Effectiveness of oral electrolyte solutions with different compositions for the treatment of neonatal calves with induced osmotic diarrhea / Eficácia de soluções eletrolíticas orais com diferentes composições no tratamento de bezerros neonatos com diarreia osmótica induzida

In a randomized controlled trial, we evaluated the effects of five oral electrolyte solutions (OESS) with different compositions of water, electrolyte, and acid-base balances of diarrheal neonatal calves. Osmotic diarrhea and dehydration were induced with sucrose in milk, spironolactone, and hydrochlorothiazide for 48 h in thirty 10-day old Holstein healthy calves with 43.5 ± 3.80 kg BW who were fed with natural milk. They were allocated to five treatment groups (n=6) based on the administered OES (commercial: OES A, B, C, D; and non-commercial: OES UEL). On the day of treatment, the calves received 6L of OES in two doses apart from milk intakes. Venous blood samples were collected at -48h (start of induction), -24h, Oh (start of the treatment day), 8h, 16h, 24h, 48h, and 72h. TPP, glucose, D-lactate, L-lactate, pH, pCO2, HCO3, BE, Na, K, CI, SID3, SIG, AG, Atot and percentage change in plasma volume (%PV) were measured or calculated and analyzed by two-way repeated measures ANOVA. All the calves developed osmotic diarrhea, mild to moderate dehydration, hyponatremia, relative hyperchloremia, and moderate to severe metabolic acidosis. The tested OESS were well accepted by the calves and effective in reversing dehydration, electrolyte imbalances, and metabolic acidosis. OES D did not completely correct hyponatremia, and SEO B caused transient hyperglycemia. It has been concluded that all the tested OESS are safe and effective for the treatment of diarrhea in calves with moderate degrees of dehydration and metabolic acidosis, which indicates that they have proper compositions for this purpose.

Em um ensaio clínico controlado e aleatório, foram comparados os efeitos de cinco soluções eletrolíticas orais (SEOs) sobre os equilíbrios hídrico, eletrolítico e ácido-base de bezerros neonatos diarreicos. Diarreia osmótica e desidratação foram induzidas com sacarose no leite, espironolactona e hidroclorotiazida, por 48h, em 30 bezerros Holandeses com 10 dias de idade, 43,5 ± 3,8kg de peso, e alimentados com leite natural. Eles foram distribuídos em cinco grupos de tratamento (n=6) de acordo com a SEO administrada (comercial: SEO A, B, C, D; e não comercial: SEO UEL). No dia do tratamento, os bezerros receberam 6L de SEO em duas doses além da ingestão de leite. Amostras de sangue venoso foram coletadas em -48h (início da indução), - 24h, Oh (início do dia de tratamento), 8h, 16h, 24h, 48h e 72h. PPT, glicose, lactatos Le D, pH, pCO2, HCO3, BE, Na, K, CI, SID3, SIG, AG, Atot e variação percentual no volume plasmático (%VP) foram mensurados ou calculados, e analisados por meio de ANOVA de duas vias de medidas repetidas. Todos os bezerros desenvolveram diarreia osmótica, desidratação leve a moderada, hiponatremia, hipercloremia relativa e acidose metabólica moderada a grave. As SEOs testadas foram bem aceitas pelos bezerros e eficazes para a reversão da desidratação, dos desequilíbrios eletrolíticos e da acidose metabólica. A SEO D não corrigiu completamente a hiponatremia, e a SEO B causou hiperglicemia transitória. Conclui-se que todas as SEOs são eficazes para o tratamento da diarreia em bezerros com graus moderados de desidratação e de acidose metabólica, o que indica que possuem composições adequadas para esse fim.

Water intake and feeding with whole milk accentuate metabolic acidosis in calves with induced osmotic diarrhea / Ingestão de água e alimentação com leite integral acentuam a acidose metabólica em bezerros com diarreia osmótica induzida

Sucrose- and diuretics-based protocols are widely used to induce osmotic diarrhea and dehydration in calves, but they fail to cause metabolic acidosis. In previous studies, calves were fed milk replacers and deprived of water. In this study, we assessed the water, electrolyte, and acid-base imbalances in calves that were fed whole milk and were not completely deprived of water during the induction period. Healthy, male Holstein calves aged 10-12 days were assigned to two groups: free access to water (FWG; n=17) and water deprivation at night (DWG; n=21); and osmotic diarrhea was induced with sucrose added to milk, spironolactone (2mg kg-1) and hydrochlorothiazide (2mg kg-1) orally every 8h for 48h. pH, pCO2, HCO3-, BE, Na+, K+, Cl-, SID3, TPP, AG, Atot, glucose, L-lactate, D-lactate, SIG, and percentage change in plasma volume were measured in venous blood samples taken at 0, 24, and 48h. Data were analyzed using two-way repeated measures ANOVA. Calves showed diarrhea, mild (FWG) to moderate (DWG) dehydration, hyponatremia, and moderate (FWG) to severe (DWG) metabolic acidosis. AG and D-lactate levels were higher and SIG was lower in the DWG, and there was no hyper-L- or D-lactatemia. The magnitude of metabolic acidosis was similar to that observed in natural cases of diarrhea. The protocol for inducing osmotic diarrhea and dehydration should be applied to calves that are fed whole milk and are not completely deprived of water.

Protocolos baseados em sacarose e diuréticos são amplamente usados para induzir diarreia osmótica e desidratação em bezerros, porém não provocam acidose metabólica. Em estudos anteriores, os bezerros foram alimentados com substitutos de leite e privados de água. Neste estudo, avaliaram-se os desequilíbrios hídrico, eletrolítico e ácido base em bezerros que foram alimentados com leite integral e não foram completamente privados de água durante o período de indução. Bezerros HPB machos sadios com 10 a 12 dias de idade foram distribuídos por dois grupos: acesso livre à água (FWG; n=17) e privação de água durante a noite (DWG; n=21); e a diarreia osmótica foi induzida com sacarose adicionada ao leite, espironolactona (2mg kg-1) e hidroclorotiazida (2mg kg-1) por via oral a cada 8h durante 48h. pH, pCO2, HCO3-, BE, Na+, K+, Cl-, SID3, PPT, AG, Atot, glicose, lactato L, lactato D, SIG e alteração percentual no volume plasmático foram medidos em amostras de sangue venoso colhidas em 0, 24 e 48h. Os dados foram analisados usando ANOVA de medidas repetidas bifatorial. Os bezerros apresentaram diarreia, desidratação leve (FWG) a moderada (DWG), hiponatremia e acidose metabólica moderada (FWG) a grave (DWG). Os valores de AG e de lactato D foram maiores e o de SIG foi menor no DWG, e não houve hiperlactatemia L ou D. A magnitude da acidose metabólica foi semelhante à observada em casos naturais de diarreia. O protocolo para induzir diarreia osmótica e desidratação deve ser aplicado a bezerros alimentados com leite integral e não totalmente privados de água.

