The role of androgens in mammals folliculogenesis / Papel dos andrógenos na foliculogênese em mamíferos

Introduction: Steroid hormones production is a physiological process termed steroidogenesis. An important stage of this process is the conversion of androgens into estrogens through aromatase enzyme. Furthermore, androgens are important in the process of folliculogenesis, promoting follicular growth in different species. Thus, the aim of this review was to present the process of synthesis, mechanism of action, and importance of androgens in folliculogenesis. Additionally, the main results of in vitro culture of ovarian cells in the presence of these hormones were emphasized. Review: Folliculogenesis begins in prenatal life in most of species and can be defined as the process of formation, follicular growth, and oocyte maturation. Preantral follicles represent 95% of the follicular population and assisted reproductive technologies have been developed (e.g., Manipulation of Oocytes Enclosed in Preantral Follicles - MOEPF) in order to avoid the great follicle loss that occurs naturally in vivo by atresia. The MOEPF aim to obtain a large number of competent oocytes from preantral follicles and then subject to in vitro maturation, fertilization, and culture for embryo production. However, the development of an efficient medium to ensure the follicular survival and oocyte maturation is the major challenge of this biotechnology. To achieve the success on in vitro culture, the effects [...]

Influência do manejo na fisiologia reprodutiva do macho bovino / Influence of management on the reproductive physiology of male bovine / Influencia del manejo en la fisiología reproductiva del bovino macho

O conhecimento da fisiologia do desenvolvimento testicular e ponderal, a precocidade sexual, a capacidade de produção e qualidade espermática, além dos fatores que potencialmente interferem nestes processos, são importantes para predizer a capacidade reprodutiva dos touros. Entre esses fatores, existem alguns que podem influenciar negativamente na fisiologia reprodutiva do touro, e, dessa forma, reduzir a fertilidade desses animais e causar esterilidade, tais como os fatores diretamente relacionados ao manejo e a nutrição. Dessa forma, torna-se de fundamental importância o conhecimento da fisiologia do desenvolvimento testicular e ponderal, e de como alguns fatores, como o manejo e o clima, podem interferir nestes processos. Portanto, o objetivo desta revisão é demonstrar como alguns fatores do ambiente, tais como o manejo e o clima, podem influenciar nessas características, com vistas à produção animal.(AU)

Knowledge of the physiology and weight of the testicular development, sexual precocity, ability and quality of sperm production, and the factors that potentially interfere with these processes are important for predicting the reproductive capacity of bulls. Among these factors, there are some that can negatively influence their reproductive physiology, and thus reduce their fertility, causing sterility, such as factors directly related to the management and nutrition. Thus, it is of fundamental importance to study the physiology of testicular development and weight, and how certain factors, such as management and climate, can interfere with these processes. Therefore, the aim of this review is to show how some environmental factors, such as management and climate, can influence these characteristics, aiming to animal production.(AU)

El conocimiento de la fisiología del desarrollo testicular y ponderal, la precocidad sexual, la capacidad de producción y la calidad del esperma, además de los factores que potencialmente interfieren en estos procesos, son importantes para predecir la capacidad reproductiva de los toros. Entre estos factores, hay algunos que pueden influir negativamente en la fisiología reproductiva del toro, y por lo tanto reducir la fertilidad de esos animales y causar esterilidad, tales como los factores directamente relacionados al manejo y la nutrición. Por lo tanto, es de fundamental importancia el conocimiento de la fisiología del desarrollo testicular y ponderal, y cómo ciertos factores, como el manejo y el clima, pueden interferir en estos procesos. Así, el objetivo de esta revisión es demostrar cómo algunos factores ambientales, tales como manejo y el clima, pueden influenciar en esas características, con miras a la producción animal.(AU)

The role of androgens in mammals folliculogenesis / Papel dos andrógenos na foliculogênese em mamíferos

Introduction: Steroid hormones production is a physiological process termed steroidogenesis. An important stage of this process is the conversion of androgens into estrogens through aromatase enzyme. Furthermore, androgens are important in the process of folliculogenesis, promoting follicular growth in different species. Thus, the aim of this review was to present the process of synthesis, mechanism of action, and importance of androgens in folliculogenesis. Additionally, the main results of in vitro culture of ovarian cells in the presence of these hormones were emphasized. Review: Folliculogenesis begins in prenatal life in most of species and can be defined as the process of formation, follicular growth, and oocyte maturation. Preantral follicles represent 95% of the follicular population and assisted reproductive technologies have been developed (e.g., Manipulation of Oocytes Enclosed in Preantral Follicles - MOEPF) in order to avoid the great follicle loss that occurs naturally in vivo by atresia. The MOEPF aim to obtain a large number of competent oocytes from preantral follicles and then subject to in vitro maturation, fertilization, and culture for embryo production. However, the development of an efficient medium to ensure the follicular survival and oocyte maturation is the major challenge of this biotechnology. To achieve the success on in vitro culture, the effects [...](AU)

