Expanding anti-venom strategies: Camelid polyclonal antibodies with high capacity to recognize snake venom.

Camelid immunoglobulins represent a unique facet of antibody biology, challenging conventional understandings of antibody diversification. IgG2 and IgG3 in particular are composed solely of heavy chains and exhibit a reduced molecular weight (90 kDa); their elongated complementarity determining region (CDR) loops play a pivotal role in their functioning, delving deep into enzyme active sites with precision. Serum therapy stands as the primary venom-specific treatment for snakebite envenomation, harnessing purified antibodies available in diverse forms such as whole IgG, monovalent fragment antibody (Fab), or divalent fragment antibody F (ab')2. This investigation looks into the intricacies of IgGs derived from camelid serum previously immunized with crotamine and crotoxin, toxins predominantly in Crotalus durissus venom, exploring their recognition capacity, specificity, and cross-reactivity to snake venoms and its toxins. Initially, IgG purification employed affinity chromatography via protein A and G columns to segregate conventional antibodies (IgG1) from heavy chain antibodies (IgG2 and IgG3) of camelid isotypes sourced from Lama glama serum. Subsequent electrophoretic analysis (SDS-PAGE) revealed distinct bands corresponding to molecular weight profiles of IgG's fractions representing isotypes in Lama glama serum. ELISA cross-reactivity assays demonstrated all three IgG isotypes' ability to recognize the tested venoms. Notably, IgG1 exhibited the lowest interactivity in analyses involving bothropic and crotalic venoms. However, IgG2 and IgG3 displayed notable cross-reactivity, particularly with crotalic venoms and toxins, albeit with exceptions such as PLA2-CB, showing reduced reactivity, and C. atrox, where IgGs exhibited insignificant reactivity. In Western blot assays, IgG2 and IgG3 exhibited recognition of proteins within molecular weight (≈15 kDa) of C. d. collilineatus to C. d. terrificus, with some interaction observed even with bothropic proteins despite lower reactivity. These findings underscore the potential of camelid heavy-chain antibodies, suggesting Lama glama IgGs as prospective candidates for a novel class of serum therapies. However, further investigations are imperative to ascertain their suitability for serum therapy applications.

Accidente ofídico como problema de salud pública serpientes en la ciudad / Ophidian accident as a public health problem snakes in the city

En todo el planeta ocurren mordeduras por serpiente tanto en humanos, como animales; sin embargo, muchos pueblos carecen de recursos para prestar atención sanitaria, administrar suero antiofídico o mantener seguimiento desde lo multidisciplinario al paciente que quedó con secuelas. Objetivo: Establecer alertas tempranas sobre migración o emigración de serpientes hacia la ciudad, respecto al accidente ofídico como problema de salud pública. Materiales y métodos: La investigación es monográfica de tipo documental y muestra pertinencia social. Resultados: Es indispensable abordar tempranamente a la víctima, así como, registrar causas coadyuvantes o desencadenantes del accidente, ya que, dejó de ser exclusivamente rural y se registra en zonas urbanizadas e incluso en la ciudad. El alcance y magnitud de la investigación, sobrepasa lo académico de fortalecer áreas de conocimiento en carreras científicas del pregrado y trasciende a carreras relacionadas, afines y de postgrado, relacionadas indirectamente al problema. Conclusión: Garantizar seguridad del humano y su entorno requiere disposición para la prevención; no obstante, la migración o emigración de ésta biodiversidad revela un problema socio-ambiental, dependiente de entender la gestión académica y alertas tempranas que anuncian que, las serpientes han llegado a la ciudad(AU)

All over the planet snake bites occur in both humans and animals; however, many towns lack the resources to provide health care, administer antivenom serum or maintain multidisciplinary follow-up of the patient with sequelae. Objective: To establish early alerts on the migration or emigration of snakes to the city, regarding the ophidian accident as a public health problem. Materials and methods: The research is monographic documentary type and shows social relevance. Results: It is essential to address the victim early, as well as to record contributing causes or triggers of the accident, since it is no longer exclusively rural and is recorded in urbanized areas and even in the city. The scope and magnitude of the research goes beyond the academic of strengthening areas of knowledge in undergraduate scientific careers and transcends related, related and postgraduate careers, indirectly related to the problem. Conclusion: Ensuring the safety of humans and their environment requires provision for prevention; however, the migration or emigration of this biodiversity reveals a socio-environmental problem, dependent on understanding the academic management and early warnings that announce that the snakes have arrived in the city(AU)

The modulatory effect of crotoxin and its phospholipase A2 subunit from Crotalus durissus terrificus venom on dendritic cells interferes with the generation of effector CD4+ T lymphocytes.