Morbidity and mortality in Holstein calves from birth to 145 days of age on a large dairy farm in Brazil / Morbidade e mortalidade em bezerras da raça Holandesa do nascimento aos 145 dias de vida, em uma grande fazenda produtora de leite no Brasil

The present study aimed to investigate the morbidity and mortality associated with the most common diseases during the rearing period of Holstein calves in a high-production dairy farm. The calves (n = 600) were allocated to three groups based on age: G1 (1-7 days, n = 216), G2 (30-40 days, n = 188), and G3 (69-85 days, n = 196). They were evaluated over 60 days at eight different times. The morbidity rates were 47.67% (286/600) for diarrhea, 73.00% (438/600) for bovine respiratory disease (BRD), and 3.83% (23/600) for umbilical inflammation (UI). The mortality rate was 2.33% (14/600) for all the animals studied. The morbidity differed in the groups, with higher rates of diarrhea (78.85%, 166/216) and UI (6.94%, 15/216) in G1, and the highest rate of BRD in G3 (79.59%, 156/196). Diarrhea was associated with the occurrence of BRD in G1 and G2. Even in farms with good management practices, there is high morbidity associated with diarrhea and BRD, with the morbidity rate for diarrhea decreasing and that for BRD increasing as the animals get older. In addition, diarrhea is an important risk factor for BRD, especially in younger animals.(AU)

O presente estudo objetivou investigar a morbidade e a mortalidade associadas às doenças mais comuns no período de criação de bezerras da raça Holandesa, em uma fazenda leiteira de alta produção. As bezerras (n = 600) foram alocadas em três grupos de acordo com a idade: G1 (1-7 dias, n = 216); G2 (30-40 dias, n = 188); G3 (69-85 dias, n = 196). Os animais foram avaliados durante 60 dias, em oito momentos diferentes. A morbidade foi de 47,67% (286/600) para diarreia, 73,00% (438/600) para doença respiratória bovina (DRB) e 3,83% (23/600) para inflamação umbilical (IU). A taxa de mortalidade foi de 2,33% (14/600), para o total de animais avaliados. A morbidade foi diferente entre os grupos, com maior frequência de diarreia (78,85%, 166/216) e IU (6,94%, 15/216) no G1, sendo a maior ocorrência de DRB no G3 (79,59%, 156/196). A diarreia foi associada à DRB no G1 e no G2. Mesmo em fazendas com boas práticas de manejo, há alta morbidade por diarreia e DRB, com a taxa de morbidade por diarreia diminuindo e a de DRB aumentando à medida que os animais envelhecem. Além disso, a diarreia é um importante fator de risco para DRB, especialmente em animais mais jovens.(AU)

Diarreia Epidêmica Suína (PED), enfermidade exótica no Brasil mas emergente nas Américas / Porcine Epidemic Diarrhea (PED), exotic disease in Brazil but emerging in the Americas / Diarrea Epidemica Suina (PED), enfermedad exotica en Brasil, pero emergente el las Américas

Surtos recentes da Diarreia Epidêmica Suína (PED, em inglês) têm sido descritos em diversos países, sobretudo na China e Estados Unidos, e tem provocado significativo impacto econômico à suinocultura mundial. Como a doença se disseminou também pela América do Sul, afetando Peru, Colômbia e Equador, o conhecimento sobre a enfermidade é de extrema relevância para manutenção do status livre da doença no Brasil. A PED é causada por vírus da família Coronaviridae, caracterizando-se por diarreia líquida profusa e vômitos, de intensidade variável, sendo mais graves em leitões neonatos. A RT-PCR tem sido a técnica de diagnóstico mais empregada, mas a sorologia e a imuno-histoquímica também podem ser utilizadas. A vacina comercial disponível nos Estados Unidos é considerada de alto custo e efetividade intermediária e, por isso, protocolos rígidos de biossegurança são fundamentais para dificultar a entrada do agente no rebanho. Estudos recentes têm se intensificado no sentido de elucidar a epidemiologia da doença, uma vez que a via de disseminação viral entre rebanhos ainda não se encontra totalmente estabelecida e o impacto econômico causado pela alta mortalidade, sobretudo de animais lactentes, compromete sensivelmente a produção de carne suína nos países afetados.(AU)

Recent outbreaks of Porcine Epidemic Diarrhea (PED) has been described in several countries, mainly in China and the United States, and it has causing significative economic impact to the swine industry worldwide. As the virus spread also in South America, affecting Peru, Colombia and Ecuador, knowledge about the disease is extremely important to maintain the free status of the disease in Brazil. PED is caused by a virus from Coronaviridae family, and is characterized by profuse liquid diarrhea and vomit, varying in severity, being more severe in newborn piglets. The RT-PCR has been the most used diagnostic technique, but serology and immunohistochemistry can also be used. The commercial available vaccine is considered costly and with intermediate effectiveness, consequently complementary biosecurity rules are important to hinder the entry of the agent into the herd. Many studies have been conducted in order to elucidate the epidemiology of the disease, since the route of viral spread among herds is not yet fully established and the economic impact due to high mortality, especially in young animals, significantly impairs the production of pork in affected countries.(AU)

Brotes recientes de la Diarrea Epidémica Suína (PED, en inglés) han sido descritos en diversos países, sobre todo en China y Estados Unidos, y ha provocado un significativo impacto económico a la suinocultura mundial. Como la enfermedad también se diseminó en América del Sur, afectando a Perú, Colombia y Ecuador, el conocimiento sobre la enfermedad es de extrema relevancia para el mantenimiento del estatus libre de la enfermedad en el Brasil. La PED es causada por el virus de la familia Coronaviridae, caracterizándose por diarrea liquida profusa y vómito, de intensidad variable, siendo más grave en lechones neonatos. La RT-PCR ha sido la técnica de diagnóstico más utilizada, pero la serología e inmunohistoquímica también pueden ser utilizadas. La vacuna comercial disponible en los Estados Unidos es considerada de alto costo y efectividad intermedia, por eso, protocolos rígidos de bioseguridad son fundamentales para dificultar la entrada del agente en el rebaño. Estudios recientes se han intensificado en el sentido de dilucidar la epidemiologia de la enfermedad, una vez que la vía de diseminación viral entre rebaños aún no se encuentra completamente establecida y el impacto económico causado por la alta mortalidad, sobre todo de animales lactantes, compromete sensiblemente la producción de carne suína en los países afectados.(AU)

Diarreia Epidêmica Suína (PED), enfermidade exótica no Brasil mas emergente nas Américas / Porcine Epidemic Diarrhea (PED), exotic disease in Brazil but emerging in the Americas / Diarrea Epidemica Suina (PED), enfermedad exotica en Brasil, pero emergente el las Américas

Surtos recentes da Diarreia Epidêmica Suína (PED, em inglês) têm sido descritos em diversos países, sobretudo na China e Estados Unidos, e tem provocado significativo impacto econômico à suinocultura mundial. Como a doença se disseminou também pela América do Sul, afetando Peru, Colômbia e Equador, o conhecimento sobre a enfermidade é de extrema relevância para manutenção do status livre da doença no Brasil. A PED é causada por vírus da família Coronaviridae, caracterizando-se por diarreia líquida profusa e vômitos, de intensidade variável, sendo mais graves em leitões neonatos. A RT-PCR tem sido a técnica de diagnóstico mais empregada, mas a sorologia e a imuno-histoquímica também podem ser utilizadas. A vacina comercial disponível nos Estados Unidos é considerada de alto custo e efetividade intermediária e, por isso, protocolos rígidos de biossegurança são fundamentais para dificultar a entrada do agente no rebanho. Estudos recentes têm se intensificado no sentido de elucidar a epidemiologia da doença, uma vez que a via de disseminação viral entre rebanhos ainda não se encontra totalmente estabelecida e o impacto econômico causado pela alta mortalidade, sobretudo de animais lactentes, compromete sensivelmente a produção de carne suína nos países afetados.

Recent outbreaks of Porcine Epidemic Diarrhea (PED) has been described in several countries, mainly in China and the United States, and it has causing significative economic impact to the swine industry worldwide. As the virus spread also in South America, affecting Peru, Colombia and Ecuador, knowledge about the disease is extremely important to maintain the free status of the disease in Brazil. PED is caused by a virus from Coronaviridae family, and is characterized by profuse liquid diarrhea and vomit, varying in severity, being more severe in newborn piglets. The RT-PCR has been the most used diagnostic technique, but serology and immunohistochemistry can also be used. The commercial available vaccine is considered costly and with intermediate effectiveness, consequently complementary biosecurity rules are important to hinder the entry of the agent into the herd. Many studies have been conducted in order to elucidate the epidemiology of the disease, since the route of viral spread among herds is not yet fully established and the economic impact due to high mortality, especially in young animals, significantly impairs the production of pork in affected countries.

