Prevalence and antibiotic resistance of (Streptococcus equi) from nasal cavity of healthy equines / Prevalência e resistência a antibióticos de (Streptococcus equi) da cavidade nasal de equinos hígidos no município de Fernandopólis, São Paulo, Brasil

Strangles is a disease of the respiratory tract of horses caused by Streptococcus equi. The disease has high morbidity and low lethality, and produces economic losses due to low performance and high cost treatment. This research focused on evaluate antibiotic resistance of Streptococcus equi from the nasal cavity of healthy horses from the region Fernandópolis São Paulo. Fifty (50) mongrel healthy horses, ageing from twelve to twenty four (12-24) months were used. Samples from the nasal cavity of each animal were obtained using sterile swabs and after were cultured on blood agar base plus 5% defibrinated sheep blood. Plates that showed mucous colonies and Beta- hemolytic were tested using Gram stain method, the catalase test, and identified by the system API Rapid ID thirty-two 32 Strep. All isolates were analyzed by plate difusion. Sixty seven of the obtained isolates were Streptococcus equi subspecies equi and zooepidemicus. There was higher prevalence of S. subsp equi zooepidemicus (p < 0.001). Most isolates of S. equi subsp equi were antibiotical multiresistant with significant differences between different antibiotics (p < 0.005), whereas higher susceptibility was observed in isolated S. subsp equi zooepidemicus (p < 0.05). The results showed that both subspecies of Streptococcus equi are part of the normal flora of the nasal cavity of horses, and that they differ in susceptibility to antibiotics.(AU)

A adenite equina, popularmente chamada de garrotilho, é uma enfermidade contagiosa, causada pela bactéria Streptococcus equi. A enfermidade é conhecida por ter alta morbidade e baixa letalidade e seus prejuízos econômicos devem-se à perda de performance e alto custo do tratamento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença e o perfil de resistência a antibióticos de Streptococcus equi da cavidade nasal de equinos hígidos da região de Fernandópolis SP. Foram utilizados 50 equinos hígidos sem raça definida e com idade entre 12 a 24 meses. De cada animal foram colhidas amostras de exsudato da cavidade nasal por meio de swabs esterilizados e em seguida colocados em tubos contendo ágar base acrescido com 5% de sangue ovino desfibrinado. Os isolados que apresentaram colônias mucosas e Beta -hemolíticas foram analisados pela coloração de Gram, submetidos ao teste da catalase, e identificados pelo sistema API Rapid ID 32 Strep. Todos os isolados foram avaliados em difusão em placa. Foram isolados sessenta e sete amostras de Streptococcus equi, das subespécies equi e zooepidemicus. Verificou-se prevalência maior de S. equi subesp zooepidemicus (p < 0,001). A maioria dos isolados de S. equi subespécies equi foram mutirresistentes, havendo diferenças significativas entre os diferentes antibióticos (p < 0,005), enquanto que foi verificada maior susceptibilidade nos isolados S. eqequi subespécies zooepidemicus (p < 0,05). Os resultados obtidos mostraram que ambas as subespécies deStreptococcus equi fazem parte da microbiota normal da cavidade nasal de equinos, e que as mesmas diferemquanto a susceptibilidade aos antibióticos.(AU)

Prevalence and antibiotic resistance of (Streptococcus equi) from nasal cavity of healthy equines / Prevalência e resistência a antibióticos de (Streptococcus equi) da cavidade nasal de equinos hígidos no município de Fernandopólis, São Paulo, Brasil

Strangles is a disease of the respiratory tract of horses caused by Streptococcus equi. The disease has high morbidity and low lethality, and produces economic losses due to low performance and high cost treatment. This research focused on evaluate antibiotic resistance of Streptococcus equi from the nasal cavity of healthy horses from the region Fernandópolis São Paulo. Fifty (50) mongrel healthy horses, ageing from twelve to twenty four (12-24) months were used. Samples from the nasal cavity of each animal were obtained using sterile swabs and after were cultured on blood agar base plus 5% defibrinated sheep blood. Plates that showed mucous colonies and Beta- hemolytic were tested using Gram stain method, the catalase test, and identified by the system API Rapid ID thirty-two 32 Strep. All isolates were analyzed by plate difusion. Sixty seven of the obtained isolates were Streptococcus equi subspecies equi and zooepidemicus. There was higher prevalence of S. subsp equi zooepidemicus (p < 0.001). Most isolates of S. equi subsp equi were antibiotical multiresistant with significant differences between different antibiotics (p < 0.005), whereas higher susceptibility was observed in isolated S. subsp equi zooepidemicus (p < 0.05). The results showed that both subspecies of Streptococcus equi are part of the normal flora of the nasal cavity of horses, and that they differ in susceptibility to antibiotics.

