Zika virus syndrome, lack of environmental policies and risks of worsening by cyanobacteria proliferation in a climate change scenario / Síndrome do zika vírus, carência de políticas ambientais e riscos de agravamento por proliferação de cianobactérias em um cenário de mudanças climáticas

ABSTRACT Almost half of the Brazilian population has no access to sewage collection and treatment. Untreated effluents discharged in waters of reservoirs for human supply favor the flowering of cyanobacteria - and these microorganisms produce toxins, such as saxitoxin, which is a very potent neurotoxin present in reservoirs in the Northeast region. A recent study confirmed that chronic ingestion of neurotoxin-infected water associated with Zika virus infection could lead to a microcephaly-like outcome in pregnant mice. Cyanobacteria benefit from hot weather and organic matter in water, a condition that has been intensified by climate change, according to our previous studies. Considering the new findings, we emphasize that zika arbovirus is widespread and worsened when associated with climate change, especially in middle- or low-income countries with low levels of sanitation coverage.

RESUMO No Brasil, quase metade da população não tem acesso a coleta e tratamento de esgotos. Os efluentes não tratados, devido a contaminação das águas de reservatórios para abastecimento humano, geram florações de cianobactérias - e esses microrganismos produzem toxinas, como a saxitoxina, uma neurotoxina bastante potente e presente nos reservatórios da região Nordeste. Estudo recente confirmou que a ingestão crônica de água contaminada com neurotoxinas associada a infeção pelo zika vírus em camundongos prenhes poderia levar a desfecho semelhante a microcefalia. Cianobactérias são beneficiadas por tempo quente e matéria orgânica na água, e essas condições estão sendo intensificadas pelas mudanças climáticas, segundo nossos estudos anteriores. Aqui, ressaltamos que, à luz dos novos achados, a arbovirose do zika, associada às mudanças do clima, se amplifica e se agrava, sobretudo em países de média ou baixa renda, com baixos níveis de cobertura de saneamento.

Transtorno do espectro autista: uma revisão sistemática sobre aspectos nutricionais e eixo intestino-cérebro / Autism spectrum disorder: a systematic review about nutritional aspects and gut-brain axis

O número de indivíduos diagnosticados com o transtorno do espectro autista (TEA) registrou aumento evidente na última década. Os principais sintomas, apresentados pelo portador, são neurológicos e digestórios, estando às intervenções nutricionais dentre as terapêuticas mais promissoras para amenizar a sintomatologia clínica. Assim, objetivou-se revisar sistematicamente os estudos sobre distúrbios alimentares e do trato gastrointestinal apresentado pelo indivíduo portador do TEA, a fim de compreender como o comportamento alimentar influência na etiopatogênese e manifestações clínicas da doença, com foco no eixo intestinocérebro. Para isso realizou-se uma revisão sistemática, seguindo as diretrizes PRISMA. A partir de uma busca estruturada e abrangente em bases de dados eletrônicas, 23 estudos foram recuperados e incluídos na revisão. Os critérios de inclusão definiam ser artigos originais relacionando o TEA com alterações nutricionais e/ou com o eixo intestino-cérebro. Após análise da composição da microbiota intestinal, os estudos mostraram um quadro de desequilíbrio. Foram encontradas, também, alterações na barreira de muco e permeabilidade intestinal e alterações em proteínas envolvidas na digestão e absorção de alimentos. Dietas restritivas e a modulação da microbiota, com uso de probióticos e de antibióticos específicos, são apresentadas como estratégias terapêuticas adjuvantes promissoras. Conclui-se que o eixo intestino-cérebro está envolvido tanto na etiologia, quanto nas manifestações clínicas do TEA. Porém, não sendo certo se alterações intestinais são causa ou consequência das alterações neurológicas. Até o presente momento, a comunidade científica não tem conclusões suficientes para indicar o uso de dietas restritivas, e uso de probióticos e de antibióticos como terapêutica para o TEA.

The number of individuals diagnosed with autism spectrum disorder (ASD) had an evident increase in the last decade. The primary symptoms exhibited amongst these patients were mostly digestive and neurological disorders; with nutritional interventions being one of the most promising therapies to assuage this clinical symptomology. As such, following the PRISMA guidelines, we systematically reviewed the research studies apropos of the ASD patients manifesting said digestive disorders, to comprehend how dietary behavior can influence the etiopathogenesis and clinical manifestations of the disease, with primary focus on the gut-brain axis. From a comprehensive and structured search through electronic databases, 23 studies were retrieved and admitted in this review. The inclusion criteria defined that there be original articles consociating ASD with nutritional disorders and/or with the gut-brain axis. These studies analyzed the composition of the intestinal flora of diagnosed patients, subsequently discerning cases of varying imbalances. Alterations in the gene expression of the proteins involved in the digestion and absorption of food, the mucous barrier and the intestinal permeability were described. Accordingly, restrictive diets and the modulation of the microbiota by administering specific anti- & probiotics were initially identified as promissory therapies. In conclusion, the gut-brain axis was observed to be a determinant factor in both the etiology and clinical symptomology of ASD - though it is still debatable the correlation of intestinal alterations with neurological changes. At present, there is no concrete scientific proof accrediting to restrictive diets and the use of specific anti- & probiotics, as successful treatments for ASD.

