Effect of Clomiphene Citrate on the Ultrastructure of Testis in Albino Rats

SUMMARY: The aim of the present work was to study the closer effect of clomiphene citrate on the ultrastructure of the testis of adult albino rats to provide a basis for optimizing this drug in the treatment of male infertility. The testes were removed from both groups under anesthesia and then prepared for examination by light using hematoxylin and eosin stains and a transmission electron microscope. Semithin sections were cut into 1 µm thick sections, stained with toluidine blue, and examined by light microscopy for a survey. The desired areas were placed in the center, and other areas were trimmed. Primary spermatocytes showed marked nuclear changes (pyknosis), and their nuclear membranes were ill-defined and disrupted. The cytoplasm showed widespread degeneration of mitochondria and lysosomes and focal degeneration of the rough endoplasmic reticulum compared with the control group. The spermatids were pale, and the two phases of spermatogenesis were distinctly identifiable in the control group but were confused in the treated group. Some spermatids had interrupted nuclear membranes, also containing degenerated mitochondria, focal fragmentation of rough endoplasmic reticulum, and free ribosomes. Spermatozoa in the treated group appeared deformed compared to the control, where they had deformed head caps. Leydig cells of the treated group have an irregularly shaped nucleus, with focal chromatin aggregation and peripheral chromatin condensation on the inner surface of the nuclear membrane. The observations of the present work indicate a possible causal relationship between testicular affection and ingestion of clomiphene citrate, which can be avoided by close medical observations using ultrasonography, semen analysis, or testicular biopsy to detect early malignant changes. Furthermore, the drug should not be used for more than three to six cycles and should be stopped for at least three cycles before reuse. When clomiphene citrate is ineffective in the treatment of male infertility, human menopausal gonadotropin (hMG) administration is typically selected. However, high-dose hMG therapy is associated with a variety of adverse effects. In this work, we report the success of a modified clomiphene citrate regimen in increasing sperm count without any hazards to the testicular tissue.

El objetivo del trabajo fue estudiar el efecto del citrato de clomifeno sobre la estructura de los testículos de la rata albina adulta, con la finalidad de determinar la mejor manera de utilizar este fármaco en el tratamiento de la infertilidad masculina. Los testículos se extrajeron bajo anestesia y para su análisis a través de microscopio de luz se tiñeron con HE. Además, las muestras fueron preparadas para su examen con microscopía electrónica de transmisión. Por otra parte, se cortaron secciones semifinas de 1 µm de espesor, se tiñeron con azul de toluidina y se examinaron mediante microscopía óptica. Los espermatocitos primarios mostraron cambios nucleares marcados (picnosis) y sus membranas nucleares estaban mal definidas y alteradas. En el grupo experimental las células presentaban el citoplasma con degeneración generalizada de las mitocondrias y de los lisosomas y una degeneración focal del retículo endoplásmico rugoso en comparación con el grupo control. Las espermátidas estaban pálidas y las dos fases de la espermatogénesis eran claramente identificables en el grupo control, pero se confundían en el grupo tratado. Algunas espermátidas tenían membranas nucleares interrumpidas, y también contenían mitocondrias degeneradas, fragmentación focal del retículo endoplásmico rugoso y ribosomas libres. Los espermatozoides del grupo tratado se presentaban deformados en comparación con el control. Las células de Leydig del grupo tratado presentaban un núcleo de forma irregular, con agregación focal de cromatina y condensación de cromatina periférica en la superficie interna de la membrana nuclear. Las observaciones del presente trabajo indican una posible relación causal entre la afección testicular y la ingestión de citrato de clomifeno, que puede evitarse mediante observaciones médicas minuciosas a través de ecografía, análisis de semen o biopsia testicular para detectar cambios malignos tempranos. Además, el medicamento no debiera ser usado durante más de tres a seis ciclos y debe suspenderse durante al menos tres ciclos antes de volver a usarlo. Cuando el citrato de clomifeno es ineficaz en el tratamiento de la infertilidad masculina, normalmente se selecciona la administración de gonadotropina menopáusica humana (hMG). Sin embargo, la terapia con hMG en dosis altas se asocia con una variedad de efectos adversos. En este trabajo, informamos el éxito de un régimen modificado con citrato de clomifeno para aumentar el recuento de espermatozoides sin riesgo para el tejido testicular.