Brotes recientes de la Diarrea Epidémica Suína (PED, en inglés) han sido descritos en diversos países, sobre todo en China y Estados Unidos, y ha provocado un significativo impacto económico a la suinocultura mundial. Como la enfermedad también se diseminó en América del Sur, afectando a Perú, Colombia y Ecuador, el conocimiento sobre la enfermedad es de extrema relevancia para el mantenimiento del estatus libre de la enfermedad en el Brasil. La PED es causada por el virus de la familia Coronaviridae, caracterizándose por diarrea liquida profusa y vómito, de intensidad variable, siendo más grave en lechones neonatos. La RT-PCR ha sido la técnica de diagnóstico más utilizada, pero la serología e inmunohistoquímica también pueden ser utilizadas. La vacuna comercial disponible en los Estados Unidos es considerada de alto costo y efectividad intermedia, por eso, protocolos rígidos de bioseguridad son fundamentales para dificultar la entrada del agente en el rebaño. Estudios recientes se han intensificado en el sentido de dilucidar la epidemiologia de la enfermedad, una vez que la vía de diseminación viral entre rebaños aún no se encuentra completamente establecida y el impacto económico causado por la alta mortalidad, sobre todo de animales lactantes, compromete sensiblemente la producción de carne suína en los países afectados.

Salmonelose em bezerros pelo sorovar Dublin no estado do Paraná, Brasil - aspectos clínico-patológicos / Salmonellosis in calves by serovar Dublin in Paraná State, Brazil - clinicopathological aspects

Background: Calf diarrhea remains one of the main diseases affecting the cattle industry. Persistence of this significant problem is associated with the complexity of factors that may be involved (infectious, environmental). An accurate diagnosis is essential for confirming the cause and helping clinicians and cattle producers to apply appropriate strategies in a timely manner. This report describes the histological changes according to the degree of salmonellosis severity, which is a contagious infectious disease caused by Salmonella enterica subsp. enterica, a Gram-negative bacterium, in two beef calves in northern Paraná State, southern Brazil. Cases: Two 90-day-old crossbred Angus and Nellore calves from a beef farm in northern Paraná State were referred to a Veterinary Hospital. Animal 1- developed acute clinical signs (enteritis, ataxia, and muscle rigidity) and died the day after the signs began. Gross findings included heavy and non-collapsed lungs, pulmonary oedema, hepatomegaly, enteritis, and severe diffuse typhlitis. Microscopic analysis revealed severe diffuse necrotic enteritis, typhlitis, severe diffuse interstitial pneumonia, moderate centrilobular hepatic necrosis, mild multifocal nephritis, and severe spleen and lymph node necrosis. Paratyphoid nodules were evidenced on the liver, spleen, and mesenteric lymph nodes. Animal 2- presented apathy, green fibrinous diarrhea, and died three days after the onset of clinical signs. The macroscopic examination showed moderate diffuse enteritis and hepatosplenomegaly. At the microscopic examination, many paratyphoid nodules were observed on the liver, spleen, kidneys, and Peyer's patches, which were associated with intralesional and intravascular bacilli. Additional findings included severe diffuse fibrinous necrotic enteritis with intralesional bacilli, diffuse interstitial pneumonia, multifocal splenic necrosis, lymphoid depletion, and moderate multifocal to coalescent lymphocytic nephritis. Histological Gram staining was performed on selected samples, revealing intralesional Gram-negative bacilli in the liver and intestine. Thus, liver and intestine fragments were used for the microbiological examination. Microbiological culture, isolation and biochemical tests identified the genus Salmonella spp. Then, the colonies were subjected to serological tests for serovar identification, according to ISO/TR 6579-3, which determined the serovar Dublin. After identifying the disease etiological agent, the outbreak was controlled by appropriate antibiotic therapy combined with the correction of sanitary measures. Discussion: Enteritis is a frequent disease in calves, posing a diagnostic challenge in identifying the etiological agent. In the present case, the histological, microbiological, and serological results confirmed a disseminated Salmonella spp. infection. The microscopic findings, such as interstitial pneumonia, fibrinous necrotic enteritis markedly in ileum and paratyphoid nodules in various organs, are the most common aspects of the disease. However, fibrinous cholecystitis, which is considered pathognomonic for salmonellosis, was not observed in this study. Therefore, the absence of such a lesion should not exclude the disease in sick animals. A microscopic injury score was used to determine lesion severity by assigning values from 1 to 4, wherein: 1 = no apparent lesions, 2 = mild lesions, 3 = moderate lesions, and 4 = severe lesions. Both calves were scored as 4. Multiple predisposing factors for the condition were identified in this farm such as different age animals in the same paddock and no specific paddock for sick animals, given that the infectious agent remains in feces, saliva, and nasal discharge. The serovar Dublin induces several clinical signs such as septicemic, respiratory, and enteric manifestations, making a clinical diagnosis a challenge

Neonatal diarrhea and rotavirus A infection in beef and dairy calves, Brazil, 2006-2015 / Diarreia neonatal e infecção por rotavírus A em bezerros de corte e leite, Brasil, 2006-2015

Calf diarrhea causes substantial economic losses in the cattle industry worldwide. Bovine rotavirus A (RVA) is the main viral agent that leads to enteric infection and diarrhea outbreaks in calves throughout the world. The aim of this retrospective (2006-2015) study was to determine the frequency of RVA detection in diarrheic fecal samples from beef and dairy calves from the three main cattle-producing regions of Brazil. Diarrheic fecal samples (n=1,498) of 124 beef and 56 dairy cattle herds from the Midwest, South, and Southeast geographical regions of Brazil were evaluated using the silver-stained polyacrylamide gel electrophoresis (ss-PAGE) technique. RVA double stranded-RNA was identified by the ss-PAGE technique in 410 (27.4%) fecal samples. The frequency of positive samples found in beef calves (31.9%; 328/1,027) was higher than the frequency found in diarrheic fecal samples from dairy calves (17.4%; 82/471). RVA infection was identified in calves from the three Brazilian geographical regions analyzed. However, the frequency of positive diarrheic calves in the Midwest region (39.4%), predominantly beef calves, was higher than in the South (19.4%) and Southeast (17.6%) regions. The temporal distribution of RVA-infected calves evaluated by two five-year periods (2006-2010, 24.5%; 2011-2015, 28.8%) demonstrated a very similar frequency of RVA in both periods. Considering the wide regional and temporal scope of this study, it can be concluded that RVA remains an important etiology of neonatal diarrhea in calves of Brazilian cattle herds.(AU)

A diarreia neonatal ocasiona perdas econômicas importantes na pecuária bovina em todo o mundo. Rotavírus A (RVA) é o principal agente etiológico viral de infecções entéricas e surtos de diarreia em bezerros de rebanhos de corte e leite. O objetivo deste estudo retrospectivo (2006-2015) foi determinar a frequência de detecção de RVA em amostras de fezes diarreicas de bezerros de corte e leite das três principais regiões produtoras de bovinos do Brasil. Amostras de fezes diarreicas (n=1.498) de 124 rebanhos bovinos de corte e 56 rebanhos bovinos de leite das regiões Centro-Oeste, Sul e Sudeste do Brasil foram avaliadas utilizando a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). O genoma segmentado de RVA foi identificado pela técnica de EGPA em 410 (27,4%) amostras de fezes. A frequência de amostras positivas encontrada em bezerros de rebanhos de corte (31,9%; 328/1.027) foi maior que a frequência identificada em amostras de fezes diarreicas de bezerros de rebanhos leiteiros (17,4%; 82/471). A infecção por RVA foi identificada em bezerros das três regiões geográficas brasileiras analisadas. No entanto, a frequência de bezerros com diarreia positivos para RVA na região Centro-Oeste (39,4%), predominantemente de bezerros de rebanhos de corte, foi maior que nas regiões Sul (19,4%) e Sudeste (17,6%). A distribuição temporal dos bezerros infectados com RVA avaliados por dois períodos de cinco anos (2006-2010, 24,5%; 2011-2015, 28,8%) demonstrou uma frequência muito semelhante em ambos os períodos. Considerando a amplitude regional e temporal deste estudo, pode-se concluir que RVA continua sendo uma importante etiologia de diarreia neonatal em bezerros de rebanhos bovinos brasileiros.(AU)