Application of botulinum toxin type A in gummy smile: case report / Aplicação da toxina botulínica tipo A em sorriso gengival: relato de caso

ABSTRACT Gummy smile is one of the major complaints of patients, due to its influence on the self-esteem. It is known that it has a multifactorial cause and can be present in the excessive vertical growth of the maxilla, excessive labial contraction, short upper lip and extrusion of the anterior teeth. The use of the botulinum toxin can be associated with additional treatments or be applied individually, according to the need of each patient. The goal of this research study was to present a clinical case using botulinum toxin type A as an alternative therapy to correct the gummy smile. A 22-year-old patient, presenting vertical maxillary growth, reporting aesthetic discomfort while smiling, chose for an alternative treatment therapy with the application of botulinum toxin to correct the accentuated gingival display. The results show that the toxin is a satisfactory treatment option and its indication is considered a fast, effective, easy and safe treatment method, being a more conservative approach compared to surgical procedures.

RESUMO O sorriso gengival, é uma das grandes queixas dos pacientes, devido a sua influência na auto estima do mesmo. Sua causa é multifatorial, podendo estar presente no excesso de crescimento vertical da maxila, contração labial excessiva, lábio superior curto e extrusão dos dentes anteriores. A aplicação da toxina botulínica pode ser associada a outros tratamentos ou isoladamente, de acordo com a necessidade de cada paciente. O objetivo desse trabalho foi apresentar um caso clinico utilizando a toxina botulínica tipo A como uma alternativa terapêutica para a correção do sorriso gengival. Paciente, 22 anos, apresentando crescimento vertical da maxila, relatando desconforto estético ao sorrir, optou pela alternativa terapêutica, com a aplicação da toxina botulínica para correção da exposição gengival acentuada. Os resultados encontrados mostram que a toxina é um tratamento satisfatório e sua indicação é considerada um tratamento rápido, eficaz, fácil e seguro. Um método mais conservador quando comparado aos procedimentos cirúrgicos.

Estudio bioquímico del veneno de la anémona de mar Phymactis papillosa (Actiniidae)

En este trabajo se ha estudiado bioquímicamente el veneno de Phymactis papillosa, colectadas en la bahía de Ancón. El veneno fue obtenido mediante shock hipotónico y luego se liofilizó. El análisis electroforético del veneno soluble mostró la presencia de 5 bandas proteicas con pesos moleculares entre 5 y 25.1 kDa. El veneno soluble fue fraccionado por cromatografía de filtración en una columna de Sephadex G-50, obteniéndose cuatro picos de proteína (I, II, III y IV). Tanto en el veneno soluble como en las fracciones colectadas se midió actividad de proteasa, fosfolipasa, hialuronidasa, fosfatasa ácida y fosfatasa alcalina; así como, actividad hemolítica y neurotóxica. Se encontró actividad proteolítica sobre caseína, en el veneno soluble y en los picos I y III. No se detectó actividad de fosfolipasa, hialuronidasa, fosfatasa ácida y fosfatasa alcalina. La actividad hemolítica, ensayada sobre eritrocitos humanos, se encontró en el veneno soluble y en el pico II. Finalmente, tanto el veneno soluble como el pico III mostraron ser neurotóxicos al ser inyectados en ratones albinos vía intraperitoneal. Se concluye que el veneno soluble de P. papillosa tiene actividad proteolítica, hemolítica y neurotóxica

In this work, the poison of Phymactis papillosa collected in Ancón bay has been studied biochemically. The venom was obtained by hypotonic shock and then lyophilized. Electrophoretic analysis of the soluble poison showed the presence of 5 protein bands with molecular weights between 5 and 25.1 kDa. The soluble venom was fractionated by filtration chromatography on a Sephadex G-50 column, yielding four protein peaks (I, II, III and IV). In the soluble venom and collected fractions was measured protease activity, phospholipase, hyaluronidase, acid phosphatase and alkaline phosphatase; as well as hemolytic and neurotoxic activity. Proteolytic activity on casein was found in the soluble venom and peaks I and III. Was not detected phospholipase activity, hyaluronidase, acid phosphatase and alkaline phosphatase. Hemolytic activity on human red cells tested, was found in the soluble venom and peak II. Finally, the soluble venom as the peak III showed be neurotoxic when injected into white mice intraperitoneally. It is concluded that the soluble venom of P. papillosa has proteolytic, hemolytic and neurotoxic activity

Por que a ingestão de carambola é proibida para pacientes com doença renal crônica? / Why eating star fruit is prohibited for patients with chronic kidney disease?