A adenite equina, popularmente chamada de garrotilho, é uma enfermidade contagiosa, causada pela bactéria Streptococcus equi. A enfermidade é conhecida por ter alta morbidade e baixa letalidade e seus prejuízos econômicos devem-se à perda de performance e alto custo do tratamento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença e o perfil de resistência a antibióticos de Streptococcus equi da cavidade nasal de equinos hígidos da região de Fernandópolis SP. Foram utilizados 50 equinos hígidos sem raça definida e com idade entre 12 a 24 meses. De cada animal foram colhidas amostras de exsudato da cavidade nasal por meio de swabs esterilizados e em seguida colocados em tubos contendo ágar base acrescido com 5% de sangue ovino desfibrinado. Os isolados que apresentaram colônias mucosas e Beta -hemolíticas foram analisados pela coloração de Gram, submetidos ao teste da catalase, e identificados pelo sistema API Rapid ID 32 Strep. Todos os isolados foram avaliados em difusão em placa. Foram isolados sessenta e sete amostras de Streptococcus equi, das subespécies equi e zooepidemicus. Verificou-se prevalência maior de S. equi subesp zooepidemicus (p < 0,001). A maioria dos isolados de S. equi subespécies equi foram mutirresistentes, havendo diferenças significativas entre os diferentes antibióticos (p < 0,005), enquanto que foi verificada maior susceptibilidade nos isolados S. eqequi subespécies zooepidemicus (p < 0,05). Os resultados obtidos mostraram que ambas as subespécies deStreptococcus equi fazem parte da microbiota normal da cavidade nasal de equinos, e que as mesmas diferemquanto a susceptibilidade aos antibióticos.

Púrpura Hemorrágica em equino: relato de caso / Hemorrhagic purple in equine: case report / Purpura hemorrágica en equino: relato de caso

Foi atendido no Hospital Veterinário da UENF, um equino da raça Quarto de Milha de 4 anos que apresentava relutância ao caminhar, edema nos membros,ventre, prepúcio, região peitoral e face além, de hemorragias puntiformes na mucosadas narinas e no focinho. Os linfonodos submandibulares estavam infartados. O proprietário relatou sinais clínicos de adenite equina há 10 dias. O histórico associado aos achados clínicos levou a suspeita de púrpura hemorrágica, sendo ela posteriormente confirmada através de exames complementares como hemograma e biópsia de pele. O equino foi tratado com doses medicamentosas inferiores as citadas na literatura e obteve uma recuperação satisfatória.(AU)

Reluctance to walk, swelling in the limbs, abdomen, prepuce, pectoralregion and face, pinpoint hemorrhages in the mucosa of the nose and muzzle andinfarted submandibular Iymph nodes were observed in a four years old quarter horseatlended in the Veterinary Hospital of the UENF. The owner reported clinical signs ofequine adenites 10 days ago which was trated with penicillin. The historic associatedto clinical findings led to suspicion of hemorrhagic purpura. It was confirmed by additional tests such as bloodcount and skin biopsy. The horse was treated with medication doses lower than those reported in the literature and had a satisfactory recovery.(AU)

Fue atendido en el hospital veterinario de Ia UENF, un equino de Ia raza cuarto de mil Ia de 4 anos quepresentaba renuencia a caminar, edema de los miembros, vientre, prepucio, región pectoral, cara y hemorragiaspuntiformes en Ia mucosa de Ias narinas y Ia boca. Los linfonodos submandibulares estaban infartados. En Iahistoria fue relatada adenitis equina desde hace 10 días tratada con penicilina. Esta historia unida aios hallazgos clínicos Ilevaron a sospechar purpura hemorrágica, siendo posteriormente confirmada por exámenes complementarios como hemograma y biopsia de pieI. EI equino fue tratado con dosis medicinales inferiores a Ias citadas en Ia literatura, y fue eficiente para Ia recuperación.(AU)

