RESUMO
Abstract Ulcerative colitis is one of the IBDs. Its etiology and pathogenesis remain undefined with an interaction between environmental, genetic and immunological factors is the most accepted explanation. Several recent studies have examined microRNA expression in the peripheral blood and tissues from IBD patients. The study aims at assessing the expression of serum miR-16 in ulcerative colitis patients and its correlation with disease extent, activity and severity. It included 30 treatment naïve ulcerative colitis patients of different presentations. Serum miR-16 expression was assessed using reverse transcriptase quantitative real time PCR (RT-qPCR), and then correlated with that of a group of 20 healthy subjects to assess its role in diagnosis of ulcerative colitis. Also, it was correlated with disease extent (proctitis, left sided colitis, extensive colitis) and disease activity and severity indices (Truelove and Witts criteria, fecal calprotectin and UCEIS). Thirty ulcerative colitis patients were enrolled, 53% had mild, 37% had moderate, while 10% had severe disease. Concerning endoscopic extent, 8 had proctitis, 14 had left sided colitis and 8 had extensive colitis. Serum expression of miR-16 in the 30 patients were compared to that of the healthy control subjects. The patients' group showed median serum miR-16 expression of 1.91, 1.13 for the control group with a significant difference between both groups. Correlation between serum miR-16 expression with disease extent, activity and severity showed no significant relation. From the current study we can conclude that increased serum expression of miR-16 is associated with ulcerative colitis despite no significant relation to disease activity extent or severity.
Resumo A colite ulcerativa é uma das DII. Sua etiologia e patogênese permanecem indefinidas; a interação entre fatores ambientais, genéticos e imunológicos é a explicação mais aceita. Vários estudos recentes avaliaram a expressão de microRNA no sangue e tecidos periféricos em pacientes com DII. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão do miR-16 sérico em pacientes com colite ulcerativa e sua correlação com a extensão, atividade e gravidade da doença. Foram incluídos 30 pacientes de colite ulcerativa, com diferentes apresentações, que ainda não haviam sido submetidos a nenhum tipo de tratamento. A expressão sérica de miR-16 foi avaliada usando transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase quantitativa (RT-qPCR) e, em seguida, correlacionada com a de um grupo de 20 indivíduos saudáveis para avaliar seu papel no diagnóstico de colite ulcerativa. Além disso, foi feita uma correlação com a extensão da doença (proctite, colite do lado esquerdo, colite extensa) e com os índices de atividade e gravidade da doença (critérios de Truelove e Witts, calprotectina fecal e UCEIS). Trinta pacientes com colite ulcerativa foram incluídos no estudo, classificada como leve em 53%, moderada em 37% e grave em 10%. Quanto à extensão endoscópica, oito apresentavam proctite, 14 apresentavam colite do lado esquerdo e oito apresentavam colite extensa. A expressão sérica de miR-16 nos 30 pacientes foi comparada à dos indivíduos controle saudáveis. No, grupo de pacientes, a expressão sérica de miR-16 foi de 1,91 (grupo controle: 1,13), uma diferença estatisticamente significativa entre os dois grupos. Não foi observada relação significativa entre a expressão sérica de miR-16 e a extensão, atividade e gravidade da doença. A partir do presente estudo, pode-se concluir que o aumento da expressão sérica do miR-16 está associado à colite ulcerativa, apesar de não haver relação significativa com a extensão ou gravidade da atividade da doença.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Colite Ulcerativa/genética , Colite Ulcerativa/patologia , MicroRNAs , Doenças Inflamatórias Intestinais , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Transcrição Reversa , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo RealRESUMO
Context Gastric mucosa-associated lymphoid tissue (MALT) lymphoma is clearly associated with Helicobacter pylori gastritis and can be cured with anti- H pylori therapy alone. The presence of t(11;18)(q21;q21) translocation is thought to predict a lower response rate to anti- H pylori treatment. Objectives To study the presence of t(11;18)(q21;q21) genetic translocation and its clinical impact in low-grade gastric MALT lymphoma Brazilian patients. Methods A consecutive series of eight patients with gastric MALT lymphoma were submitted to gastroscopy, endoscopic ultrasound, histopathological examination, H pylori search and RT-PCR-based methodology. All patients received anti-H pylori treatment. Eradicated patients were followed-up every 3-6 months for 2 years. Results Eight patients were studied. All patients had tumor involvement restricted to the mucosa or submucosa and seven patients had low-grade gastric MALT lymphoma. All infected patients achieved H pylori eradication. Histological tumor regression was observed in 5/7 (71%) of the low-grade gastric MALT lymphoma patients. The presence of t(11;18)(q21;q21) translocation was found in 4 (57%) of these patients; among them only two had histological tumor regression following H pylori eradication. Conclusions RT-PCR is a feasible and efficient method to detect t(11;18)(q21;q21) translocation, being carried out in routine molecular biology laboratories. The early detection of such translocation can be very helpful for better targeting the therapy to be applied to gastric MALT lymphoma patients. .