Resumo Novos estudos têm mostrado o mecanismo pelo qual a carambola (Averrhoa carambola) torna-se tóxica para indivíduos com doença renal crônica (DRC). O objetivo deste trabalho foi revisar a literatura atual sobre o tema. Trata-se de artigo de revisão, com publicações de 2000 a 2014 disponíveis em bases de dados científicas. Há relatos de que a neurotoxicidade ocorre devido à presença de oxalato na carambola; porém, achados recentes mostram que o efeito neurotóxico se dá pela toxina caramboxina, que parece inibir o sistema GABAérgico, que é o principal sistema inibitório do sistema nervoso central (SNC), envolvendo alterações como soluços e confusão mental, até quadros mais sérios como convulsões e morte. É importante a ação multiprofissional para alertar os pacientes com DRC quanto à proibição do consumo da carambola.

Abstract New studies have shown the mechanism by which the star fruit (Averrhoa carambola) becomes toxic to individuals with chronic kidney disease (CKD). The aim of this study was to review the current literature on the topic. This is a review article, with publications from 2000 to 2014 available in scientific database. There are reports that neurotoxicity is due to the presence of oxalate in star fruit, but recent findings show that the neurotoxic effect of the toxin is by caramboxin, which appears to inhibit the GABAergic system which is the major inhibitory system in the central nervous system (CNS), involving changes as sobs and confusion, to more serious conditions such as seizures and death. It is important to multidisciplinary action to alert patients with CKD as the prohibition of the star fruit consumption.

Carambola (Averrhoa carambola): sua neurotoxicidade e abordagens terapêuticas / Starfruit (carambola Averrhoa): its neurotoxicity and therapeutic approaches

A insuficiência renal crônica é uma doença de elevada morbimortalidade e é consenso que sua incidência e prevalência, em estágio terminal, vêm aumentando de forma significativa. Como relevância nos cuidados nutricionais está o consumo da carambola. A Averrhoa carambola, da família das oxalidáceas, conhecida popularmente como carambola, é uma fruta originária da Ásia e comum em países tropicais, entre eles o Brasil. Apesar do uso como terapia alternativa na medicina de alguns países, essa fruta recebe destaque por ter em sua composição o ácido oxálico, possível causador de efeitos deletérios aos doentes renais crônicos. Além disso, possui uma neurotoxina capaz de provocar alterações neurológicas nestes pacientes renais crônicos. Essa neurotoxina parece apresentar especificamente inibição sobre o sistema de condução GABAérgico, o que aumenta a excitabilidade do sistema nervoso central. As manifestações clínicas da intoxicação pela carambola podem ser desde soluços e confusão mental, até convulsões e morte. Diante da descrição de alguns relatos de casos sobre o consumo da carambola, percebe-se que a abordagem terapêutica mais indicada é a hemodiálise, com ou sem hemoperfusão. Assim a recomendação é evitar o consumo desta fruta, já que suas complicações além de imprevisíveis são potencialmente fatais.

Efecto neurotóxico del extracto acuoso de boldo (Peumus boldus) en un modelo animal / Neurotoxic effect of aqueous extract of boldo (Peumus boldus) in an animal model

Objetivos : Evaluar el efecto neurotóxico del extracto acuoso de boldo (Peumus boldus) en un modelo experimental. Materiales y métodos. Se diseñó un experimento, que incluyó 20 ratas macho Holtzman de 250 ± 15 gr, distribuidas aleatoriamente en cuatro grupos: el control negativo recibió solución salina (SS) por vía oral (VO), el control positivo que recibió 6-hidroxidopamina por vía intracraneal (VIC) y SS por VO, el grupo experimental 1 recibió extracto acuoso de boldo (EAB) por VO y el grupo experimental 2 recibió 6-hidroxidopamina por VIC y EAB por VO, en todos los casos durante 21 días. Se realizó una evaluación neurológica, la cual tuvo tres componentes: a) clínico, evaluado con el test de rotarod, b) bioquímico, mediante la determinación de niveles séricos de ácido úrico, y c) histopatológico, por inmunohistoquímica para neuronas dopaminérgicas de sustancia negra. Se empleó la prueba de Kruskal Wallis y el test de Dunn para evaluar las diferencias entre los grupos. Resultados. Se encontró disminución significativa en el tiempo de latencia del test de rotarod entre los grupos control negativo y control positivo (p<0,01), control negativo y experimental 1 (p=0,09), control negativo y experimental 2 (p<0,01), control positivo y experimental 1 (p=0,04), y experimental 1 y 2 (p=0,09). En la determinación de ácido úrico no hubo diferencia significativa intergrupal. En el conteo neuronal hubo depleción de neuronas dopaminérgicas totales, pero sin diferencia intergrupal. Conclusiones. Se evidencio un efecto neurotóxico del extracto acuoso de boldo en ratas macho de la cepa Holtzman a nivel clínico.

