Diagnóstico hematológico de coinfecção por Ehrlichia spp. e Hepatozoon canis em cães no semiárido da Paraíba / Hematogical diagnosis of coinfection by Ehrlichia spp. and Hepatozoon canis in dogs in the semi-arid of Paraiba

Dentre as hemoparasitoses com maior frequência de transmissão por carrapatos pode-se destacar a Erliquiose, a Hepatozoonose, a Anaplasmose e a Babesiose. A coinfecção por esses agentes são frequentes na rotina clínica; no entanto, poucas são as descrições sobre a ocorrência simultânea desses agentes em hemogramas. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi relatar os casos de quatro cães diagnosticados com coinfecção por Ehrlichia spp. e Hepatozoon canis, os quais foram atendidos no Hospital Veterinário Adílio Santos de Azevedo (HV-ASA) do Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia da Paraíba (IFPB), campus Sousa. Durante a avaliação clínica, relatou-se que os pacientes apresentavam, de maneira em comum, oligodipsia e hiporexia, além de histórico de presença de carrapatos. Em seguida, foram realizados hemogramas, que revelaram que todos os animais apresentavam anemia leve a moderada. Além disso, notou-se que o animal 1 estava com trombocitopenia e os animais 2 e 3, neutrofilia. Na pesquisa de hemoparasitas em esfregaço sanguíneo, observou-se coinfecção por H. canis e E. spp. nos quatro animais. Desta forma, este relato demonstrou a importância do uso do hemograma e da pesquisa dos agentes causadores das hemoparasitoses, através do esfregaço sanguíneo. Ressalte-se que o esfregaço sanguíneo, embora seja um método inespecífico e de baixa sensibilidade, pode e deve ser adotado como rotina, por ser uma técnica simples, rápida, barata, pouco invasiva e de diagnóstico definitivo.

Among the hemoparasitoses with the highest frequency of transmission by ticks, ehrlichiosis, hepatozoonosis, anaplasmosis, and babesiosis may be highlighted. The coinfection with these agents is frequent in clinical routine; however, there are few descriptions of the simultaneous occurrence of these agents in blood counts. Therefore, this work aimed to report the cases of four dogs diagnosed with Ehrlichia spp. and Hepatozoon canis, which were treated at the Adílio Santos de Azevedo Veterinary Hospital (HV-ASA), of the Federal Institute of Education, Science, and Technology of Paraíba (IFPB), Sousa campus. During the clinical evaluation, it was reported that the patients had oligodipsia and hyporexia in common, in addition to a history of tick presence. Then, blood counts were performed, which revealed that all animals had mild to moderate anemia. In addition, it was noted that animal 1 had thrombocytopenia and animals 2 and 3 had neutrophilia. In the investigation of hemoparasites in blood smears, co-infection with H. canis and E. spp. was observed in the four animals. Thus, this report demonstrated the importance of using the blood count and researching the causative agents of hemoparasitosis, through the blood smear. It should be noted that the blood smear, although it is a non-specific and low-sensitivity method, can and should be adopted as a routine, as it is a simple, fast, inexpensive, minimally invasive, and definitive diagnostic technique.

Babesiose: um ponto de vista diagnóstico: relato de caso / Babesiosis: a diagnostic point of view - case report

A babesiose canina é uma doença transmitida pela picada de carrapatos, como o Rhipicephalus sanguineus, vetor de Babesia vogeli, um hemoprotozoário de extrema importância na Medicina Veterinária. Esse protozoário parasita os eritrócitos, levando a uma hemólise. O animal infectado pode apresentar febre, letargia, anorexia, anemia, mucosas pálidas ou ictéricas, hematúria e hepatoesplenomegalia. O diagnóstico presuntivo da babesiose canina pode se basear em histórico, anamnese ou exame físico, porém a confirmação é obtida por meio do exame parasitológico. Durante o atendimento, um cão, macho, cinco anos, boxer, apresentou apatia, hiporexia, hematúria, hipertermia. Para confirmação de diagnóstico foram solicitados os exames complementares: hemograma, alanina aminotransferase e creatinina. A única alteração encontrada foi diminuição de plaquetas, porém no esfregaço sanguíneo foram observadas estruturas de Babesia sp. livres e parasitando hemácias.(AU)