Dendritic Cells (DCs) direct either cellular immune response or tolerance. The crotoxin (CTX) and its CB subunit (phospholipase A2) isolated from Crotalus durissus terrificus rattlesnake venom modulate the DC maturation induced by a TLR4 agonist. Here, we analyzed the potential effect of CTX and CB subunit on the functional ability of DCs to induce anti-ovalbumin (OVA) immune response. Thus, CTX and CB inhibited the maturation of OVA/LPS-stimulated BM-DCs from BALB/c mice, which means inhibition of costimulatory and MHC-II molecule expression and proinflammatory cytokine secretion, accompanied by high expression of ICOSL, PD-L1/2, IL-10 and TGF-ß mRNA expression. The addition of CTX and CB in cultures of BM-DCs incubated with ConA or OVA/LPS inhibited the proliferation of CD3+ or CD4+T cells from OVA-immunized mice. In in vitro experiment of co-cultures of purified CD4+T cells of DO11.10 mice with OVA/LPS-stimulated BM-DCs, the CTX or CB induced lowest percentage of Th1 and Th2 and CTX induced increase of Treg cells. In in vivo, CTX and CB induced lower percentage of CD4+IFNγ+ and CD4+IL-4+ cells, as well as promoted CD4+CD25+IL-10+ population in OVA/LPS-immunized mice. CTX in vivo also inhibited the maturation of DCs. Our findings demonstrate that the modulatory action of CTX and CB on DCs interferes with the generation of adaptive immunity and, therefore contribute for the understanding of the mechanisms involved in the generation of cellular immunity, which can be useful for new therapeutic approaches for immune disorders.

Epidemiological overview of snakebites in the Baja California peninsula, Mexico (2003-2018).

INTRODUCTION: Ophidian accident is a global public health problem. In Mexico, there is a high incidence of snakebites, which cause medical complications that can leave severe sequelae. OBJECTIVE: To analyze the epidemiological overview of snake venom poisoning in the Baja California (BC) peninsula within the 2003-2018 period. METHOD: A descriptive, retrospective analysis of reported cases was carried out, based on data collection and interpretation. RESULTS: A total of 541 records were obtained, out of which 273 occurred in BC and 268 in Baja California Sur (BCS), with an annual average of 17.06 and 16.75, respectively. The incidence rate for BC was 7.62, while for BCS it was 33.09. The highest annual incidence rate in the state of BC corresponded to southern Ensenada, with a value of 42.3, while in BCS it corresponded to the municipality of Comondú, with a value of 54.04. CONCLUSIONS: Epidemiological analyses allow a better local, state and regional understanding of the problem, in order to develop efficient action protocols to face an ophidian accident, as well as to determine the training requirements of medical personnel and establish a support network for the treatment of cases.

INTRODUCCIÓN: El accidente ofídico es un problema de salud pública mundial. En México existe una alta incidencia de mordeduras por serpientes, que provocan complicaciones médicas que pueden dejar secuelas severas. OBJETIVO: Analizar el panorama epidemiológico del ofidismo en la península de Baja California (BC) en los años 2003-2018. MÉTODO: Se hizo un análisis de tipo descriptivo y retrospectivo de los casos presentados, a partir de la recopilación e interpretación de la información. RESULTADOS: Se obtuvieron 541 registros, de los cuales 273 se presentaron en BC y 268 en Baja California Sur (BCS), con un promedio anual de 17.06 y 16.75 respectivamente. La tasa de incidencia para BC fue de 7.62 y para BCS de 33.09. La tasa de incidencia anual más alta en el Estado de BC correspondió al sur de Ensenada, con un valor de 42.3, mientras que en BCS fue en Comondú, con un valor de 54.04. CONCLUSIONES: Los análisis epidemiológicos permiten tener un mejor entendimiento local, estatal y regional de la problemática, para poder desarrollar protocolos de acción eficientes para enfrentar un accidente ofídico, así como para determinar las necesidades de capacitación del personal médico y establecer una red de ayuda para el tratamiento de casos.

The modulatory effect of crotoxin and its phospholipase A2 subunit from Crotalus durissus terrificus venom on dendritic cells interferes with the generation of effector CD4+ T lymphocytes

Dendritic Cells (DCs) direct either cellular immune response or tolerance. The crotoxin (CTX) and its CB subunit (phospholipase A2) isolated from Crotalus durissus terrificus rattlesnake venom modulate the DCs maturation induced by a TLR4 agonist. Here, we analyzed the potential effect of CTX and CB subunit on the functional ability of DCs to induce anti-ovalbumin (OVA) immune response. Thus, CTX and CB inhibited the maturation of OVA/LPS-stimulated BM-DCs from BALB/c mice, which means inhibition of costimulatory and MHC-II molecules expression and proinflammatory cytokines secretion, accompanied by high expression of ICOSL, PD-L1/2, IL-10 and TGF-β mRNA expression. The addition of CTX and CB in cultures of BM-DCs incubated with ConA or OVA/LPS inhibited the proliferation of CD3+ or CD4+T cells from OVA-immunized mice. In in vitro experiment of co-cultures of purified CD4+T cells of DO11.10 mice with OVA/LPS-stimulated BM-DCs, the CTX or CB induced lowest percentage of Th1 and Th2 and CTX induced increase of Treg cells. In in vivo, CTX and CB induced lower percentage of CD4+IFNγ+ and CD4+IL-4+ cells, as well as promoted CD4+CD25+IL-10+ population in OVA/LPS-immunized mice. CTX in vivo also inhibited the maturation of DCs. Our findings demonstrate that the modulatory action of CTX and CB on DCs interferes with the generation of adaptive immunity and, therefore contribute for the understanding of the mechanisms involved in the generation of cellular immunity, which can be useful for new therapeutic approaches for immune disorders.