Objectives. To assess the neurotoxic effect of the aqueous extract of boldo (Peumus boldus) in an experimental model. Materials and methods. 20 male Holtzman rats of 250 ± 15 g were randomized into four groups: the negative control received saline solution (SS) orally (PO), the positive control received 6-hydroxydopamine intracranially (IC) and SS by PO. Experimental group 1 received aqueous extract of boldo (AEB) by PO, and experimental group 2 received 6-hydroxydopamine intracranially and AEB by PO. The experiment lasted 21 days. A neurological assessment was performed which had three components: a) clinical, evaluated with the rotarod test, b) biochemical, by measuring serum levels of uric acid, and c) histopathology, by immunohistochemistry for substantia nigra dopaminergic neurons. The Kruskal Wallis test and the Dunn test were used to assess differences between groups. Results. A significant decrease was found in the latency time of the rotarod test between the negative and positive control group (p<0.01), negative control and experimental 1 (p=0.09), negative control and experimental 2 (p<0.01), positive control and experimental 1 (p=0.04), and experimental 1 and 2 (p=0.09). There was no significant intergroup difference in the identification of uric acid. There was a depletion of the total dopaminergic neurons in the neuronal count, without intergroup difference. Conclusions. A neurotoxic effect of aqueous extract of boldo was recognized at a clinical level in Holtzman male rats.

Avaliação dos efeitos neurotóxicos da injeção intrahipocampal de três toxinas isoladas do veneno do escorpião Tityus bahiensis / Assessment of the neurotoxic effects the intrahippocampal injection of three toxins isolated from Tityus bahiensis scorpion venom

In Brazil, the scorpions of the genus Tityus belonging to the Buthidae family are the main responsible for serious accidents. Among them there are Tityus serrulatus and Tityus bahiensis; due to the high number of accidents they cause, they are considered of greater clinical importance. However, there are few studies on the action of the venom of T. bahiensis mainly in the central nervous system, even this venom presenting an important neurotoxic action. The neurotoxins are considered the main toxic elements of the venom, and among those already described, ion channels (sodium, potassium, calcium and chloride) are considered their main targets of action. The action of some of these toxins produces behavioral, electrographic and histopathological changes due to the alteration in the brain concentration of neurotransmitters. Therefore, the aim of our study was to evaluate the possible neurotoxic effects of three toxins from the venom of the scorpion on the hippocampus of rats, by evaluating the behavioral and electroencephaographic activity, and to evaluate possible changes on the levels of neurotransmitters and integrity of hippocampal neurons after intrahippocampal injection of the toxins. Thus, T. bahiensis scorpion venom was fractionated by gel filtration (Sephadex G25) into 5 fractions. The fraction that showed a higher activity on the tested model was chromatographed on HPLC generating 3 peaks (toxins Tb II-I, Tb II-II and Tb II-III), which had tested their activities on experimental models. Male Wistar rats used as experimental subjects were submitted to a stereotactic surgery for the implantation of cannulae and / or electrodes in the hippocampus. The animals were evaluated for behavioral activity, brain and neuronal integrity (histological sections of hippocampal tissue examined by an optical microscope for quantification of cells in the CA1, CA3 and CA4 areas) after injection of toxins. Microdialysis samples were collected for measurement of neurotransmitters that were performed on HPLC. The results show that the toxins induced behavioral (prostration, respiratory difficult, limited mobility, increased secretion, myoclonus and wet dog shake) electroencephalographic spikes and discharges) and histological alterations (cell death in the hippocampal CA1, CA3 and CA4 regions). More specifically in relation to Tb II-II, it was able to alter the levels of the neurotransmitters glutamate and GABA. Administration of glutamatergic antagonists AP-5 and MK-801 prior of injection of Tb II-II showed that this toxin acts on glutamate receptors, more effectively on non-NMDA type receptors, since the action of MK-801 in relation Tb II-II was more effective at blocking the onset of some behavioral, electroencephalographic and histopathological changes in comparison to the AP-5. With these results we can conclude that the three toxins were able to make changes on behavioral, electroencephalographic and histopathological parameters, and the action of Tb II-II is primarily a result of increased release of glutamate that generally seems to be more strongly linked to its action on glutamatergic non-NMDA -type receptors.

