Avaliação da microdureza e do potencial antimicrobiano de cimentos para cimentação modificados com diacetato de clorexidina a 0, 5% / Microhardness and antimicrobial potential evaluation of cements for cementation modified with 0, 5% diacetate chlorhexidine

O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a microdureza e o potencial antimicrobiano de três cimentos para cimentação utilizados em dentística modificados com diacetato de clorexidina a 0,5%. Para o teste de exaustão foram usados 48 corpos de prova de 5 mm de diâmetro por 2 mm de altura, colocados numa placa de 96 orifícios, divididos em 2 corpos de prova de acordo com o período de eluição para cada grupo previamente determinado. A eluição foi feita com PBS (tampão fostato), tornando o ambiente isotônico, por períodos de 60, 30 e 15 dias, ou sem exaustão (imediato), com posterior exposição ao inóculo bacteriano (Streptococcus mutans em 80 Unidades Formadoras de Colônias - UFC), em meio isotônico para evitar a morte da bactéria. Após 60 minutos de exposição a 37ºC, cada corpo de prova recebeu 100 µL de agar TSA, para a análise do crescimento das colônias. A viabilidade celular foi avaliada através do teste colorimétrico de Metiltetrazolium (MTT), em que foi utilizada uma suspensão celular L929 (fibroblastos gengival de camundongo), linhagem recomendada pela ISO 10993-5 de 2009 para a realização dos testes de citotoxicidade. As amostras ficaram em eluição pelos períodos de 24 horas, 72 horas e 7 dias , momentos em que foram aliquotados 200 µL da solução de eluição do corpo de prova, para a realização do teste. No geral foram testadas quatro réplicas de cada uma das amostras obtidas distribuídas nos grupos de corpo de prova previamente definidos, sendo confeccionados 18 corpos de prova com 5 mm de diâmetro por 2 mm de altura. A análise de microdureza Knoop (KHN) foi feita confeccionando cinco espécimes para cada grupo experimental com 5 mm de diâmetro e 2 mm de altura, incluídos em seis blocos de resina acrílica rosa. Cada grupo foi denominado conforme os respectivos tratamentos a serem utilizados. Grupo 1 (G1) - cimento de fosfato de zinco sem diacetato de clorexidina; Grupo 2 (G2) - Ketac™ Cem Easymix sem diacetato de clorexina; Grupo 3 (G3) - RelyX™ U 200 sem diacetato de clorexidina; Grupo 4 (G4) - cimento de fosfato de zinco com diacetato de clorexidina 0,5%; Grupo 5 (G5) - Ketac™ Cem Easymix com diacetato de clorexidina 0,5%; Grupo 6 (G6) - RelyX™ U 200 com diacetato de clorexidina 0,5%. Em relação ao teste de exaustão, o cimento de fosfato de zinco foi o que apresentou melhor atividade antimicrobiana. No referente à citotoxicidade, não houve efeito citotóxico significativo entre todas as amostras testadas, tendo apenas o cimento de fosfato de zinco sem adição de diacetato de clorexina no período de eluição de 72 h ficado ligeiramente acima da barra de viabilidade celular. Considerando a microdureza Knoop, o cimento de fostato de zinco apresentou comportamento inferior ao Ketac™ Cem Easymyx e ao RelyX™ U 200, que não foram diferentes entre si e, assim, a adição do diacetato de clorexidina a 0.5% não modificou a propriedade mecânica analisada dos cimentos testados.

