Providing inoculum for Didymella bryoniae studies: the effect of light spectrum and storing at low temperature / Fornecendo inóculo para estudos de Didymella bryoniae: o efeito do espectro de luz e armazenamento em baixa temperatura

Abstract The in vitro sporulation of Didymella bryoniae is of great importance for studies that require pure inoculum and in large quantities. Thus, the objectives of this study were to identify the best condition for D. bryoniae sporulation combining different light spectra (UV-A or UV-B light, white light, and continuous dark), with distinct culture media (PDA, V8, ML, and PDAB) and, to evaluate fungus' survivability stored at -20°C over time. The fungus samples were only able to sporulate when subjected to the UV-B light treatment, regardless of the culture medium. The highest appearance of spores conidium type was observed in the PDAB medium, and the lowest production occurred in the ML medium. Reproductive structures, such as perithecia and pycnidia, were observed in all culture media. However, there was considerable variation in the amount of each structure between the different culture media. The ML and V8 media showed a greater number of perithecia and the PDA and PDAB media presented a greater proportion of pycnidia compared to perithecia. The storage duration at -20°C did not affect mycelial growth or mycelial growth rate. In conclusion, the UV-B light is essential for D. bryoniae in vitro sporulation. Moreover, the culture medium composition influences the type of fungal structure produced, as well as spores' size and quantity. Freezing at -20°C is an efficient technique that can be used to store D. bryoniae for at least five months without loss of viability.

Resumo A esporulação de Didymella bryoniae in vitro é de grande importância para estudos que requerem inóculo puro e em grandes quantidades. Assim, os objetivos deste estudo foram identificar a melhor condição para esporulação de D. bryoniae combinando diferentes espectros de luz (luz UV-A ou UV-B, luz branca e escuro contínuo) com distintos meios de cultura (PDA, V8, ML e PDAB) e, avaliar a sobrevivência do fungo armazenado a -20°C ao longo do tempo. As amostras de fungo só esporularam quando submetidas ao tratamento com luz UV-B, independentemente do meio de cultura. Maior aparecimento de esporos do tipo conídio foi observado no meio PDAB, e a menor produção ocorreu no meio ML. Estruturas reprodutivas, como peritécios e picnídeos, foram observadas em todos os meios de cultura. No entanto, houve uma variação considerável na quantidade de cada estrutura entre os diferentes meios de cultura. Os meios ML e V8 apresentaram maior número de peritécios e os meios PDA e PDAB apresentaram maior proporção de picnídeos em relação aos peritécios. A duração do armazenamento a -20°C não afetou o crescimento micelial ou a taxa de crescimento micelial. Em conclusão, a luz UV-B é essencial para a esporulação de D. bryoniae in vitro. Além disso, a composição do meio de cultura influencia o tipo de estrutura fúngica produzida, bem como o tamanho e a quantidade dos esporos. O congelamento a -20°C é uma técnica eficiente que pode ser usada para armazenar D. bryoniae por pelo menos cinco meses sem perda de viabilidade

Providing inoculum for Didymella bryoniae studies: the effect of light spectrum and storing at low temperature

Abstract The in vitro sporulation of Didymella bryoniae is of great importance for studies that require pure inoculum and in large quantities. Thus, the objectives of this study were to identify the best condition for D. bryoniae sporulation combining different light spectra (UV-A or UV-B light, white light, and continuous dark), with distinct culture media (PDA, V8, ML, and PDAB) and, to evaluate fungus survivability stored at -20°C over time. The fungus samples were only able to sporulate when subjected to the UV-B light treatment, regardless of the culture medium. The highest appearance of spores conidium type was observed in the PDAB medium, and the lowest production occurred in the ML medium. Reproductive structures, such as perithecia and pycnidia, were observed in all culture media. However, there was considerable variation in the amount of each structure between the different culture media. The ML and V8 media showed a greater number of perithecia and the PDA and PDAB media presented a greater proportion of pycnidia compared to perithecia. The storage duration at -20°C did not affect mycelial growth or mycelial growth rate. In conclusion, the UV-B light is essential for D. bryoniae in vitro sporulation. Moreover, the culture medium composition influences the type of fungal structure produced, as well as spores size and quantity. Freezing at -20°C is an efficient technique that can be used to store D. bryoniae for at least five months without loss of viability.

Resumo A esporulação de Didymella bryoniae in vitro é de grande importância para estudos que requerem inóculo puro e em grandes quantidades. Assim, os objetivos deste estudo foram identificar a melhor condição para esporulação de D. bryoniae combinando diferentes espectros de luz (luz UV-A ou UV-B, luz branca e escuro contínuo) com distintos meios de cultura (PDA, V8, ML e PDAB) e, avaliar a sobrevivência do fungo armazenado a -20°C ao longo do tempo. As amostras de fungo só esporularam quando submetidas ao tratamento com luz UV-B, independentemente do meio de cultura. Maior aparecimento de esporos do tipo conídio foi observado no meio PDAB, e a menor produção ocorreu no meio ML. Estruturas reprodutivas, como peritécios e picnídeos, foram observadas em todos os meios de cultura. No entanto, houve uma variação considerável na quantidade de cada estrutura entre os diferentes meios de cultura. Os meios ML e V8 apresentaram maior número de peritécios e os meios PDA e PDAB apresentaram maior proporção de picnídeos em relação aos peritécios. A duração do armazenamento a -20°C não afetou o crescimento micelial ou a taxa de crescimento micelial. Em conclusão, a luz UV-B é essencial para a esporulação de D. bryoniae in vitro. Além disso, a composição do meio de cultura influencia o tipo de estrutura fúngica produzida, bem como o tamanho e a quantidade dos esporos. O congelamento a -20°C é uma técnica eficiente que pode ser usada para armazenar D. bryoniae por pelo menos cinco meses sem perda de viabilidade

Resistance of Brazilian wheat cultivars to blast under controlled condition / Resistência de cultivares brasileiras de trigo à brusone sob condições controladas