Contexto A patogênese do linfoma MALT (tecido linfoide associado à mucosa) gástrico, também conhecido como linfoma de zona marginal de células B, está claramente associada à gastrite por infecção pelo Helicobacter pylori e, a maioria desses tumores pode ser curada apenas com a erradicação da bactéria. A presença da translocação t(11;18)(q21;q21) tem sido identificada como a anomalia citogenética mais comum do linfoma MALT gástrico e sua presença pode prever uma menor taxa de resposta ao tratamento anti-H pylori. Objetivos Estudo da translocação genética t(11;18)(q21;q21) e seu impacto na evolução clínica de pacientes portadores de linfoma MALT gástrico de baixo grau. Métodos Uma série consecutiva de oito pacientes com linfoma MALT gástrico foi submetida à endoscopia digestiva, ultra-sonografia endoscópica, exame histopatológico, pesquisa do H pylori e metodologia rotineira de transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) utilizando primers específicos para API2-MALT1. Todos os pacientes receberam tratamento anti-H pylori e retratamento, quando necessário. Após a erradicação, exames endoscópicos foram realizados a cada 3-6 meses durante 2 anos para acompanhamento da evolução do tumor. Resultados Foram estudados oito pacientes (seis mulheres, idade média: 57 anos). Todos apresentavam à ecoendoscopia envolvimento tumoral restrito à mucosa ou submucosa com aparência endoscópica variável. A histologia mostrou que sete pacientes tinham linfoma MALT gástrico de baixo grau e um de alto grau. A erradicação do H pylori foi obtida em todos os pacientes, embora a bactéria não tenha sido identificada em um deles. Foi observada regressão histológica ...
Assuntos
Adulto , Idoso , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Helicobacter pylori , Infecções por Helicobacter/complicações , Linfoma de Zona Marginal Tipo Células B/genética , Neoplasias Gástricas/genética , Translocação Genética/genética , /genética , /genética , Infecções por Helicobacter/tratamento farmacológico , Linfoma de Zona Marginal Tipo Células B/microbiologia , Gradação de Tumores , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Neoplasias Gástricas/microbiologiaRESUMO
RT-qPCR é um dos métodos de mensurar expressão gênica mais difundidos e confiáveis utilizados atualmente. Primeiro, realiza-se extração do RNAm de um grupo celular homogêneo para poder realizar a fase RT (transcrição reversa). Neste momento a enzima transcriptase reversa sintetiza o DNAc correspondente de cada fita de RNA. Em seguida inicia-se a qPCR (reação em cadeia da polimerase em tempo real), que recebe esse nome por dar resultados quantitativos (q de qPCR), diferentemente dos qualitativos da PCR convencional. Essa etapa caracteriza-se pela amplificação de um sítio específico no conjunto de DNAc, que ocorre, resumidamente, por meio do uso de uma DNA polimeraseDNA-dependente termoestável (Taq polimerase), dois oligômerosespecíficos para servirem de iniciadores para a polimerase (primers) e um fluoróforo não específico de DNA (SYBR Green I, por exemplo). Conforme as cadeias duplas do DNAc-alvo vãosendo sintetizadas, o fluoróforo se liga a elas e, após ser excitado, emite luz proporcionalmente ao número de cadeias duplas. Através de análise gráfica pode-se quantificar a amostra inicial de DNAc que, na ausência de erros, é proporcional a de RNAm...