Influência do manejo na fisiologia reprodutiva do macho bovino / Influence of management on the reproductive physiology of male bovine / Influencia del manejo en la fisiología reproductiva del bovino macho

O conhecimento da fisiologia do desenvolvimento testicular e ponderal, a precocidade sexual, a capacidade de produção e qualidade espermática, além dos fatores que potencialmente interferem nestes processos, são importantes para predizer a capacidade reprodutiva dos touros. Entre esses fatores, existem alguns que podem influenciar negativamente na fisiologia reprodutiva do touro, e, dessa forma, reduzir a fertilidade desses animais e causar esterilidade, tais como os fatores diretamente relacionados ao manejo e a nutrição. Dessa forma, torna-se de fundamental importância o conhecimento da fisiologia do desenvolvimento testicular e ponderal, e de como alguns fatores, como o manejo e o clima, podem interferir nestes processos. Portanto, o objetivo desta revisão é demonstrar como alguns fatores do ambiente, tais como o manejo e o clima, podem influenciar nessas características, com vistas à produção animal.(AU)

Knowledge of the physiology and weight of the testicular development, sexual precocity, ability and quality of sperm production, and the factors that potentially interfere with these processes are important for predicting the reproductive capacity of bulls. Among these factors, there are some that can negatively influence their reproductive physiology, and thus reduce their fertility, causing sterility, such as factors directly related to the management and nutrition. Thus, it is of fundamental importance to study the physiology of testicular development and weight, and how certain factors, such as management and climate, can interfere with these processes. Therefore, the aim of this review is to show how some environmental factors, such as management and climate, can influence these characteristics, aiming to animal production.(AU)

El conocimiento de la fisiología del desarrollo testicular y ponderal, la precocidad sexual, la capacidad de producción y la calidad del esperma, además de los factores que potencialmente interfieren en estos procesos, son importantes para predecir la capacidad reproductiva de los toros. Entre estos factores, hay algunos que pueden influir negativamente en la fisiología reproductiva del toro, y por lo tanto reducir la fertilidad de esos animales y causar esterilidad, tales como los factores directamente relacionados al manejo y la nutrición. Por lo tanto, es de fundamental importancia el conocimiento de la fisiología del desarrollo testicular y ponderal, y cómo ciertos factores, como el manejo y el clima, pueden interferir en estos procesos. Así, el objetivo de esta revisión es demostrar cómo algunos factores ambientales, tales como manejo y el clima, pueden influenciar en esas características, con miras a la producción animal.(AU)

Steroidogenic enzymes mRNA expression profile and steroids production in bovine theca cells cultured in vitro and stimulated with angiotensin II / Perfil de expressão de RNAm de enzimas esteroidogênicas e produção de esteroides a partir de células da teca bovina cultivadas in vitro e estimuladas por Angiotensina II

The main objective of this study was to detect the steroidogenic effects of Ang II in bovine theca cells in vitro. Bovine theca cells were obtained from follicles (larger than 10mm of diameter) collected from a local abattoir and submitted to different treatments in a sequence of experiments. In experiment 1, CYP17A1 mRNA profile was evaluated in LH- (10ng ml-1) and Ang II-treated (0.1µM) theca cells. In experiment 2, a dose-response effect of Ang II (0.001; 0.1 e 10µM) plus insulin (100ng ml-1) and LH (100ng ml-1) was evaluated on steroidogenesis of bovine theca cells. Experiment 3 explored the effects of saralasin (an antagonist of Ang II receptors) on steroid production and steroidogenic enzymes regulation in theca cells. After 24 hours, culture media from experiments 2 and 3 was collected to evaluate testosterone and androstenedione levels by High-Performance Liquid Chromatography. In parallel, mRNA levels of key steroidogenic enzymes (HSD3B2, CYP11A1, CYP17A1) and STAR were assessed by RT-PCR. There was no difference in testosterone and androstenedione production between treated and controls groups, as well as in mRNA levels of the evaluated genes. In conclusion, the results suggest that Ang II does not regulate steroidogenesis in bovine theca cells.(AU)