No Brasil, os escorpiões do gênero Tityus pertencentes à família Buthidae são os principais causadores de acidentes graves. Entre eles destacam-se o Tityus serrulatus e o Tityus bahiensis devido ao alto número de acidentes que causam tornando-os os de maior importância médica. Contudo, poucos são os estudos sobre a ação do veneno do T. bahiensis principalmente no sistema nervoso central, mesmo esse veneno apresentando uma importante ação neurotóxica. As neurotoxinas são consideradas os principais elementos tóxicos desses venenos, sendo que entre as já descritas, os canais iônicos (sódio, potássio, cálcio e cloreto) são considerados os seus principais alvos de ação. A ação de algumas dessas toxinas produz alterações comportamentais, eletrográficas e histopatológicas por alterar as concentrações cerebrais de neurotransmissores. Portanto, o objetivo do nosso trabalho foi avaliar os possíveis efeitos neurotóxico de três toxinas isoladas do veneno do escorpião Tityus bahiensis sobre o hipocampo de ratos, por meio da avaliação das atividades comportamentais e elétrica cerebral, além de avaliar possíveis alterações sobre os níveis de neurotransmissores e a integridade dos neurônios hipocampais, após injeção intrahipocampal das toxinas. Para tanto, o veneno do escorpião T. bahiensis foi fracionado por Gel Filtração (Sephadex G25) formando 5 frações. A fração que apresentou maior atividade sobre o modelo testado foi cromatografada em HPLC gerando 3 picos isolados (toxina Tb II-I, Tb II-II e Tb II-III), os quais tiveram suas atividades testadas sobre os modelos experimentais. Como sujeitos experimentais utilizamos ratos Wistar machos, submetidos à cirurgia estereotáxica para a implantação de cânulas ou/e eletrodos no hipocampo. Os animais foram avaliados quanto à atividade comportamental, elétrica cerebral e integridade neuronal (cortes histológico do tecido hipocampal analisados em microscópio óptico para quantificação das células nas áreas CA1, CA3 e CA4), após injeção das toxinas. Por microdiálise foram coletadas as amostras para dosagem de neurotransmissores que foram realizadas em HPLC. Os resultados demonstram que as três toxinas promoveram alterações sobre parâmetros comportamentais (prostração, dificuldade respiratória e locomotora, mioclonia, “wet dog shake” e convulsão), eletrográficos (espículas e descargas epileptiformes) e histopatológicos (morte de células nas regiões CA1, CA3 e CA4). Em relação à Tb IIII, essa foi capaz de alterar os níveis dos neurotransmissores Glutamato e GABA. O uso dos antagonistas de glutamato AP-5 e MK-801 antes da injeção da Tb II-II mostrou que essa age em receptores glutamatérgico, de maneira mais efetiva sobre os receptores do tipo não NMDA, já que a ação do MK-801 em relação a Tb II-II foi mais efetiva em bloquear o surgimento de algumas alterações comportamentais, eletrográficas e histopatológicas em comparação com o AP-5. Com esses resultados podemos concluir que as três toxinas foram capazes de promover alterações sobre parâmetros comportamentais, eletrográficos e histopatológicos, sendo que a ação da Tb II-II é resultado prioritariamente do aumento da liberação de glutamato que de maneira geral parece estar mais intensamente ligado a sua ação sobre receptores glutamatérgicos do tipo não NMDA.

Estudo dos efeitos dos venenos de artrópodes (Phoneutria nigriventer e Tityus serrulatus) e suas frações sobre a regulação térmica em ratos / Study of the effects of arthropod venoms (Phoneutria nigriventer and Tityus serrulatus) and its fractions on thermoregulation in rats

Body temperature is controlled mainly by the hypothalamus ensuring the proper functioning of metabolic pathways. Accidents with Phoneutria nigriventer and Tityus serrulatus can cause various symptoms: hypothermia and/or hyperthermia, sweating and tremor that may be related to thermoregulation. This work aims to analyze and identify components of venoms acting on thermoregulation and to assess possible mechanisms of action. The venoms were separated into pools by gel filtration and gel electrophoresis to confirm the effectiveness of the separation. The venoms were tested in temperature bioassay in rats. A thermal sensor was implanted subcutaneously in the neck for recording temperature. The venom of Phoneutria nigriventer showed and hypothermic action in rats and Tityus serrulatus showed hyperthermic action. Pools of venoms were also tested; the pool II of venom both had hypothermic action and pool III, hyperthermic action. Subsequent steps were performed exclusively with the venom of Phoneutria nigriventer. The pools II and III were separated by HPLC on peaks. The peaks 8 and 13 of pool II showed hyperthermic action, as well as the peaks 30 and 31 of pool III. The peak 29 of pool III showed hypothermic action. The peaks 29, 30 and 31 were repurified and retested, but without significant results. To study the mechanisms of action, the peak 13 of pool II was tested in animals pretreated with Dantrolene, a drug used against malignant hyperthermia. The results showed that dantrolene did not decrease the temperature of healthy animals, as it acts on calcium channels that can be only modified in patients with the disease. The LPS, an exogenous pyrogen, would be tested with the peak of this hypothermic action, however the peak 29 showed no effect after repurification. The peak 13 was also tested in human glioblastoma U87, revealed not to be cytotoxic. The peaks 8 and 13, were performed by means of mass spectrometry revealing similar masses family of Tachykinins and Ctenitoxins, both actions on the nervous system. The peaks 29, 30 and 31 were tested in cultured hypothalamus neurobasal cells, all the peaks showed a statistically significant decrease in cell viability at lower concentrations after for 24 hours of incubation. At 6 hours of incubation, the statistics showed that the peaks 30 and 31 increased the viability of cells in higher concentrations. The repurified peak 30b was sequenced by Edman degradation and part of the peptide revealed 100% homology with Tx2-6 of Phoneutria nigriventer, which is an NAV inhibitor irreversible neurotoxin and cause sweating. Rats are resistant to change its temperature, thus variations in body temperature ranging only 1 degree could be considered quite significant. Molecules isolated from the venom may act for summation or synergistically and other peptides present in the venom can act in opposite effect. Study of animal toxins are a source of new biomolecules and drug development. Toxins that act on thermoregulation are little studied and need further characterized