Propriedade intelectual do soro antiofídico: a efetividade a partir da correlação entre os investimentos do governo federal nos principais institutos responsáveis pela produção do soro e realização de pesquisas para o tratamento de acidentes ofídicos no brasil, com relação ao número de vítimas fatais dos acidentes / Intellectual property of antiophidic serum: the effectiveness from the correlation between federal government investments in the main institutes responsible for the production of serum and conducting researches for the treatment of official accidents in Brazil, with regard to the accident of disease acts

Resumo Introdução O envenenamento por picada de serpentes é um latente problema de saúde pública em nível global. Neste contexto, o Brasil se apresenta como referência mundial no tratamento deste tipo de acidente. É importante destacar que o tratamento de acidentes ofídicos no país foi evidenciado a partir dos estudos do sanitarista Vital Brazil, que patenteou o tratamento e doou para o Estado brasileiro. Mas, qual o impacto este ato gerou para a sociedade, já que a gestão da patente se tornou obrigação do Estado? Objetivo A partir de uma análise da evolução do tratamento do ofidismo, verificar a correlação entre os investimentos do Governo Federal nos principais institutos responsáveis pela produção do soro e realização de pesquisas para o tratamento de acidentes ofídicos no Brasil, com relação ao número de vítimas fatais dos acidentes. Método Realizou-se uma análise de correlação estatística, tendo como base acidentes e óbitos decorrentes dos acidentes ofídicos e os investimentos do governo nos principais institutos produtores de soros antipeçonhentos, no período de 1998 a 2017. Resultados Os resultados mostraram que há uma franca evolução no número de acidentes decorrentes dos acidentes ofídicos no Brasil entre 1998 e 2017. Conclusão Existe correlação positiva entre os investimentos do Governo Federal nos principais institutos responsáveis pela produção do soro e realização de pesquisas para o tratamento de acidentes ofídicos no Brasil, com relação ao número de vítimas fatais dos acidentes.

Abstract Background Snakebite poisoning is a latent global public health problem. In this context, Brazil is a world reference in the treatment of this type of accident. It is important to highlight that the treatment of ophidian accidents in the country was evidenced by the studies of the sanitary veterinarian Vital Brazil, who patented the treatment and donated to the Brazilian state. But what impact did this act have on society since patent management became a state obligation? Objective Based on an analysis of the evolution of the treatment of ophidism, we aimed to verify the correlation between the investments of the Federal Government in the main institutes responsible for the production of serum and researching the treatment of ophidian accidents in Brazil, number of fatal accident victims. Method A statistical correlation analysis was performed based on accidents and deaths resulting from ophidian accidents and government investments in the main institutes producing anti-blind sera from 1998 to 2017. Results The results showed that there is a clear evolution in the number of accidents resulting from ophidian accidents in Brazil. Conclusion there is a positive correlation between the investments of the Brazilian government to control the mortality resulting from these accidents.

A new case of envenomation by neotropical opisthoglyphous snake Philodryas olfersii (Lichtenstein, 1823) in Recife, State of Pernambuco, Brazil

Abstract Human envenomation by the snakes Colubridae and Dipsadidae are reported in Brazil, and envenomation by the Opisthoglyphous snake Philodryas olfersii could be dangerous. Here, we present the second record of an envenomation by Philodryas olfersii in Pernambuco, northeast Brazil. The male victim presented with mild erythema pain, paraesthesia, local numbness, and swollen lymph nodes. The symptoms were similar to those of a pit viper bite, and disappeared completely after 15 days.

Epidemiological and clinical aspects of ophidian bothropic accidents in dogs / Aspectos epidemiológicos e clínicos dos acidentes ofídicos botrópicos em cães

Snakebites are included in the group of emergencies for domestic animals, and these consultations demand technical knowledge as well as careful clinical evaluation of patients. Because of the importance of this theme and the higher prevalence of snakebites caused by snakes of the genus Bothrops in Rio Grande do Sul state, Brazil, this study aimed to address the epidemiological and clinical aspects of these accidents in dogs in the state, in addition to establishing their incidence. Clinical records of dogs, with a diagnosis of ophidian bothropic accident, assisted at the Toxicological Information Center of Rio Grande do Sul (CIT-RS) were revised from 2014 to 2016. These data were collected at the Toxicological Information Center, Statistics and Evaluation Center, State Secretary of Health. Data on the incidence of accidents and epidemiological and clinical information were obtained for each case. A total of 53 records were revised. In the records that included animal sex (n=49), 53% were female and 46.9% were male. As for animal age (n=47), the dogs ranged from one to 14 years, and most of them (46.9%) were in the 1-4-year age group. Over half of the cases occurred in the rural area (60.7%), and the head and neck were the main venom inoculation sites (76.3%). Diseases were characterized by clinical courses varying from hyperacute (<30 min to 6h), acute (6-24h), to subacute (4-5 days). Severe accidents accounted for 40% of the cases, with edema as the most frequent clinical sign (88.7%) followed by hemorrhagic manifestations (41.5%). Associations of epidemiological and clinical aspects coupled with history of exposure are important characteristics to assist with suspicion and definitive diagnosis of bothropic accidents in dogs.(AU)