The first report of wheat blast in the world was in Brazil, in 1986. Since then, a great effort has been made towards the development of wheat cultivars resistant to this disease, which is caused by the fungus Pyricularia oryzae Triticum (PoT). The objective of this research was to (i) evaluate the resistance of wheat genotypes to blast and (ii) verify the correlation between disease severity on wheat spikes and sporulation rate of PoT on spike rachises. Plants of 40 cultivars grown in pots, at the flowering stage (stage 65 on the Zadoks scale), were inoculated with a suspension of conidia of a PoT isolate representative of the main variant of the fungus reported in Brazil. Severity of blast on the spikes at 5 and 7 days after inoculation (dai) and the rate of sporulation of the fungus on the rachis (conidia per g of rachis) were evaluated. Eighty percent of the cultivars that were classified in the group with the lowest sporulation rate were also classified in the group with the highest resistance at 7 dai. However, the correlation coefficients of the analysis established between the cultivar severity at 5 and 7 dai averages and the PoT sporulation rate averages were not significant (r=0.2464 and r=0.2047, respectively). Results obtained represent the updated characterization to blast of wheat cultivars in Brazil and constitute an important exploratory framework for the evaluation of the reaction of wheat genotypes based on the sporulation rate of PoT on their tissues.

O primeiro relato da brusone do trigo no mundo foi no Brasil, em 1986. Desde então, tem-se realizado um esforço muito grande com vistas ao desenvolvimento de cultivares de trigo resistentes a esta doença, a qual é causada pelo fungo Pyricularia oryzae Triticum (PoT). O objetivo deste trabalho foi de (i) avaliar a resistência de genótipos de trigo à brusone e (ii) verificar a correlação entre severidade da doença em espigas e taxa de esporulação de PoT em ráquis de espigas. Plantas de 40 cultivares brasileiras de trigo crescidas em vasos, no estádio de florescimento (estádio 65 da escala de Zadoks), foram submetidas à inoculação com uma suspensão de conídios de um isolado de PoT representativo da principal variante do fungo encontrada no Brasil. A severidade de brusone nas espigas aos cinco e sete dias após a inoculação (dai) e a taxa de esporulação do fungo nas ráquis (conídios por g de ráquis) foram avaliadas. Oitenta por cento das cultivares que foram classificadas no grupo com menor taxa de esporulação também foram classificadas no grupo de maior resistência aos sete dai. Entretanto, os coeficientes de correlação da análise estabelecida entre as médias de severidade das cultivares aos cinco e sete dai e as médias da taxa de esporulação de PoT não foram significativos (r=0,2464 e r=0,2047, respectivamente). Os resultados obtidos representam a caracterização atualizada da reação à brusone de cultivares de trigo do Brasil e constituem-se em importante marco exploratório da avaliação da reação de genótipos de trigo baseado na taxa de esporulação de PoT em seus tecidos.

Mulberry extract as an ecofriendly anticoccidial agent: in vitro and in vivo application / Extrato de amoreira como agente anticoccidiano ecologicamente correto: aplicação in vitro e in vivo

Natural products are ecofriendly agents that can be used against parasitic diseases. Eimeria species cause eimeriosis in many birds and mammals and resistance to available medications used in the treatment of eimeriosis is emerging. We investigated the in vitro and in vivo activity of Morus nigra leaf extracts (MNLE) against sporulation of oocysts and infection of mice with Eimeria papillata. Phytochemical analysis of MNLE showed the presence of seven compounds and the in vitro effects of MNLE, amprolium, DettolTM, formalin, ethanol, and phenol were studied after incubation with oocysts before sporulation. Furthermore, infection of mice with E. papillata induced an oocyst output of approximately 12 × 105 oocysts/g of feces. MNLE significantly decreased oocyst output to approximately 86% and the total number of parasitic stages in the jejunum by approximately 87%. In addition, the reduction in the number of goblet cells in the jejuna of mice was increased after treatment. These findings suggest that mulberry exhibited powerful anticoccidial activity.(AU)

Os produtos naturais são agentes ecologicamente corretos que podem ser usados contra doenças parasitárias. As espécies de Eimeria causam eimeriose em muitas aves e mamíferos e a resistência aos medicamentos disponíveis usados no tratamento da eimeriose está emergindo. Foram investigadas as atividades in vitro e in vivo dos extratos de folhas de Morus nigra (MNLE) contra esporulação de oocistos e infecção de camundongos com Eimeria papillata. A análise fitoquímica do MNLE mostrou a presença de sete compostos e os efeitos in vitro do MNLE, amprolium, DettolTM, formalina, etanol e fenol foram estudados após incubação com oocistos antes da esporulação. Além disso, a infecção de camundongos com E. papillata induziu uma produção de oocistos de aproximadamente 12 × 105 oocistos / g de fezes. O MNLE reduziu significativamente a produção de oocistos para aproximadamente 86%, e o número total de estágios parasitários no jejuno em aproximadamente 87%. Além disso, a redução no número de células caliciformes no jejuno de camundongos aumentou após o tratamento. Esses achados sugerem que a amoreira exibia uma poderosa atividade anticoccidiana.(AU)

Mulberry extract as an ecofriendly anticoccidial agent: in vitro and in vivo application / Extrato de amoreira como agente anticoccidiano ecologicamente correto: aplicação in vitro e in vivo

Abstract Natural products are ecofriendly agents that can be used against parasitic diseases. Eimeria species cause eimeriosis in many birds and mammals and resistance to available medications used in the treatment of eimeriosis is emerging. We investigated the in vitro and in vivo activity of Morus nigra leaf extracts (MNLE) against sporulation of oocysts and infection of mice with Eimeria papillata. Phytochemical analysis of MNLE showed the presence of seven compounds and the in vitro effects of MNLE, amprolium, DettolTM, formalin, ethanol, and phenol were studied after incubation with oocysts before sporulation. Furthermore, infection of mice with E. papillata induced an oocyst output of approximately 12 × 105 oocysts/g of feces. MNLE significantly decreased oocyst output to approximately 86% and the total number of parasitic stages in the jejunum by approximately 87%. In addition, the reduction in the number of goblet cells in the jejuna of mice was increased after treatment. These findings suggest that mulberry exhibited powerful anticoccidial activity.