Canine babesiosis is a disease transmitted through tick bites, such as Rhipicephalus sanguineus, vector of Babesia vogeli, a hemoprotozoan of extreme importance in Veterinary Medicine. This protozoan parasites erythrocytes leading to hemolysis. The infected animal may have fever, lethargy, anorexia, anemia, pale or jaundiced mucous membranes, hematuria and hepatosplenomegaly. The presumptive diagnosis of babesiosis can be based on history, anamnesis or physical examination, but the confirmation is obtained through parasitological examination. During the service, a male dog, five years old, boxer, presented apathy, hyporexia, hematuria, hyperthermia. To confirm the diagnosis, a complete blood count, alanine aminotransferase and creatinine were requested. The only alteration found was a decrease in platelets, however, in the blood smear, Babesia sp. were detected free and parasitizing red blood cells.(AU)

Anemia hemolítica imunomediada associada à micoplasmose em um cão / Associated immunomediated hemolytic anemia mycoplasmosis in a dog

A anemia hemolítica imunomediada (AHIM) é uma reação de hipersensibilidade tipo II onde ocorre o aumento da destruição das hemácias. Ela pode ser dividida em primaria, caracterizada por não ter uma causa subjacente, e em secundária, pode ser causada por agentes infecciosos, como a micoplasmose, neoplasias, medicamentos e transfusões. O objetivo desse trabalho foi realizar uma análise clínica e laboratorial de um cão com anemia hemolítica imunomediada decorrente da Mycoplasma spp. Uma cadela da raça Pit Bull, com 05 meses de idade, foi levada ao hospital apresentando vômitos, diarreia e anorexia. No exame físico, foi possível observar a presença de carrapatos e mucosas ictéricas. Nos exames hematológicos foi possível evidenciaras alterações morfológicas de hemácias que caracterizavam anemia hemolítica imunomediada e a presença do parasita Mycoplasma spp. Nas análises bioquímicas se observou níveis séricos aumentados de creatinina e ureia. Pode-se concluir que, a observação de Mycoplasma spp. em esfregaços sanguíneos associada às alterações morfológicas eritrocitárias são de relevante importância para o diagnóstico de AHIM, auxiliando assim na instituição da melhor conduta terapêutica, contribuindo para o prognóstico do paciente.(AU)

Immune-mediated hemolytic anemia (AHIM) is a type II hypersensitivity reaction, where red blood cell destruction occurs or increases. It can be divided into primary, characterized by not having an underlying cause, and secondary, which can be caused by infectious agents, such as mycoplasmosis, neoplasms, drugs and transfusions. The objective of this work was to perform a clinical and laboratory analysis of a dog with immune-mediated hemolytic anemia due to Mycoplasma spp. A five-months-old female Pit Bull dog was taken to the hospital presenting vomiting, diarrhea and anorexia. On physical examination, it was possible to observe the presence of ticks and icteric mucous membranes. In hematological exams, it was possible to show morphological changes in red blood cells that characterize immune-mediated hemolytic anemia and the presence of the parasite Mycoplasma spp. In the biochemical analyzes it was observed increased serum levels of creatinine and urea. It can be concluded that the observation of Mycoplasma spp. in blood vessels associated with erythrocyte morphological changes are of relevant importance for the diagnosis of AHIM, thus assisting in the practice of a better method of therapy, contributing to the patient's prognosis.(AU)

First detection of Trypanosoma vivax in cattle in the state of Bahia, Brazil, based on parasitological and molecular analyses / Primeira detecção de Trypanosoma vivax em bovinos no estado da Bahia, Brasil baseada em análises parasitológica e molecular

We report the first detection of Trypanosoma vivax in Bahia state based on blood smear and PCR analyses. A total of 623 bovine blood samples were collected over two years. Parasitological analysis by smear technique detected the presence of T. vivax in 0.3%, while molecular analysis by PCR showed a prevalence in 18.9% of the samples. This study demonstrated the higher sensitivity of molecular analysis in the diagnosis of hemoparasitosis caused by T. vivax in dairy cattle herds.(AU)

