The waveless model: clinical and research applications of follicular wave suppression in cattle / Modelo waveless: aplicações clínicas e na pesquisa da supressão das ondas foliculares em bovinos

The follicular growth waves are directly linked to the fluctuations in plasma gonadotrophins, which are controlled by the hypothalamic GnRH release pattern. Therefore, if the actions of the GnRH are inhibited or blocked, the final stages of the antral follicle growth are suppressed, resulting in an induced anestrus (a.k.a. waveless model). In the human medicine, GnRH agonists or antagonists are broadly used in the control of ovarian disfunctions, as well as in the preparation of women for assisted reproductive cycles. In cattle, a similar effect can be obtained by active immunization against GnRH. This was shown to be a viable strategy, for example, for the control of chronic cases of cystic ovarian disease in oocyte donors. However, on shall take into account the substantial individual variation on the immune response and, consequently, the lack of control of the duration of the anestrus induced. The waveless model is also very useful as a research model, once it controls the potential interference of the endogenous FSH and LH, improving the sensitivity of essays with exogenous hormones and consequently reducing the required number of replicas within studies.(AU)

O padrão de crescimento folicular em ondas está diretamente associado às flutuações nas concentrações plasmáticas de gonadotrofinas, controladas por sua vez pelo padrão de liberação de GnRH hipotalâmico. Desta forma, a inibição ou bloqueio da ação do GnRH suprime as etapas finais do crescimento folicular, resultando em anestro induzido (também chamado modelo waveless). Na medicina humana, agonistas ou antagonistas de GnRH são utilizados tanto no controle de disfunções ovarianas quanto na preparação de pacientes para procedimentos de reprodução assistida. Em bovinos, este efeito pode ser obtido pela imunização ativa contra GnRH, e mostrou-se estratégia viável, por exemplo, no controle de casos crônicos de doença ovariana cística em doadoras de oócitos. Contudo, é importante considerar a grande variação individual na resposta à imunização e consequente impossibilidade de controlar a duração do anestro induzido. O modelo waveless também é de grande utilidade na pesquisa, uma vez que elimina a potencial interferência do FSH e LH endógenos, aumentando a sensibilidade nos ensaios com hormônios exógenos e consequentemente reduzindo o número de réplicas necessárias nos estudos.(AU)

Níveis de progesterona e os parâmetros reprodutivos no período periovulatório de vacas Nelore submetidas ao protocolo de IATF / Progesterone levels and reproductive parameters in the periovulatory period of Nellore cows under FTAI protocol

Background: Fixed Time Artificial Insemination (FTAI) has achieved a significant evolution in the last 18 years, however, despite the progress achieved by modern FTAI programs, the conception rates obtained are still low. Therefore, this study aimed to evaluate the interrelation between progesterone levels in the periovulatory period and reproductive parameters of Nellore cows submitted to an FTAI protocol. Materials, Methods & Results: On a random day, called day 0 (D0), 57 cows received a P4 device associated with the intramuscular (IM) application of 2.0 mg of estradiol benzoate. On D9, the P4 devices were removed and then were administered 500 µg of cloprostenol sodium IM; 0.6 mg of estradiol cypionate IM and 300 IUI of Equine Chorionic Gonadotrophin IM. Blood samples were collected for the determination of serum P4 concentrations on D9 and D11 of the protocol. The evaluations of follicular diameter (DFOL), follicular wall area (AFOL) and the vascularization area of the follicle wall (VFOL) were carried out on D11 using B-mode ultrasonography examination and colour Doppler, and then the artificial inseminations were performed. The evaluation of the corpus luteum diameter (CLD), of the total corpus luteum area (CLA), of the area of corpus luteum vascularization (CLV) and blood sampling for determination of postovulatory P4 levels (Post-P4) were performed on D24. For the analysis of the P4 concentration the chemiluminescence method was used, with a sensitivity of 0.1 ng/mL. According to the P4 concentrations on D11, cows were divided into 2 groups, LOW LEVELS OF P4 and HIGH LEVELS OF P4. The diagnosis of pregnancy was performed using transrectal ultrasonography on D45, at this point the cows were divided into 2 groups, PREGNANT and NON-PREGNANT. The correlation between DFOL and P4 dosage on D11 was moderate, negative and significant and between the AFOL and the serum P4 levels on D9, was moderate, negative and significant. As for the other correlations between follicular and luteal parameters and serum P4 levels, these were low to moderate, negative and not significant. Cows in the LOW LEVELS OF P4 group had significantly larger diameter and follicular areas than the cows in the HIGH LEVELS OF P4 group, the other follicular and luteal parameters showed no statistical difference. Of the total 57 cows that were inseminated, 30 cows became pregnant. Cows in the PREGNANT group had serum P4 levels on D9 equivalent to that obtained by the NON-PREGNANT group. However, at D11 the cows that became pregnant presented significantly lower serum P4 levels than cows that did not become pregnant. Discussion: The results of the interrelation between follicular parameters and P4 levels obtained in the present study, pointed out that the lower the levels of P4, the higher the follicular parameters, corroborating with other authors. Thus, larger preovulatory follicles provided high ovulation rates. Periovulatory serum P4 levels did not significantly affect the morphofunctional parameters of the CL. Such findings may be justified by high periovulatory P4 levels resulting from less efficient luteolysis, exert a negative effect on the results of FTAI protocols, because progesterone inhibits the release of LH pulses. It is concluded that lower periovulatory P4 levels established a favourable condition for follicular development and fertility, however, morphofunctional parameters of the corpus luteum were not affected.

DNA damage and primordial follicle activation after in vitro culture of sheep ovarian cortex in Morus nigra leaf extract / Dano ao DNA e ativação do folículo primordial após a cultivo in vitro do córtex ovariano de ovelha em extrato de folha de Morus nigra

This study evaluated the effect of Morus nigra leaf extract, with or without supplementation, on morphology, activation and DNA damage of preantral follicles cultured within sheep ovarian tissue. Ovaries were collected and divided into fragments, being one fixed for histological and Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) analysis (fresh control). The remaining fragments were cultured for 7 days in alpha minimum essential media (α-MEM) supplemented with bovine serum albumin (BSA), insulin, transferrin, selenium, glutamine, hypoxanthine and ascorbic acid (α-MEM+; control medium) or into medium composed of M. nigra extract without supplements (0.1; 0.2 or 0.4mg/mL) or supplemented with the same substances described above for α-MEM+ (MN 0.1+; 0.2+ or 0.4+mg/mL). Then, tissues were destined to histological and TUNEL analysis. The α-MEM+ treatment had more morphologically normal follicles than all M. nigra extract treatments. However, α-MEM+ treatment also showed signs of atresia because the percentage of TUNEL positive cells was similar in α-MEM+ and in 0.1mg/mL M. nigra without and with supplements. Moreover, a reduction in the primordial follicles and an increase in the growing ones were observed in all treatments, except 0.2mg/mL M. nigra. In conclusion, the follicles cultured at 0.1mg/mL M. nigra extract were in good condition and able to continue their development, as demonstrated by the same rates of DNA damage and follicular activation as the control medium.(AU)

