Flushing folicular: uma nova alternativa para melhorar a obtenção de oócitos por aspiração ovariana em bovinos / Follicular flushing: a new alternative to improve oocyte recovery by ovarian aspiration in cattle

A lavagem folicular (flushing) associado à aspiração folicular, ou também chamado deflushing folicular (FF) é uma técnica bastante utilizada para a recuperação de oócitos em mulheres. Em animais, já foi empregado para a aspiração folicular transvaginal em equinose na aspiração de ovários bovinos de abatedouros. A recuperação do maior número possível de oócitos é o propósito desse método, pois corresponde a uma ou mais lavagens do folículo puncionado imediatamente após a aspiração folicular. Este trabalho objetivou comparar ouso do FF associado à aspiração folicular (AF) em ovários bovinos de frigoríficos, quanto às taxas de recuperação de oócitos (TRO) e a morfologia dos oócitos. Na AF utilizou-se agulha 18G acoplada a seringa. No FF foi elaborado um sistema manual no laboratório INVITRO/CEBRAN, utilizando equipo, torneira de 3 vias, agulha, seringa, tubo e bomba de vácuo. Neste trabalho, ocorreu apenas uma lavagem intrafolicular. Os oócitos foram classificados de A (COC) a F (Desnudos), conforme o número de camada de células do cumulus, grau de compactação, coloração e uniformidade do citoplasma. Na taxa de obtenção de oócitos por ovário não houve diferença estatística (FF 11±3,12 vs. AF11,63±3,74; p>0,05); porém existiu diferenças na TRO por folículo aspirado (FF88,13%±16,44 vs. AF 71,50%±14,47; p<0,05) e na taxa de recuperação de oócitos grau A(FF 27%±10,98 vs. AF 12,75%±8,56; p<0,05). Além disso, o FF aumentou o tempo de colheita dos oócitos devido a lavagem extra (p<0,01). Com os dados obtidos pode-se observar que o flushing folicular melhorou a TRO em ovários bovinos, favorecendo maior recuperação de COCs.(AU)

Follicular lavage (flushing) associated with follicular aspiration, or also called follicular flushing (FF) is a technique widely used for the oocyte recovery in women. In animals, it has already been used by transvaginal follicular aspiration in horses and aspiration of bovine ovaries from slaughterhouses. The recovery of the largest possible number of oocytes is the purpose of this method, as it corresponds to one or more washes of the punctured follicle immediately after follicular aspiration. This study aimed to compare the use of FF associated with follicular aspiration (FA) in bovine ovaries from slaughterhouses, in terms of oocyte recovery rates (ORT) and oocyte morphology. In FA, an 18G needle attached to a syringe was used. In the FF a manual system was elaborated in the INVITRO / CEBRAN laboratory, using parenteral infusion equipment, 3-way stopcock, needle, syringe, tube and vacuum pump. In this study, there was only an intra-follicular lavage. Oocytes were classified from A (COC) to F (Denudes), according to the number of cumulus cell layers, degree of compaction, staining and uniformity of the cytoplasm. There was no statistical difference in the oocytes rate obtained by ovary (FF 11±3.12 vs. FA 11.63±3.74; p> 0.05); however, there were differences in ORT per aspirated follicle (FF 88.13%±16.44 vs. FA 71.50%±14.47;p<0.05) and in the recovery rate of grade A oocytes (FF 27%±10.98 vs. AF 12.75%±8.56;p<0.05). In addition, the FF increased the time to harvest the oocytes due to extra washing(p<0.01). With the data obtained, it can be seen that follicular flushing improved ORT in bovine ovaries, favoring greater recovery of COCs.(AU)

Flushing folicular: uma nova alternativa para melhorar a obtenção de oócitos por aspiração ovariana em bovinos / Follicular flushing: a new alternative to improve oocyte recovery by ovarian aspiration in cattle