Resumo Os produtos naturais são agentes ecologicamente corretos que podem ser usados ​​contra doenças parasitárias. As espécies de Eimeria causam eimeriose em muitas aves e mamíferos e a resistência aos medicamentos disponíveis usados ​​no tratamento da eimeriose está emergindo. Foram investigadas as atividades in vitro e in vivo dos extratos de folhas de Morus nigra (MNLE) contra esporulação de oocistos e infecção de camundongos com Eimeria papillata. A análise fitoquímica do MNLE mostrou a presença de sete compostos e os efeitos in vitro do MNLE, amprolium, DettolTM, formalina, etanol e fenol foram estudados após incubação com oocistos antes da esporulação. Além disso, a infecção de camundongos com E. papillata induziu uma produção de oocistos de aproximadamente 12 × 105 oocistos / g de fezes. O MNLE reduziu significativamente a produção de oocistos para aproximadamente 86%, e o número total de estágios parasitários no jejuno em aproximadamente 87%. Além disso, a redução no número de células caliciformes no jejuno de camundongos aumentou após o tratamento. Esses achados sugerem que a amoreira exibia uma poderosa atividade anticoccidiana.

Culture medium and inoculation methodology for the study of soft root rot caused by Phytopythium sp / Meio de cultura e metodologia de inoculação para o estudo da podridão mole de raízes causada por Phytopythium sp

ABSTRACT: Cassava (Manihot esculenta Crantz) is an important crop in Brazil and Pará is the major producer of roots. High temperature and humidity of tropical regions favor the development of various diseases, among them the cassava root rot. The objective of this study was to evaluate the effect of luminosity and culture medium on the mycelial growth and sporulation of Phytopythium sp. associated with different methods of inoculation on cassava roots. In vitro tests for pathogen growth were established in a 2 x 6 factorial design (luminosity x culture medium) with five replicates and the means were compared by t test (P≤0.05). The culture medium containing sweet cassava root produced greater mycelial development and higher pathogen sporulation and it was the most suitable medium for pathogen culture. The culture under absence of light generated better mycelial growth than culture under 12 hour of light. Regarding the type of inoculation, the response was better when deeper injuries were induced.

RESUMO: A mandioca (Manihot esculenta Crantz) é uma importante cultura para o Brasil, onde o Pará é o principal produtor de raízes. Regiões tropicais com alta umidade e temperatura favorecem o desenvolvimento de diversas doenças, como as podridões de raiz. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da luminosidade e de meios de cultura no crescimento micelial e na esporulação de Phytopythium sp. e analisar métodos de inoculação do patógeno em raízes de mandioca destacadas. Os ensaios in vitro foram instalados em esquema fatorial 2x6 (luminosidade x meio de cultura), com cinco repetições e as médias comparadas pelo teste t (p≤0,05). O meio de cultura contendo raiz de mandioca mansa proporcionou maior desenvolvimento micelial e maior esporulação do patógeno e é o mais adequado para o cultivo do patógeno. O cultivo sob ausência de luz gerou melhor crescimento micelial do que o cultivo sob 12 horas de luz. Quanto ao tipo de inoculação, a resposta foi melhor nas raízes que obtiveram ferimentos mais profundos.

Culture medium and inoculation methodology for the study of soft root rot caused by Phytopythium sp / Meio de cultura e metodologia de inoculação para o estudo da podridão mole de raízes causada por Phytopythium sp

Cassava (Manihot esculenta Crantz) is an important crop in Brazil and Pará is the major producer of roots. High temperature and humidity of tropical regions favor the development of various diseases, among them the cassava root rot. The objective of this study was to evaluate the effect of luminosity and culture medium on the mycelial growth and sporulation of Phytopythium sp. associated with different methods of inoculation on cassava roots. In vitro tests for pathogen growth were established in a 2 x 6 factorial design (luminosity x culture medium) with five replicates and the means were compared by t test (P0.05). The culture medium containing sweet cassava root produced greater mycelial development and higher pathogen sporulation and it was the most suitable medium for pathogen culture. The culture under absence of light generated better mycelial growth than culture under 12 hour of light. Regarding the type of inoculation, the response was better when deeper injuries were induced.(AU)

A mandioca (Manihot esculenta Crantz) é uma importante cultura para o Brasil, onde o Pará é o principal produtor de raízes. Regiões tropicais com alta umidade e temperatura favorecem o desenvolvimento de diversas doenças, como as podridões de raiz. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da luminosidade e de meios de cultura no crescimento micelial e na esporulação de Phytopythium sp. e analisar métodos de inoculação do patógeno em raízes de mandioca destacadas. Os ensaios in vitro foram instalados em esquema fatorial 2x6 (luminosidade x meio de cultura), com cinco repetições e as médias comparadas pelo teste t (p0,05). O meio de cultura contendo raiz de mandioca mansa proporcionou maior desenvolvimento micelial e maior esporulação do patógeno e é o mais adequado para o cultivo do patógeno. O cultivo sob ausência de luz gerou melhor crescimento micelial do que o cultivo sob 12 horas de luz. Quanto ao tipo de inoculação, a resposta foi melhor nas raízes que obtiveram ferimentos mais profundos.(AU)

Desenvolvimento tecnológico do Bacillus coagulans BVB5 como potencial cepa probiótica / Technological development of Bacillus coagulans BVB5 as potential probiotic strains