The aim of this study was to evaluate, in vitro, the hardness and the antimicrobial potential of three cements for cementation used in dentistry modified with 0.5% chlorhexidine diacetate. For the exhaustion test were used 48 specimens samples with 5 mm in diameter and 2 mm in height, placed in a 96 well plate, divided into 2 specimens samples according to the elution period for each previously determined group. The elution was done with PBS (phosphate buffer), making an isotonic environment for periods of 60, 30 and 15 days, or without exhaustion (immediate), with subsequent exposure to the bacterial inoculum (Streptococcus mutans in 80 Colony Forming Units - UFC) in an isotonic medium to prevent the death of bacteria. After 60 minutes at 37°C exposure, each specimen received 100 µL of agar TSA, for the analysis of the colonies' growth. Cell viability was evaluated by colorimetric test Metiltetrazolium (MTT), which was used in a suspension of the cell type L929 (mouse fibroblasts gum), strain recommended by ISO 10993-5 2009 for carrying out the cytotoxicity tests. The samples were eluted in the periods of 24 hours, 72 hours and 7 days, when 200 µL were aliquoted from specimens samples eluting solution, to perform the colorimetric test. In general, four replicates were tested of each obtained samples, distributed into previously defined specimen groups, totalizing 18 specimens samples with a diameter of 5 mm and a height of 2 mm. The Knoop microhardness analysis (KHN) was done preparing five specimens samples for each experimental group with 5 mm in diameter and 2 mm in height, included in 6 pink acrylic resin blocks. Each group was designed according to the treatment to be received. Group 1 (G1) - Zinc phosphate cement without chlorhexidine diacetate; Group 2 (G2) - Ketac™ Cem Easymyx without clorexina diacetate; Group 3 (G3) - RelyX™ U 200 without chlorhexidine diacetate; Group 4 (G4) - Zinc phosphate cement with 0,5 % chlorhexidine diacetate; Group 5 (G5) - Ketac™ Cem EasyMix with 0,5% chlorhexidine diacetate; Group 6 (G6) - RelyX™ U 200 with 0,5% chlorhexidine diacetate. Regarding to exhaustion test, zinc phosphate cement showed the best antimicrobial activity. With regard to cytotoxicity, there was no significant cytotoxic effect of all tested samples, having only the zinc phosphate cement without adding chlorhexidine diacetate in the elution period of 72 h, stayed slightly above the cell viability bar. Considering the Knoop hardness, zinc phosphate cement showed less behavior than Ketac™ Cem Easymyx and RelyX™ U 200, which were not different between them. Thus, the addition of 0.5% chlorhexidine diacetate did not modified the mechanical property of the tested cements.

Avaliação do comportamento físico e microbiológico da incorporação de diacetato de clorexidina a resinas acrílicas a base de PMMA / Evaluation of physical and microbiological behavior of the chlorhexidine diacetate incorporation in PMMA based acrylic resins

Neste trabalho, objetivou-se avaliar as propriedades físicas e microbiológicas de resinas acrílicas a base de polimetilmetacrilato após a incorporação de sal de diacetato de clorexidina (CDA) às mesmas. Para tal, foram confeccionados corpos de prova (CDPs) com as resinas VIPI COR® e Duralay®, sem e com incorporação de 0,5%; 1,0% e 2,0% de CDA, totalizando 8 grupos. A cromatografia líquida foi utilizada para mensurar a liberação de CDA pelas resinas acrílicas, e ainda, mensurar sua lixiviação de monômeros residuais.Para isso, os CDPs foram armazenados individualmente em placas para cultura celular de 24 poços contendo 1 ml de água destilada estéril em cada poço. Após tempo de armazenagem de 2 horas, 7 dias, 14 dias, 21 dias e 28 dias, a 37oC, a solução foi retirada e a liberação de clorexidina ou monômeros residuais foi avaliada utilizando-se HPLC associado a espectrometria ultravioleta. A atividade antifúngica para C. albicans foi avaliada utilizando teste de difusão em ágar, no qual os CDPs foram colocados em placas de BHI previamente inoculadas com C. albicans, com medição do halo de inibição após 48 horas de incubação a 37ºC. A análise do grau de conversão das resinas se deu através da técnica de espectroscopia de infravermelho transformada de Fourier – FTIR utilizando-se uma amostra de resina não polimerizada de cada grupo e realizados 4 scans de absorbância. Para a mensuração da sorção de água por parte das resinas contendo CDA, foram confeccionados 10 corpos de prova para cada grupo, que foram posicionados em suporte dentro de dessecador a ± 37ºC para remoção de umidade intrínseca (m1) e depois imersos em 100 ml de água deionizada por 7 dias a ±37°C, tendo a água trocada diariamente. Após este intervalo, os corpos foram secos para obter a nova massa da resina (m2). As massas obtidas foram incluídas em fórmula matemática para obtenção do grau de sorção. Após obtenção dos resultados, quando comparou-se o halo inibição entre ...