Administração de metformina em água associada a clomifeno em ratos Wistar: avaliação de parâmetros de palatabilidade e bem-estar animal

Rats (Rattus norvegicus) are one of the most used conventional laboratory animals in experimentation in the world. Goto-Kakizaki (GK) mice were produced by genetic selection and are models for the study of type 2 diabetes mellitus and polycystic ovary syndrome. It is a strain that is difficult to reproduce and maintain in animal facilities, a fact that led us to study methods to improve its reproductive rates. Thus, this study aimed to evaluate the protocol of administration of metformin in drinking water associated with administration of clomiphene in rats, to treat fertility problems related to polycystic ovary and irregular estrous cycle in the GK strain. However, as GK rats are rare, in this work Wistar rats were used to evaluate the protocol. Twelve males and 12 females of the Wistar strain with approximately 65 days of life were used. Females were divided into 3 groups – group 1 was control (without metformin), group 2 metformin (1.51 mg/ml) and group 3 metformin + clomiphene (10mg/kg). For 25 days, filtered water was given to group 1, metformin diluted in water to groups 2 and 3, and group 3 was given clomiphene via gavage from the twentieth day of metformin supply. On the 25th day of providing water with medication, these females were mated with 12 males, forming four couples in each group. Every day of the experimental protocol, the animals were weighed to monitor the growth, and the daily consumption of water and feed, and the behavior and welfare of the animals were verified. It was observed that the entire protocol occurred without any change, and the animals' growth and consumption of water and feed were considered normal, and there was no behavioral change. The results obtained indicate that there are no problems in the administration of metformin and clomiphene, to improve the reproductive indices of rats, which compromise animal welfare.

Os ratos (Rattus norvegicus) são um dos animais convencionais de laboratório mais utilizados em experimentação no mundo. Ratos da linhagem Goto-Kakizaki (GK) foram produzidos por seleção genética e são modelos para o estudo de diabetes mellitus do tipo 2 e síndrome do ovário policístico. É uma linhagem de difícil reprodução e manutenção em biotérios, fato que nos levou a estudar métodos para melhorar os seus índices reprodutivos. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o protocolo de administração de metformina na água de beber associada a administração de clomifeno em ratos, a fim de tratar problemas de fertilidade relacionados a ovário policístico e ciclo estral irregular na linhagem GK. No entanto, como ratos GK são raros, neste trabalho foram utilizados ratos Wistar para avaliação do protocolo. Foram utilizados 12 machos e 12 fêmeas da linhagem Wistar com aproximadamente 65 dias de vida. As fêmeas foram divididas em 3 grupos – sendo o grupo 1 controle (sem metformina), grupo 2 metformina (1,51 mg/ml) e grupo 3 metformina + clomifeno (10mg/kg). Durante 25 dias forneceu-se água filtrada para o grupo 1, metformina diluída em água para os grupos 2 e 3, e ao grupo 3 foi fornecido clomifeno via gavagem a partir do vigésimo dia de fornecimento de metformina. No 25° dia de fornecimento de água com medicação, essas fêmeas foram acasaladas com 12 machos, formando quatro casais em cada grupo. Todos os dias do protocolo experimental os animais foram pesados para acompanhamento do crescimento, e foram verificados o consumo diário de água e ração, e o comportamento e bem-estar dos animais. Observou-se que todo o protocolo ocorreu sem qualquer alteração, sendo que foram considerados normais o crescimento dos animais e o consumo de água e ração, e não houve qualquer alteração comportamental. Os resultados obtidos apontam não haver problemas na administração de metformina e clomifeno, para melhorar os índices reprodutivos de ratos, que comprometam o bem-estar animal.

Efeitos do citrato de clomifeno, letrozol e estradiol sobre apoptose em células do cumulus oophorus humano / Effects of clomiphene citrate, letrozole and estradiol on apoptosis in human cumulus oophorus cells

Citrato de clomifeno (CC) e letrozol (LE) são indutores de ovulação que, apesar das altas taxas de ovulação confirmada, atingem baixas taxas de gravidez. Este estudo teve como objetivo investigar os efeitos de CC e LE in vitro, isoladamente ou em combinação com estradiol (E), na apoptose de células do cumulus oophorus humano. Realizamos um estudo prospectivo controlado utilizando culturas primárias de células do cumulus de pacientes submetidas à fertilização in vitro (n=22). A coloração com Giemsa e a imunocitoquímica para alfa-inibina foram utilizadas para avaliar a pureza e a morfologia da cultura celular. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio MTT, o ciclo celular por citometria de fluxo e a expressão gênica de Caspase-3, Bax e Superóxido dismutase 2 (SOD-2) e S26 por reação em cadeia de polimerase (PCR) em tempo real. As células foram tratadas por 24 horas em 5 grupos de tratamento: CC, CC + E, LE, LE + E e controle. Nenhum dos tratamentos afetou a viabilidade celular, mas o LE reduziu a porcentagem média de células na fase S em relação ao controle (24,79 versus 21,70, p=0,0014). O tratamento com CC aumentou a expressão gênica de Bax (4 vezes) e SOD-2 (2 vezes), que foi revertida quando adicionado E à cultura. A expressão de SOD-2 aumentou em células tratadas com LE quando comparado ao controle (4 vezes), que foi também revertida por adição de E. Estes achados sugerem que CC e LE não afetam significativamente a viabilidade das células do cumulus humana. Porém, houve modulação na expressão de genes envolvidos na apoptose por essas drogas isoladamente e em associação com E, sugerindo que CC e LE podem ter efeitos diretos nas células do cumulus além de seus mecanismos de ação conhecidos.