Introdução: O aumento da demanda por alimentos funcionais, os quais incluem os suplementados ou fermentados por microrganismos probióticos, resultou no avanço da pesquisa e desenvolvimento de novas cepas potencialmente probióticas. Os microrganismos probióticos pertencentes ao gênero Bacillus spp. são atraentes devido a sua estabilidade inerente de bactérias formadoras de esporos. Os esporos permitem uma vida de prateleira prolongada e aumentam a capacidade do microrganismo de sobreviver às barreiras gástricas, que se revelam uma vantagem sobre os lactobacilos. Objetivo: Foram realizados experimentos para o desenvolvimento tecnológico de duas cepas formadoras de esporos de Bacillus coagulans BVB1 e BVB5 como potenciais microrganismos probióticos objetivando avaliar o potencial probiótico dos mesmos. Método: Como primeira etapa, as caracterizações fenotípica e genotípica identificaram que a cepa BVB1 não era B. coagulans e sim B. subtilis. Os estudos seguiram com a cinética da fermentação/esporulação apenas da cepa de Bacillus coagulans BVB5. Conclusão: O desafio da esporulação de Bacillus coagulans BVB5 foi vencido, fato que pode ser verificado na cinética da fermentação que apresentou resultados superiores a 99% de grau de esporulação

Introduction: The increased demand for functional foods, which include those supplemented or fermented by probiotic microorganisms, resulted in the advancement of research and development of new potentially probiotic strains. Probiotic microorganisms Bacillus spp. Are attractive because of their inherent stability of spore forming bacteria. Spores allow prolonged shelf life and increase the ability to survive gastric barriers, which prove to be an advantage over lactobacilli. Objective: Experiments were performed for the technological development of Bacillus coagulans BVB1 and BVB5 as potential probiotic microorganisms with two strains of Bacillus coagulans aiming to evaluate the efficacy of probiotic product composed of spore forming microorganism (Bacillus coagulans strains BVB1 and BVB5). Method: As a first step, phenotypic and genotypic characterization identified that the BVB1 strain was not B. coagulans but B. subtilis. Although Bacillus subtilis strain BVB1 presented a technological potential to be used as a probiotic strain in food additives, the studies followed with the kinetics of fermentation/sporulation of Bacillus coagulans BVB5, in agreement with the master's project originally proposed. Conclusion: The challenge of sporulation of Bacillus coagulans BVB5 was overcome, a fact that can be verified with the results of fermentation kinetic which presented sporulation degree more than 99%

Evaluation of the gelatin technique for the preservation of phytopathogenic fungi / Avaliação da técnica da gelatina para preservação de fungos fitopatogênicos

The preservation methods for fungi have great importance in ex situ collections, representing important biological heritage, useful for mycologists and plant pathologists in several scientific works. However, there is a lack of studies for a suiTable and efficient preservation method for the different groups of fungi. Although, the most appropriate is the one that maintain, even after long periods, the original characteristics of culture: viability, sporulation and pathogenicity, excluding mutations and undesirable contamination. The choice will depend of the laboratory infrastructure, microorganism, objectives, preferences and knowledge of the researcher. We conducted this study inside the Laboratory of Mycology and Plant Protection (LAMIP) in UFU (Universidade Federal de Uberlândia), localized in Uberlândia (MG), Brazil. The objective was to evaluate the gelatin preservation method (17 cultures), never used before for phytopathogenic fungi. Other classical methods were concomitantly evaluated, such as sterile soil (68 cultures), resistant structures (Sclerotinia sclerotiorum) in 4°C (10 strains) and mineral oil (31 cultures). We examined the time for maintaining the viability, sporulation and colonization in host tissues preserved in different dates. The gelatin method remained viability in 10 cultures; this method is suiTable for preservation of the genera and species: Colletotrichum spp., Septoria spp., Fusarium spp., F. moniliforme var. subglutinans, Macrophomina spp., Phomopsis spp. and Verticillium spp. The viability remained in 38 strains of sterile soil, three of mineral oil, and one strain of sclerotia reached a maximum preservation time in 4°C of four years.

Os métodos de preservação de fungos têm grande importância em coleções ex situ, representando importante patrimônio biológico, útil para micologistas e fitopatologista como suporte para vários trabalhos científicos. Não existe um método de preservação adequado e eficiente para os diferentes grupos de fungos, entretanto, o mais apropriado é o que mantém, mesmo após longos períodos, as características originais da cultura: viabilidade, esporulação e patogenicidade, excluindo mutações e contaminação indesejável. A escolha dependerá da infra-estrutura laboratorial, microorganismo, objetivos, preferências e conhecimentos do pesquisador. Este trabalho foi realizado no Laboratório de Micologia e Proteção Vegetal (LAMIP) da UFU (Universidade Federal de Uberlândia), localizado em Uberlândia (MG), Brasil. O objetivo foi avaliar o método de preservação da gelatina (17 culturas), nunca testado antes para fungos fitopatogêncios. Concomitantemente foram avaliados métodos clássicos, como solo estéril (68 culturas), escleródios (Sclerotinia sclerotiorum) em 4 ° C (10 isolados) e óleo mineral (31 culturas). Avaliou-se a manutenção na viabilidade, esporulação e patogenicidade dos isolados. O método da gelatina manteve a viabilidade em 10 culturas, sendo adequado para a preservação dos gêneros e espécies: Colletotrichum spp., Septoria spp., Fusarium spp., F. moniliforme var. subglutinans, Macrophomina spp., Phomopsis spp. e Verticillium spp. A viabilidade foi mantida em 38 isolados em solo estéril, três isolados em óleo mineral e um apenas um isolado de escleródio atingiu um tempo máximo de preservação de quatro anos.