A lavagem folicular (flushing) associado à aspiração folicular, ou também chamado deflushing folicular (FF) é uma técnica bastante utilizada para a recuperação de oócitos em mulheres. Em animais, já foi empregado para a aspiração folicular transvaginal em equinose na aspiração de ovários bovinos de abatedouros. A recuperação do maior número possível de oócitos é o propósito desse método, pois corresponde a uma ou mais lavagens do folículo puncionado imediatamente após a aspiração folicular. Este trabalho objetivou comparar ouso do FF associado à aspiração folicular (AF) em ovários bovinos de frigoríficos, quanto às taxas de recuperação de oócitos (TRO) e a morfologia dos oócitos. Na AF utilizou-se agulha 18G acoplada a seringa. No FF foi elaborado um sistema manual no laboratório INVITRO/CEBRAN, utilizando equipo, torneira de 3 vias, agulha, seringa, tubo e bomba de vácuo. Neste trabalho, ocorreu apenas uma lavagem intrafolicular. Os oócitos foram classificados de A (COC) a F (Desnudos), conforme o número de camada de células do cumulus, grau de compactação, coloração e uniformidade do citoplasma. Na taxa de obtenção de oócitos por ovário não houve diferença estatística (FF 11±3,12 vs. AF11,63±3,74; p>0,05); porém existiu diferenças na TRO por folículo aspirado (FF88,13%±16,44 vs. AF 71,50%±14,47; p<0,05) e na taxa de recuperação de oócitos grau A(FF 27%±10,98 vs. AF 12,75%±8,56; p<0,05). Além disso, o FF aumentou o tempo de colheita dos oócitos devido a lavagem extra (p<0,01). Com os dados obtidos pode-se observar que o flushing folicular melhorou a TRO em ovários bovinos, favorecendo maior recuperação de COCs.

Follicular lavage (flushing) associated with follicular aspiration, or also called follicular flushing (FF) is a technique widely used for the oocyte recovery in women. In animals, it has already been used by transvaginal follicular aspiration in horses and aspiration of bovine ovaries from slaughterhouses. The recovery of the largest possible number of oocytes is the purpose of this method, as it corresponds to one or more washes of the punctured follicle immediately after follicular aspiration. This study aimed to compare the use of FF associated with follicular aspiration (FA) in bovine ovaries from slaughterhouses, in terms of oocyte recovery rates (ORT) and oocyte morphology. In FA, an 18G needle attached to a syringe was used. In the FF a manual system was elaborated in the INVITRO / CEBRAN laboratory, using parenteral infusion equipment, 3-way stopcock, needle, syringe, tube and vacuum pump. In this study, there was only an intra-follicular lavage. Oocytes were classified from A (COC) to F (Denudes), according to the number of cumulus cell layers, degree of compaction, staining and uniformity of the cytoplasm. There was no statistical difference in the oocytes rate obtained by ovary (FF 11±3.12 vs. FA 11.63±3.74; p> 0.05); however, there were differences in ORT per aspirated follicle (FF 88.13%±16.44 vs. FA 71.50%±14.47;p<0.05) and in the recovery rate of grade A oocytes (FF 27%±10.98 vs. AF 12.75%±8.56;p<0.05). In addition, the FF increased the time to harvest the oocytes due to extra washing(p<0.01). With the data obtained, it can be seen that follicular flushing improved ORT in bovine ovaries, favoring greater recovery of COCs.

Reproductive efficiency of adult and prepubertal goats subjected to repeated follicular aspiration / Eficiência reprodutiva em cabras adultas e pré-púberes após repetidas sessões de aspiração folicular