Clomiphene citrate (CC) and letrozole (LE) are ovulatory stimulants that, despite high ovulation rates, achieve low pregnancy rates. This study aimed to investigate the in vitro effects of CC and LE, alone or in combination with estradiol (E), on apoptosis in human cumulus cells. We performed a controlled prospective study using primary cumulus cell cultures from patients undergoing in vitro fertilization (n=22). Giemsa stain and alpha-inhibin immunocytochemistry was used to assess cell culture purity and morphology. Cell viability was evaluated by MTT assay, cell cycle status by flow cytometry, and Caspase-3, Bax and superoxide dismutase 2 (SOD-2), and S26 gene expression by real-time polymerase chain reaction (qPCR). Cells were treated for 24 hours in 5 conditioned media: CC, CC + E, LE, LE + E and control. None of the treatments affected cell viability, but LE reduced the mean percentage of cells in the S phase compared to control (24.79 versus 21.70, p=0.0014). CC treatment increased mRNA expression of Bax (4 fold) and SOD-2 (2 fold), which was reversed by co-treatment with E. SOD-2 expression increased in cells treated with LE compared to control (4 fold), which was also reversed by E. These findings suggest that CC and LE do not significantly affect the viability of human cumulus cells. Still, the expression of genes involved in apoptosis was modulated by these drugs alone and in association with E, suggesting that CC and LE may have direct effects on cumulus cells beyond their known mechanisms of action.

Atualizações na terapêutica farmacológica para infertilidade na mulher diagnosticada com síndrome de ovários policísticos: revisão de literatura / Updates on pharmacological treatments for infertility in women diagnosed with polycystic ovary syndrome: a literature review

Objetivo: Abordar atualizações referentes à terapia medicamentosa para indução da ovulação nas mulheres diagnosticadas com síndrome dos ovários policísticos (SOP). Métodos: Revisão de literatura por meio de levantamento bibliográfico do período de 1975 a 2021, nas bases eletrônicas PubMed, SciELO e MedLine, complementado pela Diretriz Internacional Baseada em Evidências para a Avaliação e Manejo da SOP de 2018 e pelo manual da Febrasgo para SOP. Sete descritores que atendessem à finalidade da pesquisa foram utilizados. Resultados: A literatura aponta atualmente algumas drogas como opção na terapêutica para a indução de ovulação, como metformina, letrozol e citrato de clomifeno, evidenciando que o uso de letrozol isolado e em associação com a metformina apresentaram melhores taxas de ovulação, 71,5% e 75,4%, respectivamente. Conclusão: O uso do letrozol isolado ou combinado com a metformina apresentou os melhores resultados nas taxas de gravidez e ovulação, todavia o tratamento para indução ovulatória deve ser individualizado.(AU)

Objective: To address updates of medicinal therapy for ovulation induction in women diagnosed with polycystic ovary syndrome (PCOS). Methods: Reviewing Literature through a bibliographic survey from 1975 to 2021, on the electronic databases PubMed, SciELO and MedLine, complemented by the International Evidence-Based Guideline for the Evaluation and Management of PCOS 2018 and the Febrasgo guide for PCOS. Seven descriptors that matched to the purpose of the research were applied. Results: Some drugs are currently indicated in the literature as an option for ovulation induction therapy, such as: metformin, letrozole and clomiphene citrate, showing that the use of letrozole alone and in association with metformin had better ovulation rates, 71.5% and 75.4%, respectively. Conclusion: The use of letrozole alone or combined with metformin showed the best results in pregnancy and ovulation rates, however, treatment for ovulatory induction must be individualized.(AU)

Síndrome dos ovários policísticos: particularidades no manejo da infertilidade / Polycystic ovary syndrome: particularities in the management of infertility

A síndrome dos ovários policísticos (SOP) é responsável por cerca de 80% dos casos de infertilidade anovulatória. Não há na literatura evidências suficientes para a definição do tratamento ideal da infertilidade na SOP, mas repete-se que deve ser iniciado por mudanças no estilo de vida, e frequentemente envolve a indução farmacológica da ovulação e, em casos selecionados, as técnicas de reprodução assistida e o drilling ovariano laparoscópico. Este texto pretende reunir informações atuais sobre o manejo da infertilidade em mulheres com SOP e, dessa forma, permitir ao ginecologista a escolha da melhor abordagem, de forma Individualizada e baseada nas melhores evidências disponíveis.(AU)