Púrpura Hemorrágica em equino: relato de caso / Hemorrhagic purple in equine: case report / Purpura hemorrágica en equino: relato de caso

Foi atendido no Hospital Veterinário da UENF, um equino da raça Quarto de Milha de 4 anos que apresentava relutância ao caminhar, edema nos membros,ventre, prepúcio, região peitoral e face além, de hemorragias puntiformes na mucosadas narinas e no focinho. Os linfonodos submandibulares estavam infartados. O proprietário relatou sinais clínicos de adenite equina há 10 dias. O histórico associado aos achados clínicos levou a suspeita de púrpura hemorrágica, sendo ela posteriormente confirmada através de exames complementares como hemograma e biópsia de pele. O equino foi tratado com doses medicamentosas inferiores as citadas na literatura e obteve uma recuperação satisfatória.

Reluctance to walk, swelling in the limbs, abdomen, prepuce, pectoralregion and face, pinpoint hemorrhages in the mucosa of the nose and muzzle andinfarted submandibular Iymph nodes were observed in a four years old quarter horseatlended in the Veterinary Hospital of the UENF. The owner reported clinical signs ofequine adenites 10 days ago which was trated with penicillin. The historic associatedto clinical findings led to suspicion of hemorrhagic purpura. It was confirmed by additional tests such as bloodcount and skin biopsy. The horse was treated with medication doses lower than those reported in the literature and had a satisfactory recovery.

Fue atendido en el hospital veterinario de Ia UENF, un equino de Ia raza cuarto de mil Ia de 4 anos quepresentaba renuencia a caminar, edema de los miembros, vientre, prepucio, región pectoral, cara y hemorragiaspuntiformes en Ia mucosa de Ias narinas y Ia boca. Los linfonodos submandibulares estaban infartados. En Iahistoria fue relatada adenitis equina desde hace 10 días tratada con penicilina. Esta historia unida aios hallazgos clínicos Ilevaron a sospechar purpura hemorrágica, siendo posteriormente confirmada por exámenes complementarios como hemograma y biopsia de pieI. EI equino fue tratado con dosis medicinales inferiores a Ias citadas en Ia literatura, y fue eficiente para Ia recuperación.

Cloning, expression and characterization of SeM protein of Streptococcus equi subsp. equi and evaluation of its use as antigen in an indirect ELISA / Clonagem, expressão e caracterização de proteína SeM de Streptococcus equi subsp. equi e avaliação de sua utilização como antígeno em um ELISA indireto

Strangles is an economically important horse disease caused by Streptococcus equi subsp. equi. The diagnosis can be confirmed either directly by bacterial isolation and PCR or by ELISA, which is an indirect method based on the detection of serum antibodies. The aim of this study was to clone, express and characterize the SeM protein of Streptococcus equi subsp. equi, evaluate its use as antigen in indirect ELISA and determine its performance to distinguish sera of negative, vaccinated and positive animals. This was initially performed by cloning the gene encoding the SeM protein and its expression in Escherichia coli. Subsequently, the protein produced was characterized and used as antigen in ELISA. Serum samples for evaluation were taken from 40 negative foals, 46 horses vaccinated with a commercial vaccine against strangles and 46 horses diagnosed with the disease. The test showed high specificity and sensitivity, allowing discrimination between negative and positive, positive and vaccinated animals, and vaccinated animals and negative sera. Thus, it was concluded that the protein produced rSeM, which can be used as antigen for disease diagnosis, and the described ELISA might be helpful to evaluate the immune status of the herd.(AU)

A adenite equina é uma enfermidade economicamente importante de equinos, causada por Streptococcus equi subsp. equi. Seu diagnóstico pode ser confirmado de forma direta, por meio de isolamento bacteriano e de PCR, ou de forma indireta, por meio de ELISA, método baseado na detecção de anticorpos séricos. O objetivo deste estudo foi clonar, expressar e caracterizar a proteína SeM de Streptococcus equi subsp. equi, avaliar sua utilização como antígeno em um ELISA indireto e determinar a capacidade do teste de distinguir soros de animais negativos, vacinados e positivos. Para tal, foi inicialmente realizada a clonagem do gene que codifica para a proteína SeM e sua expressão em Escherichia coli. Posteriormente, a proteína produzida foi caracterizada e utilizada como antígeno em um teste de ELISA indireto. Para avaliação do teste, foram utilizadas amostras de soro de 40 potros negativos, de 46 equinos vacinados com uma vacina comercial contra adenite equina e de 46 equinos com diagnóstico da doença. O teste demonstrou alta sensibilidade e especificidade, permitindo discriminar entre soros negativos e positivos, positivos e de animais vacinados, e negativos e de animais vacinados. Assim, conclui-se que a proteína rSeM produzida pode ser usada como antígeno para o diagnóstico da enfermidade e que o ELISA descrito pode ser útil para avaliar o estado imunológico do rebanho.(AU)

