Novel gel-like microemulsion for topical delivery of Amphotericin B / Una nueva microemulsión tipo gel para la aplicación tópica de anfotericina B

The aim of the present work was to develop a ME for topical delivery of Amphotericin B (AmB). Microemulsions (MEs) are versatile systems to solubilize drugs due to the presence of both a hydrophobic and a hydrophilic region, as well as a distinctive interface composed of surfactant and cosurfactant. MEs have been reported for many advantages for topical application of drugs. Considering that AmB has very low water solubility a screening of surfactants and oils was performed. A gel-like ME system, that can be applied topically without the need for thickeners agents, was selected. AmB was incorporated up to 1 mg/g and remained stable for at least 90 days both at 4 °C and room temperature, so this formulation would be appropriate as a compounding medication. An in vitro skin penetration test was performed, the applied dose penetrated (10.16 +/- 0.01 µg/cm²/h as estimated flux) and remained completely within the skin during the assay; AmB was not detected in the receptor compartment. In vitro antifungal and antileishmanial activity was tested and drug showed proper activity. AmB is a second line drug for the treatment of cutaneous leishmaniasis, but topical dosage forms are still lacking. This system is potentially useful for the treatment of skin infections avoiding drug toxic systemic effects.

Se desarrolló una microemulsión (ME) para la aplicación tópica de anfotericina B (AmB). Las ME son sistemas versátiles que facilitan la solubilización de principios activos y, además, presentan muchas ventajas para aplicar fármacos en forma tópica. La AmB posee muy baja solubilidad en agua, por lo cual se realizó una evaluación de su solubilidad en distintos aceites y surfactantes. Se confeccionaron diagramas ternarios de fase y se seleccionó una ME-gel que puede ser aplicada tópicamente sin el agregado de agentes espesantes. Se solubilizó hasta 1 mg/g de AmB y el fármaco permaneció estable durante al menos 90 días a 4 °C y a temperatura ambiente, por lo cual esta formulación sería apropiada como un medicamento magistral. El estudio in vitro de permeación en piel mostró que la dosis aplicada penetró completamente (flujo estimado de difusión 10,16 +/- 0,01 µg/cm²/h) y permaneció retenida en la misma durante el tiempo de estudio sin detectarse AmB en el compartimento receptor. La actividad antifúngica y antileishmania in vitro fue adecuada. La AmB es una droga de segunda línea en el tratamiento de la leishmaniasis cutánea; sin embargo, no se dispone de preparados para uso tópico. Esta formulación sería útil para el tratamiento local de las infecciones de piel, evitando efectos adversos sistémicos.

Efecto de la Aplicación Tópica de una Solución Comercial de Amitraz sobre el Cronotropismo y Dromotropismo Cardiacos en Ratas Anestesiadas y Perros Conscientes / Effect of a Topical Application of Amitraz Solution on Cardiac Chronotropism and Dromotropism in Anesthetized Rats and Conscious Dogs

El amitraz es una formamidina usada como ectoparasiticida en Medicina Veterinaria. Su toxicidad intravenosa y oral ha sido reportada, aunque su prescripción se fundamenta en aplicaciones tópicas. Esta investigación evaluó los efectos cronotrópicos y dromotrópicos de la aplicación tópica de amitraz (12% v/v; 4mL/L) en ratas anestesiadas con pentobarbital sódico y en perros conscientes. Se usaron 16 ratas y 12 perros, los cuales se sometieron a un electrocardiograma (ECG) control. Subsecuentemente, a 16 ratas se les aplicó amitraz en baño de inmersión por 2 min y a 12 perros se les aplicó baños de aspersión. Posteriormente, se registraron dos ECGs consecutivos cada 30 min, durante 1 h. Como indicadores de cronotropismo y dromotropismo, se usaron la frecuencia cardiaca (FC) y el intervalo P-R, respectivamente. La FC en ratas fue reducida (control: 265,7±12,1 lat/min vs amitraz: 234, 4±13,8 lat/min) a los 30 min del baño con amitraz, alcanzando diferencias significativas (P<0,05), a los 60 min (225,0±13,6 lat/min). Se prolongó el intervalo P-R (control: 54,3±2,0 mseg vs amitraz: 67,9±2,4 mseg) (P<0,05) a los 30 min y 60 min (72,1±2,8 mseg), respectivamente. En contraste, no se observaron cambios significativos en la FC e intervalo P-R en perros. Los efectos cronotrópicos y dromotrópicos negativos observados en ratas, podrían reflejar una acción agonista a2-adrenérgica presináptica en el sistema nervioso central, con la consecuente reducción del tono simpático, sin descartar una acción parasimpaticomimética. Posiblemente, la absorción cutánea del amitraz en caninos, sería incapaz de desarrollar estos efectos. En caninos sin premedicación, pudieran desarrollarse respuestas autonómicas reflejas capaces de regular un posible efecto del amitraz sobre las variables estudiadas. Las dosis terapéuticas de amitraz, no produjeron cambios en el ECG de caninos aparentemente sanos. Se requieren experimentos adicionales para esclarecer si dosis superiores en aplicación tópica actúan en forma similar en perros con lesiones de piel producidas por ácaros o garrapatas.

Amitraz is a diamidine molecule widely used as an ectoparasiticide in Veterinary Medicine. Although amitraz is prescribed as a topical treatment, its toxicity has been reported in oral and intravenous administration. This investigation assessed the potential chronotropic and dromotropic effects of topical amitraz (12% v/v; 4mL/L) in anesthetized rats and conscious dogs. Sixteen rats and twelve dogs were used. Before treatment, body surface was moistened with water and all animals were subjected to a baseline electrocardiogram (ECG). Subsequently, amitraz was applied to rats (n=16) as an immersion bath for 2 min, or as a spray application to dogs (n=12), respectively. Two consecutive ECGs were recorded at 30 min interval for 1 h. The heart rate (HR) and the P-R intervals were calculated to estimate chronotropism and dromotropism, respectively. The HR of rats was reduced (control: 265.7±12.1 beats/min vs amitraz: 234.4±13.8 beats/min) at 30 min after amitraz application, reaching a significant (P<0,05) value at 60 min (225.0±13.6 beats/min). The P-R interval was significantly (P<0.05) prolonged at 30 min (control: 54.3±2.0 msec vs amitraz: 67.9±2.4 msec) and 60 min (72.1±2.8 msec), respectively. In contrast, no significant changes in HR and P-R interval were found in dogs treated with amitraz. The negative chronotropic and dromotropic effects observed in rats may reflect the activation of pre-synaptic a2-adrenoceptors in the central nervous system and a reduction in the sympathetic outflow, without excluding a potential parasympatomimetic effect. The lack of these effects in dogs might be related either to reduced skin absorption or to a potential autonomic regulatory reflex in conscious dogs. The therapeutic dose of amitraz used herein did not modify the ECG in apparently healthy dogs. Further experiments are required to establish the effects of higher topical doses in dogs suffering from skin diseases related to mites or ticks infestations.