RT-qPCR is one of the most widespread and reliable methods of measuring gene expression. First, the extraction ofmRNA from a homogeneous cell group is done in order to perform the RT phase (reverse transcription). At this point the reverse transcriptase enzyme synthesizes cDNA corresponding to eachRNA strand. Then begins the qPCR (real time polymerase chain reaction), which gets its name because it gives quantitative results (q of qPCR), unlike the conventional PCR qualitative results. This stage is characterized by amplification of a specific site in the set of cDNA, which is achieved, briefly, through the use of a DNA-dependent thermostable DNA polymerase (Taq polymerase), two oligomers specific to serve as primers for polymerase and anon-specific DNA fluorophore (SYBR Green I, for example). As the double-strand cDNA is being synthesized, the fluorophore binds to its strands and, after being excited, emits light in proportion to the number of double chains. Through graphical analysis, it is possible to quantify the initial sample of cDNA that, in absence of errors, isproportional to mRNA...
Assuntos
Humanos , DNA , RNA , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Transcrição Reversa/genética , Expressão Gênica , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
O estudo teve por objetivo a detecção e tipagem do vírus dengue, nos vetores Aedes aegypti. Durante o período de dezembro de 2005 a dezembro de 2006, foram coletados 8.984 mosquitos, em 46 bairros da Cidade de Manaus abrangendo todas as zonas geográficas da cidade. Destes, 819 eram Aedes aegypti (414 fêmeas e 405 machos). As fêmeas de Aedes aegypti foram agrupadas em pools de 1 a 10 mosquitos totalizando 138 pools, sendo que 111 pools foram positivos para DENV 3. Porém, um pool mostrou-se positivo para dois sorotipos, DENV 1 e DENV 3. A prevalência de Aedes aegypti infectados com DENV 3, na Cidade de Manaus foi de 53 por cento. Entretanto, a prevalência por zona foi de 70 por cento no Centro-oeste, 60 por cento no Sul, 53 por cento no Oeste, 47 por cento no Centro-Sul, 30 por cento no Norte e 23 por cento na zona Leste. O monitoramento da circulação viral em mosquitos com o uso da técnica da transcrição reversa-reação da polimerase em cadeia que permite o conhecimento prévio dos níveis de disseminação viral em determinadas áreas contribuindo para determinar os locais para aplicar as medidas de prevenção e controle.
The aim of this study was to detect and type dengue viruses in the vector Aedes aegypti. Between December 2005 and December 2006, 8,984 mosquitoes were collected in 46 districts of the city of Manaus, covering all of the geographical zones of the city. Of these, 819 were Aedes aegypti (414 females and 405 males). The females of Aedes aegypti were grouped in pools of 1 to 10 mosquitoes, thus totaling 138 pools, of which 111 pools were positive for DENV 3 and a single pool was positive for two serotypes (DENV 1 and DENV 3). The prevalence of Aedes aegypti infected with DENV 3 in the city of Manaus was 53 percent. The zonal prevalence was 70 percent in the western central zone, 60 percent in the southern zone, 53 percent in the western zone, 47 percent in the southern central zone, 30 percent in the northern zone and 23 percent in the eastern zone. Monitoring of virus circulation among mosquitoes by means of the reverse transcription polymerase chain reaction technique enables prior knowledge of the levels of virus spread in given areas, thus contributing towards determining the localities where prevention and control measures should be applied.