Cloning, expression and characterization of SeM protein of Streptococcus equi subsp. equi and evaluation of its use as antigen in an indirect ELISA / Clonagem, expressão e caracterização de proteína SeM de Streptococcus equi subsp. equi e avaliação de sua utilização como antígeno em um ELISA indireto

Strangles is an economically important horse disease caused by Streptococcus equi subsp. equi. The diagnosis can be confirmed either directly by bacterial isolation and PCR or by ELISA, which is an indirect method based on the detection of serum antibodies. The aim of this study was to clone, express and characterize the SeM protein of Streptococcus equi subsp. equi, evaluate its use as antigen in indirect ELISA and determine its performance to distinguish sera of negative, vaccinated and positive animals. This was initially performed by cloning the gene encoding the SeM protein and its expression in Escherichia coli. Subsequently, the protein produced was characterized and used as antigen in ELISA. Serum samples for evaluation were taken from 40 negative foals, 46 horses vaccinated with a commercial vaccine against strangles and 46 horses diagnosed with the disease. The test showed high specificity and sensitivity, allowing discrimination between negative and positive, positive and vaccinated animals, and vaccinated animals and negative sera. Thus, it was concluded that the protein produced rSeM, which can be used as antigen for disease diagnosis, and the described ELISA might be helpful to evaluate the immune status of the herd...

A adenite equina é uma enfermidade economicamente importante de equinos, causada por Streptococcus equi subsp. equi. Seu diagnóstico pode ser confirmado de forma direta, por meio de isolamento bacteriano e de PCR, ou de forma indireta, por meio de ELISA, método baseado na detecção de anticorpos séricos. O objetivo deste estudo foi clonar, expressar e caracterizar a proteína SeM de Streptococcus equi subsp. equi, avaliar sua utilização como antígeno em um ELISA indireto e determinar a capacidade do teste de distinguir soros de animais negativos, vacinados e positivos. Para tal, foi inicialmente realizada a clonagem do gene que codifica para a proteína SeM e sua expressão em Escherichia coli. Posteriormente, a proteína produzida foi caracterizada e utilizada como antígeno em um teste de ELISA indireto. Para avaliação do teste, foram utilizadas amostras de soro de 40 potros negativos, de 46 equinos vacinados com uma vacina comercial contra adenite equina e de 46 equinos com diagnóstico da doença. O teste demonstrou alta sensibilidade e especificidade, permitindo discriminar entre soros negativos e positivos, positivos e de animais vacinados, e negativos e de animais vacinados. Assim, conclui-se que a proteína rSeM produzida pode ser usada como antígeno para o diagnóstico da enfermidade e que o ELISA descrito pode ser útil para avaliar o estado imunológico do rebanho...

Immunogenicity and cross reactivity indices of Streptococcus equi subsp. equi strains isolated from cases of Strangles and commercial vaccines / Imunogenicidade e índices de reatividade cruzada de cepas de Streptococcus equi subsp. equi isoladas de casos de Adenite Eqüina e vacinas comerciais

Horse Strangles appears frequently in animals vaccinated with commercial bacterins in Rio Grande do Sul, Brazil. Aiming to know the antigenic relationships of strains recovered from sick animals among them and with two vaccines profusely used in the state, bilateral cross reactivity indices (CRI) were estimated. In addition, the immunogenicity of vaccines prepared with field isolates and commercial vaccines was tested in mice. Antibody titers were measured by ELISA and expressed as seroconversions. Thirteen strains of Streptococcus equi subsp. equi, nine classified biochemically as typical and other four as atypical strains, were recovered from 35 sick horses belonging to 10 herds of Rio Grande do Sul, Brazil. The strains recovered from sick horses showed very close CRI, suggesting antigenic homogeneity among them, but not with the vaccinal strains. A vaccine produced with an atypical strain induced the highest seroconversion, 9.4, while two produced with typical strains were poorly-immunogenic. The commercial vaccines were less immunogenic than five and four vaccines produced with field strains, inducing seroconversions of 2.6 and 3.8, respectively.