Neonatal diarrhea and rotavirus A infection in beef and dairy calves, Brazil, 2006-2015 / Diarreia neonatal e infecção por rotavírus A em bezerros de corte e leite, Brasil, 2006-2015

Calf diarrhea causes substantial economic losses in the cattle industry worldwide. Bovine rotavirus A (RVA) is the main viral agent that leads to enteric infection and diarrhea outbreaks in calves throughout the world. The aim of this retrospective (2006-2015) study was to determine the frequency of RVA detection in diarrheic fecal samples from beef and dairy calves from the three main cattle-producing regions of Brazil. Diarrheic fecal samples (n=1,498) of 124 beef and 56 dairy cattle herds from the Midwest, South, and Southeast geographical regions of Brazil were evaluated using the silver-stained polyacrylamide gel electrophoresis (ss-PAGE) technique. RVA double stranded-RNA was identified by the ss-PAGE technique in 410 (27.4%) fecal samples. The frequency of positive samples found in beef calves (31.9%; 328/1,027) was higher than the frequency found in diarrheic fecal samples from dairy calves (17.4%; 82/471). RVA infection was identified in calves from the three Brazilian geographical regions analyzed. However, the frequency of positive diarrheic calves in the Midwest region (39.4%), predominantly beef calves, was higher than in the South (19.4%) and Southeast (17.6%) regions. The temporal distribution of RVA-infected calves evaluated by two five-year periods (2006-2010, 24.5%; 2011-2015, 28.8%) demonstrated a very similar frequency of RVA in both periods. Considering the wide regional and temporal scope of this study, it can be concluded that RVA remains an important etiology of neonatal diarrhea in calves of Brazilian cattle herds.(AU)

A diarreia neonatal ocasiona perdas econômicas importantes na pecuária bovina em todo o mundo. Rotavírus A (RVA) é o principal agente etiológico viral de infecções entéricas e surtos de diarreia em bezerros de rebanhos de corte e leite. O objetivo deste estudo retrospectivo (2006-2015) foi determinar a frequência de detecção de RVA em amostras de fezes diarreicas de bezerros de corte e leite das três principais regiões produtoras de bovinos do Brasil. Amostras de fezes diarreicas (n=1.498) de 124 rebanhos bovinos de corte e 56 rebanhos bovinos de leite das regiões Centro-Oeste, Sul e Sudeste do Brasil foram avaliadas utilizando a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). O genoma segmentado de RVA foi identificado pela técnica de EGPA em 410 (27,4%) amostras de fezes. A frequência de amostras positivas encontrada em bezerros de rebanhos de corte (31,9%; 328/1.027) foi maior que a frequência identificada em amostras de fezes diarreicas de bezerros de rebanhos leiteiros (17,4%; 82/471). A infecção por RVA foi identificada em bezerros das três regiões geográficas brasileiras analisadas. No entanto, a frequência de bezerros com diarreia positivos para RVA na região Centro-Oeste (39,4%), predominantemente de bezerros de rebanhos de corte, foi maior que nas regiões Sul (19,4%) e Sudeste (17,6%). A distribuição temporal dos bezerros infectados com RVA avaliados por dois períodos de cinco anos (2006-2010, 24,5%; 2011-2015, 28,8%) demonstrou uma frequência muito semelhante em ambos os períodos. Considerando a amplitude regional e temporal deste estudo, pode-se concluir que RVA continua sendo uma importante etiologia de diarreia neonatal em bezerros de rebanhos bovinos brasileiros.(AU)

Neonatal diarrhea and rotavirus A infection in beef and dairy calves, Brazil, 2006-2015

ABSTRACT: Calf diarrhea causes substantial economic losses in the cattle industry worldwide. Bovine rotavirus A (RVA) is the main viral agent that leads to enteric infection and diarrhea outbreaks in calves throughout the world. The aim of this retrospective (2006-2015) study was to determine the frequency of RVA detection in diarrheic fecal samples from beef and dairy calves from the three main cattle-producing regions of Brazil. Diarrheic fecal samples (n=1,498) of 124 beef and 56 dairy cattle herds from the Midwest, South, and Southeast geographical regions of Brazil were evaluated using the silver-stained polyacrylamide gel electrophoresis (ss-PAGE) technique. RVA double stranded-RNA was identified by the ss-PAGE technique in 410 (27.4%) fecal samples. The frequency of positive samples found in beef calves (31.9%; 328/1,027) was higher than the frequency found in diarrheic fecal samples from dairy calves (17.4%; 82/471). RVA infection was identified in calves from the three Brazilian geographical regions analyzed. However, the frequency of positive diarrheic calves in the Midwest region (39.4%), predominantly beef calves, was higher than in the South (19.4%) and Southeast (17.6%) regions. The temporal distribution of RVA-infected calves evaluated by two five-year periods (2006-2010, 24.5%; 2011-2015, 28.8%) demonstrated a very similar frequency of RVA in both periods. Considering the wide regional and temporal scope of this study, it can be concluded that RVA remains an important etiology of neonatal diarrhea in calves of Brazilian cattle herds.

RESUMO: A diarreia neonatal ocasiona perdas econômicas importantes na pecuária bovina em todo o mundo. Rotavírus A (RVA) é o principal agente etiológico viral de infecções entéricas e surtos de diarreia em bezerros de rebanhos de corte e leite. O objetivo deste estudo retrospectivo (2006-2015) foi determinar a frequência de detecção de RVA em amostras de fezes diarreicas de bezerros de corte e leite das três principais regiões produtoras de bovinos do Brasil. Amostras de fezes diarreicas (n=1.498) de 124 rebanhos bovinos de corte e 56 rebanhos bovinos de leite das regiões Centro-Oeste, Sul e Sudeste do Brasil foram avaliadas utilizando a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). O genoma segmentado de RVA foi identificado pela técnica de EGPA em 410 (27,4%) amostras de fezes. A frequência de amostras positivas encontrada em bezerros de rebanhos de corte (31,9%; 328/1.027) foi maior que a frequência identificada em amostras de fezes diarreicas de bezerros de rebanhos leiteiros (17,4%; 82/471). A infecção por RVA foi identificada em bezerros das três regiões geográficas brasileiras analisadas. No entanto, a frequência de bezerros com diarreia positivos para RVA na região Centro-Oeste (39,4%), predominantemente de bezerros de rebanhos de corte, foi maior que nas regiões Sul (19,4%) e Sudeste (17,6%). A distribuição temporal dos bezerros infectados com RVA avaliados por dois períodos de cinco anos (2006-2010, 24,5%; 2011-2015, 28,8%) demonstrou uma frequência muito semelhante em ambos os períodos. Considerando a amplitude regional e temporal deste estudo, pode-se concluir que RVA continua sendo uma importante etiologia de diarreia neonatal em bezerros de rebanhos bovinos brasileiros.