O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da Angiotensina II (Ang II) sobre a esteroidogenese nas células da teca bovina, cultivadas in vitro. Para isso, células da teca bovina foram obtidas de folículos maiores que 10 mm de diâmetro de ovários oriundos de abatedouro e submetidas a diferentes tratamentos em uma sequência de experimentos. No experimento 1, o perfil de expressão do RNAm de CYP17A1 foi avaliado nas células da teca em resposta ao LH (10ng ml-1) e/ou Ang II (0,1µM) em diferentes momentos de tratamento. No experimento 2, foi investigado o efeito dose-resposta de Ang II (0,001; 0,1 e 10µM), acrescido de insulina (100ng ml-1) e LH (100ng ̸ml) sobre a esteroidogênese nas células da teca bovina. O experimento 3 explorou os possíveis efeitos da Ang II por meio do tratamento de células da teca com saralasina (antagonista dos receptores da Ang II). Após 24 horas, nos experimentos 2 e 3, o meio de cultura foi coletado e avaliado quanto aos níveis de testosterona e androstenediona pela técnica de HPLC. Em paralelo, a expressão gênica de enzimas-chave da esteroidogênese (HSD3B2, CYP11A1, CYP17A1) e STAR foi avaliada por qRT-PCR. Não se observou diferença na produção de testosterona e androstenediona entre controle e grupos tratados, bem como, na expressão do RNAm para os genes estudados. Em conclusão, nossos resultados não demonstraram um papel da Ang II sobre a esteroidogenese nas células da teca bovina.(AU)

Steroidogenic enzymes mRNA expression profile and steroids production in bovine theca cells cultured in vitro and stimulated with angiotensin II / Perfil de expressão de RNAm de enzimas esteroidogênicas e produção de esteroides a partir de células da teca bovina cultivadas in vitro e estimuladas por Angiotensina II

The main objective of this study was to detect the steroidogenic effects of Ang II in bovine theca cells in vitro. Bovine theca cells were obtained from follicles (larger than 10mm of diameter) collected from a local abattoir and submitted to different treatments in a sequence of experiments. In experiment 1, CYP17A1 mRNA profile was evaluated in LH- (10ng ml-1) and Ang II-treated (0.1µM) theca cells. In experiment 2, a dose-response effect of Ang II (0.001; 0.1 e 10µM) plus insulin (100ng ml-1) and LH (100ng ml-1) was evaluated on steroidogenesis of bovine theca cells. Experiment 3 explored the effects of saralasin (an antagonist of Ang II receptors) on steroid production and steroidogenic enzymes regulation in theca cells. After 24 hours, culture media from experiments 2 and 3 was collected to evaluate testosterone and androstenedione levels by High-Performance Liquid Chromatography. In parallel, mRNA levels of key steroidogenic enzymes (HSD3B2, CYP11A1, CYP17A1) and STAR were assessed by RT-PCR. There was no difference in testosterone and androstenedione production between treated and controls groups, as well as in mRNA levels of the evaluated genes. In conclusion, the results suggest that Ang II does not regulate steroidogenesis in bovine theca cells.

O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito da Angiotensina II (Ang II) sobre a esteroidogenese nas células da teca bovina, cultivadas in vitro. Para isso, células da teca bovina foram obtidas de folículos maiores que 10 mm de diâmetro de ovários oriundos de abatedouro e submetidas a diferentes tratamentos em uma sequência de experimentos. No experimento 1, o perfil de expressão do RNAm de CYP17A1 foi avaliado nas células da teca em resposta ao LH (10ng ml-1) e/ou Ang II (0,1µM) em diferentes momentos de tratamento. No experimento 2, foi investigado o efeito dose-resposta de Ang II (0,001; 0,1 e 10µM), acrescido de insulina (100ng ml-1) e LH (100ng ̸ml) sobre a esteroidogênese nas células da teca bovina. O experimento 3 explorou os possíveis efeitos da Ang II por meio do tratamento de células da teca com saralasina (antagonista dos receptores da Ang II). Após 24 horas, nos experimentos 2 e 3, o meio de cultura foi coletado e avaliado quanto aos níveis de testosterona e androstenediona pela técnica de HPLC. Em paralelo, a expressão gênica de enzimas-chave da esteroidogênese (HSD3B2, CYP11A1, CYP17A1) e STAR foi avaliada por qRT-PCR. Não se observou diferença na produção de testosterona e androstenediona entre controle e grupos tratados, bem como, na expressão do RNAm para os genes estudados. Em conclusão, nossos resultados não demonstraram um papel da Ang II sobre a esteroidogenese nas células da teca bovina.