Relatamos a primeira detecção de T. vivax no estado da Bahia baseada em esfregaços sanguíneos e PCR. Foram coletadas 623 amostras de sangue de bovinos ao longo de dois anos. An análise dos esfregaços detectou a presença do T. vivax em 0,3% delas, enquanto a detecção molecular por PCR mostrou uma prevalência em 18,9%. Este estudo evidenciou a maior sensibilidade da análise molecular no diagnóstico da hemoparasitose causada pelo T. vivax, em rebanhos bovinos leiteiros.(AU)

Perfil hematológico e epidemiológico em cães com babesiose, no município de Fortaleza/CE / Hematological and epidemiological profile in dogs with babesiosis in the municipality of Fortaleza/CE

A babesiose canina é uma hemoparasitose, causada por um protozoário do gênero Babesia spp., que parasita os eritrócitos de animais infectados. Este estudo teve como objetivo analisar o perfil hematológico e epidemiológico de cães diagnosticados com babesiose, através da visualização, no esfregaço sanguíneo, de merozoítos no interior dos eritrócitos, na cidade de Fortaleza/CE, durante cinco anos (2015 a 2019). No período, foram observados 38 cães acometidos. O segundo semestre, o período seco, foi o que apresentou um maior número de casos (60,5%). Observou-se maior frequência em cães machos (57,8%), sem raça definida (57,8%), com menos de um ano de idade (73,6%). As alterações hematológicas mais frequentes foram trombocitopenia (86,8%) e anemia (81,5%). Sugere-se, nesses casos, a inclusão da babesiose como diagnóstico diferencial. Apesar da baixa sensibilidade, a pesquisa de hemoparasitos, no esfregaço sanguíneo, pode ser utilizada na rotina clínica.

Canine babesiosis is a hemoparasitosis caused by a protozoan of the genus Babesia spp., that parasitize the erythrocytes of infected animals. This study aimed to analyze the hematological and epidemiological profile of dogs diagnosed with babesiosis, through visualization in blood smear of merozoites inside erythrocytes, in the city of Fortaleza/CE, for five years (2015 to 2019). During the period, 38 affected dogs were observed. The second half, the dry period, was the one with the highest number of cases (60.5%). A higher frequency was observed in male dogs (57.8%), mixed breed (57.8%) under one year of age (73.6%). The most frequent hematological changes were thrombocytopenia (86.8%) and anemia (81.5%). In these cases, it is suggested to include babesiosis as a differential diagnosis. Despite the low sensitivity, the search for hemoparasites in the blood smear can be used in the clinical routine.

Anemia hemolítica imunomediada associada à micoplasmose em um cão / Associated immunomediated hemolytic anemia mycoplasmosis in a dog

A anemia hemolítica imunomediada (AHIM) é uma reação de hipersensibilidade tipo II onde ocorre o aumento da destruição das hemácias. Ela pode ser dividida em primaria, caracterizada por não ter uma causa subjacente, e em secundária, pode ser causada por agentes infecciosos, como a micoplasmose, neoplasias, medicamentos e transfusões. O objetivo desse trabalho foi realizar uma análise clínica e laboratorial de um cão com anemia hemolítica imunomediada decorrente da Mycoplasma spp. Uma cadela da raça Pit Bull, com 05 meses de idade, foi levada ao hospital apresentando vômitos, diarreia e anorexia. No exame físico, foi possível observar a presença de carrapatos e mucosas ictéricas. Nos exames hematológicos foi possível evidenciaras alterações morfológicas de hemácias que caracterizavam anemia hemolítica imunomediada e a presença do parasita Mycoplasma spp. Nas análises bioquímicas se observou níveis séricos aumentados de creatinina e ureia. Pode-se concluir que, a observação de Mycoplasma spp. em esfregaços sanguíneos associada às alterações morfológicas eritrocitárias são de relevante importância para o diagnóstico de AHIM, auxiliando assim na instituição da melhor conduta terapêutica, contribuindo para o prognóstico do paciente.