This work aimed to evaluate physical and microbiological properties of PMMA acrylic resins after incorporating chlorhexidine diacetate salt (CDA) to them . For that, specimens ( CDPs ) were made with resins VIPI COR ® and Duralay ® , with and without incorporation of 0.5 % , 1.0 % and 2.0 % of CDA , totaling 8 groups . The liquid chromatography was used to measure the release of CDA by acrylic resins , and also to measure leaching of residual monomers . For that, CDPs were stored individually in cell culture plates to 24 well containing 1 ml of sterile distilled water in each well. Storage time after 2 hours , 7 days, 14 days, 21 days and 28 days at 37 ° C , the solution was removed and release of residual monomers or chlorhexidine was evaluated by using ultraviolet spectrometry combined with HPLC. The antifungal activity to C. albicans was evaluated using the agar diffusion method , in which the CDPs were placed on BHI plates inoculated with C. albicans with measuring the zone of inhibition after 48 hours incubation at 37 ° C. The analysis of the resins´ conversion degree is given by infrared spectroscopy Fourier transform - FTIR using an uncured resin sample in each group and 4 scans performed absorbance . For the measurement of resins containing CDA ´s water sorption, 10 specimens were prepared for each group , which were placed in support within desiccator ± 37 º C to remove intrinsic ( m1 ) and then immersed moisture in 100 ml deionized water for 7 days at ± 37 ° C , and the water was changed daily. After this interval , the specimens were dried to obtain the new resin´s weight ( m2 ) . The masses obtained were included in the mathematical formula for the degree of sorption. After obtaining results, when compared the inhibition halo between the tested groups and the same brand , only the analyzes between group CDA2 % x CDA 1 % group and from CDA 1 % x CDA0.5 %,showed ...

Avaliação in vitro do efeito da incorporação de clorexidina nas propriedades físicas e na atividade antibacteriana de resinas acrílicas autopolimerizáveis / Effect of the incorporation of chlorhexidine in provisional crown and bridge acrylic resins on their physical properties

Objetivo. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da incorporação de diacetato de clorexidina (CDA), em diferentes concentrações e tempos de armazenamento, nas propriedades físicas e na atividade antibacteriana de resinas acrílicas, utilizadas na confecção de coroas e pontes provisórias. Métodos. Fase I: Foram confeccionados 150 corpos de prova retangulares (3,0 mm X 10 mm X 64 mm), de acordo com a norma ISO 1567 e 150 corpos de prova quadrados (10 mm X 10 mm X 2,0 mm), utilizando-se duas resinas acrílicas autopolimerizáveis, Duralay (Reliance Dental Mfg. Co.) e Dencor (Clássico). Os corpos de prova foram distribuídos em 30 grupos (n=10/grupo) de acordo com a concentração de CDA incorporada às resinas (p/p) (A) 0%, (B) 1%, (C) 2%, (D) 4%, (E) 5%, em função do tempo de armazenamento em água destilada, a 37°C (T0 – 2h, T1 – 7 dias, T2 – 30 dias). Foram realizados os ensaios de microdureza Knoop, em microdurômetro Micromet 5104, Buehler (N), rugosidade superficial (Ra), em rugosímetro digital Mitutoyo Surftest SJ-201 (n=5) e resistência à flexão em três pontos (MPa), em uma máquina de ensaio universal EMIC MF 200 DL (n=5). Fase II: Adicionalmente, a atividade antibacteriana dos materiais sobre Streptococcus mutans foi determinada através da realização de testes de difusão em meio BHI, sendo para isso confeccionados 30 corpos de prova em forma de disco (12 mm X 3,0 mm) com as mesmas 5 concentrações (n=3/grupo). Os resultados foram tabulados e submetidos à análise estatística three-way ANOVA (Fase I) e two-way ANOVA (Fase II). Resultados. ANOVA mostrou que a adição de CDA não provocou alteração significativa na resistência à flexão dos materiais testados. A resistência à flexão é inversamente proporcional ao tempo para a resina Dencor e diretamente proporcional ao tempo para a resina Duralay. Houve aumento da microdureza com o acréscimo de CDA ao material Dencor com relação ao grupo controle, enquanto que no material Duralay a CDA não ...

Objectives. This study evaluated the effect of the incorporation of chlorhexidine diacetate salt hydrate (CDA) on the hardness, roughness and flexural strength (FS) of provisional crown and bridge acrylic resins. Methods. Step I: One hundred fifty specimens (3,0 mm X 10 mm X 64 mm) and one hundred fifty specimens (10 mm X 10 mm X 2,0 mm) of the autopolymerizing resins: Duralay (Reliance Dental Mfg. Co.) and Dencor (Clássico) were prepared, according to the ISO 1567 specification. The specimens were divided into 30 groups (n=10/group) according to the concentration of CDA (w/w): (A) 1%, (B) 2%, (C) 4%, (D) 5%, (E) 0% and the storage time in distilled water at 37°C, after mixing (T0 – 2h, T1 – 7 days, T2 – 30 days). The surface hardness was assessed using a Knoop Hardness test (KHN), the surface roughness measurements (Ra) were made using a surface roughness tester Mitutoyo Surftest SJ-201 (n=5) and the FS were tested using a 3-point bending test (n=5). Step II: Additionally, antibacterial study was performed by observing the presence of inhibition zone against Streptococcus mutans. For this test, 30 set disc-shaped specimens (12 mm X 3 mm) were prepared with the same 5 concentrations of chlorhexidine (n=3/group). Results. ANOVA showed that the addition of CDA had not a significantly lower effect on flexural strength of the tested materials. The flexural strength is inversely proportional to the time for Dencor and directly proportional for Duralay. There was a decrease of microhardness with the increase of CDA concentration on Dencor samples in relation to the control group, whereas the addition of CDA did not interfere in this property for Duralay. Surface roughness significantly increased (p<0,001) over time and increasing concentration of CDA for Dencor and did not cause significant change in Duralay. The agar diffusion test showed that all the tested groups had significant antibacterial activity against S. mutans, compared ...