Efeito da temperatura no crescimento micelial, produção e germinação de conídios de Colletotrichum spp. isolados de mangueira com sintomas de antracnose / Effect of temperature on mycelial growth, production and germination Colletotrichum spp. isolated from mango with symptoms of anthracnose

Muitos são os problemas fitossanitários encontrados na cultura da mangueira (Mangifera indica L), dentre eles destaca-se o fungo Colletotrichum gloeosporioides causador da antracnose, doença que atinge todos os órgãos da planta. O presente trabalho teve como objetivo analisar a influência da temperatura no desenvolvimento das colônias de três isolados de Colletotrichum spp. obtidos de diferentes órgãos da mangueira. Os três isolados apresentaram melhor crescimento micelial na faixa de temperatura de 20 a 25 °C. A faixa de temperatura de 25 a 30 °C demonstrou se mais eficiente em relação à germinação de conídios e esporulação para os isolados de Colletotrichum spp.

Many disease problems are found in the culture of mango (Mangifera indica L), among them stands out Colletotrichum gloeosporioides causing anthracnose disease, which affects all plant organs. This study aimed to analyze the influence of temperature on the development of colonies of three isolates of Colletotrichum spp. obtained from different organs of the hose. The three isolates showed better mycelial growth in the temperature range 20-25 ° C. The track temperature 25-30 ° C showed more efficient in relation to the germination of conidia and sporulation for Colletotrichum spp.

Compatibilidade de isolados de Beauveria bassiana (Ascomycetes: Clavicipitaceae) com carrapaticidas químicos utilizados no controle do carrapato dos bovinos / Compatibility of Beauveria bassiana (Ascomycetes: Clavicipitaceae) with chemicals acaricides used in the control of cattle tick

O presente trabalho teve como escopo avaliar a compatibilidade dos isolados IBCB66 e IBCB21 de Beauveria bassiana com os carrapaticidas a base de Flumetrina + Coumafós, Deltametrina, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós, Cipermetrina High Cis, Diclorvós + Cipermetrina High Cis, Cipermetrina e Amitraz utilizados no controle do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus em nosso país. O efeito dos produtos comerciais sobre os isolados foi verificado por meio da observação do crescimento vegetativo, produção de conídios e viabilidade das estirpes do fungo B. bassiana. Com referência ao isolado IBCB66, os produtos Deltametrina, Cipermetrina High Cis e Amitraz foram classificados como compatíveis, não interferindo no desenvolvimento do entomopatógeno. O produto Cipermetrina foi classificado como tóxico e os produtos Flumetrina + Coumafós, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós e Diclorvós + Cipermetrina High Cis, muito tóxicos. Em relação ao isolado IBCB21, os produtos Flumetrina + Coumafós, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós, Cipermetrina High Cis, Diclorvós + Cipermetrina High Cis e Cipermetrina foram classificados como muito tóxicos e o produto Amitraz como tóxico. Entre os carrapaticidas avaliados, o produto Deltametrina foi o único que não produziu efeito tóxico sobre o entomopatógeno.

The purpose of the present study was to assess compatibility between IBCB66 and IBCB21 isolates of Beauveria bassiana and acaricides: Flumethrin + Coumaphos, Deltamethrin, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos + Chlorpyrifos, Cypermethrin High Cis, Dichlorvos + Cypermethrin High Cis, Cypermethrin and Amitraz, utilized on the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in our country. The effect of commercial products on the isolates was assayed according to observation of vegetative growth, conidia production, and viability of strains of B. bassiana fungus. With concerning about IBCB66 isolate, products Deltamethrin, Cypermethrin High Cis and Amitraz were compatible, not affecting the entomopathogen development. Product Cypermethrin was toxic, and products Flumethrin + Coumaphos, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos+ Chlorpyrifos and Dichlorvos + Cypermethrin High Cis were very toxic. In regard to IBCB21 isolate, products Flumethrin + Coumaphos, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos + Chlorpyrifos, Cypermethrin High Cis, Dichlorvos + Cypermethrin High Cis and Cypermethrin were very toxic and product Amitraz was toxic. From the acaricides evaluated, product Deltamethrin was the single agent that did not produce toxic effect on the entomopathogen.

Compatibilidade de isolados de Beauveria bassiana (Ascomycetes: Clavicipitaceae) com carrapaticidas químicos utilizados no controle do carrapato dos bovinos

The purpose of the present study was to assess compatibility between IBCB66 and IBCB21 isolates of Beauveria bassiana and acaricides: Flumethrin + Coumaphos, Deltamethrin, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos + Chlorpyrifos, Cypermethrin High Cis, Dichlorvos + Cypermethrin High Cis, Cypermethrin and Amitraz, utilized on the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in our country. The effect of commercial products on the isolates was assayed according to observation of vegetative growth, conidia production, and viability of strains of B. bassiana fungus. With concerning about IBCB66 isolate, products Deltamethrin, Cypermethrin High Cis and Amitraz were compatible, not affecting the entomopathogen development. Product Cypermethrin was toxic, and products Flumethrin + Coumaphos, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos+ Chlorpyrifos and Dichlorvos + Cypermethrin High Cis were very toxic. In regard to IBCB21 isolate, products Flumethrin + Coumaphos, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos + Chlorpyrifos, Cypermethrin High Cis, Dichlorvos + Cypermethrin High Cis and Cypermethrin were very toxic and product Amitraz was toxic. From the acaricides evaluated, product Deltamethrin was the single agent that did not produce toxic effect on the entomopathogen.

O presente trabalho teve como escopo avaliar a compatibilidade dos isolados IBCB66 e IBCB21 de Beauveria bassiana com os carrapaticidas a base de Flumetrina + Coumafós, Deltametrina, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós, Cipermetrina High Cis, Diclorvós + Cipermetrina High Cis, Cipermetrina e Amitraz utilizados no controle do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus em nosso país. O efeito dos produtos comerciais sobre os isolados foi verificado por meio da observação do crescimento vegetativo, produção de conídios e viabilidade das estirpes do fungo B. bassiana. Com referência ao isolado IBCB66, os produtos Deltametrina, Cipermetrina High Cis e Amitraz foram classificados como compatíveis, não interferindo no desenvolvimento do entomopatógeno. O produto Cipermetrina foi classificado como tóxico e os produtos Flumetrina + Coumafós, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós e Diclorvós + Cipermetrina High Cis, muito tóxicos. Em relação ao isolado IBCB21, os produtos Flumetrina + Coumafós, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós, Cipermetrina High Cis, Diclorvós + Cipermetrina High Cis e Cipermetrina foram classificados como muito tóxicos e o produto Amitraz como tóxico. Entre os carrapaticidas avaliados, o produto Deltametrina foi o único que não produziu efeito tóxico sobre o entomopatógeno.