Este estudo avaliou o efeito do extrato das folhas de Morus nigra, com ou sem suplementos, sobre a morfologia, a ativação e o dano ao DNA de folículos pré-antrais cultivados inclusos em tecido ovariano. Os ovários foram coletados e divididos em fragmentos, sendo um fixado para análise histológica e ensaio de marcação de terminações dUTP mediada por desoxinucleotidil transferase terminal (TUNEL) (controle fresco). Os fragmentos restantes foram cultivados durante 7 dias em meio essencial mínimo alfa (α-MEM) suplementado com albumina sérica bovina (BSA), insulina, transferrina, selênio, glutamina, hipoxantina e ácido ascorbico (α-MEM+; meio controle) ou em meio composto de extrato de M. nigra sem suplementos (0,1; 0,2 or 0,4mg/mL) ou suplementado com as mesmas substâncias descritas para α-MEM+ (MN 0,1+; 0,2+ or 0,4+mg/mL). Então, os tecidos foram destinados à análise histológica e TUNEL. O tratamento do α-MEM+ apresentou mais folículos morfologicamente normais que todos os tratamentos do extrato de M. nigra. No entanto, o tratamento com α-MEM+ também mostrou sinais de atresia, pois a porcentagem de células TUNEL positivas foi semelhante em α-MEM+ e em 0,1mg/mL M. nigra sem e com suplementos. Além disso, observou-se uma redução nos folículos primordiais e um aumento nos folículos em crescimento em todos os tratamentos, exceto 0,2mg/mL M. nigra. Em conclusão, os folículos cultivados com 0,1mg/mL de extrato de M. nigra estavam em boas condições e aptos a continuar seu desenvolvimento, como demonstrado pelas taxas de dano ao DNA e de ativação folicular semelhantes ao meio controle.(AU)

DNA damage and primordial follicle activation after in vitro culture of sheep ovarian cortex in Morus nigra leaf extract / Dano ao DNA e ativação do folículo primordial após a cultivo in vitro do córtex ovariano de ovelha em extrato de folha de Morus nigra

This study evaluated the effect of Morus nigra leaf extract, with or without supplementation, on morphology, activation and DNA damage of preantral follicles cultured within sheep ovarian tissue. Ovaries were collected and divided into fragments, being one fixed for histological and Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) analysis (fresh control). The remaining fragments were cultured for 7 days in alpha minimum essential media (α-MEM) supplemented with bovine serum albumin (BSA), insulin, transferrin, selenium, glutamine, hypoxanthine and ascorbic acid (α-MEM+; control medium) or into medium composed of M. nigra extract without supplements (0.1; 0.2 or 0.4mg/mL) or supplemented with the same substances described above for α-MEM+ (MN 0.1+; 0.2+ or 0.4+mg/mL). Then, tissues were destined to histological and TUNEL analysis. The α-MEM+ treatment had more morphologically normal follicles than all M. nigra extract treatments. However, α-MEM+ treatment also showed signs of atresia because the percentage of TUNEL positive cells was similar in α-MEM+ and in 0.1mg/mL M. nigra without and with supplements. Moreover, a reduction in the primordial follicles and an increase in the growing ones were observed in all treatments, except 0.2mg/mL M. nigra. In conclusion, the follicles cultured at 0.1mg/mL M. nigra extract were in good condition and able to continue their development, as demonstrated by the same rates of DNA damage and follicular activation as the control medium.(AU)

Este estudo avaliou o efeito do extrato das folhas de Morus nigra, com ou sem suplementos, sobre a morfologia, a ativação e o dano ao DNA de folículos pré-antrais cultivados inclusos em tecido ovariano. Os ovários foram coletados e divididos em fragmentos, sendo um fixado para análise histológica e ensaio de marcação de terminações dUTP mediada por desoxinucleotidil transferase terminal (TUNEL) (controle fresco). Os fragmentos restantes foram cultivados durante 7 dias em meio essencial mínimo alfa (α-MEM) suplementado com albumina sérica bovina (BSA), insulina, transferrina, selênio, glutamina, hipoxantina e ácido ascorbico (α-MEM+; meio controle) ou em meio composto de extrato de M. nigra sem suplementos (0,1; 0,2 or 0,4mg/mL) ou suplementado com as mesmas substâncias descritas para α-MEM+ (MN 0,1+; 0,2+ or 0,4+mg/mL). Então, os tecidos foram destinados à análise histológica e TUNEL. O tratamento do α-MEM+ apresentou mais folículos morfologicamente normais que todos os tratamentos do extrato de M. nigra. No entanto, o tratamento com α-MEM+ também mostrou sinais de atresia, pois a porcentagem de células TUNEL positivas foi semelhante em α-MEM+ e em 0,1mg/mL M. nigra sem e com suplementos. Além disso, observou-se uma redução nos folículos primordiais e um aumento nos folículos em crescimento em todos os tratamentos, exceto 0,2mg/mL M. nigra. Em conclusão, os folículos cultivados com 0,1mg/mL de extrato de M. nigra estavam em boas condições e aptos a continuar seu desenvolvimento, como demonstrado pelas taxas de dano ao DNA e de ativação folicular semelhantes ao meio controle.(AU)

Estrous behavior, ovulatory follicle dynamics, and corpus luteum size in Creole cows after spontaneous or prostaglandin F2α-induced estrous / Comportamiento estral, dinámica folicular ovulatoria y tamaño del cuerpo lúteo en vacas Criollas después del estro natural o inducido con prostaglandina F2α / Comportamento estral, dinâmica folicular ovulatória e tamanho do corpo lúteo em vacas Crioulas após o estro espontâneo ou induzido com prostaglandina F2α

Background: evaluation of reproductive behavior in Creole cows is important to determine several parameters, such as fertility, that show the physiologic reproductive mechanisms under different conditions. Therefore, the sequence of events such as ovulation and the subsequent formation of a corpus luteum need to be considered to establish genetic improvement programs under synchronized or naturally-occurring estrous conditions. Objective: to evaluate the ovarian and behavioral estrous characteristics before, during and after prostaglandin F2α-induced or naturally occurring estrous in Creole cows. Methods: thirty Creole cows were subjected to estrous synchronization with PGF2α and observed continuously over five days to determine estrous onset and duration. Seventeen days after synchronized estrous detection, cows were observed during seven d to detect the naturally-occurring estrous and its duration. After the onset of both types of estrous the ovaries of each cow were ultrasounded every 8 h to determine diameter of the preovulatory follicle at deviation and its maximum diameter prior to ovulation, as well as its growth rate, time to ovulation and maximum diameter of the later corpus luteum. Results: time of appearance and duration of synchronized and spontaneous estrous were similar (p>0.1). Diameters of the dominant follicle at deviation and prior to ovulation were similar in both types of estrous. Nevertheless, growth rate (mm/d) of the preovulatory follicle was higher (p<0.05) in synchronized estrous. However, time from onset of synchronized estrous to ovulation was longer (p<0.01). Diameter of corpus luteum 10 d after ovulation was similar in both types of estrous. Results indicate that growth rate of follicle and time from synchronized or spontaneous estrous to ovulation must be considered for estrous cycle manipulation and artificial insemination of Creole cows. Conclusion: a higher proportion of Creole cows show heat during nighttime, growth rate of ovulatory follicle is higher during synchronized estrous, and time from onset of synchronized estrous to ovulation is longer, when compared with spontaneous estrous.

