Indução da morte celular imunogênica em linhagens celulares de leucoplasia e carcinoma de células escamosas oral sob tratamento de artemisinina e cisplatina / Induction of immunogenic cell death in leukoplakia and oral squamous cell carcinoma cell lines under artemisinin and cisplatin treatment

Novos fármacos, como a artemisinina (ART), podem ser promissores no tratamento de lesões potencialmente malignas (LPM) e podem ser úteis quando usados em associação com outros quimioterápicos, especialmente na redução dos seus efeitos colaterais. A leucoplasia oral (LO) é a LPM mais comum da cavidade bucal e, pode evoluir para um carcinoma de células escamosas oral (CCEO). Não há terapia para evitar a sua transformação maligna, a quimioprevenção pode iniciar a morte celular imunogênica (MCI) que ativa o sistema imunológico para que reconheça e elimine as células malignas ou pré-malignas, sendo um potencial tratamento para as LPM. O presente estudo objetivou avaliar se a ART e a cisplatina (CSP) associadas ou não seriam capazes de induzir a MCI em linhagens celulares de LO (DOK) e CCEO SCC180). Material e métodos: As linhagens celulares HaCat (controle), DOK e SCC-180 foram tratadas por ART e CSP de forma combinada ou isolada, a fim de analisar a citotoxicidade e a genotoxicidade destes fármacos, além da capacidade destes em reduzir a migração celular e, se os compostos seriam capazes de induzir a expressão da proteína box de alta mobilidade (HGMB-1), caspase 3, 8, 9, e Calreticulina (CALR). Resultados: Em todas as linhagens celulares a CSP e CSP+ART causaram uma resposta dose dependente, apresentando maior citotoxicidade com doses mais altas, o que não foi observado com a ART. A formação de micronúcleos não foi observada no teste de genotoxicidade. A taxa de migração foi reduzida com as concentrações de IC50 de CSP e ART+CSP para as células de CCEO. Não foram encontradas expressões significativas de proteínas relacionadas à MCI ou apoptose nas linhagens de LO e CCEO, tratadas com ART, CSP ou ART+CSP, indicando que outro tipo de morte celular possa ter ocorrido. Conclusão: A MCI e a apoptose não foram evidenciadas como forma de morte celular após as linhagens de LO e CCEO receberem tratamentos com ART, CSP e a associação de ambas. Efeitos genotóxicos não foram observados nas doses testadas. O tratamento de CSP e ART+CSP foi capaz de reduzir a migração de células de CCEO. Também concluímos que novos estudos são necessários para elucidar se a ART e CSP podem ocasionar a MCI ou apoptose em linhagens celulares de LO e CCEO (AU)

New drugs, such as artemisinin (ART), may be promising in the treatment of potentially malignant lesions (PML) and may be useful when used in combination with other chemotherapy drugs, especially in reducing their side effects. Oral leukoplakia (OL) is the most common LPM of the oral cavity and can progress to oral squamous cell carcinoma (OSCC). There is no therapy to prevent its malignant transformation, chemoprevention can initiate immunogenic cell death (ICM) that activates the immune system to recognize and eliminate malignant or pre-malignant cells, being a potential treatment for LPM. The present study aimed to evaluate whether or not ART and cisplatin (CSP) combined would be capable of inducing MCI in LO (DOK) and CCEO SCC-180) cell lines. Material and methods: HaCat (control), DOK and SCC-180 cell lines were treated by ART and CSP in combination or alone, in order to analyze the cytotoxicity and genotoxicity of these drugs, in addition to their ability to reduce cell and, whether the compounds would be able to induce the expression of high mobility box protein (HGMB-1), caspase 3, 8, 9, and Calreticulin (CALR). Results: In cytotoxicity at higher doses, which was not observed with ART. The formation of micronuclei was not observed in the genotoxicity test. The migration rate was reduced with the IC50 concentrations of CSP and ART+CSP for OSCC cells. No significant expressions of proteins related to MCI or apoptosis were found in the LO and CCEO lines, treated with ART, CSP or ART+CSP, indicating that another type of cell death may have occurred. Conclusion: MCI and apoptosis were not evidenced as a form of cell death after the LO and CCEO lines received treatments with ART, CSP and the combination of both. Genotoxic effects were not observed at the doses tested. CSP and ART+CSP treatment was able to reduce OSCC cell migration. We also conclude that new studies are necessary to elucidate whether ART and CSP can cause MCI or apoptosis in LO and CCEO cell lines.(AU)

