Comparison between Slow Freezing and Vitrification in Terms of Ovarian Tissue Viability in a Bovine Model / Comparação da viabilidade do tecido ovariano após congelamento lento e vitrificação em modelo bovino

Abstract Objective To assess the viability of bovine ovarian tissue after cryopreservation through either slow freezing or vitrification, and to compare it to that of control tissue by performing morphological analyses. Methods The study included 20 bovine ovarian cortex fragments that were divided into control, vitrification, and slow freezing groups. Each group consisted of four fragments of the same ovary, two fixed without cultivation, and two fixed with cultivation. Tissues were evaluated based on follicular morphology immediately after heating and after 7 days of culture, and compared with the control group. Results A total of 240 fragments were analyzed, generating a sample of 1,344 follicles without cultivation and 552 with cultivation. When the non-cultivated samples were classified as non-atretic follicles, 572 were found in the control group, 289 in the vitrification group, and 373 in the slow freezing group, showing no significant differences. When classified as atretic, 46 follicles were found in the control group, 23 in the vitrification group, and 41 in the slow freezing group, also showing no statistical difference. In the post-culture sample, an evolution of the follicular stages could be observed. This finding was important to support that the follicles considered non-atretic in the non-cultivated group were actually viable in the morphological evaluation. Conclusion With no differences between the protocols, vitrification was shown to be an advanced and alternative method for patients who will undergo treatments that.

Resumo Objetivo avaliar a viabilidade do tecido ovariano bovino após a criopreservação, utilizando congelamento lento e vitrificação, e comparando com o tecido controle por meio de análises morfológicas. Métodos o estudo incluiufragmentos de córtex de vinte ovários bovinos divididos em grupos controle, vitrificação e congelamento lento. Cada grupo foi composto por quatro fragmentos do mesmo ovário, sendo dois fragmentos fixados sem cultivo e dois fragmentos fixados pós-cultivo. Os tecidos foram avaliados pela morfologia folicular logo após o aquecimento e após sete dias de cultivo, e comparados com o grupo controle. Resultados um total de 240 fragmentos foi analisado, gerando uma amostra de 1.344 folículos sem cultivo e 552 pós-cultivo. Quando a amostra sem cultivo teve seus folículos agrupados em não atrésicos, obtivemos 572 no grupo controle, 289 no vitrificação, e 373 no congelamento lento, não apresentando diferença estatística. Quando agrupados em atrésicos, o grupo controle apresentou 46 folículos, o vitrificação, 23, e o congelamento lento, 41, não apresentando também diferença estatística. Na amostra pós-cultivo, podemos observar uma evolução dos estágios foliculares: esse achado foi importante para sustentar que os folículos considerados não atrésicos na avaliação morfológica sem cultivo estavam realmente viáveis. Conclusão não havendo diferenças entre os protocolos, a vitrificação se mostra um avanço e um método alternativo para pacientes que irão se submeter a tratamentos que podem levar a uma falência ovariana, uma vez que a metodologia é mais barata, mais rápida e mais bem adaptável a uma rotina de um laboratório.

Criopreservação de oócitos / Oocytes cryopreservation

criopreservação de oócitos atualmente representa uma grande evolução em Reprodução Humana Assistida. Essa técnica consiste na conservação de células ou tecidos a temperaturas inferiores a -196¨¬C. A criopreservação de oócitos é um dos principais destaques, que surgiu com o objetivo de preservar a fertilidade feminina e, ainda, contornar as questões éticas e legais associadas ao congelamento de embriões. As técnicas de criopreservação vêm sendo aprimoradas, tendo sido observado um avanço notável nas taxas de fertilização obtidas a partir de oócitos congelados. Com base nisto, este estudo teve como objetivo realizar uma revisão bibliográfica sobre dois métodos de criopreservação (congelamento lento e vitrificação). Para isso, realizaram-se leitura e seleção de informações trabalhadas por outros autores em revistas científicas, sites de busca e livros específicos de reprodução humana assistida. Foram analisados: histórico da criopreservação de oócitos; indicações; crioprotetores; métodos de criopreservação e resultados das taxas de fertilização, gravidez e aborto segundo pesquisas já realizadas tanto com congelamento lento quanto com vitrificação de oócitos. Apesar dos resultados favoráveis à criopreservação oocitária, são necessárias mais pesquisas para que haja estabilização dos resultados e estabelecimento de uma técnica de criopreservação de oócitos humanos que seja universal e padronizada, podendo ser aplicada com sucesso nas clínicas de Reprodução Humana Assistida.

Cryopreservation of oocytes currently represents a major evolution in the human assisted reproduction. This technique consists of the conservation of cells or tissues in temperatures less than -196 ¢ªC. In view of the controversy in several cultures on legal and ethical issues associated with the freezing of embryos, the development of techniques that could solve this problem became necessary. The cryopreservation of oocytes is one of the highlights, aiming to preserve the fertility of women. The techniques of cryopreservation have been improving in search of quality and good results. Nowadays, we observe a progress in fertilization rates obtained from frozen oocytes. Our objective was to carry out a bibliographic review of two methods of cryopreservation (slow freezing and vitrification). In order to do that, we read and checked information provided by other authors in scientific journals, search engines and books on human assisted reproduction. We analyzed: history of oocytes cryopreservation; indications; cryoprotectors; methods and results of cryopreservation of fertilization, pregnancy and abortion rates, according to other surveys on slow freezing and oocyte vitrification. Despite the favorable results of oocytes cryopreservation, further studies are necessary to stabilize the results and to establish a technique which be universal for cryopreservation of human oocytes and can be successfully applied in human assisted reproduction clinics.