deuterado. Foi achado um perfil característico após a incubaþÒo de fibroblastos com esta deficiÛncia. Os valores D²C12:1 foram semelhantes entre os pacientes e os controles, ao passo que os valores de D2C14:1 e D²C16:1 foram significativamente mais elevados nos fibroblastos dos pacientes. Este substrato poderia ser utilizado para realizar diagnóstico in vitro da deficiÛncia VLCAD-H.(AU)
RESUMO
La acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD, very long chain acyl-Co A dehydrogenase) es considerada una enzima limitante en el sistema de beta-oxidación de ácidos grasos de cadena muy larga. Con base en la clínica presentada en esta deficiencia se han informado 3 fenotipos: VLCAD-C por presentar cardiomiopatía dilatada, VLCAD-H caracterizada por episodios de hipoglicemia y VLCAD-M en la cual se presentan episodios de miopatía con rabdomiólisis. Los estudios in vitro, que buscan intermediarios de la degradación mitocondrial de ácidos grasos, facilitan el diagnóstico de alteraciones hereditarias o adquiridas de la actividad de esta enzima. En el presente trabajo se analiza la producción de metabolitos en fibroblastos de pacientes con deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga con hipoglicemia (VLCAD-H), incubados con ácido oleico deuterado. Se incubaron fibroblastos de cinco pacientes con deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD) con hipoglicemia y de diez controles en presencia de ácido oleico deuterado. Se encontró un perfil característico luego de la incubación de fibroblastos con esta deficiencia. Los valores de D²C12:1 fueron similares entre los pacientes y los controles, mientras que los valores de D²C14:1 y D²C16:1 fueron encontrados significativamente más elevados en los fibroblastos de los pacientes. Este sustrato podría ser usado para realizar diagnóstico in vitro de la deficiencia de VLCAD-H.
Very-long-chain acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD) is considered a rate-limit-ing enzyme in a very-long-chain fatty acid beta-oxidation system. Based on clinical presentation three phenotypes have been reported for this deficien-cy, as follows: VLCAD-C presenting cardiomiopathy, VLCAD-H characterized by episodes of hypoglycemia, and VLCAD-M including episodes of myopathy with rhabdomyolysis. In vitro studies, searching for intermediates of mitochondrial fatty acid degradation, are a tool for diagnosis of inherited or acquired alterations of this enzyme activity. The present work analizes the metabolite production in fbroblasts from patientes with VLCAD-H deficiency, incubated with deuterated oleic acid. Fibroblasts from ten controls and fve patients with VLCAD deficiency with hypoglycemia (VLCAD-H) were incubated in the presence of deuterated oleic acid. A characteristic profle was found after incuba-tion of fbroblasts with this deficiency. D²C12:1 values were similar between patients and controls, while values of D²C14:1 and D²C16:1 were significantly higher in the fbroblasts of patients. Therefore, this substrate could be used for in vitro diagnosis of VLCAD-H deficiency.
A acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD, very long chain acyl-Co A dehydrogenase) é considerada uma enzima limitante no sistema de beta-oxidação de ácidos graxos de cadeia muito longa. Com base na clínica apresentada nesta deficiência, foram informados três fenótipos: VLCAD-C por apre-sentar cardiomiopatia dilatada, VLCAD-H caracterizada por episódios de hipoglicemia e VLCAD-M em que ocorrem episódios de miopatia com rabdomiólise. Os estudos in vitro, em busca de intermediários da degradação mitocondrial de ácidos graxos, são uma ferramenta para o diagnóstico de alterações here-ditárias ou adquiridas da atividade desta enzima. O presente trabalho analisa a produção de metabólitos em fibroblastos de pacientes com deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa, com hipoglicemia (VLCAD-H), incubadas com ácido oleico deuterado. Foram incubados fibroblastos de cinco pacientes com deficiência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD) com hipoglicemia, e de dez controles em presença de ácido oleico deuterado. Foi achado um perfil característico após a incubação de fibroblastos com esta deficiência. Os valores D²C12:1 foram semelhantes entre os pacientes e os controles, ao passo que os valores de D2C14:1 e D²C16:1 foram significativamente mais elevados nos fibroblastos dos pacientes. Este substrato poderia ser utilizado para realizar diagnóstico in vitro da deficiência VLCAD-H.