Antecedentes: la evaluación del comportamiento reproductivo en vacas Criollas es importante para determinar varios parámetros como la fertilidad, que muestren los mecanismos fisiológicos de la reproducción bajo diferentes condiciones. Así, la secuencia de eventos como ovulación y la subsiguiente formación de cuerpo lúteo se deben considerar al implementar programas de mejoramiento genético bajo condiciones del estro sincronizado o natural. Objetivo: evaluar las características ováricas y conductuales de vacas Criollas antes, durante y después del estro inducido con prostaglandina F2α (PGF2α) o del estro natural. Métodos: treinta vacas Criollas fueron sometidas a sincronización del estro con PGF2α y observadas continuamente durante cinco días para detectar el inicio y la duración del estro. Diecisiete días después del período de detección del estro sincronizado las vacas fueron observadas durante siete días para detectar el estro natural y su duración. Después del inicio de ambos estros, los ovarios de cada vaca fueron monitoreados mediante ultrasonografía cada 8 h para determinar el diámetro del folículo preovulatorio al momento de la desviación y su máximo diámetro alcanzado antes de la ovulación, así como su tasa de crecimiento, tiempo a la ovulación y diámetro máximo del cuerpo lúteo posteriormente formado. Resultados: el momento de inicio y la duración del estro sincronizado y natural fueron similares (p>0,1). El diámetro del folículo dominante al momento de la desviación y antes de la ovulación fueron similares en los dos tipos de estro, pero la tasa de crecimiento del folículo preovulatorio (mm/d) fue mayor (p<0,05) en el estro sincronizado. No obstante, el tiempo del inicio del estro sincronizado a la ovulación fue mayor (p<0,01). El diámetro del cuerpo lúteo 10 d después de la ovulación fue similar en ambos estros. Los resultados indican que la tasa de crecimiento del folículo y el tiempo del estro -sincronizado o natural- a la ovulación deben considerarse cuando se requiere manipular el ciclo estral para inseminación artificial. Conclusión: una mayor proporción de vacas Criollas mostraron estro durante la noche, la tasa de crecimiento del folículo ovulatorio es mayor durante el estro sincronizado, y el tiempo del inicio del estro sincronizado con PGF2α a la ovulación es mayor que en el estro natural.

Antecedentes: a avaliação do comportamento reprodutivo do gado Crioulo é importante para a determinação de parâmetros como a fertilidade, que indiquem claramente os mecanismos fisiológicos da reprodução em diferentes condições. Assim, a sequência de eventos como a ovulação e subsequente formação do corpo lúteo é um grupo dos fatores a considerar quando programas de melhoramento genético são implementados sob condições do estro natural ou sincronizado. Objetivo: avaliar as características do ovário e o comportamento estral antes, durante e depois de um estro induzido por prostaglandinas F2α (PGF2α) ou que ocorre naturalmente. Métodos: trinta vacas Crioulas foram submetidas à sincronização de estros com PGF2α e observadas continuamente ao longo de cinco dias para detectar o início e tempo de duração do estro. Dezessete dias após o período de detecção do estro sincronizado, as vacas foram observadas similarmente ao longo de sete dias para detectar o estro de ocorrência natural e sua duração. Depois do início de ambos os tipos de estro, os ovários de cada vaca foram monitorizados por ultrassom em intervalos de 8 h para determinar o diâmetro do folículo pré-ovulatório de desvio e o seu diâmetro máximo antes da ovulação, assim como sua taxa de crescimento, tempo da ovulação e o diâmetro máximo do último corpo lúteo. Resultados: a hora do dia da apresentação e a duração dos estros sincronizados e espontâneos foram semelhantes (p>0,1). O diâmetro do folículo dominante em desvio e antes da ovulação foi similar em ambos os tipos de estro, mas a taxa de crescimento (mm/d) do folículo pré-ovulatório foi maior (p<0,05) em vacas sincronizadas com um tempo maior de início do estro até a ovulação (p<0,01). O diâmetro do corpo lúteo 10 d depois da ovulação foi similar em ambos os tipos de estro. Os resultados indicam que a taxa de crescimento do folículo e o tempo do estro sincronizado ou espontâneo até a ovulação devem ser considerados quando a manipulação do ciclo estral e a inseminação artificial de vacas Crioulas são requeridos. Conclusão: uma maior proporção de vacas Crioulas manifestou estro durante a noite, a taxa de crescimento do folículo ovulatório é maior durante o estro sincronizado e o tempo de início do estro sincronizado com PGF2α na ovulação é maior do que no estro natural.

Utilização da gonadotrofina coriônica equina (eCG) em protocolos de sincronização da ovulação para IATF em bovinos: revisão / Use of equine chorionic gonadotropin (eCG) in ovulation synchronization protocols for FTAI in cattle: review

O rebanho bovino brasileiro apresenta um grande número de animais com baixo escore de condiçãocorporal e com um grande período de anestro pós-parto, o que contribui notavelmente para a baixa eficiênciareprodutiva do rebanho nacional, uma vez que a condição nutricional do animal e a ciclicidade são fatores queinterferem diretamente no desempenho reprodutivo. Nesse sentido, alguns tratamentos hormonais, associadoscom eCG, têm sido utilizados em rebanhos sob essas condições, a fim de se aumentar a pulsatilidade de LH paracrescimento folicular e sincronização da ovulação. O objetivo desta revisão é apresentar alguns resultados do usode eCG em protocolos para inseminação artificial em tempo fixo em bovinos.(AU)

The Brazilian cattle presents a large number of animals with low body condition score and a largeperiod of postpartum anestrus, which contributes significantly to the low reproductive efficiency of the nationalherd, since the nutritional condition of the animal and the cyclicity are factors that directly affect reproductiveperformance. Thus, some hormonal treatments, associated with eCG, have been used for cattle under theseconditions, in order to increase the LH pulsatility for follicular growth and ovulation synchronization. The aimof this review is to present some results of the use of eCG in protocols for fixed-time artificial insemination incattle.(AU)

Utilização da gonadotrofina coriônica equina (eCG) em protocolos de sincronização da ovulação para IATF em bovinos: revisão / Use of equine chorionic gonadotropin (eCG) in ovulation synchronization protocols for FTAI in cattle: review

O rebanho bovino brasileiro apresenta um grande número de animais com baixo escore de condiçãocorporal e com um grande período de anestro pós-parto, o que contribui notavelmente para a baixa eficiênciareprodutiva do rebanho nacional, uma vez que a condição nutricional do animal e a ciclicidade são fatores queinterferem diretamente no desempenho reprodutivo. Nesse sentido, alguns tratamentos hormonais, associadoscom eCG, têm sido utilizados em rebanhos sob essas condições, a fim de se aumentar a pulsatilidade de LH paracrescimento folicular e sincronização da ovulação. O objetivo desta revisão é apresentar alguns resultados do usode eCG em protocolos para inseminação artificial em tempo fixo em bovinos.