Avaliação in vitro de duas resinas macias para reembasamento de próteses modificadas pela incorporação de clorexidina / In vitro evaluation of two resins-based denture soft lininers modified by chlorhexidine incorporation

Resinas macias para reembasamento de próteses são largamente utilizadas após cirurgias para estabilizarem a prótese e condicionarem o tecido, aguardando a completa cicatrização. É importante que o material não seja facilmente colonizado por biofilme oral e se possível, evite a contaminação do sítio cirúrgico. Objetivou-se avaliar o efeito da incorporação de clorexidina às resinas acrílicas macias para o reembasamento de próteses totais, através de análises de liberação, citotoxicidade e efeito inibitório de um biofilme de C. albicans. Foram confeccionados corpos de provas (CDPs) com as resinas Trusoft® e Coe-soft®, com incorporação de 0%, 0,5%, 1,0% e 2,0% de clorexidina, totalizando 8 grupos. A liberação de clorexidina foi avaliada através da mensuração da mudança na densidade óptica da solução de armazenamento, na qual ficaram imersos os CDPs, por espectrometria UV, a cada 48 horas, durante 40 dias. A citotoxicidade celular foi avaliada em fibroblastos (linhagem L929), que ficaram 24 horas em contato com meio de cultura no qual os CDPs ficaram previamente imersos, pela técnica de absorção de corante vermelho neutro após 24, 48 e 72 horas e semanalmente até o 28º dia. E, por fim, a atividade antifúngica contra a C. albicans (ATCC 10231) foi avaliada de duas maneiras: (1) teste de difusão em ágar, no qual os CDPs foram colocados em placas de BHI previamente inoculadas com C. albicans, com medição do halo de inibição após 48 horas de incubação a 37ºC; (2) a avaliação da inibição da formação de um biofilme de C. albicans sobre a superfície dos CDPs pela quantificação por metil tetrazólio (MTT) a cada 48 horas, durante 22 dias, com leitura feita em espectrofotômetro de UV. Os dados obtidos foram inseridos no programa SigmaStat (versão 3.1, USA) para realizar as análises estatísticas. As diferenças estatísticas foram determinadas por análises de variâncias do tipo ANOVA e todos os procedimentos para comparações ...

Denture soft lining materials are widely used after dental surgeries, tissue conditioning and stabilization of prostheses, until the complete tissue healing. It is important that this material not became easily colonized by oral biofilm and if possible, avoid contamination of the surgical site. The aim of this study was to evaluate the effect of chlorhexidine incorporation into resin-based soft denture lining material, considering the drug release analysis, cytotoxicity and C. albicans biofilm inhibition. Specimens were done using Trusoft® and Coe-soft®, incorporating 0%, 0.5%, 1.0% and 2.0% of chlorhexidine, totaling eight groups. The chlorhexidine release was evaluated through the measurement of change in optical density of the storage solution, which the specimens were immersed, by UV spectrometry, after every 48 hours for 40 days. The cellular cytotoxicity was evaluated in fibroblasts (strain L929), which were 24 hours in contact with culture medium, in which the specimens were previously immersed, the technique of neutral red dye uptake was used after 24, 48 and 72 hours and weekly until 28th day. Finally, the antifungal activity against C. albicans (ATCC 10231) was evaluated by two different ways: (1) agar diffusion test, in which the specimens were placed over the top of BHI agar plates previously inoculated with C. albicans, and the measurement of inhibition zone was done after 48h of incubation at 37ºC, (2) C. albicans biofilm inhibition over the specimens surface, which was mensured after every each 48 hours of biofilm and specimens co-incubation, by methyl tetrazolium (MTT), in UV/vis spectrophotometer, during 22 days. Data were analyzed with the SigmaStat software (version 3.1, USA). Statistical differences were determined by analysis of variance ANOVA and all procedures for multiple paired comparisons were made using the Holm-Sidak method, with overall ...