A temperatura corporal é controlada principalmente pelo hipotálamo garantindo o bom funcionamento de vias metabólicas. Acidentes com Phoneutria nigriventer e Tityus serrulatus podem causar diversos sintomas: hipotermia e/ou hipertermia, sudorese e tremor que podem estar relacionados a termorregulação. Este trabalho tem como objetivo analisar e identificar componentes dos venenos com ação sobre a termorregulação e verificar possíveis mecanismos de ação. Os venenos foram separados em pools por filtração em gel, e gel de eletroforese para confirmação da eficácia da separação. Os venenos foram testados em bioensaio de temperatura em ratos. Um sensor térmico foi implantado subcutaneamente na porção dorsal para registro de temperatura. O veneno de Phoneutria nigriventer mostrou ação hipotérmica em ratos e o de Tityus serrulatus mostrou ação hipertérmica. Os pools dos venenos também foram testados; o pool II de veneno de ambos tiveram ação hipotérmica e o pool III, ação hipertérmica. As etapas posteriores foram realizadas com o veneno de Phoneutria nigriventer. Os pools II e III foram separados por CLAE em picos. Os picos 8 e 13 do pool II mostraram ação hipertérmica, assim como os picos 30 e 31 do pool III. O pico 29 do pool III mostrou ação hipotérmica. Os picos 29, 30 e 31 foram repurificados e retestados, mas sem resultados significativos. Para estudar os mecanismos de ação, o pico 13 do pool II foi testado em conjunto com o Dantrolene, um medicamento utilizado contra hipertermia maligna. Os resultados mostraram que o Dantrolene não diminuiu a temperatura em animais saudáveis, já que ele age em canais de cálcio que podem estar modificado em pacientes com a doença. O LPS, um pirógeno exógeno, seria testado com o pico que desse ação hipotérmica, entretanto o pico 29 não revelou efeito após repurificação. O pico 13 também foi testado em glioblastomas humanos U87, revelou não ser citotóxico. Os picos 8 e 13, foram passados por espectrometria de massas revelando massas semelhantes a família das Taquicininas e das Ctenotoxinas, ambas com ações sobre o sistema nervoso, sendo as Ctenotoxinas neurotóxicas. Os picos 29, 30 e 31 foram testados em cultura de células neurobasais obtidas de hipotálamo, todos os picos tiveram uma queda estatisticamente significativa na viabilidade celular em concentrações mais baixas após período de incubação de 24 horas. Em 6 horas de incubação, os dados estatísticos mostram que os picos 30 e 31 aumentaram a viabilidade das células em concentrações mais altas. O pico repurificado 30b foi sequenciado por degradação de Edman, e parte do peptídeo revelou 100% de homologia com a Tx2-6 de Phoneutria nigriventer, que é uma neurotoxina inibidora irreversível de NAV e causa sudorese. Ratos são bastante resistentes em alterar sua temperatura, desta forma variações de 1 grau na temperatura corpórea são bastante significativas. As moléculas do isoladas do veneno podem agir por sinergismo ou somatória e ou ainda podem apresentar efeitos antagônicos. Estudo de toxinas animais são uma fonte de novas biomoléculas e o desenvolvimento de novos fármacos. Toxinas com ação na termorregulação são pouco estudadas e ainda precisam ser melhor caracterizadas.

Efeitos das neurotoxinas Mlx-8 e Mlx-9 isoladas do veneno da serpente Micrurus lemniscatus sobre astrócitos em cultura / Effects of Mlx-8 and Mlx-9 neurotoxins isolated from the Micrurus lemniscatus snake venom in astrocytes culture

The predominant clinical manifestations of Elapid snake bite are related to the neurotoxic and myotoxic actions of the venom, causing blockade of the peripheral nervous transmission. The phospholipase A2 neurotoxins are an important component of the venom and induce cell death in cultured hippocampal neurons. Glial cells, astrocytes in particular, exert a profound effect on neuronal development providing trophic support and they are also partners at the synapses. In this work we investigated the effects of Mlx-8 and Mlx-9 phospholipases A2 toxins isolated from the Micrurus lemniscatus venom on the viability of astrocytes. It was evaluated the involvement of the muscarinic cholinergic system and of the TNF-α release in the induction of cell death, using atropine (a non-selective muscarinic antagonist) and BB-1101 (a TACE inhibitor). It was also measured the release of the gliotransmitters glutamate, TNF-α and NO. A possibility of oxidative stress generation was also evaluated by the quantification of some antioxidants enzymes activities (glutathione peroxidase, glutathione reductase and glutathione S-transferase). There was a significant reduction in astrocytes viability after the incubation with both of the toxins, Mlx-8 or Mlx-9, for 24h, in all the concentrations used (1, 10, 100, 1000ng/ml). Both toxins induced an increase in glutamate and TNF-α release, although the increase in the TNF-α release seems not to explain by itself the mechanism of viability reduction in astrocytes culture. Only Mlx-8 toxin increased NO release and glutathione reductase activity. In conclusion, Mlx-8 and Mlx-9 phospholipase A2 neurotoxins isolated from the venom of Micrurus lemniscatus are toxic for astrocytes in culture. Mlx-8 toxin mechanism seems to involve glutamate, TNF-α and NO release, together with DNA fragmentation and glutathione reductase activity elevation. Mlx-9 toxin, at the times investigated, released glutamate and TNFα, but not altered NO or enzymes activities.