Os acidentes ofídicos se enquadram no grupo de emergências para animais domésticos e esses atendimentos demandam conhecimento técnico, aliado a uma criteriosa avaliação clínica do paciente. Devido à importância do tema e a maior frequência de acidentes ofídicos provocados por serpentes do gênero Bothrops no Rio Grande do Sul, esse estudo teve como objetivo abordar os aspectos epidemiológicos e clínicos desses acidentes em cães nesse estado, além de estabelecer a frequência em que ocorrem. Foram revisados os protocolos de atendimentos clínicos de cães realizados pelo Centro de Informações Toxicológicas do Rio Grande do Sul (CIT-RS) com diagnóstico de acidente ofídico botrópico, entre o período de 2014 e 2016. Esses dados fazem parte do Centro de informação Toxicológica, Secretaria da Saúde, RS, Núcleo de Estatística e Avaliação. Foram obtidos dados relacionados à frequência dos acidentes e informações referentes à epidemiologia e à clínica de cada caso. Totalizaram-se 53 registros de atendimentos. Dos protocolos que informaram o sexo (n=49), 53% corresponderam a fêmeas e 46,9%, a machos. Em relação à idade (n=47), houve uma variação entre um e 14 anos, com maior concentração dos casos entre 1-4 anos (46,9%). Mais da metade dos atendimentos ocorreu em zona rural (60,7%) e a cabeça e o pescoço foram os principais locais de inoculação do veneno botrópico (76,3%). Observou-se uma doença com um curso que variou de hiperagudo (<30 min à 6h), agudo (6-24h) a subagudo (4-5 dias). Acidentes graves representaram 40% dos casos, no qual edema foi o sinal clínico mais frequente (88,7%), seguido por manifestações hemorrágicas (41,5%). A associação dos aspectos epidemiológicos e clínicos, aliados ao histórico de exposição, constituem características importantes que auxiliam na suspeita e no diagnóstico definitivo do acidente botrópico em animais.(AU)

Epidemiological and clinical aspects of ophidian bothropic accidents in dogs / Aspectos epidemiológicos e clínicos dos acidentes ofídicos botrópicos em cães

Snakebites are included in the group of emergencies for domestic animals, and these consultations demand technical knowledge as well as careful clinical evaluation of patients. Because of the importance of this theme and the higher prevalence of snakebites caused by snakes of the genus Bothrops in Rio Grande do Sul state, Brazil, this study aimed to address the epidemiological and clinical aspects of these accidents in dogs in the state, in addition to establishing their incidence. Clinical records of dogs, with a diagnosis of ophidian bothropic accident, assisted at the Toxicological Information Center of Rio Grande do Sul (CIT-RS) were revised from 2014 to 2016. These data were collected at the Toxicological Information Center, Statistics and Evaluation Center, State Secretary of Health. Data on the incidence of accidents and epidemiological and clinical information were obtained for each case. A total of 53 records were revised. In the records that included animal sex (n=49), 53% were female and 46.9% were male. As for animal age (n=47), the dogs ranged from one to 14 years, and most of them (46.9%) were in the 1-4-year age group. Over half of the cases occurred in the rural area (60.7%), and the head and neck were the main venom inoculation sites (76.3%). Diseases were characterized by clinical courses varying from hyperacute (<30 min to 6h), acute (6-24h), to subacute (4-5 days). Severe accidents accounted for 40% of the cases, with edema as the most frequent clinical sign (88.7%) followed by hemorrhagic manifestations (41.5%). Associations of epidemiological and clinical aspects coupled with history of exposure are important characteristics to assist with suspicion and definitive diagnosis of bothropic accidents in dogs.(AU)

Os acidentes ofídicos se enquadram no grupo de emergências para animais domésticos e esses atendimentos demandam conhecimento técnico, aliado a uma criteriosa avaliação clínica do paciente. Devido à importância do tema e a maior frequência de acidentes ofídicos provocados por serpentes do gênero Bothrops no Rio Grande do Sul, esse estudo teve como objetivo abordar os aspectos epidemiológicos e clínicos desses acidentes em cães nesse estado, além de estabelecer a frequência em que ocorrem. Foram revisados os protocolos de atendimentos clínicos de cães realizados pelo Centro de Informações Toxicológicas do Rio Grande do Sul (CIT-RS) com diagnóstico de acidente ofídico botrópico, entre o período de 2014 e 2016. Esses dados fazem parte do Centro de informação Toxicológica, Secretaria da Saúde, RS, Núcleo de Estatística e Avaliação. Foram obtidos dados relacionados à frequência dos acidentes e informações referentes à epidemiologia e à clínica de cada caso. Totalizaram-se 53 registros de atendimentos. Dos protocolos que informaram o sexo (n=49), 53% corresponderam a fêmeas e 46,9%, a machos. Em relação à idade (n=47), houve uma variação entre um e 14 anos, com maior concentração dos casos entre 1-4 anos (46,9%). Mais da metade dos atendimentos ocorreu em zona rural (60,7%) e a cabeça e o pescoço foram os principais locais de inoculação do veneno botrópico (76,3%). Observou-se uma doença com um curso que variou de hiperagudo (<30 min à 6h), agudo (6-24h) a subagudo (4-5 dias). Acidentes graves representaram 40% dos casos, no qual edema foi o sinal clínico mais frequente (88,7%), seguido por manifestações hemorrágicas (41,5%). A associação dos aspectos epidemiológicos e clínicos, aliados ao histórico de exposição, constituem características importantes que auxiliam na suspeita e no diagnóstico definitivo do acidente botrópico em animais.(AU)

Serologic survey for ophidian paramyxovirus in captive snakes / Inquérito sorológico para paramixovirus ofídico em serpentes cativas