Therapeutic effects of dimethyldiguanide combined with clomifene citrate in the treatment of polycystic ovary syndrome

SUMMARY OBJECTIVE In view of the high incidence of polycystic ovary syndrome (PCOS) and the unsatisfactory therapeutic effects of dimethyldiguanide or clomifene citrate alone, our study aimed to investigate the therapeutic effects of dimethyldiguanide combined with clomifene citrate in the treatment of PCOS. METHODS A total of 79 patients with POCS and 35 healthy females were included, and endometrial biopsies were obtained. The sterol regulatory element-binding protein-1 (SREBP1) expression in endometrial tissues was detected by qRT-PCR. POC patients were randomly divided into group A (n=40) and group B (n=39). Patients in group A were treated with dimethyldiguanide combined with clomifene citrate, while patients in group B were treated with clomifene citrate alone. The number of mature follicles and cervical mucus score, follicular development rate and single follicle ovulation rate, cycle pregnancy rate, early miscarriage rate, ovulation rate, endometrial thickness, positive rate of three lines sign, follicle stimulating hormone level and luteinizing hormone level were compared between the two groups. RESULTS The expression level of SREBP1 was higher in PCOS patients than that in the healthy control. SREBP1 expression was inhibited after treatment, while the inhibitory effects of combined treatment were stronger than those of clomifene citrate alone. Compared with clomifene citrate alone, the combined treatment improved cervical mucus score, follicle development rate, single follicle ovulation rate, endometrial thickness, positive rate of three lines sign, and follicle-stimulating hormone level. CONCLUSION The therapeutic effect of combined treatment is better than clomifene citrate alone in the treatment of PCOS.

RESUMO OBJETIVO Tendo em vista a alta incidência de síndrome dos ovários policísticos (SOP) e os efeitos terapêuticos insatisfatórios da dimetildiguanida ou do citrato de clomifeno isoladamente, nosso estudo teve como objetivo investigar os efeitos terapêuticos da dimetildiguanida associada ao citrato de clomifeno no tratamento da SOP. MÉTODOS Um total de 79 pacientes com POCS e 35 mulheres saudáveis foram incluídos, e biópsias endometriais foram obtidas. A expressão da proteína de ligação do elemento regulador de esterol-1 (SREBP1) nos tecidos endometriais foi detectada por qRT-PCR. Pacientes POC foram divididos aleatoriamente em grupo A (n=40) e grupo B (n=39). Os pacientes do grupo A foram tratados com dimetildiguanida combinada com citrato de clomifeno, enquanto os pacientes do grupo B foram tratados apenas com citrato de clomifeno. O número de folículos maduros e muco cervical, taxa de desenvolvimento folicular e taxa de ovulação, taxa de gravidez, abortamento precoce, taxa de ovulação, espessura endometrial, taxa positiva de três linhas, nível de hormônio folículo estimulante e nível de hormônio luteinizante foram comparados entre os dois grupos. RESULTADOS O nível de expressão do SREBP1 foi maior nos pacientes com SOP do que no controle normal. A expressão de SREBP1 foi inibida após o tratamento, enquanto os efeitos inibidores do tratamento combinado foram mais fortes do que os do citrato de clomifeno isoladamente. Comparado com o citrato de clomifeno sozinho, o tratamento combinado melhorou significativamente a pontuação do muco cervical, a taxa de desenvolvimento folicular, a taxa de ovulação do folículo único, a espessura endometrial, a taxa positiva de três linhas de sinal e o nível de hormônio folículo estimulante. CONCLUSÃO O efeito terapêutico do tratamento combinado é melhor do que o citrato de clomifeno isolado no tratamento da SOP.

Metformina en mujeres con síndrome de ovarios poliquísticos resistentes al citrato de clomifeno / Metformin in women with polycystic ovary syndrome resistant to clomiphene citrate