The objective of this study was to assess the reproductive response of adult and prepubertal goats subjected to repeated laparoscopic ovum pick-up (LOPU). The study animals were divided into two groups, specifically, adult nanny goats (GA, n=10) and prepubertal nanny goats (GP, n=10), which were subjected to estrous synchronization and ovarian stimulation for LOPU. Both groups underwent six LOPU procedures at seven-day intervals and were subsequently subjected to controlled mating and pregnancy diagnosis to evaluate their future fertility. The study showed a reduction in the number of follicles visualized and in the amount and quality of the oocytes that were recovered and exposed to in vitro maturation. As indicated by the fertility test, however, no complications were found during the laparoscopic procedures that would impair the reproductive future of the animals. Therefore, a viable number of oocytes were obtained even with the decreased reproductive efficiency, proving that repeated LOPUs do not interfere with the reproductive of adult and prepubertal nanny goats. These results indicate a positive aspect of this procedure, allowing for increasing reproductive performance of this kind, when used for the production in vitro.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta reprodutiva de cabras adultas e pré-púberes submetidas a repetidas aspirações foliculares por videolaparoscopia (LOPU). Os animais do estudo foram divididos em dois grupos, especificamente cabras adultas (GA, n = 10) e pré-púberes (GP, n = 10), que foram submetidas a sincronização de estro e estimulação ovariana para LOPU. Ambos os grupos foram submetidos a seis procedimentos LOPU em intervalos de sete dias e foram posteriormente submetidos à monta controlada e posterior diagnóstico de gestação para avaliar sua fertilidade. O estudo mostrou uma diminuição do número de folículos visualizados, na quantidade e na qualidade dos oócitos que foram recuperados e expostos à maturação in vitro. Tal como indicado pelo teste de fertilidade, no entanto, não foram observadas grandes complicações durante os procedimentos laparoscópicos que pudessem prejudicar o futuro reprodutivo dos animais. Portanto, foi obtido um número de oócitos viáveis, mesmo com a diminuição da eficiência reprodutiva, provando que repetidas LOPU não interferem na reprodutividade de animais adultos e pré-púberes. Estes resultados indicam um aspecto positivo desse procedimento, possibilitando um aumento da eficiência reprodutiva dessa espécie quando utilizado para a produção in vitro.(AU)

Reproductive efficiency of adult and prepubertal goats subjected to repeated follicular aspiration / Eficiência reprodutiva em cabras adultas e pré-púberes após repetidas sessões de aspiração folicular

The objective of this study was to assess the reproductive response of adult and prepubertal goats subjected to repeated laparoscopic ovum pick-up (LOPU). The study animals were divided into two groups, specifically, adult nanny goats (GA, n=10) and prepubertal nanny goats (GP, n=10), which were subjected to estrous synchronization and ovarian stimulation for LOPU. Both groups underwent six LOPU procedures at seven-day intervals and were subsequently subjected to controlled mating and pregnancy diagnosis to evaluate their future fertility. The study showed a reduction in the number of follicles visualized and in the amount and quality of the oocytes that were recovered and exposed to in vitro maturation. As indicated by the fertility test, however, no complications were found during the laparoscopic procedures that would impair the reproductive future of the animals. Therefore, a viable number of oocytes were obtained even with the decreased reproductive efficiency, proving that repeated LOPUs do not interfere with the reproductive of adult and prepubertal nanny goats. These results indicate a positive aspect of this procedure, allowing for increasing reproductive performance of this kind, when used for the production in vitro.

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta reprodutiva de cabras adultas e pré-púberes submetidas a repetidas aspirações foliculares por videolaparoscopia (LOPU). Os animais do estudo foram divididos em dois grupos, especificamente cabras adultas (GA, n = 10) e pré-púberes (GP, n = 10), que foram submetidas a sincronização de estro e estimulação ovariana para LOPU. Ambos os grupos foram submetidos a seis procedimentos LOPU em intervalos de sete dias e foram posteriormente submetidos à monta controlada e posterior diagnóstico de gestação para avaliar sua fertilidade. O estudo mostrou uma diminuição do número de folículos visualizados, na quantidade e na qualidade dos oócitos que foram recuperados e expostos à maturação in vitro. Tal como indicado pelo teste de fertilidade, no entanto, não foram observadas grandes complicações durante os procedimentos laparoscópicos que pudessem prejudicar o futuro reprodutivo dos animais. Portanto, foi obtido um número de oócitos viáveis, mesmo com a diminuição da eficiência reprodutiva, provando que repetidas LOPU não interferem na reprodutividade de animais adultos e pré-púberes. Estes resultados indicam um aspecto positivo desse procedimento, possibilitando um aumento da eficiência reprodutiva dessa espécie quando utilizado para a produção in vitro.