The captivity maintenance of snakes is a challenge for the breeders, especially in diseases control. The most common diseases in serpentarium and private collections are the parasites, gastrointestinal problems and respiratory viruses. The biggest concern is the ophidian paramyxovirosis caused by ophidian paramyxovirus (OPMV), which primarily affects the respiratory system and may also involve the nervous system. Often fatal, it was described in Colubridae, Elapidae, Viperidae, Boidae and Pitonidae. This virus is transmitted by aerosols, respiratory secretions, contaminated utensils, ectoparasites such as ticks and digestive excreta. There is no specific treatment or vaccine available. The diagnostic methods are: virus isolation in cell culture; electron microscopy; immunohistochemical; polymerase chain reaction (PCR); hemagglutination-inhibition (HI) and liquid-phase blocking ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). This study aimed to make a serological survey, by liquid-phase blocking ELISA, searching to the presence of the anti-OPMV antibodies in 42 snakes (36 poisonous and six, not poisonous) maintained in the Center for the Study of Venoms and Venomous Animals (CEVAP) - UNESP. The serum was collected from caudal ventral vein and sent to the Virology Laboratory of the Biosciences Institute of Botucatu - UNESP for evaluation of antibodies titers.

O manejo de serpentes em cativeiro é um desafio permanente para os criadores, principalmente no que tange ao controle de doenças. Parasitoses, problemas gastrointestinais e viroses respiratórias têm sido as principais enfermidades registradas em serpentários e coleções particulares. A maior preocupação é a paramixovirose ofídica, causada pelo Ophidian paramyxovirus (OPMV), que acomete primariamente o sistema respiratório podendo envolver também o nervoso, sendo muitas vezes fatal e que já foi descrita em colubrídeos, elapídeos, viperídeos, boídeos e pitonídeos. O OPMV é transmitido por aerossóis e pelo contato direto com secreções respiratórias, fômites, ectoparasitas tais como os carrapatos e as excretas digestivas. Não há tratamento específico nem vacinas disponíveis para esta virose. Os procedimentos laboratoriais utilizados para o diagnóstico da infecção incluem: isolamento viral em cultivo celular; microscopia eletrônica; imunoistoquímica; reação em cadeia da polimerase (PCR); ou pode-se ainda trabalhar com a quantificação de anticorpos pelo teste de inibição de hemaglutinação (HI) e pelo teste de ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) com bloqueio na fase líquida. O presente estudo empregou a técnica de ELISA com bloqueio de fase líquida para investigar a presença de anticorpos anti-OPMV em 42 serpentes, das quais 36 peçonhentas

Serologic survey for ophidian paramyxovirus in captive snakes / Inquérito sorológico para paramixovirus ofídico em serpentes cativas

The captivity maintenance of snakes is a challenge for the breeders, especially in diseases control. The most common diseases in serpentarium and private collections are the parasites, gastrointestinal problems and respiratory viruses. The biggest concern is the ophidian paramyxovirosis caused by ophidian paramyxovirus (OPMV), which primarily affects the respiratory system and may also involve the nervous system. Often fatal, it was described in Colubridae, Elapidae, Viperidae, Boidae and Pitonidae. This virus is transmitted by aerosols, respiratory secretions, contaminated utensils, ectoparasites such as ticks and digestive excreta. There is no specific treatment or vaccine available. The diagnostic methods are: virus isolation in cell culture; electron microscopy; immunohistochemical; polymerase chain reaction (PCR); hemagglutination-inhibition (HI) and liquid-phase blocking ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). This study aimed to make a serological survey, by liquid-phase blocking ELISA, searching to the presence of the anti-OPMV antibodies in 42 snakes (36 poisonous and six, not poisonous) maintained in the Center for the Study of Venoms and Venomous Animals (CEVAP) - UNESP. The serum was collected from caudal ventral vein and sent to the Virology Laboratory of the Biosciences Institute of Botucatu - UNESP for evaluation of antibodies titers.(AU)

O manejo de serpentes em cativeiro é um desafio permanente para os criadores, principalmente no que tange ao controle de doenças. Parasitoses, problemas gastrointestinais e viroses respiratórias têm sido as principais enfermidades registradas em serpentários e coleções particulares. A maior preocupação é a paramixovirose ofídica, causada pelo Ophidian paramyxovirus (OPMV), que acomete primariamente o sistema respiratório podendo envolver também o nervoso, sendo muitas vezes fatal e que já foi descrita em colubrídeos, elapídeos, viperídeos, boídeos e pitonídeos. O OPMV é transmitido por aerossóis e pelo contato direto com secreções respiratórias, fômites, ectoparasitas tais como os carrapatos e as excretas digestivas. Não há tratamento específico nem vacinas disponíveis para esta virose. Os procedimentos laboratoriais utilizados para o diagnóstico da infecção incluem: isolamento viral em cultivo celular; microscopia eletrônica; imunoistoquímica; reação em cadeia da polimerase (PCR); ou pode-se ainda trabalhar com a quantificação de anticorpos pelo teste de inibição de hemaglutinação (HI) e pelo teste de ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) com bloqueio na fase líquida. O presente estudo empregou a técnica de ELISA com bloqueio de fase líquida para investigar a presença de anticorpos anti-OPMV em 42 serpentes, das quais 36 peçonhentas(AU)

Main plants used in traditional medicine for the treatment of snake bites n the regions of the department of Antioquia, Colombia.