A Adenite Eqüina é freqüente em animais vacinados com bacterinas comerciais no Rio Grande do Sul. Com o objetivo de determinar as relações antigênicas entre cepas isoladas de casos clínicos e duas vacinas amplamente utilizadas no Estado, foram determinados os índices de reatividade cruzada bilateral (IRC) entre elas. Também foi determinada a imunogenicidade em camundongos de vacinas preparadas com cepas de campo e de vacinas comerciais. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA e expressos como soroconversão. Foram isoladas 13 cepas de Streptococcus equi subsp. equi de 35 casos clínicos de Adenite Eqüina em 10 diferentes rebanhos do Rio Grande do Sul, Brasil, das quais nove foram classificadas bioquimicamente como típicas e outras quatro como atípicas. As cepas de campo apresentaram elevada reatividade cruzada, sugerindo homogeneidade antigênica entre elas, mas não com as cepas vacinais. Uma vacina produzida com cepa atípica induziu soroconversão de 9.4, enquanto duas vacinas produzidas com cepas típicas foram pouco imunogênicas. As vacinas comerciais induziram soroconversões de 2.6 e 3.8, menores que quatro e cinco vacinas produzidas com cepas de campo, respectivamente.

Immunogenicity and cross reactivity indices of Streptococcus equi subsp. equi strains isolated from cases of Strangles and commercial vaccines

Horse Strangles appears frequently in animals vaccinated with commercial bacterins in Rio Grande do Sul, Brazil. Aiming to know the antigenic relationships of strains recovered from sick animals among them and with two vaccines profusely used in the state, bilateral cross reactivity indices (CRI) were estimated. In addition, the immunogenicity of vaccines prepared with field isolates and commercial vaccines was tested in mice. Antibody titers were measured by ELISA and expressed as seroconversions. Thirteen strains of Streptococcus equi subsp. equi, nine classified biochemically as typical and other four as atypical strains, were recovered from 35 sick horses belonging to 10 herds of Rio Grande do Sul, Brazil. The strains recovered from sick horses showed very close CRI, suggesting antigenic homogeneity among them, but not with the vaccinal strains. A vaccine produced with an atypical strain induced the highest seroconversion, 9.4, while two produced with typical strains were poorly-immunogenic. The commercial vaccines were less immunogenic than five and four vaccines produced with field strains, inducing seroconversions of 2.6 and 3.8, respectively.

A Adenite Eqüina é freqüente em animais vacinados com bacterinas comerciais no Rio Grande do Sul. Com o objetivo de determinar as relações antigênicas entre cepas isoladas de casos clínicos e duas vacinas amplamente utilizadas no Estado, foram determinados os índices de reatividade cruzada bilateral (IRC) entre elas. Também foi determinada a imunogenicidade em camundongos de vacinas preparadas com cepas de campo e de vacinas comerciais. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA e expressos como soroconversão. Foram isoladas 13 cepas de Streptococcus equi subsp. equi de 35 casos clínicos de Adenite Eqüina em 10 diferentes rebanhos do Rio Grande do Sul, Brasil, das quais nove foram classificadas bioquimicamente como típicas e outras quatro como atípicas. As cepas de campo apresentaram elevada reatividade cruzada, sugerindo homogeneidade antigênica entre elas, mas não com as cepas vacinais. Uma vacina produzida com cepa atípica induziu soroconversão de 9.4, enquanto duas vacinas produzidas com cepas típicas foram pouco imunogênicas. As vacinas comerciais induziram soroconversões de 2.6 e 3.8, menores que quatro e cinco vacinas produzidas com cepas de campo, respectivamente.