The Brazilian cattle presents a large number of animals with low body condition score and a largeperiod of postpartum anestrus, which contributes significantly to the low reproductive efficiency of the nationalherd, since the nutritional condition of the animal and the cyclicity are factors that directly affect reproductiveperformance. Thus, some hormonal treatments, associated with eCG, have been used for cattle under theseconditions, in order to increase the LH pulsatility for follicular growth and ovulation synchronization. The aimof this review is to present some results of the use of eCG in protocols for fixed-time artificial insemination incattle.

Effect of cyclicity and Equine Chorionic Gonadotropin (eCG) in fixed-time artificial insemination programs in Bos indicus cattle / Efecto de la ciclicidad y la eCG en programas de inseminación artificial a tiempo fijo en ganado Bos indicus / Efeito da eCG e a ciclicidade em programas de inseminação artificial em tempo fixo em gado Bos indicus

Background: fixed-time artificial insemination programs (FTAI) in Bos indicus heifers have low pregnancy rates. Objective: the aim of this study was to evaluate the effect of cyclicity and equine chorionic gonadotropin (eCG) treatment in fixed-time artificial insemination (FTAI) programs in Bos indicus cattle. Methods: a total of 100 heifers were assigned to four treatments using a completely randomized design with a 2 x 2 factorial arrangement, where one of the factors was ovarian status (cyclic or acyclic) and the other was eCG use (with and without eCG). Follicular growth, ovulation, and pregnancy rates were evaluated using analysis of variance or X² test. Results: no effect (p>0.05) of cyclicity on follicular diameter was observed while eCG showed a significant effect (p<0.05). Cyclicity status and eCG use had no significant effect (p>0.05) on ovulation or pregnancy rates. Conclusions: the eCG application at the time of intravaginal device (IVD) withdrawal increased the size of the ovulatory follicle on insemination day. However, the ovarian state and the use of eCG did not affect ovulation and pregnancy rates of the heifers.

Antecedentes: los programas de inseminación artificial a tiempo fijo en novillas Bos indicus presentan bajas tasas de preñez. Objetivo: el objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de la ciclicidad y de la hormona gonadotropina coriónica equina (eCG) en programas de inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) en ganado Bos indicus. Métodos: se utilizaron 100 novillas y se conformaron cuatro tratamientos utilizando un diseño completamente aleatorizado, con arreglo factorial 2 x 2 con dos categorías, según el estado ovárico (cíclicas y acíclicas) y la utilización de eCG (con y sin eCG). El crecimiento folicular, tasas de ovulación y de preñez se analizaron a través de análisis de varianza. Resultados: no se presentó efecto significativo (p>0,05) de la ciclicidad sobre el diámetro folicular; mientras que la eCG sí presentó efecto significativo (p<0,05). La ciclicidad y la aplicación de eCG no tuvieron efecto significativo (p>0,05) sobre las tasas de ovulación y de preñez. Conclusiones: la aplicación de eCG al momento de retirar el dispositivo intravaginal (DIV), aumentó el tamaño del folículo ovulatorio el día de la inseminación; sin embargo, el estado ovárico y el uso de eCG no afectaron las tasas de ovulación y de preñez en las novillas del presente estudio.

Antecedentes: os programas de inseminação artificial em tempo fixo feitos em novilhas Bos indicus apresentam baixa taxa de prenhez. Objetivo: o objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da ciclicidade e da gonadotrofina coriônica equina (eCG) em programas de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em gado Bos indicus . Métodos: utilizaram-se 100 novilhas divididas em quatro tratamentos utilizando um delineamento inteiramente casualizado com arranjo fatorial 2 x 2 com duas categorias de acordo como o status ovariano (cíclico e acíclico) e o uso de eCG (com e sem eCG). O crescimento folicular, a taxa de ovulação e a taxa de prenhez analizaram-se usando análise de variância. Resultados: não houve efeito significativo (p>0,05) da ciclicidade sobre o diâmetro folicular, en quanto que a eCG apresentou efeito significativo (p <0,05). A ciclicidade e a aplicação de eCG não tiveram efeito significativo (p> 0,05) sobre a taxas de ovulação e prenhez. Conclusões: a aplicação de eCG no momento da remoção do dispositivo intravaginal (DIV), aumentou o tamanho do folículo ovulatório no dia da inseminação, embora, o status do ovário e o uso de eCG não afetaram as taxas de ovulação e prenhez nas novilhas avaliadas nesta pesquisa.

Effect of medroxy-progesterone acetate on follicular growth and endometrial cycloxygenase-2 (COX-2) expression during the bovine estrous cycle / Efeito do acetato de medroxi-progesterona sobre o crescimento filicular e expressão endometrial de ciclooxigenase-2 (COX-2) durante o ciclo estral de bovinos

The objective of this study was to evaluate the effect of medroxy-progesterone acetate (MAP) with or without estradiol benzoate (EB) on follicular growth during the estrous cycle in cattle. In the first experiment, Hereford cows were synchronized with a synthetic analogue of PGF2 alpha and were treated with two different doses of MAP (250 or 500 mg) with or without EB for 7 days starting on day 8 of the estrous cycle. Follicular growth was inhibited (P<0.05) in all cows except controls and those receiving 250mg MAP without EB. Seventy-five percent of the animals (15/20) showed estrus on days 21 and 22 of the cycle rather than at MAP withdrawal, demonstrating that these treatments did not induce estrus. To determine whether the EB treatment altered endometrial sensitivity to oxytocin and thus the luteolytic cascade, multiparous pre-synchronized cows received 5 mg of EB followed 6 hours later with 50 IU of oxytocin (OT; n=9). Eight hours after EB injection, endometrial fragments were collected from the cows on days 4, 13 and 17 of the estrous cycle and COX-2 gene expression was measured by PCR. EB increased COX-2 mRNA levels only on day 17 of the estrous cycle (P<0.05). In conclusion, MAP alone or associated with EB is able to suppress bovine follicular growth. However, EB in the presence of MAP is not efficient to induce luteolysis in cows when injected on day 8 of the estrous cycle.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do acetato de medroxi-progesterona (MAP) com ou sem benzoato de estradiol (BE) sobre o crescimento folicular durante o ciclo estral bovino. No primeiro experimento, vacas da raça Hereford foram sincronizadas com um análogo sintético de PGF2á e tratadas com duas doses diferentes de MAP (250 ou 500mg), com ou sem EB, durante 7 dias, iniciando-se no oitavo dia do ciclo estral. Observou-se uma inibição do crescimento folicular (P<0,05) em todas as vacas, exceto no grupo controle e no grupo que recebeu 250mg de MAP sem BE. Os 75 por cento dos animais não exibiu estro no momento da remoção do MAP, mas sim nos dias 21 e 22 do ciclo, demonstrando que os tratamentos não induziram cio. Para se determinar se o tratamento com BE alterou a sensibilidade endometrial à ocitocina e, assim, a cascata luteolítica, vacas multíparas pré-sincronizadas receberam 5mg de BE, seguidos, após 6 horas, de 50 UI de ocitocina (OT; n=9). Oito horas após a administração de BE, colheram-se fragmentos endometriais das vacas, nos dias 4, 13 e 17 do ciclo estral, mensurando-se a expressão gênica de COX-2 através de PCR. O BE aumentou os níveis de RNAm de COX-2 apenas no dia 17 do ciclo estral (P<0,05). Em conclusão, o MAP isolado ou associado a BE é capaz de suprimir o crescimento folicular bovino. Entretanto, o BE, na presença de MAP é ineficaz na indução da luteólise bovina, quando injetado no oitavo dia do ciclo estral.(AU)