New insights into steroidogenesis in normo- and hyperandrogenic polycystic ovary syndrome patients / Novos aspectos na esteroidogênese em pacientes normo ou hiperandrogênicas com síndrome de ovários policísticos

OBJECTIVE: This study sought to examine corticosteroidogenic enzyme activities in normo- and hyperandrogenic polycystic ovary syndrome (PCOS) patients. SUBJECTS AND METHODS: This cohort study included 81 patients with biochemical hyperandrogenism and 41 patients with normal androgen levels. Enzyme activities were assessed according to the serum steroid product/precursor ratios at baseline and after adrenal stimulation. RESULTS: At baseline, in the delta 4 (Δ4) pathway, hyperandrogenic patients showed greater 17-hydroxylase and 17,20 lyase activities in converting progesterone (P4) into 17-hydroxyprogesterone (17-OHP4) and 17-hydroxypregnenolone (17-OHPE) into androstenedione (A) (p = 0.0005 and p = 0.047, respectively) compared to normoandrogenic patients. In the delta 5 (Δ5) pathway, the 17-hydroxylase and 17,20 lyase enzymes showed similar activities in both groups. Hyperandrogenic patients presented lower 21-hydroxylase, lower 11β-hydroxylase (p = 0.0001), and statistically significant increases in 3β-hydroxysteroid dehydrogenase II (3β-HSDII) activities (p < 0.0001). Following tetracosactrin stimulation, only the 17,20 lyase activity remained up-regulated in the Δ4 pathway (p < 0.0001). CONCLUSION: Hyperandrogenic patients had higher 17,20 lyase activity, both at baseline and after adrenal stimulation. Greater conversion of dehydroepiandrosterone (DHEA) into A with normal conversion of 17-OHPE to 17-OHP4 in hyperandrogenic PCOS patients indicated different levels of 3β-HSDII activity in adrenal cells, and hyperandrogenic patients had lower 11β-hydroxylase and 21-hydroxylase activities.

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi examinar a atividade de enzimas responsáveis pela produção de corticosteroides em pacientes normo e hiperandrogênicas com síndrome de ovários policísticos (SOP). SUJEITOS E MÉTODOS: A coorte estudada incluiu 81 pacientes com hiperandrogenismo bioquímico e 41 pacientes com níveis normais de androgênio. A atividade enzimática foi avaliada de acordo com as proporções de produto/precursor do esteroide sérico, no momento inicial do estudo e depois de estimulação adrenal. RESULTADOS: No momento inicial, na via delta 4 (Δ4), as pacientes hiperandrogênicas mostraram maior atividade da 17-hidroxilase e 17,20 liase na conversão da progesterona (P4) em 17-hidroxiprogesterona (17-OHP4) e na conversão da 17-hidroxipregnenolona (17-OHPE) em androstenediona (A) (p = 0,0005 e p = 0,047, respectivamente) em comparação com pacientes normoandrogênicas. Na via delta 5 (Δ5), a 17-hidroxilase e a 17,20 liase mostraram atividades similares nos dois grupos. As pacientes hiperandrogênicas mostraram menor atividade da 21-hidroxilase, menor atividade da 11β-hidroxilase (p = 0,0001) e aumento estatisticamente significativo na atividade da 3β-hidroxiesteroide desidrogenase II (3β-HSDII) (p < 0.0001). Após a estimulação com tetracosactrin, apenas a atividade da 17,20 liase permaneceu regulada para cima na via Δ4 (p < 0.0001). CONCLUSÃO: As pacientes hiperandrogênicas apresentaram atividade mais alta da 17,20 liase, tanto no momento inicial quanto depois da estimulação adrenal. Maior conversão da desidroepiandrosterona (DHEA) em A com conversão normal da 17-OHPE em 17-OHP4 em pacientes hiperandrogênicas com SOP indica níveis diferentes de atividade da 3β-HSDII em células da adrenal, e pacientes hiperandrogênicas apresentaram menores atividades da 11β-hidroxilase e da 21-hidroxilase.

Expressão das enzimas: citocromo P450 aromatase, NADPH-citocromo P450 redutase e citocromo P450c17 (17-alpha-hidroxilase/17, 20-liase) na vagina de fêmeas de preás (Galea spixii, Wagler, 1831) / Enzymes expression: of the cytochrome P450 aromatase, NADPHcytochrome P450 redutase and cytochrome P450c17 (17-alpha-hidroxilase/17, 20-lyase) in the vagina of female cavies (Galea spixii, Wagler, 1831)