Immunogenicity and cross reactivity indices of Streptococcus equi subsp. equi strains isolated from cases of Strangles and commercial vaccines

Horse Strangles appears frequently in animals vaccinated with commercial bacterins in Rio Grande do Sul, Brazil. Aiming to know the antigenic relationships of strains recovered from sick animals among them and with two vaccines profusely used in the state, bilateral cross reactivity indices (CRI) were estimated. In addition, the immunogenicity of vaccines prepared with field isolates and commercial vaccines was tested in mice. Antibody titers were measured by ELISA and expressed as seroconversions. Thirteen strains of Streptococcus equi subsp. equi, nine classified biochemically as typical and other four as atypical strains, were recovered from 35 sick horses belonging to 10 herds of Rio Grande do Sul, Brazil. The strains recovered from sick horses showed very close CRI, suggesting antigenic homogeneity among them, but not with the vaccinal strains. A vaccine produced with an atypical strain induced the highest seroconversion, 9.4, while two produced with typical strains were poorly-immunogenic. The commercial vaccines were less immunogenic than five and four vaccines produced with field strains, inducing seroconversions of 2.6 and 3.8, respectively.

A Adenite Eqüina é freqüente em animais vacinados com bacterinas comerciais no Rio Grande do Sul. Com o objetivo de determinar as relações antigênicas entre cepas isoladas de casos clínicos e duas vacinas amplamente utilizadas no Estado, foram determinados os índices de reatividade cruzada bilateral (IRC) entre elas. Também foi determinada a imunogenicidade em camundongos de vacinas preparadas com cepas de campo e de vacinas comerciais. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA e expressos como soroconversão. Foram isoladas 13 cepas de Streptococcus equi subsp. equi de 35 casos clínicos de Adenite Eqüina em 10 diferentes rebanhos do Rio Grande do Sul, Brasil, das quais nove foram classificadas bioquimicamente como típicas e outras quatro como atípicas. As cepas de campo apresentaram elevada reatividade cruzada, sugerindo homogeneidade antigênica entre elas, mas não com as cepas vacinais. Uma vacina produzida com cepa atípica induziu soroconversão de 9.4, enquanto duas vacinas produzidas com cepas típicas foram pouco imunogênicas. As vacinas comerciais induziram soroconversões de 2.6 e 3.8, menores que quatro e cinco vacinas produzidas com cepas de campo, respectivamente.

Immunogenicity and cross reactivity indices of Streptococcus equi subsp. equi strains isolated from cases of Strangles and commercial vaccines

Horse Strangles appears frequently in animals vaccinated with commercial bacterins in Rio Grande do Sul, Brazil. Aiming to know the antigenic relationships of strains recovered from sick animals among them and with two vaccines profusely used in the state, bilateral cross reactivity indices (CRI) were estimated. In addition, the immunogenicity of vaccines prepared with field isolates and commercial vaccines was tested in mice. Antibody titers were measured by ELISA and expressed as seroconversions. Thirteen strains of Streptococcus equi subsp. equi, nine classified biochemically as typical and other four as atypical strains, were recovered from 35 sick horses belonging to 10 herds of Rio Grande do Sul, Brazil. The strains recovered from sick horses showed very close CRI, suggesting antigenic homogeneity among them, but not with the vaccinal strains. A vaccine produced with an atypical strain induced the highest seroconversion, 9.4, while two produced with typical strains were poorly-immunogenic. The commercial vaccines were less immunogenic than five and four vaccines produced with field strains, inducing seroconversions of 2.6 and 3.8, respectively.

A Adenite Eqüina é freqüente em animais vacinados com bacterinas comerciais no Rio Grande do Sul. Com o objetivo de determinar as relações antigênicas entre cepas isoladas de casos clínicos e duas vacinas amplamente utilizadas no Estado, foram determinados os índices de reatividade cruzada bilateral (IRC) entre elas. Também foi determinada a imunogenicidade em camundongos de vacinas preparadas com cepas de campo e de vacinas comerciais. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA e expressos como soroconversão. Foram isoladas 13 cepas de Streptococcus equi subsp. equi de 35 casos clínicos de Adenite Eqüina em 10 diferentes rebanhos do Rio Grande do Sul, Brasil, das quais nove foram classificadas bioquimicamente como típicas e outras quatro como atípicas. As cepas de campo apresentaram elevada reatividade cruzada, sugerindo homogeneidade antigênica entre elas, mas não com as cepas vacinais. Uma vacina produzida com cepa atípica induziu soroconversão de 9.4, enquanto duas vacinas produzidas com cepas típicas foram pouco imunogênicas. As vacinas comerciais induziram soroconversões de 2.6 e 3.8, menores que quatro e cinco vacinas produzidas com cepas de campo, respectivamente.