El objetivo de la investigación fue determinar la utilidad del uso de metformina en mujeres con síndrome de ovarios poliquísticos resistentes al citrato de clomífero. Esta investigación se realizó en el Hospital Central Dr. Urquinaona, Maracaibo, Venezuela, en el periodo de junio del 2012 a julio del 2017. Se incluyeron mujeres con infertilidad primaria por anovulación debido a síndrome de ovarios poliquísticos resistente a citrato de clomifeno. Las pacientes fueron elegidas al azar para ser asignadas al grupo A (casos ­ metformina) o grupo B (controles ­ placebo). Se analizaron las características generales, tasa de ovulación y de embarazo en las pacientes de cada uno de los grupos. Se seleccionaron 90 pacientes, las cuales fueron asignadas al grupo A (n = 45) o aquellas pacientes asignadas al grupo B (n = 45. No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos con respecto a edad, índice de masa corporal, duración de la infertilidad y concentraciones de hormonales (p = ns). En el grupo A se observó que 62,2 % de las pacientes presentó ovulación comparado con 35,5 % en el grupo B (p = 0,0199). Por otra parte, 46,6 % de las pacientes del grupo A quedó embarazada comparado con 20,0 % en las pacientes del grupo B (p = 0,0132). Se concluye que el uso de metformina es útil en mujeres con síndrome de ovarios poliquísticos resistentes al citrato de clomifeno, ya que aumenta la tasa de ovulación y embarazo en este grupo de pacientes.

The aim of the research was to determine the usefulness of metformin in women with polycystic ovary syndrome resistant to clomiphene citrate. This research was conducted at the Hospital Central Dr. Urquinaona, Maracaibo, Venezuela, from June 2012 to July 2017. Women with primary infertility due to anovulation by polycystic ovary syndrome resistant to clomiphene citrate were included. Patients were randomized to be assigned with group A (cases - metformin) or group B (controls - placebo). General characteristics, ovulation rate and pregnancy in the patients of each of the groups were analyzed. A total of 90 patients were assigned to group A (n = 45) or patients assigned to group B (n = 45). There were no statistically significant differences between groups with respect to age, body mass index, duration of infertility and hormonal concentrations (p = ns). In group A, 62,2 % of the patients presented ovulation compared to 35,5 % in group B (p = 0.0199). On the other hand, 46,6 % of patients in group A became pregnant compared to 20.0% in patients in group B (p = 0.0132). It is concluded that treatment with metformin is useful in women with clomiphene citrate-resistant polycystic ovary syndrome since it increases the rate of ovulation and pregnancy in this group of patients.

Clomiphene treatment may be effective in refractory episodic and chronic cluster headache / Tratamento de 15 casos episódicos e crônicos de cefaleia em salvas de difícil controle com clomifeno

ABSTRACT Objective To describe the evolution of 15 patients who were treated for difficult-to-control episodic and chronic cluster headaches with clomiphene. Methods Clomiphene treatment was used for seven chronic and eight episodic cluster headache patients. The chronic patients were refractory to the medication being used, and the episodic patients, in addition to being resistant to conventional medication, had longer cluster headache periods, exceeding the average time of previous cluster cycles. Our main analysis was of the time to pain-free, complete remission, and the length of pain-free time and complete remission. Results Clomiphene was used for 45-180 days. The average time to being pain-free was 15 days and cluster remission was up to 60 days. The average time between being pain-free until cluster remission was 26 days. Conclusions Clomiphene treatment was significantly efficient. It interrupted chronicity in all patients, suggesting the capability of changing the pattern of attacks. It proved to be safe and well tolerated.

RESUMO Objetivo Descrever a evolução de 15 casos de cefaleia em salvas de difícil controle, episódicos e crônicos, tratados com clomifeno. Métodos Foram tratados 7 casos crônicos e 8 episódicos. Os crônicos, refratários aos medicamentos preventivos em uso e os episódicos, além de refratários, apresentaram salva mais longa que as anteriores. Foram analisados o tempo para a ausência das crises, fim da salva e o tempo entre os dois parâmetros. Resultados O clomifeno foi usado por 45 a 180 dias. A média de tempo para a remissão das crises foi de 15 dias e da salva foi de 60 dias. A média entre o fim das crises e da salva foi de 26 dias. Conclusão O clomifeno foi eficaz em ambos os padrões. Foi capaz de interromper a cronicidade em todos os casos, o que sugere uma ação neuromodulatória capaz de mudar o padrão das crises. Mostrou-se seguro e bem tolerado.

Drilling: medical indications and surgical technique / Drilling: indicações e técnica

SUMMARY Introduction: anovulation is a major cause of female infertility, and polycystic ovary syndrome (PCOS) is the leading cause of anovulation. While undergoing drug-induced ovulation, women with PCOS usually have a satisfactory response recruiting follicles, but some are unable to recruit follicles or often produce an excessive number of follicles, which can result in ovarian hyper-stimulation syndrome and/or multiple pregnancy. Surgical laparoscopy with ovarian "drilling" may prevent or reduce the need for drug-induced ovulation. Objective: to identify the current indications of laparoscopic ovarian drilling and the best surgical technique. Method: a review of the medical literature based on systematic search in the Medline, Lilacs and Cochrane databases, using as keywords laparoscopy, polycystic ovary syndrome, and drilling. Results: we found 105 articles in the literature, 27 of these highly relevant, describing findings on ovarian drilling. Conclusion: laparoscopic drilling is indicated for patients with polycystic ovary syndrome with ovulatory resistance to the use of clomiphene citrate, body mass index less than 30 kg/m2 and preoperative luteinizing hormone above 10 IU/L. The preferred surgical technique should be the realization of 5 to 10 perforations on the surface of each ovary bilaterally using monopolar energy.