Para a metabolização de hormônios esteroides sexuais é essencial a participação de enzimas esteroidogênicas. A enzima citocromo P450c17 é responsável pela produção de andrógenos e a enzima citocromo P450 aromatase é responsável pela produção de estrógenos, sendo que, ambas as enzimas necessitam formar um complexo com uma enzima parceira, denominada NADPH citocromo P450 redutase, para realizar a metabolização destes hormônios essenciais para a diferenciação sexual. Objetivou-se imunolocalisar as três enzimas acima citadas no tecido vaginal de fêmeas de roedores Galea spixii. Para tanto, o experimento foi desenvolvido utilizando técnicas de citologia esfoliativa vaginal para definição das fases do ciclo estral, técnicas de microscopia de Luz, Eletrônica de Varredura e testes de imunohistoquímica para detecção das enzimas: citocromo P450c17, citocromo P450 aromatase, e NADPH citocromo P450 redutase. Constatou-se no presente estudo que o ciclo estral das fêmeas de preás silvestres do semiárido apresenta ciclo estral com duração de 15,85 ± 1,4 dias, com a formação e ruptura da membrana de oclusão vaginal durante cada ciclo estral. A vagina apresenta um clitóris hipertrofiado com o óstio uretral que se abre no topo do mesmo, e ausência de um vestíbulo vaginal. O epitélio da mucosa vaginal sofre modificações proliferativas, se espessando e se adelgando de acordo com a respectiva fase do ciclo estral. As enzimas citocromo P450 aromatase e NADPH redutase estão imunolocalizadas durante todo o ciclo estral no epitélio e tecido conjuntivo da vagina de Galea spixii. Por outro lado, a enzima P450c17 está imunolocalizada no epitélio vaginal durante todas as fases do ciclo estral, porém não está presente no estro. Com estes dados pode-se sugerir que ocorre uma metabolização local de hormônios estrógenos e andrógenos no tecido vaginal o que podem estar relacionado com a proliferação celular, variação na vascularização e inervação e ruptura da membrana de oclusão vaginal

To the metabolism of sex steroid hormones is essential the participation of esteroidogenic enzymes. The enzyme cytochrome P450c17 is responsible for androgen production; and the enzyme aromatase cytochrome P450 is responsible for estrogen production, however, both enzymes require forming a complex with an enzyme partner called NADPH cytochrome P450 reductase to perform the metabolism of these hormones, which are essential for sexual differentiation. This study aimed to immunolocalization of the three enzymes above mentioned in the vaginal tissue from female rodents Galea spixii. Therefore, the experiment was carried out using vaginal cytology techniques for definition of the estrous cycle phases, techniques for light microscopy, scanning electron and immunohistochemical tests for the detection of enzymes: cytochrome P450c17, cytochrome P450 aromatase, and NADPH cytochrome P450 reductase. It was found that the estrus cycle of Galea spixii female lasts 15.85 ± 1.4 days, with the formation and rupture of vaginal closure membrane during each oestrous cycle. The vagina has a hypertrophied clitoris with the urethral orifice that opens on top of it, and it is observed the absence of a vaginal vestibule. The vaginal mucosal epithelium undergoes proliferative changes, with thickening and thinning according to the respective estrous cycle phase. The enzymes cytochrome P450 aromatase and NADPH reductase are immunolocated throughout the oestrous cycle in the epithelium and connective tissue of the vagina from Galea spixii. On the other hand, the enzyme cytochrome P450c17 is immune located in the vaginal epithelium during all stages of the estrous cycle, except at estrous. With these data may be suggested that there is a local estrogens and androgens metabolism in vaginal tissue which may be associated with cell proliferation, vascularization and innervation variation besides the formation and rupture of the vaginal closure membrane

Análise diferencial da expressão gênica e proteica no corpo lúteo de bovinos submetidos a tratamentos com eCG / Differential analysis of the gene and protein expression in bovine corpus luteum under eCG treatments