Effect of medroxy-progesterone acetate on follicular growth and endometrial cycloxygenase-2 (COX-2) expression during the bovine estrous cycle / Efeito do acetato de medroxi-progesterona sobre o crescimento filicular e expressão endometrial de ciclooxigenase-2 (COX-2) durante o ciclo estral de bovinos

The objective of this study was to evaluate the effect of medroxy-progesterone acetate (MAP) with or without estradiol benzoate (EB) on follicular growth during the estrous cycle in cattle. In the first experiment, Hereford cows were synchronized with a synthetic analogue of PGF2 alpha and were treated with two different doses of MAP (250 or 500 mg) with or without EB for 7 days starting on day 8 of the estrous cycle. Follicular growth was inhibited (P<0.05) in all cows except controls and those receiving 250mg MAP without EB. Seventy-five percent of the animals (15/20) showed estrus on days 21 and 22 of the cycle rather than at MAP withdrawal, demonstrating that these treatments did not induce estrus. To determine whether the EB treatment altered endometrial sensitivity to oxytocin and thus the luteolytic cascade, multiparous pre-synchronized cows received 5 mg of EB followed 6 hours later with 50 IU of oxytocin (OT; n=9). Eight hours after EB injection, endometrial fragments were collected from the cows on days 4, 13 and 17 of the estrous cycle and COX-2 gene expression was measured by PCR. EB increased COX-2 mRNA levels only on day 17 of the estrous cycle (P<0.05). In conclusion, MAP alone or associated with EB is able to suppress bovine follicular growth. However, EB in the presence of MAP is not efficient to induce luteolysis in cows when injected on day 8 of the estrous cycle.

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do acetato de medroxi-progesterona (MAP) com ou sem benzoato de estradiol (BE) sobre o crescimento folicular durante o ciclo estral bovino. No primeiro experimento, vacas da raça Hereford foram sincronizadas com um análogo sintético de PGF2á e tratadas com duas doses diferentes de MAP (250 ou 500mg), com ou sem EB, durante 7 dias, iniciando-se no oitavo dia do ciclo estral. Observou-se uma inibição do crescimento folicular (P<0,05) em todas as vacas, exceto no grupo controle e no grupo que recebeu 250mg de MAP sem BE. Os 75 por cento dos animais não exibiu estro no momento da remoção do MAP, mas sim nos dias 21 e 22 do ciclo, demonstrando que os tratamentos não induziram cio. Para se determinar se o tratamento com BE alterou a sensibilidade endometrial à ocitocina e, assim, a cascata luteolítica, vacas multíparas pré-sincronizadas receberam 5mg de BE, seguidos, após 6 horas, de 50 UI de ocitocina (OT; n=9). Oito horas após a administração de BE, colheram-se fragmentos endometriais das vacas, nos dias 4, 13 e 17 do ciclo estral, mensurando-se a expressão gênica de COX-2 através de PCR. O BE aumentou os níveis de RNAm de COX-2 apenas no dia 17 do ciclo estral (P<0,05). Em conclusão, o MAP isolado ou associado a BE é capaz de suprimir o crescimento folicular bovino. Entretanto, o BE, na presença de MAP é ineficaz na indução da luteólise bovina, quando injetado no oitavo dia do ciclo estral.

Sistemas de cultivo in vitro para o desenvolvimento de oócitos imaturos de mamíferos / Systems in vitro development of immature oocytes of mammalians

O ovário mamífero possui um grande estoque de folículos primordiais, que é uma fonte potencial de oócitos para a produção in vitro de embriões. Sendo assim, o desenvolvimento de sistemas de cultivo in vitro que explorem o grande número de oócitos imaturos oriundos de folículos pré-antrais de ovários mamíferos torna-se importante para maximizar o potencial reprodutivo das fêmeas. A presente revisão aborda os aspectos relacionados aos sistemas de cultivo in vitro para desenvolvimento de oócitos imaturos oriundos de folículos pré-antrais, bem como às técnicas para analisar sua eficiência. (AU)

The mammalian ovary has a large population of primordial follicles, which is a potential source of oocytes useful for embryo in vitro production. Due to this potential, the development of in vitro culture systems to exploit the large number of immature oocytes from the preantral follicles in the mammalian ovary becomes very important to maximize the female reproductive potential. The present review approaches related aspects of in vitro culture systems for the development of immature oocytes originated from the preantral follicles, as well the techniques to analyze their efficiency.(AU)

Sistemas de cultivo in vitro para o desenvolvimento de oócitos imaturos de mamíferos / Systems in vitro development of immature oocytes of mammalians

O ovário mamífero possui um grande estoque de folículos primordiais, que é uma fonte potencial de oócitos para a produção in vitro de embriões. Sendo assim, o desenvolvimento de sistemas de cultivo in vitro que explorem o grande número de oócitos imaturos oriundos de folículos pré-antrais de ovários mamíferos torna-se importante para maximizar o potencial reprodutivo das fêmeas. A presente revisão aborda os aspectos relacionados aos sistemas de cultivo in vitro para desenvolvimento de oócitos imaturos oriundos de folículos pré-antrais, bem como às técnicas para analisar sua eficiência.

The mammalian ovary has a large population of primordial follicles, which is a potential source of oocytes useful for embryo in vitro production. Due to this potential, the development of in vitro culture systems to exploit the large number of immature oocytes from the preantral follicles in the mammalian ovary becomes very important to maximize the female reproductive potential. The present review approaches related aspects of in vitro culture systems for the development of immature oocytes originated from the preantral follicles, as well the techniques to analyze their efficiency.

