RESUMO
In order to comparatively study the methods of in vitro" isolation of leptospires, the Pasteur"s pipette and the serial dilution techniques were performed on the renal tissue samples of 60 hamsters experimentally infected either by two strains of Leptospira interrogans serovar pomona, using the Fletcher"s medium added with 100 micrograms /mL of 5-fluor-uracil or 2.5 micrograms /mL of neomycin sulfate. The hamsters were divided into groups A and B, the 30 animals of group A were inoculated with a strain of Leptospira that was passed 39 times in hamsters, and the remaining 30 animals, inoculated with a field isolate of Leptospira with only 2 passages in hamsters. The hamsters died three to seven days after the inoculation, or sacrificed in agonic state, and the presence of leptospires in the renal tissue was confirmed by at least one of the three microscopic examination procedures: direct examination of the renal tissue suspension with dark field microscopy, Levaditis histologic staining and the direct fluorescent antibody technique. The specimens taken from the group A were found to be richer in the number of leptospires than the materials of group B. The results of "in vitro" cultivation of leptospires varied according to the strain of leptospires tested. For the group A, the serial dilution technique was the most sensitive, combined with the use of 5-fluor-uracil. For the g
Com o objetivo de estudar comparativamente os métodos de isolamento de leptospiras, através das técnicas da pipeta Pasteur e a das diluições seriadas, em meio de cultura de Fletcher tratado com os antimicrobianos 5-fluor-uracil (5-FU) na concentração de 100 microgramas por mililitro ou o sulfato de neomicina na concentração de 2,5 microgramas por mililitro, foram examinados 60 pares de rins obtidos de hamsters jovens, experimentalmente inocinoculados com estirpes virulentas de Leptospira interrogans sorotipo pomona. Os trinta animais do grupo A" foram inoculados com uma estirpe que apresentava 33 passagens em hamsters. 0 grupo " B foi constituído por outrs trinta animais inoculados com a estirpe que contemplava apenas duas passagens em hamsters. Decorridos três a sete dias da inoculação, todos os animais vieram a óbito ou foram sacrificados em estado agânico. Nesta oportunidade, a existência de leptospiras em todos os rins processados foi confirmada por pelo menos um de três métodos utilizados para a visualização do agente: exame direto em microscopia de campo escuro, coloração de Levaditi, e a reação de imunofluorescência direta. Segundo estas técnicas, os materiais provenientes do grupo "A" foram caracterizados como apresentando maior riqueza em leptospiras do que aqueles originários do grup o B". Os resultados das provas culturais variaram conforme a estirpe de Leptospira
RESUMO
In order to comparatively study the methods of in vitro" isolation of leptospires, the Pasteur"s pipette and the serial dilution techniques were performed on the renal tissue samples of 60 hamsters experimentally infected either by two strains of Leptospira interrogans serovar pomona, using the Fletcher"s medium added with 100 micrograms /mL of 5-fluor-uracil or 2.5 micrograms /mL of neomycin sulfate. The hamsters were divided into groups A and B, the 30 animals of group A were inoculated with a strain of Leptospira that was passed 39 times in hamsters, and the remaining 30 animals, inoculated with a field isolate of Leptospira with only 2 passages in hamsters. The hamsters died three to seven days after the inoculation, or sacrificed in agonic state, and the presence of leptospires in the renal tissue was confirmed by at least one of the three microscopic examination procedures: direct examination of the renal tissue suspension with dark field microscopy, Levaditis histologic staining and the direct fluorescent antibody technique. The specimens taken from the group A were found to be richer in the number of leptospires than the materials of group B. The results of "in vitro" cultivation of leptospires varied according to the strain of leptospires tested. For the group A, the serial dilution technique was the most sensitive, combined with the use of 5-fluor-uracil. For the g
Com o objetivo de estudar comparativamente os métodos de isolamento de leptospiras, através das técnicas da pipeta Pasteur e a das diluições seriadas, em meio de cultura de Fletcher tratado com os antimicrobianos 5-fluor-uracil (5-FU) na concentração de 100 microgramas por mililitro ou o sulfato de neomicina na concentração de 2,5 microgramas por mililitro, foram examinados 60 pares de rins obtidos de hamsters jovens, experimentalmente inocinoculados com estirpes virulentas de Leptospira interrogans sorotipo pomona. Os trinta animais do grupo A" foram inoculados com uma estirpe que apresentava 33 passagens em hamsters. 0 grupo " B foi constituído por outrs trinta animais inoculados com a estirpe que contemplava apenas duas passagens em hamsters. Decorridos três a sete dias da inoculação, todos os animais vieram a óbito ou foram sacrificados em estado agânico. Nesta oportunidade, a existência de leptospiras em todos os rins processados foi confirmada por pelo menos um de três métodos utilizados para a visualização do agente: exame direto em microscopia de campo escuro, coloração de Levaditi, e a reação de imunofluorescência direta. Segundo estas técnicas, os materiais provenientes do grupo "A" foram caracterizados como apresentando maior riqueza em leptospiras do que aqueles originários do grup o B". Os resultados das provas culturais variaram conforme a estirpe de Leptospira