Avaliação da interação in vitro do fungo oportunista, emergente, paecilomyces lilacinus, agente causal da hialohifomicose, com células apresentadoras de antígenos humanas (macrófagos e células dentríticas) / Assessment of in vitro interaction of opportunistic emerging fungus, Paecilomyces lilacinus, causal agent of hyalohyphomycosis with human antigen-presenting cells (macrophages and dendritic cells)

Paecilomyces lilacinus, um dos agentes causais da hialohifomicose, é um fungo filamentoso, assexuado. Está amplamente distribuído pelo mundo e frequentemente é encontrado como contaminante, proveniente do ar, em espécimes clínicos e em soluções consideradas estéreis. Acomete principalmente pacientes comprometidos imunologicamente, porém pacientes imunocompetentes também podem apresentar manifestações clínicas da doença, sendo esse fungo, atualmente, considerado como um importante patógeno oportunista humano. O presente trabalho teve por objetivo a investigação da interação de conídios de P. lilacinus, proveniente de caso clínico de hialohifomicose humana, com células apresentadoras de antígenos (APCs - macrófagos e células dendríticas). Conídios interagiram com macrófagos e células dendritícas de doadores humanos saudáveis, em diferentes concentrações (conídio/APCs) e tempos de incubação para avaliação qualitativa e quantitativa da interação por microscopia óptica e para estudo do percentual de células expressando moléculas de superfície celular que atuam na resposta imune do hospedeiro. Sobrenadantes provenientes da interação das APCs com os conídios foram coletados para o estudo das citocinas IL1-beta e TNF-alfa...

Os resultados demonstraram que o fungo foi capaz de infectar de modo semelhante ambas as APCs e que a concentração de 1:1 (conídio/APCs) foi a melhor proporção entre as células para avaliar o processo de fagocitose e as etapas de desenvolvimento do fungo assim como o tempo de 6 horas de interação foi o melhor tempo para a certificação da internalização dos conídios pelas APCs. Após o processo de internalização dos conídios pelas APCs os mesmos começaram a se dilatar, formar tubos germinativos e hifas septadas que se ramificaram formando um micélio que destruiu as células humanas no período de 24 horas de observação. A avaliação quantitativa da fagocitose dos conídios pelas APCs demonstrou que não houve diferenças significativas entre o percentual fagocítico dos macrófagos e células dendríticas de cada doador como também entre os doadores. A interação do fungo com as APCs na presença de L-Name não modificou o processo de desenvolvimento do conídio no interior das células humanas, quando comparado a interação das células sem L-Name. Em relação aos marcadores de superfície celular a presença dos conídios não aumentou o percentual de macrófagos expressando CD14, porém aumentou as células expressando B7.1 e DC-SIGN. As células dendríticas apresentaram um percentual semelhante de células positivas para B7.1,na ausência e presença do fungo, e um aumento significativo do percentual de células DC-SIGN positivas na presença dos conídios. Os conídios de P. lilacinus foram capazes de estimular a secreção da citocina IL1-beta pelos macrófagos e células dendríticas e é possível que eles tenham inibido a produção de TNF-alfa pelos macrófagos. Então, os dados aqui apresentados demonstram a capacidade invasiva para APCs e de estimulação de moléculas de superfície importantes na resposta imune do hospedeiro por P. lilacinus, até o momento desconhecida...