Serum concentrations of acute phase proteins and immunoglobulins of calves with rotavirus diarrhea / Concentração sérica de proteínas de fase aguda e imunoglobulinas em bezerros acometidos por diarreia por rotavírus

The aim of the present study was to characterize changes in acute phase protein levels according to the occurrence of rotavirus diarrhea in calves in the first month of life. Blood and fecal samples were taken before colostrum intake and at 1, 2, 7, 15, 21 and 30 days of age from 24 Holstein calves allotted in three experimental groups: calves that did not present diarrhea (group A), calves that presented diarrhea, but tested negative for rotavirus in feces (group B), and calves that presented diarrhea and tested positive for rotavirus in feces (group C) (experiment 1). When the animals presented episodes of diarrhea, blood and fecal samples were taken at 24-hour intervals until the end of clinical signs (experiment 2). Serum proteins were separated by SDS-PAGE technique and rotavirus in feces was detected by PAGE. Data of experiment 1 were analyzed by ANOVA and Tukey's test, considered significant at P<0.05. Data of experiment 2 were subjected to the HSD test. Total protein, globulins, and IgG concentrations were lower in group C than in groups A and B. Ceruloplasmin and transferrin levels were higher in group C than in groups A and B. Serum concentrations of haptoglobin and α1-acid glycoprotein did not differ significantly between groups throughout the experimental period. Calves presented diarrhea between 10.4 and 14.6 days of age in group B, and between 10.3 and 14.6 days of age in group C. In the moments of diarrhea manifestation, least square means of IgA, haptoglobin and α1-acid glycoprotein concentrations did not differ significantly between groups B and C, but ceruloplasmin and transferrin concentrations were higher in group C than in group B, as opposed to what occurred with IgG levels. These findings show that optimizing passive immunity transfer of immunoglobulins decrease the likelihood of calves developing diarrhea caused by rotavirus. In addition, ceruloplasmin presents characteristics of a biomarker of rotavirus infection in calves.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar alterações nos teores de proteínas de fase aguda de acordo com a ocorrência de diarreia por rotavírus em bezerros no decorrer do primeiro mês de vida. Amostras de sangue e fezes de 24 bezerros da raça Holandesa foram coletadas antes da ingestão de colostro e com um, dois, sete, quinze, vinte um e trinta dias de idade, sendo os bezerros alocados em três grupos: bezerros que não apresentaram diarreia (grupo A), bezerros que apresentaram diarreia, mas foram negativos para a detecção de rotavírus nas fezes (grupo B) e bezerros que apresentaram diarreia e foram positivos para detecção de rotavírus nas fezes (grupo C) (experimento 1). Sempre que os animais apresentavam episódio de diarreia, amostras de sangue e fezes eram coletadas em intervalos de 24 horas até o término dos sinais clínicos (experimento 2). As proteínas séricas foram separadas por meio da técnica de SDS-PAGE e a pesquisa de rotavírus nas fezes foi realizada por meio da técnica de PAGE. Os resultados do experimento 1 foram analisados por meio de ANOVA e do teste de Tukey, considerado significativo quando P<0,05. Os dados do experimento 2 foram submetidos ao teste HSD. Os teores de proteína total, globulinas e IgG foram menores no grupo C que nos grupos A e B, os teores de ceruloplasmina e transferrina foram maiores no grupo C que nos grupos A e B e as concentrações séricas de haptoglobina e α1-glicoproteína ácida não diferiram significativamente entre grupos. Os bezerros manifestaram diarreia, em média, com 10,4 a 14,6 dias de idade no grupo B e com 10,3 a 14,6 dias de idade no grupo C. Nos momentos de manifestação de diarreia, os teores de IgA, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida não diferiram significativamente entre os grupos B e C, mas os teores de ceruloplasmina e transferrina foram maiores no grupo C que no grupo B, oposto ao verificado para o teor de IgG. Esses achados mostram que a otimização da transferência de imunidade passiva de imunoglobulinas reduz a probabilidade de os animais apresentarem diarreia por rotavírus. Adicionalmente, a ceruloplasmina apresenta características de um biomarcador da infecção por rotavírus em bezerros.(AU)

Serum concentrations of acute phase proteins and immunoglobulins of calves with rotavirus diarrhea / Concentração sérica de proteínas de fase aguda e imunoglobulinas em bezerros acometidos por diarreia por rotavírus

The aim of the present study was to characterize changes in acute phase protein levels according to the occurrence of rotavirus diarrhea in calves in the first month of life. Blood and fecal samples were taken before colostrum intake and at 1, 2, 7, 15, 21 and 30 days of age from 24 Holstein calves allotted in three experimental groups: calves that did not present diarrhea (group A), calves that presented diarrhea, but tested negative for rotavirus in feces (group B), and calves that presented diarrhea and tested positive for rotavirus in feces (group C) (experiment 1). When the animals presented episodes of diarrhea, blood and fecal samples were taken at 24-hour intervals until the end of clinical signs (experiment 2). Serum proteins were separated by SDS-PAGE technique and rotavirus in feces was detected by PAGE. Data of experiment 1 were analyzed by ANOVA and Tukey's test, considered significant at P 0.05. Data of experiment 2 were subjected to the HSD test. Total protein, globulins, and IgG concentrations were lower in group C than in groups A and B. Ceruloplasmin and transferrin levels were higher in group C than in groups A and B. Serum concentrations of haptoglobin and 1-acid glycoprotein did not differ significantly between groups throughout the experimental period. Calves presented diarrhea between 10.4 and 14.6 days of age in group B, and between 10.3 and 14.6 days of age in group C. In the moments of diarrhea manifestation, least square means of IgA, haptoglobin and 1-acid glycoprotein concentrations did not differ significantly between groups B and C, but ceruloplasmin and transferrin concentrations were higher in group C than in group B, as opposed to what occurred with IgG levels. These findings show that optimizing passive immunity transfer of immunoglobulins decrease the likelihood of calves developing diarrhea caused by rotavirus. In addition, ceruloplasmin presents characteristics of a biomarker of rotavirus infection in calves.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar alterações nos teores de proteínas de fase aguda de acordo com a ocorrência de diarreia por rotavírus em bezerros no decorrer do primeiro mês de vida. Amostras de sangue e fezes de 24 bezerros da raça Holandesa foram coletadas antes da ingestão de colostro e com um, dois, sete, quinze, vinte um e trinta dias de idade, sendo os bezerros alocados em três grupos: bezerros que não apresentaram diarreia (grupo A), bezerros que apresentaram diarreia, mas foram negativos para a detecção de rotavírus nas fezes (grupo B) e bezerros que apresentaram diarreia e foram positivos para detecção de rotavírus nas fezes (grupo C) (experimento 1). Sempre que os animais apresentavam episódio de diarreia, amostras de sangue e fezes eram coletadas em intervalos de 24 horas até o término dos sinais clínicos (experimento 2). As proteínas séricas foram separadas por meio da técnica de SDS-PAGE e a pesquisa de rotavírus nas fezes foi realizada por meio da técnica de PAGE. Os resultados do experimento 1 foram analisados por meio de ANOVA e do teste de Tukey, considerado significativo quando P 0,05. Os dados do experimento 2 foram submetidos ao teste HSD. Os teores de proteína total, globulinas e IgG foram menores no grupo C que nos grupos A e B, os teores de ceruloplasmina e transferrina foram maiores no grupo C que nos grupos A e B e as concentrações séricas de haptoglobina e 1-glicoproteína ácida não diferiram significativamente entre grupos. Os bezerros manifestaram diarreia, em média, com 10,4 a 14,6 dias de idade no grupo B e com 10,3 a 14,6 dias de idade no grupo C. Nos momentos de manifestação de diarreia, os teores de IgA, haptoglobina e 1-glicoproteína ácida não diferiram significativamente entre os grupos B e C, mas os teores de ceruloplasmina e transferrina foram maiores no grupo C que no grupo B, oposto ao verificado para o teor de IgG. Esses achados mostram que a otimização da transferência de imunidade passiva de imunoglobulinas reduz a probabilidade de os animais apresentarem diarreia por rotavírus. Adicionalmente, a ceruloplasmina apresenta características de um biomarcador da infecção por rotavírus em bezerros.(AU)

Lactic acid bacteria with probiotic potential from Nellore calves raised in semiarid / Bactérias láticas com potencial probiótico provenientes de bezerros nelore criados no semiárido

Colibacilosis is one of the major diseases of calves, causing huge losses. The aim in this study was to characterize and select lactic bacteria with probiotic potential from Nellore calves raised in northern Minas Gerais. Stool samples from six healthy calves were collected, with three days old and again at three months of age. After isolation, bacteria were enumerated and submitted to morphological and biochemical characterization with API 50 CH test, pH and acid resistance to bile salts and antagonist activity in vitro for three strains of Escherichia coli. The population of lactic acid bacteria was greater (p < 0.05) in feces of the calves at colostrum phase. For resistance to chloric acid, 92.3% of isolates from newborn calves resisted pH 4.0, presenting higher resistance than the isolates from calves at three months of age. In the antagonism test, the isolates Be4 1m, Be1 2b and Be6 2a were presumptively identified as Lactobacillus salivarius, L. crispatus and L. pentosus, respectively, and produced average inhibition zones greater than 10 mm of diameter and showed resistance acid pH and bile salts, indicating potential probiotics.