Different Follicle-Stimulating Hormone (FSH) sources influence caprine preantral follicle viability and development in vitro / Diferentes origens do Hormônio Folículo Estimulante (FSH) influenciam a viabilidade e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos

The aim of this study was to evaluate the effects of pituitary (pFSH) or recombinant (rFSH) FSH on the survival and growth of caprine preantral follicles. Caprine ovarian tissues were in vitro cultured for one or seven days in Minimum Essential Medium (MEM) alone or containing 10, 50, 100 and 1000 ng/ml of pFSH or rFSH. Control tissues (non-cultured) and those cultured were processed for histological and ultrastructural studies. In addition, follicular and oocyte diameter were analysed. After seven days of culture, only 50ng/ml of rFSH maintained the percentage of normal follicles similar to control. Moreover, 10 ng/ml of pFSH and all the concentrations of rFSH promoted primordial follicles activation. In addition, the presence of 50 ng/ml of rFSH promoted the highest follicular diameter at day seven of culture. In conclusion, 50 ng/ml of rFSH maintained the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles, promoted primordial follicles activation and further growth of cultured follicles.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do FSH pituitário (pFSH)ou recombinante (rFSH) sobre a sobrevivência e o crescimento de folículos pré-antrais caprinos. O tecido ovariano foi cultivado in vitro por um ou sete dias em Meio Essencial Mínimo (MEM) sozinho, ou contendo 10, 50, 100 e 1000 ng/ml de pFSH ou rFSH. O grupo controle (não cultivado) e aqueles cultivados foram processados para análises histológica e ultra-estrutural. Além disso, os diâmetros folicular e oocitário foram avaliados. Após sete dias de cultivo, apenas 50 ng/ml de rFSH manteve o percentual de folículos normais semelhante ao controle. Além disso, 10 ng/ml de pFSH e todas as concentrações de rFSH promoveram ativação de folículos primordiais. A presença de50 ng/ml de rFSH promoveu o maior diâmetro folicular após sete dias de cultivo. Em conclusão, 50 ng/ml de rFSH manteve a integridadede folículos pré-antrais caprinos e promoveu a ativação e o crescimento dos folículos cultivados.(AU)

Different Follicle-Stimulating Hormone (FSH) sources influence caprine preantral follicle viability and development in vitro / Diferentes origens do Hormônio Folículo Estimulante (FSH) influenciam a viabilidade e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos

The aim of this study was to evaluate the effects of pituitary (pFSH) or recombinant (rFSH) FSH on the survival and growth of caprine preantral follicles. Caprine ovarian tissues were in vitro cultured for one or seven days in Minimum Essential Medium (MEM) alone or containing 10, 50, 100 and 1000 ng/ml of pFSH or rFSH. Control tissues (non-cultured) and those cultured were processed for histological and ultrastructural studies. In addition, follicular and oocyte diameter were analysed. After seven days of culture, only 50ng/ml of rFSH maintained the percentage of normal follicles similar to control. Moreover, 10 ng/ml of pFSH and all the concentrations of rFSH promoted primordial follicles activation. In addition, the presence of 50 ng/ml of rFSH promoted the highest follicular diameter at day seven of culture. In conclusion, 50 ng/ml of rFSH maintained the ultrastructural integrity of caprine preantral follicles, promoted primordial follicles activation and further growth of cultured follicles.

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do FSH pituitário (pFSH)ou recombinante (rFSH) sobre a sobrevivência e o crescimento de folículos pré-antrais caprinos. O tecido ovariano foi cultivado in vitro por um ou sete dias em Meio Essencial Mínimo (MEM) sozinho, ou contendo 10, 50, 100 e 1000 ng/ml de pFSH ou rFSH. O grupo controle (não cultivado) e aqueles cultivados foram processados para análises histológica e ultra-estrutural. Além disso, os diâmetros folicular e oocitário foram avaliados. Após sete dias de cultivo, apenas 50 ng/ml de rFSH manteve o percentual de folículos normais semelhante ao controle. Além disso, 10 ng/ml de pFSH e todas as concentrações de rFSH promoveram ativação de folículos primordiais. A presença de50 ng/ml de rFSH promoveu o maior diâmetro folicular após sete dias de cultivo. Em conclusão, 50 ng/ml de rFSH manteve a integridadede folículos pré-antrais caprinos e promoveu a ativação e o crescimento dos folículos cultivados.

Dinâmica folicular em cabras da raça Toggenburg em lactação tratadas ou não com somatotropina bovina recombinante / Follicular dynamics of lactating Toggenburg does treated with recombinant bovine somatotropin

Avaliou-se o efeito da injeção de somatotropina bovina recombinante (r-bST) sobre o ciclo estral de cabras. Foram utilizadas 24 fêmeas da raça Toggenburg, distribuídas em dois tratamentos: T1 (n=12), cabras tratadas com r-bST; e T2 (n=12), cabras tratadas com solução salina (controle). A partir da primeira injeção do tratamento, acompanhou-se o ciclo dos animais em estro até o estro subseqüente. O comprimento médio do ciclo estral e o período interovulatório não diferiram (P>0,05) entre os tratamentos. Foram verificados ciclos estrais de duas, três e quatro ondas de crescimento folicular. Não houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos quanto ao número de ondas do ciclo estral. O número de folículos detectados com diâmetro >3mm nas cabras do T1 foi maior (P<0,05) que naquelas do T2 nos ciclos com duas (15,3±1,2 x 8,1±2,0), três (12,2±0,8 x 8,3±1,9) e quatro (12,7±1,7 x 8,8±2,5) ondas. O folículo dominante da segunda onda foi menor (P<0,05) que o da primeira e terceira ondas e também menor que o da onda ovulatória tanto para T1 quanto para T2. A concentração sérica de progesterona durante o ciclo estral não foi influenciada pelos tratamentos com r-bST (P>0,05). A r-bST não alterou a dinâmica folicular de cabras lactantes da raça Toggenburg, mas promoveu o aumento do número de folículos recrutados ³3mm durante o ciclo estral(AU)

The effect of the r-bST injection was evaluated on the goats estrous cycles. Twenty-four Toggenburg does were used in two treatments: T1 (n=12) treated with r-bST; and T2 (n=12) treated with saline solution (control). After the first r-bST injection, the estrous cycles were checked between two estrus. The estrous cycle length and interovulatory period of the goats did not differ between treatments (P>0.05). Estrous cycles with two, three and four waves of follicular growth were observed. The number of waves during the estrous cycle were not affected by the r-bST treatment (P>0.05). The number of 3mm follicles was different between T1 and T2 (P<0.05) for estrous cycles with two (15.3±1.2 x 8.1±2.0), three (12.2±0.8 x 8.3±1.9) or four (12.7±1.7 x 8.8±2.5) waves. The dominant follicle of the second wave was smaller (P<0.05) than the one of the first and third waves and smaller than the one of the ovulatory wave. The progesterone concentration during the estrous cycle of the animals did not differ (P>0.05) between treatments. The r-bST did not affect the ovarian response during the estrous cycle. The r-bST not affected the follicular dynamic of Toggenburg lactating does, but increased the number of emerging follicles >3mm during the estrous cycle(AU)