Analysis of CD83 antigen expression in human breast fibroadenoma and adjacent tissue / Análise da expressão do antígeno CD83 no fibroadenoma mamário humano e no tecido adjacente

CONTEXT AND OBJECTIVE: Dendritic cell maturation is considered essential for starting an immune response. The CD83 antigen is an important marker of dendritic cell maturation. The objectives here were to analyze CD83 antigen expression in human breast fibroadenoma and breast tissue adjacent to the lesion and to identify clinical factors that might influence this expression. DESIGN AND SETTING: This was a retrospective study at a public university hospital, in which 29 histopathological samples of breast fibroadenoma and adjacent breast tissue, from 28 women of reproductive age, were analyzed. METHODS: The immunohistochemistry method was used to analyze the cell expression of the antigen. The antigen expression in the cells was evaluated by means of random manual counting using an optical microscope. RESULTS: Positive expression of the CD83 antigen in the epithelial cells of the fibroadenoma (365.52; standard deviation ± 133.13) in relation to the adjacent breast tissue cells (189.59; standard deviation ± 140.75) was statistically larger (P < 0.001). Several clinical features were analyzed, but only parity was shown to influence CD83 antigen expression in the adjacent breast tissue, such that positive expression was more evident in nulliparous women (P = 0.042). CONCLUSIONS: The expression of the CD83 antigen in the fibroadenoma was positive and greater than in the adjacent breast tissue. Positive expression of the antigen in the adjacent breast tissue was influenced by parity, and was significantly more evident in nulliparous women.

CONTEXTO E OBJETIVOS: A maturação da célula dendrítica é considerada essencial para o início da resposta imune. O antígeno CD83 é um importante marcador da maturação da célula dendrítica. Os objetivos são analisar a expressão do antígeno CD83 no fibroadenoma mamário humano e no tecido mamário adjacente à lesão e identificar fatores clínicos que possam influenciar esta expressão. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Este é um estudo retrospectivo, realizado em um hospital público universitário, onde 29 amostras histopatológicas de fibroadenomas de mamas e de tecidos mamários adjacentes, de 28 mulheres em idade reprodutiva, foram analisados. MÉTODOS: O método de imunoistoquímica foi utilizado na análise da expressão celular do antígeno. A expressão do antígeno nas células foi avaliada por contagem aleatória e manual utilizando-se microcópio de luz. RESULTADOS: A expressão positiva do antígeno CD83 nas células epiteliais dos fibroadenomas (365,52; desvio padrão ± 133,13) em relação às células do tecido mamário adjacente (189,59; desvio padrão ± 140,75) foi estatisticamente superior (P < 0,001). Vários aspectos clínicos foram analisados, porém, a paridade se mostrou influente na expressão do antígeno CD83 no tecido mamário adjacente, onde a expressão positiva foi mais evidente nas mulheres nulíparas (P = 0,042). CONCLUSÕES: A expressão do antígeno CD83 foi positiva e mais expressiva no fibroadenoma do que no tecido mamário adjacente. A expressão positiva do antígeno no tecido mamário adjacente foi influenciada pela paridade, sendo significativamente mais evidente nas mulheres nulíparas.

Histiocitose de células de Langerhans: doença de Letterer-Siwe - importância do diagnóstico dermatológico em dois casos / Langerhans cell histiocytosis: Letterer-Siwe disease - the importance of dermatological diagnosis in two cases

A histiocitose de células de Langerhans é proliferação clonal de células fenotipicamente semelhantes às células de Langerhans. Anteriormente denominada Letterer-Siwe, é a forma mais comum e mais grave dessa enfermidade, acometendo sobretudo crianças até os dois anos de idade. São apresentados dois casos dessa rara doença, diagnosticados após parecer dermatológico, destacando-se seus aspectos mais característicos.

Langerhans cell histiocytosis is defined as a clonal proliferation of Langerhans phenotypic-like cells. Letterer-Siwe disease is the most common and serious of these entities, affecting mainly infants up to two years of age. We present two cases of this rare disease, diagnosed after dermatological examination, highligthing its typical aspects.