As manifestações clínicas predominantes no envenenamento pelo veneno elapídico são relacionadas com suas ações neurotóxicas e miotóxicas, causando bloqueio da transmissão nervosa periférica. As neurotoxinas fosfolipásicas constituem-se em um componente importante do veneno e induzem morte celular em neurônios hipocampais em cultura. Células da glia, em particular os astrócitos, liberam fatores tróficos e transmissores, participando do desenvolvimento neuronal e das sinapses. Neste trabalho foram investigados os efeitos das toxinas fosfolipásicas Mlx-8 e Mlx-9 isoladas do veneno da serpente coral Micrurus lemniscatus sobre a viabilidade dos astrócitos em cultura. A viabilidade celular foi quantificada pelo método do MTT e por citometria de fluxo. Foi estudada a participação da via colinérgica muscarinica e do TNF-α na indução da morte celular, utilizando-se o antagonista atropina e o inibidor da enzima TACE, o BB1101. Foi avaliada também a liberação dos gliotransmisores glutamato, TNF-alfa e oxido nítrico (NO). As atividades das enzimas antioxidantes glutationa peroxidase, glutationa redutase e glutationa transferase foram quantificadas de modo a investigar uma possível indução de estresse oxidativo. Ocorreu uma redução significativa da viabilidade celular quando as células foram tratadas com as toxinas Mlx-8 e Mlx-9 por um período de incubação de 24 horas, em todas as concentrações usadas (1, 10, 100 e 1000ng/ml). Ambas as toxinas induziram um aumento na liberação de TNF-α e de glutamato, embora apenas a liberação do TNF- alfa pareça não explicar a redução da viabilidade celular induzida pelas toxinas. Apenas a toxina Mlx-8 aumentou o óxido nítrico e a atividade da enzima glutationa redutase. Em síntese, a toxina Mlx-8 induziu uma redução da viabilidade celular que parece dever-se à liberação de glutamato, TNF-α e NO, com a ativação da enzima glutationa redutase e aumento da fragmentação do DNA. Já a toxina Mlx-9, nos momentos analisados, reduziu também a viabilidade celular, induziu a liberação de glutamato e TNF-α, mas não do NO.

Intoxicação por carambola em paciente com insuficiência renal crônica: relato de caso / Star fruit intoxication in a chronic renal failure patient: case report

A insuficiência renal crônica é doença de elevada morbidade e mortalidade e sua incidência e prevalência em estágio terminal têm aumentado progressivamente a cada ano. Segundo a Sociedade Brasileira de Nefrologia, as principais causas de insuficiência renal crônica são hipertensão arterial, glomerulonefrite e diabetes mellitus. Diversos fatores elevam o risco de mortalidade em pacientes com nefropatia crônica, principalmente idade, presença de diabetes e número de comorbidades associadas. Para pacientes com menos de 50 anos de idade a taxa de sobrevida em 5 anos é de 62 por cento e para aqueles acima desta idade e com diagnóstico de diabetes mellitus a sobrevida é de apenas 23 por cento. A carambola, fruta originária da Ásia e muito difundida na maioria dos países tropicais, tem sido reportada como contendo uma neurotoxina capaz de provocar graves alterações neurológicas em pacientes com histórico de nefropatia crônica. Dentre estas alterações podemos observar desde quadros leves, como soluços e confusão mental, até quadros mais sérios, como convulsões e morte. Essa neurotoxina parece apresentar especificamente inibição sobre o sistema de condução GABAérgico. Descrevemos o caso de um paciente nefropata crônico que, após ingestão de carambola, inicia quadro de mal-estar, náuseas e vômitos, seguidos de episódios convulsivos reentrantes e vai a óbito mesmo com o tratamento hemodialítico convencional.

Chronic renal failure is a high morbidity and mortality condition, with its terminal phase incidence and prevalence steadily growing year after year. According to the Sociedade Brasileira de Nefrologia [Brazilian Society of Nephrology], the main causes of renal failure are arterial hypertension, glomerulonephritis and diabetes mellitus. Several factors are implied on chronic renal failure patients' risk of mortality, particularly age, diabetes and associated co-morbidities. For patients below 50 years old, the 5 years survival rate is 62 percent and for those above this age and with diabetes mellitus, just 23 percent. Star fruit is native from Asia, and widespread in tropical countries; this fruit was reported as having a neurotoxin able to cause serious neurological changes in chronic renal disease patients. These may range from mild features, such as hiccup and confusion, to serious episodes with seizures and death. This neurotoxin apparently inhibits specifically the GABAergic conduction system. This paper describes a case involving a chronic renal disease patient who, after ingesting star fruit, featured malaise, nausea and vomiting, followed by repeated convulsions and died even though undergoing conventional hemodialysis therapy.

