Physical, laboratory, and microbiological parameters of mammary gland secretions in postpartum does / Parâmetros físicos, laboratoriais e microbiológicos de secreções lácteas de cabras no período pós-parto

Mastitis is a multifactorial disease whose prevalence is affected by the type of pathogenic agent involved, the constitution of the animal, and environmental conditions. This study evaluated the physical and laboratory characteristics of colostrum from dairy goats in the postpartum period, and the physical characteristics of the mammary glands in the same period. Of the 71 mammary glands evaluated, 12 were positive for bacterial isolates and the most frequent pathogenic agents were coagulase-negative staphylococci (CNS) (n = 11). Median somatic cell counts (SCC) in animals positive for bacterial isolates were greater than in animals without bacterial isolates at parturition (696.0 vs. 256.0 x 103 mL –1) and 48 h postpartum (1,350 vs. 437.0 x 103 mL-1). In addition, 34 samples were positive for the California Mastitis Test (CMT; score >1+), indicating a positive relationship between this test and bacterial isolation. Coagulase-negative staphylococci (CNS) were the most prevalent pathogenic agents, resulting in increase in SCC. Postpartum changes in mammary secretions were not good predictors of bacterial mastitis. Physical examination of mammary glands did not reveal significant changes for the diagnosis of mastitis in the postpartum period.(AU)

A mastite é uma doença multifatorial que sofre influência do tipo de patógeno envolvido, constituição dos animais e condições ambientais. Foi realizado estudo com objetivo de avaliar as características físicas e laboratoriais do colostro de cabras no período pós-parto, assim como características físicas das glândulas mamárias no mesmo período. As glândulas mamárias foram submetidas a avaliações físicas que não resultaram em alterações significativas ao longo dos momentos pesquisados. Das 71 metades mamárias analisadas, 12 apresentaram isolamento microbiológico e o agente mais frequente foi Staphylococcus coagulase negativo (n=11). A mediana da contagem de células somáticas (CCS) dos animais positivos à lactocultura foi maior do que daqueles que não tiveram isolamento microbiano nas colheitas realizadas no momento do parto (696 x 10³ mL –1) e após 48h (1.350 x 10³ mL-1). O California Mastitis Test (CMT) mostrou-se positivo (>1+) em 34 amostras analisadas logo após o parto, revelando uma associação entre o referido teste e o isolamento microbiano. O grupo de agentes mais prevalente no período pós-parto foi Staphylococcus coagulase negativo, resultando em aumento na CCS. Alterações nas secreções lácteas vistas nesse período não podem ser consideradas como preditoras de mastites bacterianas. O exame físico das glândulas mamárias não revelou alterações relevantes para o diagnóstico de mastite no referido período.(AU)

Physical, laboratory, and microbiological parameters of mammary gland secretions in postpartum does / Parâmetros físicos, laboratoriais e microbiológicos de secreções lácteas de cabras no período pós-parto

Mastitis is a multifactorial disease whose prevalence is affected by the type of pathogenic agent involved, the constitution of the animal, and environmental conditions. This study evaluated the physical and laboratory characteristics of colostrum from dairy goats in the postpartum period, and the physical characteristics of the mammary glands in the same period. Of the 71 mammary glands evaluated, 12 were positive for bacterial isolates and the most frequent pathogenic agents were coagulase-negative staphylococci (CNS) (n = 11). Median somatic cell counts (SCC) in animals positive for bacterial isolates were greater than in animals without bacterial isolates at parturition (696.0 vs. 256.0 x 103 mL –1) and 48 h postpartum (1,350 vs. 437.0 x 103 mL-1). In addition, 34 samples were positive for the California Mastitis Test (CMT; score >1+), indicating a positive relationship between this test and bacterial isolation. Coagulase-negative staphylococci (CNS) were the most prevalent pathogenic agents, resulting in increase in SCC. Postpartum changes in mammary secretions were not good predictors of bacterial mastitis. Physical examination of mammary glands did not reveal significant changes for the diagnosis of mastitis in the postpartum period.

A mastite é uma doença multifatorial que sofre influência do tipo de patógeno envolvido, constituição dos animais e condições ambientais. Foi realizado estudo com objetivo de avaliar as características físicas e laboratoriais do colostro de cabras no período pós-parto, assim como características físicas das glândulas mamárias no mesmo período. As glândulas mamárias foram submetidas a avaliações físicas que não resultaram em alterações significativas ao longo dos momentos pesquisados. Das 71 metades mamárias analisadas, 12 apresentaram isolamento microbiológico e o agente mais frequente foi Staphylococcus coagulase negativo (n=11). A mediana da contagem de células somáticas (CCS) dos animais positivos à lactocultura foi maior do que daqueles que não tiveram isolamento microbiano nas colheitas realizadas no momento do parto (696 x 10³ mL –1) e após 48h (1.350 x 10³ mL-1). O California Mastitis Test (CMT) mostrou-se positivo (>1+) em 34 amostras analisadas logo após o parto, revelando uma associação entre o referido teste e o isolamento microbiano. O grupo de agentes mais prevalente no período pós-parto foi Staphylococcus coagulase negativo, resultando em aumento na CCS. Alterações nas secreções lácteas vistas nesse período não podem ser consideradas como preditoras de mastites bacterianas. O exame físico das glândulas mamárias não revelou alterações relevantes para o diagnóstico de mastite no referido período.