RESUMO Introdução: a anovulação é uma das principais causas de infertilidade feminina, e a síndrome dos ovários policísticos (SOP) é a principal causa de anovulação. As mulheres com SOP, quando submetidas a indução medicamentosa da ovulação, costumam ter resposta satisfatória, recrutando folículos. No entanto, algumas podem não recrutar folículos ou, muitas vezes, têm uma produção excessiva deles, o que pode resultar em síndrome de hiperestímulo ovariano e/ou gravidez múltipla. O tratamento cirúrgico por laparoscopia comdrilling ovariano pode evitar ou reduzir a necessidade de indução da ovulação com medicamentos. Objetivos: identificar as indicações atuais do drilling ovariano laparoscópico e qual a melhor técnica operatória. Método: revisão da literatura médica, por meio de busca sistemática nas bases de dados MEDLINE, LILACS e Cochrane, utilizando as palavras-chave: laparoscopia, síndrome dos ovários micropolicísticos edrilling. Resultados: foram encontrados 105 artigos na literatura, sendo 27 de grande relevância descrevendo achados sobre o drilling ovariano. Conclusão: o drilling laparoscópico está indicado para pacientes com SOP com resistência ovulatória ao uso do citrato de clomifeno, índice de massa corpórea (IMC) inferior a 30 kg/m2 e hormônio luteinizante (LH) pré-cirúrgico superior 10 UI/L. A técnica operatória de preferência deve ser a realização de 5 a 10 perfurações na superfície de cada ovário bilateralmente por meio do uso de energia monopolar.

Efeitos da administração perinatal do citrato de clomifeno na função reprodutiva de ratos Wistar: comportamento sexual, avaliação hormonal e plasmática / Effects of perinatal administration of Clomiphene Citrate on the reproductive function of Wistar rats: sexual behavior, plasma and hormonal evaluation

A diferenciação sexual cerebral é um fenômeno importante que ocorre no período perinatal essencial para definir alguns padrões comportamentais na orientação sexual na fase adulta. Este evento ocorre após uma descarga abrupta da testosterona testicular no recém-nascido que é convertido em estrógeno E2 pela aromatase no hipotálamo do neonato e, juntamente com aquela de origem materna promove as alterações no cérebro que determinam a orientação sexual masculina do neonato. Em fêmeas, o E organiza o cérebro feminino e a orientação sexual. Assim, investigou-se o efeito do Citrato de Clomifeno, um inibidor da aromatase em ratos machos e fêmeas tratados perinatalmente. Os resultados mostraram alterações comportamentais e bioquímicas compatíveis com a desmasculinização, alteração do comportamento sexual de ambos os sexos, comportamento homossexual, ciclo estral, alteração dos níveis de testosterona, estrógeno, FSH e LH e do peso dos órgãos na fase adulta. Os resultados são explicados pelo bloqueio da aromatase, no período da diferenciação sexual cerebral

Sexual differentiation of the brain is an important phenomenon that occurs perinatally essential to define some behavioral patterns of sexual orientation in adulthood. This event occurs after an abrupt discharge of testicular testosterone in newborns that E2 is converted into estrogen by aromatase in the hypothalamus of the newborn and, along with that of maternal origin promotes changes in the brain that determine sexual orientation male neonate. In females, the E organizes the female brain and sexual orientation. Thus, we investigated the effect of clomiphene citrate, aromatase inhibitor in male and female rats treated perinatally. The results showed behavioral and biochemical changes consistent with demasculinization, altered sexual behavior of both sexes, homosexual behavior, estrous cycle, changing levels of testosterone, estrogen, FSH and LH and organ weight in adulthood. The results are explained by blocking the aromatase during the period of sexual differentiation of the brain

Estimulação ovariana controlada e inseminação intrauterina: uma terapia atual? / Controlled ovarian stimulation and intrauterine insemination: an actual therapy?