A gonadotrofina coriônica equina (eCG) tem sido utilizada em programas de sincronização para inseminação artificial em tempo fixo e normalmente promove o aumento do volume do corpo lúteo e a da produção de progesterona. Além disso, esta mesma gonadotrofina pode ser utilizada para superovulação. Desse modo, hipóteses relativas aos mecanismos pelos quais gonadotrofinas exógenas alteram as funções celulares nos corpos lúteos resultantes foram formuladas. Para testar tais hipóteses, 18 vacas (Bos indicus) foram divididas em grupos: controle (n=5), estimulado (n=6) e superovulado (n=7) e a ovulação das mesmas foi sincronizada usando um protocolo já estabelecido com dispositivo de progesterona. Os animais estimulados receberam 400 UI de eCG no dia de remoção do dispositivo de progesterona e os animais superovulados 4 dias antes. No dia 7 após injeção de GnRh, os animais foram abatidos para a coleta de CLL e sangue. Análises de peso e volume de CL, concentração de progesterona (P4), bem como da expressão gênica e proteica de fatores angiogênicos e de proteínas esteroidogênicas foram realizadas. Além disso, o transcriptoma foi analisado por microarranjo. Foi observado que o volume do CL foi maior nos animais do grupo estimulado (1177,37 ± 167,07 mm3) e ainda maior nos do superovulado (1495,18 ± 137,01 mm3) quando comparados ao grupo controle (830,33 ± 234,99 mm3; p = 0,03). A concentração média de progesterona por CL nos animais do grupo estimulado foi maior que nos animais do grupo controle (5,95 ± 0,17 vs 3,69 ± 0,72 ng/ml; p = 0,03) e que nos superovulados (4,11 ± 0.73; p = 0,01). Além disso, os tratamentos com eCG aumentaram a expressão do FGFR2 e também da STAR nos animais estimulados e superovulados (p < 0,05). Quanto aos resultados do microarranjo, no total 242 transcritos foram aumentados e 111 foram diminuídos nos animais estimulados e 111 foram aumentados e 113 diminuídos nos animais superovulados em relação aos animais controle (1,5 vezes, p 0.05).

Equine chorionic gonadotropin (eCG) has been widely used in synchronization protocol to artificial insemination program and usually promote corpus luteum (CL) volume increases and stimulates progesterone production. Furthermore the same gonadotropin can be used to superovulation protocols. Thus, hypotheses concerning the mechanisms by which exogenous gonadotropins alter cellular functions in resulting corpora lutea were formulated. To test that hypothesis, 18 (Bos indicus) cows were divided into control (n=5), stimulated (n=6) and superovulated groups (n=7). Ovulation was synchronized using a progesterone device-based protocol. Stimulated animals received 400 IU of eCG of device removal and superovulated animals received 2000 IU of eCG 4 days prior. Corpora lutea (CLL) and blood samples were collected seven days after GnRH administration. Analyses of CL weight and volume, progesterone (P4) concentration, as well as the gene and protein expression of angiogenic and steroidogenic proteins were performed. Furthermore, the transcriptome was evaluated by microarray. The CL volume was higher in superovulated (1495.18 ± 137.01) than in stimulated (1177.37 ± 167.07) cows and higher in stimulated than in the control (830.33 ± 234.99) cows, and the P4 concentration per CL was higher in stimulated (5.95 ± 0.17 ng/ml) animals than in the control (3.69 ± 0.72 ng/ml) and superovulated (4.11 ± 0.73 ng/ml; P = 0.01) animals. Overall, 242 transcripts were up-regulated and 111 transcripts were downregulated in stimulated cows (P 0.05) and 111 were up-regulated and 113 down-regulated in superovulated cows in relation to the control (1.5 fold, P 0.05).

Efectos de la leptina en el inicio de la pubertad en animales machos / Efeitos da leptina no inicio da puberdade em animais machos / Effects of the leptin in the onset of puberty in animal males

La leptina es una hormona de 16 KDa producida principalmente por el tejido adiposo, codificada por el gen ob y compuesta por 146 aminoácidos. Cumple sus funciones en la periferia del organismo en el eje hipotálamo – hipófisis – gónadas. En varias especies se ha estudiado el efecto de esta hormona en la reproducción; los cambios en su concentración y en su expresión podrían estar asociados con el inicio de la pubertad en diferentes especies animales y en los humanos. El rol de la leptina en la reproducción del macho ha sido estudiado especialmente en ratas y ratones, pero también se han realizado investigaciones en humanos y otras especies animales. En las células de Leydig, en los túbulos seminíferos, las espermatogonias y los espermatozoides, entre otros tipos de células, hay expresión de los receptores y el RNAm de receptores de leptina, lo que indica que puede haber una función importante de la leptina en los testículos. En general, se ha hallado un efecto inhibitorio de la testosterona con la secreción de leptina y viceversa, lo cual indica que la leptina puede regular la esteroidogénesis en el testículo. La leptina también puede actuar en células no diferenciadas del testículo para permitir su diferenciación en espermatocitos y puede asistir a la célula a través de toda su diferenciación y maduración hacia espermátides. A través de todos estos resultados obtenidos, se observa a la leptina como una importante hormona que puede estar involucrada en funciones vitales del eje neuroendocrino y reproductivo del macho.