Dinâmica folicular em cabras da raça Toggenburg em lactação tratadas ou não com somatotropina bovina recombinante / Follicular dynamics of lactating Toggenburg does treated with recombinant bovine somatotropin

Avaliou-se o efeito da injeção de somatotropina bovina recombinante (r-bST) sobre o ciclo estral de cabras. Foram utilizadas 24 fêmeas da raça Toggenburg, distribuídas em dois tratamentos: T1 (n=12), cabras tratadas com r-bST; e T2 (n=12), cabras tratadas com solução salina (controle). A partir da primeira injeção do tratamento, acompanhou-se o ciclo dos animais em estro até o estro subseqüente. O comprimento médio do ciclo estral e o período interovulatório não diferiram (P>0,05) entre os tratamentos. Foram verificados ciclos estrais de duas, três e quatro ondas de crescimento folicular. Não houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos quanto ao número de ondas do ciclo estral. O número de folículos detectados com diâmetro >3mm nas cabras do T1 foi maior (P<0,05) que naquelas do T2 nos ciclos com duas (15,3±1,2 x 8,1±2,0), três (12,2±0,8 x 8,3±1,9) e quatro (12,7±1,7 x 8,8±2,5) ondas. O folículo dominante da segunda onda foi menor (P<0,05) que o da primeira e terceira ondas e também menor que o da onda ovulatória tanto para T1 quanto para T2. A concentração sérica de progesterona durante o ciclo estral não foi influenciada pelos tratamentos com r-bST (P>0,05). A r-bST não alterou a dinâmica folicular de cabras lactantes da raça Toggenburg, mas promoveu o aumento do número de folículos recrutados ³3mm durante o ciclo estral

The effect of the r-bST injection was evaluated on the goats estrous cycles. Twenty-four Toggenburg does were used in two treatments: T1 (n=12) treated with r-bST; and T2 (n=12) treated with saline solution (control). After the first r-bST injection, the estrous cycles were checked between two estrus. The estrous cycle length and interovulatory period of the goats did not differ between treatments (P>0.05). Estrous cycles with two, three and four waves of follicular growth were observed. The number of waves during the estrous cycle were not affected by the r-bST treatment (P>0.05). The number of 3mm follicles was different between T1 and T2 (P<0.05) for estrous cycles with two (15.3±1.2 x 8.1±2.0), three (12.2±0.8 x 8.3±1.9) or four (12.7±1.7 x 8.8±2.5) waves. The dominant follicle of the second wave was smaller (P<0.05) than the one of the first and third waves and smaller than the one of the ovulatory wave. The progesterone concentration during the estrous cycle of the animals did not differ (P>0.05) between treatments. The r-bST did not affect the ovarian response during the estrous cycle. The r-bST not affected the follicular dynamic of Toggenburg lactating does, but increased the number of emerging follicles >3mm during the estrous cycle

Avaliação ultra-sonográfica da dinâmica folicular e lútea em vacas da raça Guzerá / Ultrasonographic evaluation of follicular dynamics and luteal function in Guzerá cows

Caracterizaram-se o padrão de crescimento folicular e a função lútea ao longo do ciclo estral em vacas da raça Guzerá (n=5), multíparas, não-lactantes. Os animais utilizados apresentavam idade e condição corporal semelhantes e peso corporal médio de 518± 48.5kg. A dinâmica folicular foi monitorada diariamente a partir do dia da ovulação, durante dois ciclos consecutivos, utilizando-se um aparelho de ultra-sonografia equipado com uma probe linear retal de 5MHz. Amostras de sangue foram coletadas a cada 48h, a partir do momento da ovulação, durante os dois ciclos. O primeiro ciclo foi sincronizado pela administração de um luteolítico (cloprostenol), e o segundo foi natural. Os folículos foram identificados e mensurados; e os dados obtidos, registrados em função do dia do ciclo. O comprimento do ciclo estral foi de 19,10± 1,86 dias. Observou-se maior incidência de ciclos com três ondas de crescimento folicular (50 por cento), mas ciclos com duas (37,5 por cento) ou quatro ondas (12,5 por cento) também foram identificados. O diâmetro máximo dos folículos dominantes não ovulatórios foi de 11,60± 2,37 mm, e dos folículos ovulatórios de 14,4± 0,5 mm. A taxa de crescimento dos folículos dominantes da primeira, segunda, terceira e quarta onda foi de 1,48± 0,60; 0,81± 0,13; 1,10± 0,27 e 1,33mm/dia, respectivamente. A concentração máxima de progesterona no diestro foi de 5,50± 0,92ng/ml. A raça Guzerá apresenta características da dinâmica folicular semelhantes àquelas observadas em outras raças zebuínas, como a tendência ao maior número de ondas de crescimento associadas à menor taxa de crescimento, diâmetro máximo e persistência dos folículos dominantes das ondas intermediárias(AU)

The follicular growth pattern and luteal function during the estrous cycle were studied using multiparous, non-lactating Guzerá cows (n=5). The animals presented similar age, body score condition, and mean body weight of 518 ± 48.5kg. Follicular dynamics was daily monitored between ovulations during two consecutive estrous cycles, using an ultrasound device equipped with a linear rectal 5MHz transducer. Blood samples were collected each 48h after ovulation, during the evaluated cycles. The first cycle was synchronized using a luteolytic agent (cloprostenol), and the second estrous cycle was natural. Follicles were identified and measured, and data were individually recorded according to the day of the cycle. The mean length of the cycles was 19.10 ± 1.86 days. There was a higher incidence of cycles presenting three follicular growth waves (50 percent), but cycles presenting two (37.5 percent) or three (12.5 percent) waves were also observed. The maximum diameter of non-ovulatory follicles was 11.60± 2.37mm, and that of ovulatory follicles was 14.40± 0.50mm. The growth rate of dominant follicles during the first, second, third and fourth waves were 1.48 ± 0.60; 0.81 ± 0.13; 1.10 ± 0.27 and 1.33mm/day, respectively. Progesterone maximum concentration during diestrus was 5.50± 0.92ng/ml. These results show that the Guzera breed presents characteristics of the follicular dynamics similar to those observed in other Zebu breeds, like the trend to a higher number of follicular waves associated with lower growth rate, maximum diameter and persistence of the dominant follicles emerging during non-ovulatory waves(AU)

Avaliação ultra-sonográfica da dinâmica folicular e lútea em vacas da raça Guzerá / Ultrasonographic evaluation of follicular dynamics and luteal function in Guzerá cows