Uso de PCR e sequenciamento do rDNA 16S para identificação de bactérias do gênero Staphylococcus isoladas de mastite bovina / Identification of Staphylococcus strains isolated from bovine mastitis by PCR and 16S rDNA sequencing

O objetivo deste trabalho foi identificar espécies de Staphylococcus (n=100) isoladas de mastite em rebanhos bovinos do Estado de Minas Gerais. Para esta finalidade foram utilizadas reações de PCR empregando oligonucleotídeos iniciadores descritos anteriormente para amplificar genes específicos de S. aureus (femA), S. intermedius (rDNA 16S) e S. hyicus (rDNA 16S-23S) e o sequenciamento do rDNA 16S. De acordo com as reações de PCR, 83 isolados foram identificados como S. aureus, 13 isolados como S. intermedius, dois como S. hyicus e dois isolados não foram identificados. Foram submetidos ao sequenciamento do rDNA 16S seis isolados identificados como S. aureus e os 17 restantes. Os seis isolados identificados como S. aureus confirmaram essa identificação. Dos outros 17 isolados, 13 foram identificados como S. chromogenes e quatro como S. hyicus, com similaridade igual ou superior a 99%. Baseando-se nos resultados da reação de PCR do gene femA e do sequenciamento do rDNA 16S, foram identificados 83 S. aureus, 13 S. chromogenes e quatro S. hyicus. Neste estudo os oligonucleotídeos iniciadores empregados na reação de PCR para S. intermedius não foram específicos, pois amplificaram também S. chromogenes; e os empregados na reação de PCR para S. hyicus não foram sensíveis, pois falharam na identificação de dois isolados de S. hyicus. A identificação definitiva das duas últimas espécies somente foi possível pelo sequenciamento do rDNA 16S.(AU)

The objective of this study was to identify the species of 100 isolates of Staphylococcus from mastitis in dairy cows from herds located in the state of Minas Gerais, Brazil. PCR reactions were carried out using specific primers described previously for S. aureus (femA gene), S. intermedius (16S rDNA) and S. hyicus (16S-23S rDNA spacer region). In addition, products of amplification of variable regions of the 16S rDNA gene of the strains were sequenced. According to the results of the PCR, 83 strains were identified as S. aureus, 13 as S. intermedius, two as S. hyicus and two isolates were not identified. The sequencing of 16S rDNA was applied to 23 strains identified by PCR amplifications: six S. aureus and the strains identified as S. intermedius (n=13), S. hyicus (n=2) or not identified (n=2). The sequencing of 16S rDNA confirmed the six strains as S. aureus. The others 17 strains were identified as S. chromogenes (13 isolates) and S. hyicus (four isolates). Each sample was related to a specie according to the smallest E-value and highest similarity (≥ 99%). The identification of S. hyicus and S. chromogenes was accomplished only by 16S rDNA sequencing.(AU)

Uso de PCR e sequenciamento do rDNA 16S para identificação de bactérias do gênero staphylococcus isoladas de mastite bovina / Identification of staphylococcus strains isolated from bovine mastitis by PCR and 16S rDNA sequencing

O objetivo deste trabalho foi identificar espécies de Staphylococcus (n=100) isoladas de mastite em rebanhos bovinos do Estado de Minas Gerais. Para esta finalidade foram utilizadas reações de PCR empregando oligonucleotídeos iniciadores descritos anteriormente para amplificar genes específicos de S. aureus (femA), S. intermedius (rDNA 16S) e S. hyicus (rDNA 16S-23S) e o sequenciamento do rDNA 16S. De acordo com as reações de PCR, 83 isolados foram identificados como S. aureus, 13 isolados como S. intermedius, dois como S. hyicus e dois isolados não foram identificados. Foram submetidos ao sequenciamento do rDNA 16S seis isolados identificados como S. aureus e os 17 restantes. Os seis isolados identificados como S. aureus confirmaram essa identificação. Dos outros 17 isolados, 13 foram identificados como S. chromogenes e quatro como S. hyicus, com similaridade igual ou superior a 99%. Baseando-se nos resultados da reação de PCR do gene femA e do sequenciamento do rDNA 16S, foram identificados 83 S. aureus, 13 S. chromogenes e quatro S. hyicus. Neste estudo os oligonucleotídeos iniciadores empregados na reação de PCR para S. intermedius não foram específicos, pois amplificaram também S. chromogenes; e os empregados na reação de PCR para S. hyicus não foram sensíveis, pois falharam na identificação de dois isolados de S. hyicus. A identificação definitiva das duas últimas espécies somente foi possível pelo sequenciamento do rDNA 16S.

The objective of this study was to identify the species of 100 isolates of Staphylococcus from mastitis in dairy cows from herds located in the state of Minas Gerais, Brazil. PCR reactions were carried out using specific primers described previously for S. aureus (femA gene), S. intermedius (16S rDNA) and S. hyicus (16S-23S rDNA spacer region). In addition, products of amplification of variable regions of the 16S rDNA gene of the strains were sequenced. According to the results of the PCR, 83 strains were identified as S. aureus, 13 as S. intermedius, two as S. hyicus and two isolates were not identified. The sequencing of 16S rDNA was applied to 23 strains identified by PCR amplifications: six S. aureus and the strains identified as S. intermedius (n=13), S. hyicus (n=2) or not identified (n=2). The sequencing of 16S rDNA confirmed the six strains as S. aureus. The others 17 strains were identified as S. chromogenes (13 isolates) and S. hyicus (four isolates). Each sample was related to a specie according to the smallest E-value and highest similarity (≥ 99%). The identification of S. hyicus and S. chromogenes was accomplished only by 16S rDNA sequencing.