Decreased intelligence in children and exposure to fluoride and arsenic in drinking water

Recent evidence suggests that fluoride (F) and arsenic (As) may adversely affect intelligence quotient (IQ) scores. We explore the association between exposure to F and As in drinking water and intelligence in children. Three rural communities in Mexico with contrasting levels of F and As in drinking water were studied: Moctezuma (F 0.8±1.4mg/L; As 5.8±1.3µg/L); Salitral (F 5.3±0.9mg/L; As 169±0.9µg/L) and 5 de Febrero (F 9.4±0.9mg/L; As 194±1.3µg/L). The final study sample consisted of 132 children from 6 to 10 years old. After controlling for confounders, an inverse association was observed between F in urine and Performance, Verbal, and Full IQ scores (beta values = -13, -15.6, -16.9, respectively). Similar results were observed for F in drinking water (beta values = -6.7, -11.2, -10.2, respectively) and As in drinking water (beta values= -4.30, -6.40, -6.15, respectively). The p-values for all cases were < 0.001. A significant association was observed between As in urine and Full IQ scores (beta = -5.72, p = 0.003). These data suggest that children exposed to either F or As have increased risks of reduced IQ scores.

Estudios recientes sugieren que el flúor (F) y el arsénico (As) pueden tener efectos adversos sobre el coeficiente intelectual (CI). En este estudio exploramos la asociación entre el F y el As y la inteligencia en niños expuestos a estas sustancias a través del agua. Tres comunidades rurales de México con diferentes niveles de F y As fueron estudiadas: Moctezuma (F 0,8±1,4mg/L; As 5,8±1,3µg/L); Salitral (F 5,3±0,9mg/L; As 169±0,9µg/L) y 5 de Febrero (F 9,4±0,9mg/L; As 194±1,3µg/L). La muestra final fue de 132 niños de 6 a 10 años de edad. Después de controlar por confusores, se obtuvieron asociaciones inversas entre F en orina y las puntuaciones de los CI (Desempeño, Verbal y Total) (valores beta = -13, -15,6, -16,9, respectivamente) p < 0,001 en todos los casos. Resultados similares se obtuvieron con F en agua (valores beta = -6,7, -11,2, -10,2, respectivamente) y con As en agua (valores beta = -4,30, -6,40, -6,15, respectivamente). En todos los casos p < 0,001. Para As en orina, se obtuvo una asociación inversa con las puntuaciones del CI total (beta= -5,72; p = 0,003). Estos datos sugieren que los niños expuestos al F o al As tienen mayor riesgo de tener disminución en las puntuaciones del CI.

Revisión de tema: Aspectos toxinológicos y biomédicos del veneno de las abejas Apis mellifera / Toxicological and biomedical aspects of bee venom Apis mellifera

El veneno de abejas incluye compuestos orgánicos de bajo y alto peso molecular. Se encuentran en él péptidos simples como la apamina, polipéptidos como la melitina y enzimas como la fosfolipasa A2 y la hialuronidasa; recientemente se demostró que algunos citratos son también componentes mayores del veneno. La melitina y la fosfolipasa A2 son los componentes principales y más abundantes, cerca del 75 por ciento, en una relación 3:1. La melitina se adhiere a las membranas de los glóbulos rojos, produciendo hemólisis; la fosfolipasa A2, el mayor de los alergenos del veneno, actúa como agente bloqueador que puede provocar parálisis respiratoria. La apamina representa cerca del 2 por ciento del veneno total; es menos tóxica que los compuestos anteriores y se comporta como neurotoxina de acción motora; además de desencadenar un efecto cardioestimulante parecido al de las drogas adrenérgicas, tiene propiedades antiarrítmicas. Un 2 por ciento del veneno lo constituye el péptido MCD (Mast Cell Degranulation) o factor degranulador de los mastocitos, uno de los compuestos responsables de la liberación de histamina y serotonina. Adicionalmente, se han identificado compuestos como fosfatasa ácida, norepinefrina, dopamina e histamina. En esta revisión se exponen aspectos relacionados con la conformación y función del aparato picador, con la composición y acción del veneno, con el comportamiento y los hábitos de las abejas y, finalmente, con las medidas de manejo y tratamiento de sus picaduras; se procuró hacer una mirada comparativa de esos aspectos aplicados a las abejas europeas y a las africanizadas

Bee venom includes organic components of low and high molecular weight such as simple peptides like apamin, polypeptides like mellitin and enzymes like phospholipase A2 and hyaluronidase. It was recently demonstrated that some citrates are also important components of this venom. Mellitin and phospholipase A2 are the main and more abundant components, around 75%, in a ratio of 3:1; mellitin interacts with human red blood cells membranes producing hemolysis; and phospholipase A2, the main allergen of the venom, may act as blocking agent causing respiratory paralysis. Apamin represents about 2% of the total venom; it is less toxic than the aforementioned substances and acts as a motor neurotoxin; it is also responsible for triggering a cardiostimulant effect similar to that of adrenergic drugs; it has antiarrhythmic properties as well. Peptide MCD (Mast Cell Degranulation factor) constitutes 2% of the venom, and it is one of the components responsible for histamine and serotonin release. Additionally, other components have been identified such as acid phosphatase, norepinephrine, dopamine and histamine. This review discusses aspects of the conformation and function of the bee stinging apparatus, of venom composition and action and ofs the behavior and habits of these insects. Finally, handling and treatment of bees bites are discussed. Applied aspects of the European and Africanized bees are compared