OBJETIVO: Analisar a taxa de gravidez na inseminação intrauterina (IIU), aferindo eventuais fatores prognósticos de sucesso. MÉTODOS: Estudo retrospectivo de ciclos de IIU ocorridos de janeiro de 2007 a julho de 2010 em uma Unidade de Medicina da Reprodução do Hospital Vila Nova de Gaia. Os ciclos foram precedidos por estimulação ovárica controlada e monitorizada por ecografia endovaginal. Avaliou-se a taxa de gravidez em função da idade da mulher, tipo e duração da infertilidade, motilidade no espermograma, número de folículos e fármaco usado na estimulação ovárica. A análise estatística foi efetuada com o Statistical Package for the Social Sciences (SPSS 17), com um nível de significância 5 por cento (p<0,05). RESULTADOS: O estudo integrou 139 casais submetidos a 220 ciclos de IIU. A taxa global de gravidez por ciclo foi de 18,6 por cento e, das 41 grávidas, 5 foram gemelares (12,1 por cento). Ocorreu maior taxa de gravidez abaixo dos 30 anos (28,5 vs 15,7 por cento; p=0,02), duração de infertilidade <3 anos (23,8 vs 13,9 por cento; p=0.05), espermograma sem alterações da motilidade (23,2 vs 10,3 por cento; p=0,01) e na presença de dois folículos no momento da ovulação face ao desenvolvimento monofolicular (27,7 vs 14,2 por cento; p=0,030). As taxas gravídicas com citrato de clomifeno, gonadotrofinas e a sua associação foram de 13,0, 26,1 e 28,6 por cento, respectivamente, com diferença significativa na taxa de gravidez clínica entre citrato de clomifeno e gonadotrofinas. CONCLUSÕES: A IIU mantém-se como um natural ponto de partida para casais convenientemente selecionados. Idades mais jovens, menor duração da infertilidade e espermograma sem alterações na motilidade constituem fatores de bom prognóstico e a estimulação com gonadotrofinas contribui para melhoria da taxa de gravidez.

PURPOSE: To evaluate the pregnancy rate in intrauterine insemination (IUI), and to determine possible prognostic factors of successful pregnancy. METHODS: A retrospective study of IUI cycles performed in the Reproductive Medicine Unit of Vila Nova de Gaia Hospital, between January 2007 and July 2010. The IUI cycles were preceded by ovarian stimulation and monitored by vaginal ultrasound. Clinical pregnancy rates were analyzed according to the woman’s age, type and duration of infertility, spermatozoa parameters assessed in the spermogram, number of mature follicles and the drug used for ovarian stimulation. Statistical analysis was performed using the Statistical Package for the Social Sciences (SPSS17), with the level of significance set at p<0.05. RESULTS: The study comprised 139 couples who underwent 220 IUI cycles. The absolute pregnancy rate per cycle was 18.6 percent. Of the 41 clinical pregnancies, 5 were twin pregnancies (12.1 percent). The pregnancy rate was higher at ages <30 years (28.5 vs 15.7 percent; p=0.024), duration of infertility <3 years (23.8 vs 13.9 percent; p=0.05), normal sperm motility (23.2 vs 10.3 percent; p=0.01) and with two follicles at the time of insemination (27.7 vs 14.2 percent for monofollicular growth; p=0.030). The pregnancy rates obtained with clomiphene citrate, gonadotropins and combined clomiphene citrate/gonadotropin were 13.0, 26.1 and 28.6 percent, respectively, with a statistically significant difference in clinical pregnancy rate between clomiphene citrate and gonadotropin. CONCLUSIONS: IUI remains a natural starting point for conveniently selected couples with infertility. Younger age and normal sperm motility are good prognostic factors. Gonadotrophin stimulation seems to be an important tool for improving the pregnancy rate of IUI.

Clomiphene fails to revert hypogonadism in most male patients with conventionally treated nonfunctioning pituitary adenomas / Clomifeno não reverte o hipogonadismo na maioria dos homens com adenomas pituitários não funcionais tratados de forma convencional

OBJETIVE: To evaluate the effect of clomiphene in men with hypogonadism and conventionally treated nonfunctioning pituitary adenomas (NFPA). PATIENTS AND METHODS: Open label, single-arm, prospective trial. Nine hypogonadal men (testosterone < 300 ng/dL and low/normal LH) with previously treated NFPA. Clomiphene (50 mg/day orally) for 12 weeks. Testosterone, estradiol, LH, FSH, prolactin and erectile function were evaluated before and after 10 days, 4, 8 and 12 weeks of clomiphene treatment. RESULTS: After clomiphene treatment, testosterone and erectile function improved in only one patient. In the remaining eight patients, testosterone levels decreased whereas LH, FSH, and estradiol remained unchanged. Insulin sensitivity increased in unresponsive patients. CONCLUSIONS: Compared with hypogonadal men with prolactinomas under dopaminergic therapy, clomiphene treatment failed to restore normal testosterone levels in most patients with conventionally treated NFPA.