Caracterizaram-se o padrão de crescimento folicular e a função lútea ao longo do ciclo estral em vacas da raça Guzerá (n=5), multíparas, não-lactantes. Os animais utilizados apresentavam idade e condição corporal semelhantes e peso corporal médio de 518± 48.5kg. A dinâmica folicular foi monitorada diariamente a partir do dia da ovulação, durante dois ciclos consecutivos, utilizando-se um aparelho de ultra-sonografia equipado com uma probe linear retal de 5MHz. Amostras de sangue foram coletadas a cada 48h, a partir do momento da ovulação, durante os dois ciclos. O primeiro ciclo foi sincronizado pela administração de um luteolítico (cloprostenol), e o segundo foi natural. Os folículos foram identificados e mensurados; e os dados obtidos, registrados em função do dia do ciclo. O comprimento do ciclo estral foi de 19,10± 1,86 dias. Observou-se maior incidência de ciclos com três ondas de crescimento folicular (50 por cento), mas ciclos com duas (37,5 por cento) ou quatro ondas (12,5 por cento) também foram identificados. O diâmetro máximo dos folículos dominantes não ovulatórios foi de 11,60± 2,37 mm, e dos folículos ovulatórios de 14,4± 0,5 mm. A taxa de crescimento dos folículos dominantes da primeira, segunda, terceira e quarta onda foi de 1,48± 0,60; 0,81± 0,13; 1,10± 0,27 e 1,33mm/dia, respectivamente. A concentração máxima de progesterona no diestro foi de 5,50± 0,92ng/ml. A raça Guzerá apresenta características da dinâmica folicular semelhantes àquelas observadas em outras raças zebuínas, como a tendência ao maior número de ondas de crescimento associadas à menor taxa de crescimento, diâmetro máximo e persistência dos folículos dominantes das ondas intermediárias

The follicular growth pattern and luteal function during the estrous cycle were studied using multiparous, non-lactating Guzerá cows (n=5). The animals presented similar age, body score condition, and mean body weight of 518 ± 48.5kg. Follicular dynamics was daily monitored between ovulations during two consecutive estrous cycles, using an ultrasound device equipped with a linear rectal 5MHz transducer. Blood samples were collected each 48h after ovulation, during the evaluated cycles. The first cycle was synchronized using a luteolytic agent (cloprostenol), and the second estrous cycle was natural. Follicles were identified and measured, and data were individually recorded according to the day of the cycle. The mean length of the cycles was 19.10 ± 1.86 days. There was a higher incidence of cycles presenting three follicular growth waves (50 percent), but cycles presenting two (37.5 percent) or three (12.5 percent) waves were also observed. The maximum diameter of non-ovulatory follicles was 11.60± 2.37mm, and that of ovulatory follicles was 14.40± 0.50mm. The growth rate of dominant follicles during the first, second, third and fourth waves were 1.48 ± 0.60; 0.81 ± 0.13; 1.10 ± 0.27 and 1.33mm/day, respectively. Progesterone maximum concentration during diestrus was 5.50± 0.92ng/ml. These results show that the Guzera breed presents characteristics of the follicular dynamics similar to those observed in other Zebu breeds, like the trend to a higher number of follicular waves associated with lower growth rate, maximum diameter and persistence of the dominant follicles emerging during non-ovulatory waves

Dinâmica folicular em cabras da raça Toggenburg em lactação tratadas ou não com somatotropina bovina recombinante

The effect of the r-bST injection was evaluated on the goats estrous cycles. Twenty-four Toggenburg does were used in two treatments: T1 (n=12) treated with r-bST; and T2 (n=12) treated with saline solution (control). After the first r-bST injection, the estrous cycles were checked between two estrus. The estrous cycle length and interovulatory period of the goats did not differ between treatments (P>0.05). Estrous cycles with two, three and four waves of follicular growth were observed. The number of waves during the estrous cycle were not affected by the r-bST treatment (P>0.05). The number of 3mm follicles was different between T1 and T2 (P 0.05) for estrous cycles with two (15.3±1.2 x 8.1±2.0), three (12.2±0.8 x 8.3±1.9) or four (12.7±1.7 x 8.8±2.5) waves. The dominant follicle of the second wave was smaller (P 0.05) than the one of the first and third waves and smaller than the one of the ovulatory wave. The progesterone concentration during the estrous cycle of the animals did not differ (P>0.05) between treatments. The r-bST did not affect the ovarian response during the estrous cycle. The r-bST not affected the follicular dynamic of Toggenburg lactating does, but increased the number of emerging follicles >3mm during the estrous cycle.

Avaliou-se o efeito da injeção de somatotropina bovina recombinante (r-bST) sobre o ciclo estral de cabras. Foram utilizadas 24 fêmeas da raça Toggenburg, distribuídas em dois tratamentos: T1 (n=12), cabras tratadas com r-bST; e T2 (n=12), cabras tratadas com solução salina (controle). A partir da primeira injeção do tratamento, acompanhou-se o ciclo dos animais em estro até o estro subseqüente. O comprimento médio do ciclo estral e o período interovulatório não diferiram (P>0,05) entre os tratamentos. Foram verificados ciclos estrais de duas, três e quatro ondas de crescimento folicular. Não houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos quanto ao número de ondas do ciclo estral. O número de folículos detectados com diâmetro >3mm nas cabras do T1 foi maior (P 0,05) que naquelas do T2 nos ciclos com duas (15,3±1,2 x 8,1±2,0), três (12,2±0,8 x 8,3±1,9) e quatro (12,7±1,7 x 8,8±2,5) ondas. O folículo dominante da segunda onda foi menor (P 0,05) que o da primeira e terceira ondas e também menor que o da onda ovulatória tanto para T1 quanto para T2. A concentração sérica de progesterona durante o ciclo estral não foi influenciada pelos tratamentos com r-bST (P>0,05). A r-bST não alterou a dinâmica folicular de cabras lactantes da raça Toggenburg, mas promoveu o aumento do número de folículos recrutados ³3mm durante o ciclo estral.

CULTIVO IN VITRO DE FOL?CULOS PRÉ-ANTRAIS ISOLADOS A PARTIR DE OV?RIOS DE VACAS ZEBU?NAS (Bos taurus indicus)

Dentre as biotecnologias da reprodução, a manipulação de folículos pré-antrais tem sido vista como uma alternativa para a preservação de gametas femininos, uma vez que possibilita o isolamento e o cultivo de um grande número de ovócitos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar o crescimento in vitro de folículos isolados a partir de ovários de vacas zebuínas. Os folículos foram isolados mecanicamente e cultivados por 4 dias utilizando-se o meio Waymouth MB 752/1 suplementado com piruvato, l-glutamina, hipoxantina, insulina, transferrina, selênio, ácido ascórbico, soro fetal bovino e eCG. Após o período de cultivo, os folículos passaram de 61,0 ± 18,5 (D0) para 86,2 ± 29,6 mm (D4) de diâmetro. Dos 78 folículos pré-antrais analisados 83,5% apresentavam-se morfologicamente normais no último dia de cultivo, enquanto 11,5% mostravam-se degenerados e 5% rompidos. Um total de 23 folículos foi processado para análise por microscopia de luz. Pela observação de figuras mitóticas constatou-se que 47,8% dos folículos apresentavam proliferação das células da granulosa. Em conclusão, este estudo mostrou que folículos pré-antrais isolados a partir de ovários de vacas zebuínas podem crescer in vitro.