ETHNOPHARMACOLOGY RELEVANCE: In Colombia, more than 4.000 ophidian accidents occur per year and due to the scarce distribution and limited availability of antivenom, the use of traditional medicine has been perpetuated in some of its rural communities, in which initially, those affected are treated by healers and shamans using medicinal plants in different ways. METHODS: Research was conducted with renowned healers or connoisseurs of plants on the ethnobotany of ophidian accidents in five different areas and their municipalities of Antioquia: Magdalena Medio (Caracolí, Puerto Berrío); Bajo Cauca (Caucasia, Zaragoza); Nordeste (San Roque, Yalí); Norte (Gómez Plata, Valdivia); Suroeste (Ciudad Bolívar, Salgar); collecting information related to experience and time of use of plants in the treatment of these poisonings, amounts used, ways of use (beverage, bathing, ointment, chupaderas, vapors), preparation types (maceration or decoction) and treatment duration. RESULTS: 71 plant species were identified and collected, 49.29% of them without previous reports as antiophidian and 38.0% employed for the same purpose in other geographical areas. The leaves (24.82%), stems (11.68%) and flowers (10.95%) were found to be the most frequently employed structures in the preparation of the extracts, which are usually prepared by decoction (83.94%), maceration (6.57%). CONCLUSIONS: In this work, specimens lacking previous ethnobotanical reports have been found, plants used by ethnic groups from other regions of Antioquia and the world to treat snake bites; and herbaceous plants whose inhibitory activity of symptoms produced by some snake venoms, has been experimentally verified by in vivo and in vitro tests.

Clinical-epidemiologic aspects of ophidian accidents occurred in Triângulo Mineiro region, Minas Gerais State, Brazil: retrospective case series / Aspectos clínico-epidemiológicos dos acidentes ofídicos ocorridos na região do Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brasil: estudo retrospectivo

Ophidian accidents constitute a serious problem of public health in the tropical countries. In Central and South America, most of the accidents are caused by Bothrops (90.5%), followed by the Crotalus (7.7%), Lachesis (1.4%) and Micrurus (0.4%) genus. The aim of this work was to evaluate clinical-epidemiological aspects of ophidian accidents reported and treated at the Clinical Hospital at Federal University of Uberlândia, in the central region of Brazil. In this study, 641 medical records from January 1999 to December 2013 were analyzed. The results showed that the accidents were more common in the afternoon, from October to April. The major bite occurrence frequency was attributed to the Bothrops (54.76%), followed by Crotalus (30.58%) and Micrurus (1.40%) snakes. Most of the victims were males (80.34%). The main anatomical regions bitten were the lower and upper limbs, 65.67% and 30.58%, respectively. Approximately 80% of the victims were treated in the first 6 hours after the accident.

Os acidentes ofídicos constituem um sério problema de saúde pública em países tropicais. Nas Américas Central e do Sul, a maioria dos acidentes são causados pelo gênero Bothrops (90,5%), seguido por Crotalus (7,7%), Lachesis (1,4%) e Micrurus (0,4%). O objetivo deste trabalho foi avaliar os aspectos clínico-epidemiológicos dos acidentes ofídicos registrados e tratados no Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia, na região central do Brasil. Neste estudo, foram analisados 641 prontuários médicos de janeiro de 1999 a dezembro de 2013. Os resultados mostraram que os acidentes ofídicos foram mais comuns durante o período da tarde, de outubro a abril. A maior frequência de ocorrência das picadas foi atribuída às serpentes do gênero Bothrops (54,76%), seguido por Crotalus (30,58%) e Micrurus (1,40%). A maioria das vítimas foi do sexo masculino (80.34%). As principais regiões anatômicas acometidas foram os membros inferiores e superiores, 65,67% e 30,58%, respectivamente. Aproximadamente 80% das vítimas foram tratadas nas primeiras 6 horas após o acidente.

Estudo do potencial regulador da crotoxina e suas subunidades isoladas do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre a atividade funcional de células dendríticas / Modulatory potential of crotoxin and its subunits isolated from Crotalus durissus terrificus venom on dendritic cells

Pathogens as well as pathogenic molecules are able to activate or modulate the immune system. The Crotalus durissus terrificus rattlesnake venom, its main toxin, crotoxin (CTX) and the CA (crotapotin) or CB (phospholipase A2) subunits have suppressive effect on the immune system. Dendritic cells (DCs) are potent cells from innate immunity responsible by antigen presentation to T lymphocytes and, thus are directly involved in the generation of the adaptive immune response or tolerance. Therefore, we evaluated the modulatory effect of CTX as well as its subunits on functional activity of DCs in vitro. The CTX, CA and CB were purified, analyzed by SDS-PAGE and the endotoxin (LPS) content removed. The cytometric analysis of CD11c expression by cells showed that the protocol using GM- CSF/IL-4 was more efficient in generating DCs in vitro than GM-CSF. Furthermore, these immature CD11c+ cells expressed Toll like receptors 1, 2, 4 and C-type lectin receptors (DCSIGN and MR). DCs were incubated with CTX, CA, CB with or without LPS for 7 days and then analyzed for the expression of class II MHC (MHC-II), CD40, CD80 e CD86 molecules as well as the secretion of proinflammatory cytokines (IL-1β, IL-12, IL-6, TNF-α). CTX, CA or CB did not induce increased expression of costimulatory and MHC-II molecules by DCs, whereas LPS induced high expression of these molecules on DCs. Furthermore, CTX and CB inhibited the expression of CD40, CD80, CD86 and MHC-II molecules by DCs incubated with LPS. Both CTX and CB inhibited the secretion of proinflammatory cytokines by DC stimulated with LPS. However, CA was not able to inhibit the DC maturation induced by LPS. It was also verified that formyl peptide receptor is involved in this effect of CTX and CB on DC maturation induced by LPS. Analysis of IL-10 secretion and gene expression of TGFβ and IL-10 showed that CTX and, at lower intensity the CB, induced high amounts of these anti-inflammatory cytokines by DCs incubated only with the toxins or with LPS. In addition, it was verified increased secretion of prostaglandin E2 and lipoxin A4 by DCs incubated with CTX and CB and, at lower intensity with CA, in the presence or not of LPS. Proliferation assay of CD3+ lymphocytes co-cultured with DCs previoulsy incubated with CTX or CB with or without LPS showed that CTX and CB inhibited the cellular proliferation induced by LPS. These results demonstrate that CTX and CB subunit, but not CA, exert modulatory effect on functional activity of DCs and suggest the involviment of anti-inflammatory mediators in this process.