OBJETIVO: Avaliar o efeito do clomifeno em homens com hipogonadismo e adenoma hipofisário não funcionante (NFPA) previamente tratados. PACIENTES E MÉTODOS: Aberto, braço único, prospectivo. Nove homens hipogonádicos (testosterona < 300 ng/dL e LH normal/baixo) com NFPA previamente tratados. Clomifeno (50 mg/dia oral) por 12 semanas. Testosterona, estradiol, LH, FSH, prolactina e função erétil foram avaliados antes e após 10 dias, 4, 8 e 12 semanas de clomifeno. RESULTADOS: Após clomifeno, a testosterona e a função erétil melhoraram em um paciente. Em outros oito pacientes, os níveis de testosterona reduziram enquanto os níveis de LH, FSH, e estradiol permaneceram inalterados. A sensibilidade à insulina aumentou nos não respondedores. CONCLUSÕES: Em contraste com homens hipogonádicos com prolactinomas tratados com agonistas dopaminérgicos, a maioria dos hipogonádicos com NFPA falha em restaurar os níveis de testosterona durante o uso de clomifeno.

Uso de la metformina en el tratamiento de pacientes infértiles con síndrome de ovarios poliquísticos / Use of metformin in the treatment of infertile patients with polycystic ovary syndrome

Determinar el efecto de la terapia con metformina en pacientes infértiles con síndrome de ovarios poliquísticos. Estudio clínico, prospectivo y descriptivo. Incluyó pacientes con diagnóstico de síndrome de ovarios poliquísticos, infertilidad y resistencia a la insulina, a las que se les administró tratamiento con metformina por 3 meses. Las pacientes que no se embarazaron en ese período recibieron tratamiento con citrato de clomifeno, hasta un máximo de 6 meses. En el Servicio de Fertilidad Maternidad "Concepción Palacios". Caracas. Resultados: Se completó un total de 62 pacientes. La tasa de embarazo de 25,8 por ciento (19 pacientes). Un 57,9 por ciento de las pacientes lograron embarazo con 3 meses de tratamiento, con una P= 0,492 lo cual no fue estadísticamente significante. La tasa de embarazos con citrato de clomifeno fue de 23,5 por ciento (8 pacientes), P=0,684. El 63,2 por ciento (12) tuvo un embarazo a término. La tasa de aborto fue de 26,3 por ciento (5). La metformina induce ovulación espontánea en pacientes con síndrome de ovarios poliquísticos. No existe diferencia estadística entre la tasa de embarazos con la terapia con metformina sola y metformina con citrato de clomifeno. La metformina mejora la evolución de embarazo

To determine the effect of treatment with metformin in infertile patients with polycystic ovary syndrome. Clinical, prospective and descriptive study. Infertile anovulatory patients with polycystic ovary syndrome and insulin resistant were included, and all of them, were treated with metformin for 3 months. Patients who did not ovulate in this time, received clomiphene citrate for 6 months. Fertility Service of Maternidad "Concepcion Palacios". 62 infertile patients were included in this study. The pregnancy rate was 25.8 percent (19 patients). The 57.9 percent of women became pregnant with metformin administration for 3 months, with P= 0.492, it was not statistical significance. The pregnancy rate with clomiphene citrate was 23.5 percent (8 patients), P= 0.684. The abortion rate was 26.3 percent (5). The metformin induce ovulation in anovulatory polycystic ovary syndrome women, whereas the pregnancy rate resulted similar in both treatment groups: metformin alone and metformin and clomiphene citrate

Dificuldades no diagnóstico e tratamento de homem com síndrome metabólica e hipogonadismo / Difficulties in the diagnosis and treatment of a man with metabolic syndrome and hypogonadism

Descreve-se o caso de um homem com síndrome metabólica caracterizada por obesidade centrípeta, resistência à insulina, hipertensão arterial e concentrações baixas de HDL-colesterol e altas de triglicérides. Associadas ao quadro, havia diminuição da libido e concentrações sanguíneas baixas de testosterona total e livre, com gonadotrofinasnormais. Observados, também, teor sérico aumentado de transaminase glutâmico pirúvica e grande aumento da ferritina, mas a investigação de hemocromatose foi negativa. O tratamento com alimentação correta, exercício físico moderado e metformina desfez o quadro da síndrome metabólica e do hipogonadismo.

A man with metabolic syndrome characterized by central obesity, insulin resistance, low concentrations of HDL, high triglycerides, and high blood pressure is described. Associated to those findings, he had decreased libido and low blood concentrations of total and free testosterone, but the gonadotropin level was normal. There was also increased glutamicpyruvictransaminase and large increase in ferritin, but the investigation of hemochromatosis was negative. Treatment with proper nutrition, mild physical activity and metformin reversed the framework of metabolic syndrome and hypogonadism.