Compatibilidade de isolados de Beauveria bassiana (Ascomycetes: Clavicipitaceae) com carrapaticidas químicos utilizados no controle do carrapato dos bovinos

The purpose of the present study was to assess compatibility between IBCB66 and IBCB21 isolates of Beauveria bassiana and acaricides: Flumethrin + Coumaphos, Deltamethrin, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos + Chlorpyrifos, Cypermethrin High Cis, Dichlorvos + Cypermethrin High Cis, Cypermethrin and Amitraz, utilized on the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in our country. The effect of commercial products on the isolates was assayed according to observation of vegetative growth, conidia production, and viability of strains of B. bassiana fungus. With concerning about IBCB66 isolate, products Deltamethrin, Cypermethrin High Cis and Amitraz were compatible, not affecting the entomopathogen development. Product Cypermethrin was toxic, and products Flumethrin + Coumaphos, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos+ Chlorpyrifos and Dichlorvos + Cypermethrin High Cis were very toxic. In regard to IBCB21 isolate, products Flumethrin + Coumaphos, Dichlorvos + Cypermethrin, Dichlorvos + Chlorpyrifos, Cypermethrin High Cis, Dichlorvos + Cypermethrin High Cis and Cypermethrin were very toxic and product Amitraz was toxic. From the acaricides evaluated, product Deltamethrin was the single agent that did not produce toxic effect on the entomopathogen.

O presente trabalho teve como escopo avaliar a compatibilidade dos isolados IBCB66 e IBCB21 de Beauveria bassiana com os carrapaticidas a base de Flumetrina + Coumafós, Deltametrina, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós, Cipermetrina High Cis, Diclorvós + Cipermetrina High Cis, Cipermetrina e Amitraz utilizados no controle do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus em nosso país. O efeito dos produtos comerciais sobre os isolados foi verificado por meio da observação do crescimento vegetativo, produção de conídios e viabilidade das estirpes do fungo B. bassiana. Com referência ao isolado IBCB66, os produtos Deltametrina, Cipermetrina High Cis e Amitraz foram classificados como compatíveis, não interferindo no desenvolvimento do entomopatógeno. O produto Cipermetrina foi classificado como tóxico e os produtos Flumetrina + Coumafós, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós e Diclorvós + Cipermetrina High Cis, muito tóxicos. Em relação ao isolado IBCB21, os produtos Flumetrina + Coumafós, Diclorvós + Cipermetrina, Diclorvós + Clorpirifós, Cipermetrina High Cis, Diclorvós + Cipermetrina High Cis e Cipermetrina foram classificados como muito tóxicos e o produto Amitraz como tóxico. Entre os carrapaticidas avaliados, o produto Deltametrina foi o único que não produziu efeito tóxico sobre o entomopatógeno.

Optimization of nutritional requirements for mycelial growth and sporulation of entomogenous fungus Aschersonia aleyrodis Webber / Otimização das exigências nutricionais para crescimento micelial e esporulação do fungo entomopatogênico Aschersonia aleyrodis Webber

The objective of the present study was to investigate the optimal nutritional requirements for mycelial growth and sporulation of entomopathogenic fungus Aschersonia aleyrodis Webber by orthogonal layout methods. Herein the order of effects of nutrient components on mycelial growth was tryptone > Ca2+ > soluble starch > folacin, corresponding to the following optimal concentrations: 1.58 percent Soluble Starch, 3.16 percent Tryptone, 0.2 mmol l-1 Ca2+ and 0.005 percent Folacin. The optimal concentration of each factors for sporulation was 1.16 percent lactose, 0.394 percent tryptone, 0.4 mmol l-1 Fe2+ and 0.00125 percent V B1, and the effects of medium components on sporulation were found to be in the order lactose > V B1 > Fe2+ > tryptone. Under the optimal culture conditions, the maximum production of mycelial growth achieved 20.05 g l-1 after 7 days of fermentation, while the maximum spore yield reached 5.23 ×10(10) spores l-1 after 22 days of cultivation. This is the first report on optimization of nutritional requirements and design of simplified semi-synthetic media for mycelial growth and sporulation of A. aleyrodis.

O objetivo deste estudo foi investigar as exigências nutricionais ótimas para o crescimento micelial e esporulação do fungo entomopatogênico Aschersonia aleyrodis Webber. A ordem dos efeitos dos nutrientes na multiplicação micelial foi triptona>Ca2+>amido solúvel>folacina, com as seguintes concentrações ótimas: amido solúvel 1,58 por cento, tritona 3,16 por cento, Ca2+ 0,2mmol.l-1 e folacina 0,005 por cento. Para a esporulação, a concentração ótima de cada fator foi: lactose 1,16 por cento, triptona 0,394 por cento, Fe2+ 0,4mmol.l-1 e V B1 0,00125 por cento, na seguinte ordem: lactose> V B1> Fe2+>tritona. Em condições ótimas de cultura, a produção máxima de micélio foi 20,05g.l-1 após 7 dias de fermentação, enquanto o rendimento máximo de esporos foi 5,23 x 10(10) esporos.l-1 após 22 dias de cultivo. Esse é o primeiro relato sobre otimização das exigências nutricionais e desenvolvimento de meio de cultura semi-sintético para crescimento micelial e esporulação de A. aleyrodis.