The leptin is a 16 KDa hormone principally produced by the adipose tissue, codified by the ob gene and composed by 146 amino acids. This hormone carries out its functions at peripheral levels and in the hypothalamic– hypophysis – gonadal axis. In several species the effect of this hormone on reproduction and their concentration and expression changes might be associated with the onset of puberty in different animal species and in human beings. The role of leptin in male reproduction has been studied especially in rats, mice, human beings, and other animal species. Leptin receptor and mRNA expression has been found in Leydig cells, seminiferous tubules, spermatogonies, spermatozoa, among other cells, indicating that leptin could have an important role in testicular function. An inhibitory effect of testosterone on leptin secretion has been found and vice versa, which indicates that leptin can regulate testicular steroidogenesis. Leptin can also act in non differentiated cells of the testis, promoting spermiogenesis. Then, leptin appears to be an important hormone probably involved in vital functions of the male neuroendocrine and reproductive axis.

A leptina é um hormônio de 16 KDa produzida principalmente pelo tecido adiposo, codificada pelo gene ob e composta por 146 aminoácidos. Cumpre suas funções na periferia do organismo no eixo hipotálamo – hipófise – gônadas. Em varias espécies tem-se estudado o efeito deste hormônio na reprodução; as mudanças na concentração e em sua expressão poderiam estar associadas com o inicio da puberdade em diferentes espécies animais e em humanos. O papel da leptina na reprodução em machos tem sido estudado especialmente em ratas e ratos, porém também tem sido realizadas pesquisas em humanos e outras espécies animais. Nas células de Leydig, nos túbulos seminíferos, as espermatogônias e os espermatozóides, entre outros tipos de células, existe expressão dos receptores e o RNAm de receptores de leptina, o que indica que pode existir uma função importante da leptina nos testículos. Em geral, tem sido encontrado um efeito inibitório da testosterona com a secreção da leptina e vice versa, o qual indica que a leptina pode regular a esteroidogénese no testículo. A leptina também pode atuar nas células não diferenciadas do testículo para permitir sua diferenciação em espermatócitos e pode ajudar à célula a través de toda sua diferenciação e maturação até espermátides. A análise de todos estes resultados obtidos, permite considerar a leptina como um importante hormônio que pode estar envolvido em funções vitais do eixo neuroendócrino e reprodutivo do macho.

Pharmacological management of Cushing's syndrome: an update

The treatment of choice for Cushing's syndrome remains surgical. The role for medical therapy is twofold. Firstly it is used to control hypercortisolaemia prior to surgery to optimize patient's preoperative state and secondly, it is used where surgery has failed and radiotherapy has not taken effect. The main drugs used inhibit steroidogenesis and include metyrapone, ketoconazole, and mitotane. Drugs targeting the hypothalamic-pituitary axis have been investigated but their roles in clinical practice remain limited although PPAR-gamma agonist and somatostatin analogue som-230 (pasireotide) need further investigation. The only drug acting at the periphery targeting the glucocorticoid receptor remains Mifepristone (RU486). The management of Cushing syndrome may well involve combination therapy acting at different pathways of hypercortisolaemia but monitoring of therapy will remain a challenge.

O tratamento de escolha para a síndrome de Cushing ainda é a cirurgia. O papel da terapia medicamentosa é duplo: ele é usado para controlar o hipercortisolismo antes da cirurgia e otimizar o estado pré-operatório do paciente e, adicionalmente, quando ocorre falha cirúrgica e a radioterapia ainda não se mostrou efetiva. Os principais medicamentos são empregados para inibir a esteroidogênese e incluem: metirapona, cetoconazol e mitotano. Medicamentos visando o eixo hipotálamo-hipofisário têm sido investigados, mas seu papel na prática clínica permanece limitado, embora o agonista PPAR-gama e análogo de somatostatina, som-230 (pasireotídeo), requeira estudos adicionais. A única droga que age perifericamente no receptor glicocorticóide é a mifepristona (RU486). O manejo da síndrome de Cushing deve envolver uma combinação terapêutica atuando em diferentes vias da hipercortisolemia, mas o monitoramento dessa terapia ainda permanece um desafio.