Agentes patogênicos, assim como moléculas com potencial patogênico são capazes de ativar/modular o sistema imune. O veneno da cascavel Crotalus durissus terrificus, crotoxina (CTX-principal toxina) e suas subunidades CA (crotapotina) ou CB (fosfolipase A2) apresentam efeito supressor sobre o sistema imune. Células dendríticas (DCs) são potentes células da imunidade inata responsáveis pela apresentação dos antígenos para os linfócitos T e, portanto estão envolvidas diretamente na geração da resposta imune adaptativa ou tolerância imunológica. Portanto, no presente estudo, foi investigado o efeito modulador da CTX, bem como da CA e CB sobre a atividade funcional das DCs in vitro. CTX, CA e CB foram purificadas, analisadas por SDS-PAGE e o conteúdo de endotoxina (LPS) eliminado. DCs imaturas (iDCs) foram diferenciadas a partir da medula óssea de camundongos BALB/c com GM-CSF ou GM-CSF/IL-4 por 7 dias. A análise por citometria de fluxo da expressão de CD11c revelou que o protocolo de utilização do GM-CSF/IL-4 foi mais eficiente em gerar DCs in vitro. Além disso, estas células imaturas (CD11c+ ) expressam receptores do tipo Toll 1, 2, 4 e de lectina tipo C (DC-SIGN e MR). DCs imaturas foram incubadas com CTX, CA ou CB na presença ou não de LPS e analisadas quanto à expressão das moléculas de MHC de classe II (MHC-II), CD40, CD80 e CD86, bem como a secreção de citocinas pró-inflamatórias (IL-1β, IL-12, IL6, TNF-α). A CTX, CA e CB não induziram aumento da expressão das moléculas MHC-II e coestimuladoras nas DCs in vitro, enquanto que o LPS induziu alta expressão dessas moléculas nas DCs. Além disso, CTX e CB inibiram a expressão de CD40, CD80, CD86 e MHC-II em DCs incubadas com LPS, sendo esse efeito mais acentuado com a CTX. Tanto a CTX como CB inibiram a secreção das citocinas pró-inflamatórias pelas DCs estimuladas com LPS. Por outro lado, a subunidade CA não foi capaz de modular a maturação de DCs induzida pelo LPS. Pôde ser observado ainda, que receptor formil peptídeo está envolvido nesse efeito da CTX e CB sobre a maturação das DCs induzida pelo LPS. A análise da secreção IL-10 e expressão gênica de TGF-β e IL-10 pelas DCs incubadas com CTX, CA, CB na presença ou não de LPS mostraram que a CTX e, em menor intensidade, a CB induzem aumento dessas citocinas pelas DCs incubadas somente com as toxinas ou juntamente com LPS. Além disso, foi observada maior produção de prostaglandina E2 e lipoxina A4 pelas DCs incubadas com CTX ou CB, e em menor intensidade com CA, na presença ou não de LPS. O ensaio de proliferação de linfócitos CD3+ cocultivados com DCs previamente incubadas com CTX ou CB na presença ou não de LPS mostrou que a CTX e CB em associação com LPS inibiram a proliferação celular quando comparada à induzida somente pelo LPS. Estes resultados demonstraram que a CTX e CB, mas não CA, exercem efeito modulador sobre a atividade funcional das DCs e sugerem a participação dos mediadores antiinflamatórios nesse processo.

Envenenamento crotálico em cães / Crotalic envenomation in dogs

No Brasil, foram notificados no ano de 2011 30.826 casos de acidentes ofídicos em seres humanos, sendo que destes, 71,9% foram serpentes do gênero Bothrops. Todavia, dados do Serviço de Toxicologia do Hospital João XXIII (Belo Horizonte, MG) reportam que a maior parte dos acidentes por serpentes são decorrentes da espécie Caudisona durissa (Crotalus durissus) (ANDRADE FILHO et al., 2013). Do mesmo modo, no Hospital Veterinário da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), o percentual de atendimentos decorrentes de picadas com serpentes da espécie C. durissa no ano de 2012 até maio de 2013 foi de 90% (foi atendido um total de 10 animais envenenados por serpentes neste período e apenas um animal foi serpente Bothrops). Os diagnósticos caninos foram realizados com base na identificação da serpente, nas manifestações clínicas e achados laboratoriais.(AU)