Efecto del sustrato y la exposición a la luz en la producción de una cepa de Trichoderma sp / Effects of substrate and light exposition in the production of Trichoderma sp

Con el fin de evaluar el efecto de las condiciones de luz sobre la producción de biomasa de una cepa de Trichoderma sp. en fermentación sólida y sumergida, se probaron medios arroz 53 por ciento (p/p), arroz 53 por ciento (p/p)-melaza 3 por ciento(p/p) y arroz 53 por ciento (p/p)-melaza 10 por ciento (p/p) en agua destilada, con incubación 25oC y períodos de luz constante y fotoperíodo 24 h luz/24 h oscuridad durante 8 días. Los parámetros estimados fueron densidad poblacional (conidios/mL), germinación de esporas a 24 horas y porcentaje de pureza. Los resultados indicaron que el proceso de fermentación sólida empleando como sustrato arroz-agua destilada a 25ðC y la exposición constante a la luz permitió mayor recuperación de conidios (45x1018 conidios/mL), con 96 por ciento de germinación a 24 horas y una pureza estimada de 92,1por ciento. En la fermentación sumergida se obtuvo un porcentaje de pureza del 76,8 por ciento y la germinación de conidios a las 24 h fue de 91,2 por ciento, mostrando como desventaja un bajo porcentaje de pureza frente a la fermentación sólida.

In order to evaluate the effect of temperature and light conditions on biomass production of a Trichoderma sp. strain, three culture media were tested: rice 53% (w/w), rice 53% (w/w) -molasses 3% (w/w) and rice 53% (w/w)-molasses 10% (w/w) in distilled water. Incubation conditions were: 25°C, constant light and a photoperiod of 24 h light/24 h darkness during 8 days. The evaluated parameters were population density (conidia/mL), spore germination after 24 hours and purity percentage. The results showed that solid fermentation using rice - distilled water as substrate at 25°C and constant light, allowedthe highest conidia yield (45x1018 conidia/mL), 96% germination after 24 hours, and 92.1% purity. The liquid fermentation rendered a purityof 76.8% and conidia germination of 91.2% after 24 hours, showing a disadvantageous lower purity percentage compared to solidfermentation.

Com a finalidade de avaliar o efeito das condições de luz sobre a produção de biomassa de uma cepa de Trichoderma sp, em fermentação sólida e submergida, foram testados diferentes meios: arroz 53% (p/p), arroz 53% (p/p)-melaço 3% (p/p) e arroz 53% (p/p)-melaço 10% (p/p) em água destilada, com incubação 25°C e períodos de luz constante e fotoperíodo 24 h luz/24 h escuridão durante 8 dias. Os parâmetros estimados foram densidade populacional (conídios/mL), germinação de esporas a 24 horas e porcentagem de pureza. Os resultados indicaram que o processo de fermentação sólida usando como substrato arroz-água destilada a 25ºC e exposição constante à luz, permitiu maior recuperação de conídios (45x1018 conídios/mL), com 96% de germinação a 24 horas e uma pureza estimada de 92,1%. Na fermentação submergida obteve-se um percentual de pureza de 76,8% e a germinação de conídios as 24 h foi de 91,2%, mostrando como desvantagem um baixo percentual de pureza frente à fermentação sólida.

Optimization of nutritional requirements for mycelial growth and sporulation of entomogenous fungus Aschersonia aleyrodis Webber

The objective of the present study was to investigate the optimal nutritional requirements for mycelial growth and sporulation of entomopathogenic fungus Aschersonia aleyrodis Webber by orthogonal layout methods. Herein the order of effects of nutrient components on mycelial growth was tryptone > Ca2+ > soluble starch > folacin, corresponding to the following optimal concentrations: 1.58% Soluble Starch, 3.16% Tryptone, 0.2 mmol l-1 Ca2+ and 0.005% Folacin. The optimal concentration of each factors for sporulation was 1.16% lactose, 0.394% tryptone, 0.4 mmol l-1 Fe2+ and 0.00125% V B1, and the effects of medium components on sporulation were found to be in the order lactose > V B1 > Fe2+ > tryptone. Under the optimal culture conditions, the maximum production of mycelial growth achieved 20.05 g l-1 after 7 days of fermentation, while the maximum spore yield reached 5.23 ×10(10) spores l-1 after 22 days of cultivation. This is the first report on optimization of nutritional requirements and design of simplified semi-synthetic media for mycelial growth and sporulation of A. aleyrodis.

O objetivo deste estudo foi investigar as exigências nutricionais ótimas para o crescimento micelial e esporulação do fungo entomopatogênico Aschersonia aleyrodis Webber. A ordem dos efeitos dos nutrientes na multiplicação micelial foi triptona>Ca2+>amido solúvel>folacina, com as seguintes concentrações ótimas: amido solúvel 1,58%, tritona 3,16%, Ca2+ 0,2mmol.l-1 e folacina 0,005%. Para a esporulação, a concentração ótima de cada fator foi: lactose 1,16%, triptona 0,394%, Fe2+ 0,4mmol.l-1 e V B1 0,00125%, na seguinte ordem: lactose> V B1> Fe2+>tritona. Em condições ótimas de cultura, a produção máxima de micélio foi 20,05g.l-1 após 7 dias de fermentação, enquanto o rendimento máximo de esporos foi 5,23 x 10(10) esporos.l-1 após 22 dias de cultivo. Esse é o primeiro relato sobre otimização das exigências nutricionais e desenvolvimento de meio de cultura semi-sintético para crescimento micelial e esporulação de A. aleyrodis.

Production and infectivity of inoculum of arbuscular mycorrhizal fungi multiplied in a substrate supplemented with Tris-HCl buffer

The effect of adding Tris-HCl buffer on production and infectivity of AMF inoculum was investigated. Sporulation of Glomus etunicatum, Acaulospora longula and Gigaspora albida was improved in solution with buffer. The infectivity of G. etunicatum increased after storage, what suggests that the inoculum of this isolate is benefited by storage.