A colibacilose é uma das principais doenças que acomete bezerros nas fases iniciais, provocando prejuízos à bovinocultura. Nesta pesquisa, caracterizou-se e selecionou-se cepas de bactérias láticas com potencial probiótico, provenientes de bezerros Nelore criados no norte de Minas Gerais. Foram coletadas amostras fecais de bezerros hígidos contemporâneos, com três dias de vida e novamente aos três meses de idade. Após isolamento, realizou-se a quantificação, caracterização morfológica e bioquímica com teste API 50 CH, resistência a pH ácido e a sais biliares e atividade antagonista in vitro para três cepas de Escherichia coli. Verificou-se população superior (p < 0,05) de bactérias láticas nas fezes dos bezerros na fase colostral. Quanto à resistência ao ácido clorídrico, 92,3% dos isolados de bezerros recém-nascidos resistiram ao pH 4,0, apresentando-se superior aos isolados de bezerros aos três meses de idade. No teste de antagonismo, os isolados, Be4 1m, Be1 2b e Be6 2a, identificados presuntivamente, como Lactobacillus salivarius, L. crispatus e L. pentosus, respectivamente, produziram média de halo de inibição superior a 10 mm de diâmetro e demonstraram resistência ao pH ácido e sais biliares, indicando potencial para serem utilizados como probióticos.

Lactic acid bacteria with probiotic potential from Nellore calves raised in semiarid / Bactérias láticas com potencial probiótico provenientes de bezerros nelore criados no semiárido

Colibacilosis is one of the major diseases of calves, causing huge losses. The aim in this study was to characterize and select lactic bacteria with probiotic potential from Nellore calves raised in northern Minas Gerais. Stool samples from six healthy calves were collected, with three days old and again at three months of age. After isolation, bacteria were enumerated and submitted to morphological and biochemical characterization with API 50 CH test, pH and acid resistance to bile salts and antagonist activity in vitro for three strains of Escherichia coli. The population of lactic acid bacteria was greater (p < 0.05) in feces of the calves at colostrum phase. For resistance to chloric acid, 92.3% of isolates from newborn calves resisted pH 4.0, presenting higher resistance than the isolates from calves at three months of age. In the antagonism test, the isolates Be4 1m, Be1 2b and Be6 2a were presumptively identified as Lactobacillus salivarius, L. crispatus and L. pentosus, respectively, and produced average inhibition zones greater than 10 mm of diameter and showed resistance acid pH and bile salts, indicating potential probiotics.(AU)

A colibacilose é uma das principais doenças que acomete bezerros nas fases iniciais, provocando prejuízos à bovinocultura. Nesta pesquisa, caracterizou-se e selecionou-se cepas de bactérias láticas com potencial probiótico, provenientes de bezerros Nelore criados no norte de Minas Gerais. Foram coletadas amostras fecais de bezerros hígidos contemporâneos, com três dias de vida e novamente aos três meses de idade. Após isolamento, realizou-se a quantificação, caracterização morfológica e bioquímica com teste API 50 CH, resistência a pH ácido e a sais biliares e atividade antagonista in vitro para três cepas de Escherichia coli. Verificou-se população superior (p < 0,05) de bactérias láticas nas fezes dos bezerros na fase colostral. Quanto à resistência ao ácido clorídrico, 92,3% dos isolados de bezerros recém-nascidos resistiram ao pH 4,0, apresentando-se superior aos isolados de bezerros aos três meses de idade. No teste de antagonismo, os isolados, Be4 1m, Be1 2b e Be6 2a, identificados presuntivamente, como Lactobacillus salivarius, L. crispatus e L. pentosus, respectivamente, produziram média de halo de inibição superior a 10 mm de diâmetro e demonstraram resistência ao pH ácido e sais biliares, indicando potencial para serem utilizados como probióticos.(AU)

Detection of enterotoxin A and cytotoxin B, and isolation of Clostridium difficile in piglets in Minas Gerais, Brazil / Detecção da enterotoxina A e citotoxina B e isolamento de Clostridium difficile em leitões em Minas Gerais, Brasil

Clostridium difficile has emerged as a major cause of neonatal colitis in piglets, displacing classic bacterial pathogens. However, there is no information regarding the distribution of this microorganism in pig farms in Brazil. In the present study, the presence of toxins A/B and of C. difficile strains in stool samples from 60 diarrheic or non-diarrheic newborn piglets (one to seven days old), from 15 different farms, was studied. The presence of toxins A/B was detected by ELISA and PCR was used to identify toxin A, toxin B and binary toxin gene in each isolated strain. C. difficile A/B toxins were detected in ten samples (16.7 percent). Of these, seven were from diarrheic and three were from non-diarrheic piglets. C. difficile was recovered from 12 out of 60 (20 percent) fecal samples. Of those, three strains were non-toxigenic (A-B-) and nine were toxigenic. Of the nine toxigenic strains, four were A+B+ strains and five were A-B+ strains. The presence of binary toxin observed in the present study was much higher (50 percent) than in previously reported studies. All three non-toxigenic strains were isolated from otherwise healthy piglets. The results suggest the occurrence of neonatal diarrhea by C. difficile in farms in Brazil.

Clostridium difficile tem sido relatado como o principal causador de colite neonatal em suínos. Apesar da crescente importância deste agente, não há dados sobre infecções causadas por C. difficile em suínos no Brasil. O objetivo do presente estudo foi detectar as toxinas A/B e isolar C. difficile a partir de 60 amostras de fezes de leitões diarreicos ou apararentemente saudáveis, com no máximo sete dias de vida, e oriundos de 15 granjas diferentes. As toxinas A/B foram detectadas por ELISA e uma PCR multiplex foi utilizada para detecção dos genes responsáveis pela codificação das toxinas A, B e toxina binária. As toxinas A/B de C. difficile foram detectadas em dez amostras de fezes (16.7 por cento). Dessas, sete eram de animais diarreicos e três de leitões aparentemente saudáveis. Foi possível isolar C. difficile em 12 das 60 (20 por cento) amostras trabalhadas. Dessas, três estirpes eram não-toxigênicas (A-B-) e nove eram toxigênicas, sendo quatro caracterizadas como A+B+ e cinco como A-B+. O gene responsável pela codificação da toxina binária foi encontrado em 50 por cento das estirpes isoladas, proporção superior ao relatado em estudos anteriores. Todas as estirpes não toxigênicas foram isoladas de animais não diarreicos. Os resultados encontrados sugerem a ocorrência de diarreia por C. difficile em granjas no Brasil.