Efeitos da endotelina-1 sobre a esteroidogênese e o crescimento celular em cultura de células da granulosa de bovinos / Endothelin-1 effects on steroidogenesis and cellular growth of bovine granulosa cells culture

Além do controle neuroendócrino do eixo hipotalâmico-hipofisáriogonadal existem fatores autócrinos e parácrinos que controlam o crescimento, seleção e ovulação nos mamíferos. Estes fatores ainda não estão bem estabelecidos. Objetivando analisar as variações nas concentrações plasmáticas da endotelina-1 em um ciclo estral bovino e seus efeitos sobre o cultivo de células da granulosa, foram analisadas amostras plasmáticas de 5 dias (0, 1, 3, 7 e 13) de um ciclo estral, tendo como base o dia da ovulação (dia 0) e 3 horas (8, 13 e 16) do 14º dia do ciclo. As variações nas concentrações plasmáticas de endotelina-1 não foram significativas para os dias assim como para as horas do dia analisado. Células da granulosa obtidas de folículos antrais foram cultivadas durante 48 horas com diferentes concentrações de endotelina. Os resultados demonstraram que a endotelina atua de maneira dosedependente estimulando a produção de progesterona e inibindo o crescimento celular.(AU)

Besides the neuroendocrine control of the hypotalamic-hypophisarygonodal axis there are autocrines and paracrines factors that control the growth, selection and ovulation in the mammals. These factors are not well established yet. Aiming to analyze the variations in the endotelin-1plasmatic concentrations in a bovine estral cycle and their effects on the culture of granulosa cells, plasma samples of 5 days (0,1,3,7 and 13) from an estral cycle have been analyzed, having as basis the ovulation day (day 0) and 3 hours (8,13,16) of the fourteenth day of the cycle. The variations in the endothelin-1 concentrations were not significant for the days as well as for the hours of the analyzed day. Granulosa cells obtained from antral follicles were cultivated during 24 hours with different concentrations of endothelin. The results demonstrated that the endothelin-1 acts in a dose-dependent manner stimulating the production of progesterone and inhibiting the cellular growth.(AU)

Testosterona e gonadotrofina coriônica humana estimulam a esteroidogênese em células da granulosa de folículo pré-ovulatório de égua? / Do testosterone and human chorionic gonadotropin stimulate steroidogenesis in granulosa cells of preovulatory follicle in mare?

Avaliou-se o papel da gonadotrofina coriônica humana (hCG) e da testosterona na produção de progesterona (P4) e 17ß-estradiol (E2) pelas células da granulosa cultivadas in vitro de folículo antral de égua. Os tratamentos usados foram: 1- controle (nenhum hormônio adicionado), 2- 1UI hCG (0,3µg/ml) e 3- 10UI hCG (3,0µg/ml). O tratamento com hCG foi realizado na presença ou não de testosterona (144ng/ml). O meio foi coletado e substituído com 0,25, 3, 6, 12, 24 e 144h de cultivo. As concentrações de P4 e E2 foram mensuradas por radioimunoensaio. Não se observou diferença entre os tratamentos 1 e 3 quanto à produção de P4 e E2; o tratamento 1 resultou em aumento da concentração de progesterona após 24h de cultura (P<0,01), mas somente em presença de testosterona. A concentração de estradiol aumentou em presença de testosterona, alcançando concentração máxima com 6h de cultura (P<0,01), e diminuiu gradativamente, até atingir a concentração observada com 0,25h de cultura. A adição de hCG não influenciou a síntese do estradiol. A testosterona desempenhou importante efeito estimulador na síntese/secreção doe E2 pelas células da granulosa e modulou a ação do hormônio luteinizante na diferenciação e luteinização das células da granulosa de folículo antral presumidamente pré-ovulatório de égua in vitro.(AU)

The role of the human chorionic gonadotropin (hCG) and testosterone was evaluated in the progesterone (P4) and estradiol-17b (E2) production by granulosa cells of antral follicles from mare cultivated in vitro. The treatment (groups) with gonadotropin consisted of: 1- control (no added hormone); 2- 1 IU hCG (0.3mg/ml) and 3- 10 IU hCG (3.0mg/ml). The treatment with hCG was carried out in the presence or not of testosterone (144ng/ml). The culture medium was collected and replaced at 0.25, 3, 6, 12, 24 and 144h of culture. The concentrations of P4 and E2 were measured by radioimunoassay. Analyses of variance were used for P4 and E2, and mean of the factors were compared by the Tukey test at 5% of probability. No difference was observed between 1 and 2 groups. Treatment with 1 IU of hCG increased progesterone concentration after 24h of culture (P<0.01), only in the presence of testosterone. The concentration of estradiol increased in the presence of testosterone, reaching maximum concentration with 6h of culture (P<0.01), and reduced gradually until the observed concentration at 0.25h of culture. The addition of hCG had no effect in the synthesis of this steroid. The testosterone modulates the action of the luteinizing hormone in the differentiation and luteinization of the granulosa cells and plays important estimulator effect in the synthesis/secretion of E2 by granulosa cells in vitro of presumptive pre-ovulatory antral follicle in mare.(AU)