O efeito da adição do tampão Tris-HCl na produção e infectividade de inóculo foi investigado. A esporulação de Glomus etunicatum, Acaulospora longula e Gigaspora albida foi incrementada utilizando solução com tampão. A infectividade de G. etunicatum aumentou após estocagem, sugerindo que o inóculo deste isolado é beneficiado pelo armazenamento.

Production and infectivity of inoculum of arbuscular mycorrhizal fungi multiplied in a substrate supplemented with Tris-HCl buffer

The effect of adding Tris-HCl buffer on production and infectivity of AMF inoculum was investigated. Sporulation of Glomus etunicatum, Acaulospora longula and Gigaspora albida was improved in solution with buffer. The infectivity of G. etunicatum increased after storage, what suggests that the inoculum of this isolate is benefited by storage.

O efeito da adição do tampão Tris-HCl na produção e infectividade de inóculo foi investigado. A esporulação de Glomus etunicatum, Acaulospora longula e Gigaspora albida foi incrementada utilizando solução com tampão. A infectividade de G. etunicatum aumentou após estocagem, sugerindo que o inóculo deste isolado é beneficiado pelo armazenamento.

Sobrevivência saprofítica de Alternaria brassicicola e manejo de restos foliares de brócolos

The saprophytic survival of the fungus Alternaria brassicicola was investigated in leaf debris of broccoli (Brassica oleracea var. italica), at different depths of soil incorporation, periods of the year, and systems of soil management. Infected leaf debris were distributed in field plots, at the soil surface and at depths of 5 and 10cm. Periodically, the debris in the bags were collected and conidia concentrations were quantified for longevity of spore production and extinction rate. Higher spore production longevity was observed on leaf debris in the period with lower temperatures, higher air relative humidity and lower rainfall. The lowest spore production occurred when leaf debris incorporation was made at 10cm depth. In relation to soil management systems, when the inoculum source was deposited at the soil surface no differences in the rate of spore production were observed, but at depths of 5 and 10cm, the rate was significantly higher in the soil under conventional management. The management of Alternaria black spot on broccoli at the area under study can be accomplished by incorporating infected leaf debris in the soil, at least 10cm depth, for no less than a 60-day interval in subsequent brassica plantings.

A sobrevivência saprofítica do fungo Alternaria brassicicola foi investigada em restos foliares de brócolos (Brassica oleracea var. italica), em diferentes profundidades de incorporação no solo, períodos do ano e sistemas de manejo do solo. Os restos foliares infectados pelo patógeno foram distribuídos em parcelas no campo, na superfície do solo e nas profundidades de 5 e 10cm. Periodicamente, os restos foliares foram coletados e a concentração de conídios quantificada, sendo obtida a longevidade da esporulação e a taxa de extinção da esporulação. Foi verificada maior longevidade da esporulação nos restos foliares no período com temperaturas amenas, maior umidade relativa do ar e menor precipitação pluvial. Menor esporulação ocorreu quando os restos culturais foram incorporados a 10cm de profundidade. Quando comparados os sistemas de manejo convencional e orgânico, houve diferença na taxa de extinção da esporulação do patógeno quando a fonte de inóculo foi depositada nas profundidades de 5 e 10cm, sendo superior no solo sob manejo convencional, enquanto na superfície do solo não houve diferença. O manejo da alternariose em brócolos na região do estudo pode ser realizado pela incorporação dos restos foliares infectados no solo, à profundidade mínima de 10cm, visando a um intervalo mínimo de 60 dias entre cultivos de brássicas.

Sobrevivência saprofítica de Alternaria brassicicola e manejo de restos foliares de brócolos

The saprophytic survival of the fungus Alternaria brassicicola was investigated in leaf debris of broccoli (Brassica oleracea var. italica), at different depths of soil incorporation, periods of the year, and systems of soil management. Infected leaf debris were distributed in field plots, at the soil surface and at depths of 5 and 10cm. Periodically, the debris in the bags were collected and conidia concentrations were quantified for longevity of spore production and extinction rate. Higher spore production longevity was observed on leaf debris in the period with lower temperatures, higher air relative humidity and lower rainfall. The lowest spore production occurred when leaf debris incorporation was made at 10cm depth. In relation to soil management systems, when the inoculum source was deposited at the soil surface no differences in the rate of spore production were observed, but at depths of 5 and 10cm, the rate was significantly higher in the soil under conventional management. The management of Alternaria black spot on broccoli at the area under study can be accomplished by incorporating infected leaf debris in the soil, at least 10cm depth, for no less than a 60-day interval in subsequent brassica plantings.

A sobrevivência saprofítica do fungo Alternaria brassicicola foi investigada em restos foliares de brócolos (Brassica oleracea var. italica), em diferentes profundidades de incorporação no solo, períodos do ano e sistemas de manejo do solo. Os restos foliares infectados pelo patógeno foram distribuídos em parcelas no campo, na superfície do solo e nas profundidades de 5 e 10cm. Periodicamente, os restos foliares foram coletados e a concentração de conídios quantificada, sendo obtida a longevidade da esporulação e a taxa de extinção da esporulação. Foi verificada maior longevidade da esporulação nos restos foliares no período com temperaturas amenas, maior umidade relativa do ar e menor precipitação pluvial. Menor esporulação ocorreu quando os restos culturais foram incorporados a 10cm de profundidade. Quando comparados os sistemas de manejo convencional e orgânico, houve diferença na taxa de extinção da esporulação do patógeno quando a fonte de inóculo foi depositada nas profundidades de 5 e 10cm, sendo superior no solo sob manejo convencional, enquanto na superfície do solo não houve diferença. O manejo da alternariose em brócolos na região do estudo pode ser realizado pela incorporação dos restos foliares infectados no solo, à profundidade mínima de 10cm, visando a um intervalo mínimo de 60 dias entre cultivos de brássicas.