Assuntos
Acetoína Desidrogenase , Acil Coenzima A , Ácidos GraxosRESUMO
La enzima acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga (VLCAD) es un homodímero que cataliza la reacción inicial de la ß-oxidación mitocondrial de los ácidos grasos. El presente estudio tuvo como objetivo el análisis de los metabolitos producidos por fibroblastos incubados en presencia de sustratos tritiados vs. deuterados, como herramienta diagnóstica de la deficiencia de VLCAD. Fue encontrada severamente deprimida la oxidación de los sustratos tritiados en los fibroblastos de pacientes con esta enfermedad, asimismo la incubación con sustratos deuterados aportó un perfil característico en esta deficiencia. El método de valoración de agua tritiada, aunque inespecífico, debido a que la oxidación de sustratos tritiados también puede estar deprimida en otras deficiencias, es un buen método para sugerir una deficiencia de acil- CoA deshidrogenasa de cadena muy larga, si el análisis se compara con otros hallazgos propios de la deficiencia enzimática. Sin embargo, la determinación de los metabolitos deuterados es más específica, por encontrarse un perfil característico que muestra niveles elevados de los ácidos grasos octanoico, decanoico, dodecenoico, dodecanoico, tetradecenoico, tetradecanoico y hexadecenoico, lo que la hace diferente de otras deficiencias enzimáticas.
Very long-chain acyl-CoA dehydrogenase (VLCAD) is a homodimer that catalyzes the initial reaction of fatty acid ß-oxidation. The objective of the present study was to analyse the metabolites produced by fibroblasts incubated with tritiated vs. deuterated substrates, as a diagnostic tool for the diagnosis of VLCAD deficiency. A severe depression for oxidizing the tritiated substrates was observed for these patients' fibroblasts, and a characteristic profile for this deficiency was found when incubating fibroblasts with deuterated substrates. The method which evaluates the production of tritiated water is nonspecific as the oxidation of tritiated substrates can be found depressed in other fatty acid ß-oxidation disorders; however this method can suggest VLCAD deficiency if the tritiated water measurement is compared with others findings related to this deficiency. On the other hand the measurement of deuterated metabolites is more specific as a characteristic profile was found for this deficiency showing increased levels of the following organic acids: octanoic, decanoic, dodecenoic, dodecanoic, tetradecenoic, tetradecanoic and hexadecanoic, which is different from other fatty acid ß-oxidation disorders.
A enzima acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa (VLCAD) é um homodímero que catalisa a reação inicial da ß-oxidação mitocondrial dos ácidos graxos. O presente estudo teve como objetivo a análise dos metabólitos produzidos por Ibroblastos incubados em presença de substratos tritiados vs. deuterados, como ferramenta de diagnóstico da deIciência de VLCAD. Foi encontrada severamente deprimida a oxidação dos substratos tritiados nos Ibroblastos de pacientes com esta doença, do mesmo modo a incubação com substratos deuterados deu um perIl característico nesta deIciência. O método de avaliação de água tritiada, embora não especíIco, devido a que a oxidação de substratos tritiados também pode estar deprimida em outras deIciências, é um bom método para sugerir uma deIciência de acil-CoA desidrogenase de cadeia muito longa, se a análise é comparada com outros achados próprios da deIciência enzimática. Entretanto, a determinação dos metabólitos deuterados é mais especiIca, devido a que se encontra um perIl característico que mostra níveis elevados dos ácidos graxos octanoico, decanoico, dodecenoico, dodecanoico, tetradecenoico, tetradecanoico e hexadecenoico, o que a torna diferente de outras deIciências enzimáticas.