Matched case-control study evaluating the frequency of the main agents associated with neonatal diarrhea in piglets / Estudo caso-controle pareado avaliando a frequência dos principais agentes causadores de diarréia neonatal em suínos no Rio Grande do Sul

A case-control study was carried out in litters of 1 to 7-day-old piglets to identify the main infectious agents involved with neonatal diarrhea in pigs. Fecal samples (n=276) from piglets were collected on pig farms in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, from May to September 2007. Litters with diarrhea were considered cases (n=129) and normal litters (n=147) controls. The samples were examined by latex agglutination test, PAGE, conventional isolating techniques, ELISA, PCR, and microscopic methods in order to detect rotavirus, bacterial pathogens (Escherichia coli, Clostridium perfringens type A and C, and Clostridium difficile), and parasites (Coccidian and Cryptosporidium spp.). Outbreaks of diarrhea were not observed during sampling. At least one agent was detected in fecal samples on 25 out of 28 farms (89.3 percent) and in 16 farms (57.1 percent) more than one agent was found. The main agents diagnosed were Coccidia (42.86 percent) and rotavirus (39.29 percent). The main agents identified in litters with diarrhea were Clostridium difficile (10.6 percent), Clostridium perfringens type A (8.8 percent) and rotavirus (7.5 percent); in control litters, Clostridium difficile (16.6 percent) and Coccidian (8.5 percent). Beta hemolytic Escherichia coli and Clostridium perfringens type C were not detected. When compared with controls, no agent was significantly associated with diarrhea in case litters. These findings stress the need for caution in the interpretation of laboratorial diagnosis of mild diarrhea in neonatal pigs, as the sole detection of an agent does not necessarily indicate that it is the cause of the problem.(AU)

Um estudo de caso-controle em leitegadas de um a sete dias de idade foi realizado com o objetivo de identificar os principais agentes infecciosos envolvidos na diarreia neonatal de leitões. As amostras de fezes (n=276) foram coletadas em granjas de suínos no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, no período de maio a setembro de 2007. Leitegadas com diarreia foram consideradas casos (n=147) e leitegadas normais, controles (n=129). As amostras foram examinadas através do teste de aglutinação em látex, PAGE, cultivo, ELISA, PCR e métodos microscópicos para a excreção dos principais agentes de diarreia: virais (rotavirus), bacterianos (Escherichia coli, Clostridium perfringens tipos A e tipo C e Clostridium difficile) e parasitários (coccídeos e Cryptosporidium spp.). Durante o período do estudo não foram observados surtos e a diarréia, quando presente, apresentou-se leve. Pelo menos um agente foi identificado nas amostras fecais de 25 entre 28 granjas (89,3 por cento) analisadas e em 16 granjas (57,1 por cento) mais de um agente foi detectado. Os principais agentes encontrados nas granjas foram coccídeos (42,86 por cento) e rotavírus (39,29 por cento). Os principais agentes detectados nas leitegadas com diarreia foram Clostridium difficile (10,6 por cento), Clostridium perfringens tipo A (8,8 por cento) e rotavírus (7,5 por cento). Por outro lado, nas leitegadas controle os agentes mais prevalentes foram Clostridium difficile (16,6 por cento) e coccídeos (8,5 por cento). E. coli Beta hemolítica e Clostridium perfringens tipo C não foram detectados. O presente estudo de caso-controle demonstrou que nenhum agente infeccioso esteve associado significativamente com diarreia (p>0.05). Esses achados reforçam a necessidade de que haja cuidado na interpretação de resultados de exames laboratoriais em materiais coletados de leitões com diarreia neonatal leve, pois a detecção isolada de um agente infeccioso não indica necessariamente que o mesmo seja a causa do problema.(AU)

Matched case-control study evaluating the frequency of the main agents associated with neonatal diarrhea in piglets / Estudo caso-controle pareado avaliando a frequência dos principais agentes causadores de diarréia neonatal em suínos no Rio Grande do Sul

A case-control study was carried out in litters of 1 to 7-day-old piglets to identify the main infectious agents involved with neonatal diarrhea in pigs. Fecal samples (n=276) from piglets were collected on pig farms in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, from May to September 2007. Litters with diarrhea were considered cases (n=129) and normal litters (n=147) controls. The samples were examined by latex agglutination test, PAGE, conventional isolating techniques, ELISA, PCR, and microscopic methods in order to detect rotavirus, bacterial pathogens (Escherichia coli, Clostridium perfringens type A and C, and Clostridium difficile), and parasites (Coccidian and Cryptosporidium spp.). Outbreaks of diarrhea were not observed during sampling. At least one agent was detected in fecal samples on 25 out of 28 farms (89.3 percent) and in 16 farms (57.1 percent) more than one agent was found. The main agents diagnosed were Coccidia (42.86 percent) and rotavirus (39.29 percent). The main agents identified in litters with diarrhea were Clostridium difficile (10.6 percent), Clostridium perfringens type A (8.8 percent) and rotavirus (7.5 percent); in control litters, Clostridium difficile (16.6 percent) and Coccidian (8.5 percent). Beta hemolytic Escherichia coli and Clostridium perfringens type C were not detected. When compared with controls, no agent was significantly associated with diarrhea in case litters. These findings stress the need for caution in the interpretation of laboratorial diagnosis of mild diarrhea in neonatal pigs, as the sole detection of an agent does not necessarily indicate that it is the cause of the problem.

Um estudo de caso-controle em leitegadas de um a sete dias de idade foi realizado com o objetivo de identificar os principais agentes infecciosos envolvidos na diarreia neonatal de leitões. As amostras de fezes (n=276) foram coletadas em granjas de suínos no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, no período de maio a setembro de 2007. Leitegadas com diarreia foram consideradas casos (n=147) e leitegadas normais, controles (n=129). As amostras foram examinadas através do teste de aglutinação em látex, PAGE, cultivo, ELISA, PCR e métodos microscópicos para a excreção dos principais agentes de diarreia: virais (rotavirus), bacterianos (Escherichia coli, Clostridium perfringens tipos A e tipo C e Clostridium difficile) e parasitários (coccídeos e Cryptosporidium spp.). Durante o período do estudo não foram observados surtos e a diarréia, quando presente, apresentou-se leve. Pelo menos um agente foi identificado nas amostras fecais de 25 entre 28 granjas (89,3 por cento) analisadas e em 16 granjas (57,1 por cento) mais de um agente foi detectado. Os principais agentes encontrados nas granjas foram coccídeos (42,86 por cento) e rotavírus (39,29 por cento). Os principais agentes detectados nas leitegadas com diarreia foram Clostridium difficile (10,6 por cento), Clostridium perfringens tipo A (8,8 por cento) e rotavírus (7,5 por cento). Por outro lado, nas leitegadas controle os agentes mais prevalentes foram Clostridium difficile (16,6 por cento) e coccídeos (8,5 por cento). E. coli Beta hemolítica e Clostridium perfringens tipo C não foram detectados. O presente estudo de caso-controle demonstrou que nenhum agente infeccioso esteve associado significativamente com diarreia (p>0.05). Esses achados reforçam a necessidade de que haja cuidado na interpretação de resultados de exames laboratoriais em materiais coletados de leitões com diarreia neonatal leve, pois a detecção isolada de um agente infeccioso não indica necessariamente que o mesmo seja a causa do problema.

Detection of enterotoxin A and cytotoxin B, and isolation of Clostridium difficile in piglets in Minas Gerais, Brazil

Clostridium difficile has emerged as a major cause of neonatal colitis in piglets, displacing classic bacterial pathogens. However, there is no information regarding the distribution of this microorganism in pig farms in Brazil. In the present study, the presence of toxins A/B and of C. difficile strains in stool samples from 60 diarrheic or non-diarrheic newborn piglets (one to seven days old), from 15 different farms, was studied. The presence of toxins A/B was detected by ELISA and PCR was used to identify toxin A, toxin B and binary toxin gene in each isolated strain. C. difficile A/B toxins were detected in ten samples (16.7%). Of these, seven were from diarrheic and three were from non-diarrheic piglets. C. difficile was recovered from 12 out of 60 (20%) fecal samples. Of those, three strains were non-toxigenic (A-B-) and nine were toxigenic. Of the nine toxigenic strains, four were A+B+ strains and five were A-B+ strains. The presence of binary toxin observed in the present study was much higher (50%) than in previously reported studies. All three non-toxigenic strains were isolated from otherwise healthy piglets. The results suggest the occurrence of neonatal diarrhea by C. difficile in farms in Brazil.