Envenenamento crotálico em cães / Crotalic envenomation in dogs

No Brasil, foram notificados no ano de 2011 30.826 casos de acidentes ofídicos em seres humanos, sendo que destes, 71,9% foram serpentes do gênero Bothrops. Todavia, dados do Serviço de Toxicologia do Hospital João XXIII (Belo Horizonte, MG) reportam que a maior parte dos acidentes por serpentes são decorrentes da espécie Caudisona durissa (Crotalus durissus) (ANDRADE FILHO et al., 2013). Do mesmo modo, no Hospital Veterinário da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), o percentual de atendimentos decorrentes de picadas com serpentes da espécie C. durissa no ano de 2012 até maio de 2013 foi de 90% (foi atendido um total de 10 animais envenenados por serpentes neste período e apenas um animal foi serpente Bothrops). Os diagnósticos caninos foram realizados com base na identificação da serpente, nas manifestações clínicas e achados laboratoriais.

Absence of ectoparasites in Boa constrictor amarali (Squamata: Boidae) from anthropic environments of the Capivari River Basin, São Paulo state, Brazil / Ausência de ectoparasitas em jibóias (Boa constrictor amarali) (Squamata: Boidae) de ambientes antrópicos da Bacia do Rio Capivari, estado de São Paulo, Brasil

As part of the municipal Epidemiology Surveilance Program of Brazilian Spotted Fever of Monte Morcounty, São Paulo state, 55 free living boas (Boa constrictor amarali) were captured and inspected during a 36 months period, for identificationof their ectoparasiticfauna, after notification of their presence by local citizens whose found the animals at a random basis. The weight of boas ranged from 0.1 to 5.75 kg for the 29 captured males (mean 2.56 kg) and 0.1 to 6.9 kg for the 24 captured females (mean 3.49 kg). The length ranged from 0.5 to 1.95 cm for males and 0.5 to 1.85 cm for females, with averages of 1.47 and 1.45respectively. Nomacroscopic ectoparasite was found on the inspected individuals. Since boas came from disturbed natural areas, it is possible that the animals are profiting from the anthropic environment, occupying an inadequate environment to maintain their natural populations of ectoparasites.

Como parte do programa municipal de Vigilância Zoosanitária e Epidemiológica da Febre Maculosa Brasileira do município de Monte Mor, situado na região metropolitana de Campinas, estado de São Paulo, durante um período de 36 meses, foram inspecionadas 55 jibóias (Boa constrictor amarali) de vida livre, capturadas pelo Serviço de Controle de Zoonoses para a identificação da fauna de ectoparasitas, após a notificação de moradores da cidade que encontravam os animais ao acaso. O peso das jibóias variou de 0,1 a 5,75 kg para os 29 machos (média de 2,56 kg) e de 0,1 a 6,9 kg para as 24 fêmeas (média de 3,49 kg). O comprimento variou de 0,5 a 1,95 cm para os machos e de 0,5 a 1,85 cm para as fêmeas, com médias respectivamente de 1,47 e 1,45 para machos e fêmeas. Em nenhum dos exemplares capturados foi registrada a presença de ectoparasitas macroscópicos. Por serem provenientes de áreas naturais alteradas, é provável que as jibóias estejam se beneficiando do meio antrópico, ocupando locais inadequados para manter as populações naturais de seus ectoparasitas.

Ofidismo: incidencia y complicaciones, estudio realizado en el hospital “Dr. Verdi Cevallos Balda”, de Portoviejo, Provincia Manabí / Ophidian: general aspects and incidences research done at Dr. Verdi Cevallos Balda Hospital in Portoviejo, Province Manabí

Tipo de estudio: Retrospectivo realizado en el hospital provincial Dr. Verdi Cevallos Balda de Portoviejo, desde enero de 1998 a diciembre 2000, se tomó una muestra de 41 pacientes de un universo de 125.Objetivo: Demostrar que en Manabí la incidencia de mordeduras de ofidios es alta comparándola con otros países.Resultados: La especie involucrada en todos los casos fue la X perteneciente al género Bothrops. La incidencia y la tasa de letalidad fue de 0.52 y 7.69 en 1998; 2.01 y 3.85 en el 2000, cifras que son mayores que en Nicaragua y Costa Rica donde la misma especie de serpiente causó accidentes. Se evidenció una disminución en la tasa de letalidad en el último año. Las complicaciones dieron valores semejantes a los presentados en otros países; ocurrió la muerte de 1 paciente (11.11%) después de haberle realizado fasciotomía.Conclusión: Los accidentes fueron causados por serpientes del género Bothrops; la mayoría de personas afectadas trabajan en agricultura.

Type of research: It is a research done at Dr. Verdi Cevallos Balda hospital in Portoviejo, during January 1998 to December 2000. 41 patients were studied out of 125 that were observed.Objective: The objective of this research was to demonstrate that in the province of Manabi the incidence of snake bites is higher in comparison to other countries. Results: the species involved is X with belongs to the Bothrops species. The Incidence and the lethal rate was in 1998 0.52 and 7.69; 2.01 and 3.85 in 2000 these numbers are higher than in countries like Costa Rica and Nicaragua where the same species causes a lot of accidents. The Lethal rate has gone done this past year.