Clostridium difficile tem sido relatado como o principal causador de colite neonatal em suínos. Apesar da crescente importância deste agente, não há dados sobre infecções causadas por C. difficile em suínos no Brasil. O objetivo do presente estudo foi detectar as toxinas A/B e isolar C. difficile a partir de 60 amostras de fezes de leitões diarreicos ou apararentemente saudáveis, com no máximo sete dias de vida, e oriundos de 15 granjas diferentes. As toxinas A/B foram detectadas por ELISA e uma PCR multiplex foi utilizada para detecção dos genes responsáveis pela codificação das toxinas A, B e toxina binária. As toxinas A/B de C. difficile foram detectadas em dez amostras de fezes (16.7%). Dessas, sete eram de animais diarreicos e três de leitões aparentemente saudáveis. Foi possível isolar C. difficile em 12 das 60 (20%) amostras trabalhadas. Dessas, três estirpes eram não-toxigênicas (A-B-) e nove eram toxigênicas, sendo quatro caracterizadas como A+B+ e cinco como A-B+. O gene responsável pela codificação da toxina binária foi encontrado em 50% das estirpes isoladas, proporção superior ao relatado em estudos anteriores. Todas as estirpes não toxigênicas foram isoladas de animais não diarreicos. Os resultados encontrados sugerem a ocorrência de diarreia por C. difficile em granjas no Brasil.

Detection of enterotoxin A and cytotoxin B, and isolation of Clostridium difficile in piglets in Minas Gerais, Brazil

Clostridium difficile has emerged as a major cause of neonatal colitis in piglets, displacing classic bacterial pathogens. However, there is no information regarding the distribution of this microorganism in pig farms in Brazil. In the present study, the presence of toxins A/B and of C. difficile strains in stool samples from 60 diarrheic or non-diarrheic newborn piglets (one to seven days old), from 15 different farms, was studied. The presence of toxins A/B was detected by ELISA and PCR was used to identify toxin A, toxin B and binary toxin gene in each isolated strain. C. difficile A/B toxins were detected in ten samples (16.7%). Of these, seven were from diarrheic and three were from non-diarrheic piglets. C. difficile was recovered from 12 out of 60 (20%) fecal samples. Of those, three strains were non-toxigenic (A-B-) and nine were toxigenic. Of the nine toxigenic strains, four were A+B+ strains and five were A-B+ strains. The presence of binary toxin observed in the present study was much higher (50%) than in previously reported studies. All three non-toxigenic strains were isolated from otherwise healthy piglets. The results suggest the occurrence of neonatal diarrhea by C. difficile in farms in Brazil.

Clostridium difficile tem sido relatado como o principal causador de colite neonatal em suínos. Apesar da crescente importância deste agente, não há dados sobre infecções causadas por C. difficile em suínos no Brasil. O objetivo do presente estudo foi detectar as toxinas A/B e isolar C. difficile a partir de 60 amostras de fezes de leitões diarreicos ou apararentemente saudáveis, com no máximo sete dias de vida, e oriundos de 15 granjas diferentes. As toxinas A/B foram detectadas por ELISA e uma PCR multiplex foi utilizada para detecção dos genes responsáveis pela codificação das toxinas A, B e toxina binária. As toxinas A/B de C. difficile foram detectadas em dez amostras de fezes (16.7%). Dessas, sete eram de animais diarreicos e três de leitões aparentemente saudáveis. Foi possível isolar C. difficile em 12 das 60 (20%) amostras trabalhadas. Dessas, três estirpes eram não-toxigênicas (A-B-) e nove eram toxigênicas, sendo quatro caracterizadas como A+B+ e cinco como A-B+. O gene responsável pela codificação da toxina binária foi encontrado em 50% das estirpes isoladas, proporção superior ao relatado em estudos anteriores. Todas as estirpes não toxigênicas foram isoladas de animais não diarreicos. Os resultados encontrados sugerem a ocorrência de diarreia por C. difficile em granjas no Brasil.

Detection of enterotoxin A and cytotoxin B, and isolation of Clostridium difficile in piglets in Minas Gerais, Brazil

Clostridium difficile has emerged as a major cause of neonatal colitis in piglets, displacing classic bacterial pathogens. However, there is no information regarding the distribution of this microorganism in pig farms in Brazil. In the present study, the presence of toxins A/B and of C. difficile strains in stool samples from 60 diarrheic or non-diarrheic newborn piglets (one to seven days old), from 15 different farms, was studied. The presence of toxins A/B was detected by ELISA and PCR was used to identify toxin A, toxin B and binary toxin gene in each isolated strain. C. difficile A/B toxins were detected in ten samples (16.7%). Of these, seven were from diarrheic and three were from non-diarrheic piglets. C. difficile was recovered from 12 out of 60 (20%) fecal samples. Of those, three strains were non-toxigenic (A-B-) and nine were toxigenic. Of the nine toxigenic strains, four were A+B+ strains and five were A-B+ strains. The presence of binary toxin observed in the present study was much higher (50%) than in previously reported studies. All three non-toxigenic strains were isolated from otherwise healthy piglets. The results suggest the occurrence of neonatal diarrhea by C. difficile in farms in Brazil.

Clostridium difficile tem sido relatado como o principal causador de colite neonatal em suínos. Apesar da crescente importância deste agente, não há dados sobre infecções causadas por C. difficile em suínos no Brasil. O objetivo do presente estudo foi detectar as toxinas A/B e isolar C. difficile a partir de 60 amostras de fezes de leitões diarreicos ou apararentemente saudáveis, com no máximo sete dias de vida, e oriundos de 15 granjas diferentes. As toxinas A/B foram detectadas por ELISA e uma PCR multiplex foi utilizada para detecção dos genes responsáveis pela codificação das toxinas A, B e toxina binária. As toxinas A/B de C. difficile foram detectadas em dez amostras de fezes (16.7%). Dessas, sete eram de animais diarreicos e três de leitões aparentemente saudáveis. Foi possível isolar C. difficile em 12 das 60 (20%) amostras trabalhadas. Dessas, três estirpes eram não-toxigênicas (A-B-) e nove eram toxigênicas, sendo quatro caracterizadas como A+B+ e cinco como A-B+. O gene responsável pela codificação da toxina binária foi encontrado em 50% das estirpes isoladas, proporção superior ao relatado em estudos anteriores. Todas as estirpes não toxigênicas foram isoladas de animais não diarreicos. Os resultados encontrados sugerem a ocorrência de diarreia por C. difficile em granjas no Brasil.

Diarréia neonatal de origem bacteriana em bovinos

Neonatal diarrhea In bovines is a complex clinical manifestation, normally responsible for high rates of morbidity and mortality. The losses are observed not only due to the need of providing medication but also through mortality, reduction in growth and performance, compromizing weight gain and milk yields rates. The multiple aetiology of the disease involves the interaction of several variables, including causing agents, host and environment. In this revision the clinical aspects of colibacilosis and salmonellosis, its prevalence and pathogeny are considered. The sanitary management of colibacilosis, its prevention and treatment are also reviewed.

Diarréia neonatal em bovinos é um quadro complexo, normalmente responsável por altas taxas de morbidade e mortalidade. Os prejuízos são observados não somente nos gastos com a medicação, mas também na perda do animal em caso de morte e na redução do desenvolvimento e do desempenho do futuro animal adulto, comprometendo os índices de ganho de peso ou produção leiteira. A etiologia múltipla da enfermidade envolve a interação de diversas variáveis dos agentes, hospedeiro e meio ambiente. Nesta revisão são abordados os aspectos clínicos da colibacilose sanitário, a prevenção e o tratamento são também abordados.