Immune-mediated hemolytic anemia (AHIM) is a type II hypersensitivity reaction, where red blood cell destruction occurs or increases. It can be divided into primary, characterized by not having an underlying cause, and secondary, which can be caused by infectious agents, such as mycoplasmosis, neoplasms, drugs and transfusions. The objective of this work was to perform a clinical and laboratory analysis of a dog with immune-mediated hemolytic anemia due to Mycoplasma spp. A five-months-old female Pit Bull dog was taken to the hospital presenting vomiting, diarrhea and anorexia. On physical examination, it was possible to observe the presence of ticks and icteric mucous membranes. In hematological exams, it was possible to show morphological changes in red blood cells that characterize immune-mediated hemolytic anemia and the presence of the parasite Mycoplasma spp. In the biochemical analyzes it was observed increased serum levels of creatinine and urea. It can be concluded that the observation of Mycoplasma spp. in blood vessels associated with erythrocyte morphological changes are of relevant importance for the diagnosis of AHIM, thus assisting in the practice of a better method of therapy, contributing to the patient's prognosis.

First detection of Trypanosoma vivax in cattle in the state of Bahia, Brazil, based on parasitological and molecular analyses / Primeira detecção de Trypanosoma vivax em bovinos no estado da Bahia, Brasil baseada em análises parasitológica e molecular

We report the first detection of Trypanosoma vivax in Bahia state based on blood smear and PCR analyses. A total of 623 bovine blood samples were collected over two years. Parasitological analysis by smear technique detected the presence of T. vivax in 0.3%, while molecular analysis by PCR showed a prevalence in 18.9% of the samples. This study demonstrated the higher sensitivity of molecular analysis in the diagnosis of hemoparasitosis caused by T. vivax in dairy cattle herds.

Relatamos a primeira detecção de T. vivax no estado da Bahia baseada em esfregaços sanguíneos e PCR. Foram coletadas 623 amostras de sangue de bovinos ao longo de dois anos. An análise dos esfregaços detectou a presença do T. vivax em 0,3% delas, enquanto a detecção molecular por PCR mostrou uma prevalência em 18,9%. Este estudo evidenciou a maior sensibilidade da análise molecular no diagnóstico da hemoparasitose causada pelo T. vivax, em rebanhos bovinos leiteiros.

Valor diagnóstico de la morfología eritrocitaria en las anemias / Diagnostic value of red cell morphology in anemias / Valor diagnóstico da morfologia eritrocitária nas anemias

A pesar de la disponibilidad de modernos equipos automatizados, el estudio de la morfología eritrocitaria en extendidos de sangre periférica continúa desempeñando un rol fundamental en el diagnóstico de las anemias. En 2005, el Grupo Internacional de Consenso para la Revisión en Hematología publicó un documento con los criterios homogéneos de acción recomendados para la selección de los frotis sanguíneos que deben ser analizados mediante microscopía. Recientemente, el Comité Internacional de Estandarización en Hematología (ICSH) elaboró una serie de recomendaciones para unificar la nomenclatura y graduar los hallazgos morfológicos anormales en el estudio de la sangre periférica. El objetivo de este trabajo fue presentar a los lectores una revisión del tema y las últimas recomendaciones de los grupos de expertos a nivel nacional e internacional para el estudio de las anemias mediante la evaluación de la morfología eritrocitaria en el frotis de sangre periférica.

Despite the availability of modern automated equipment, the study of red cell morphology in peripheral blood smears continues to play a key role in the diagnosis of anemias. In 2005, the International Consensus Group for Hematology Review published a document with uniform criteria recommended action for the selection of blood smears to be analyzed by microscopy. Recently, the International Committee for Standardization in Hematology (ICSH) produced a series of recommendations to unify the nomenclature and graduate abnormal morphological findings in the study of peripheral blood. The aim of our work was to present readers with a review of the topic and the latest recommendations of the expert groups at national and international levels for the study of anemias by evaluating red cell morphology in the peripheral blood smear.

Apesar da disponibilidade de equipamentos automatizados modernos, o estudo da morfologia eritrocitária em esfregaços de sangue periférico continua a desempenhar um papel fundamental no diagnóstico das anemias. Em 2005, o Grupo Internacional de Consenso em Revisões Hematológicas publicou um documento com os critérios uniformes de ação recomendados para a seleção dos esfregaços sanguíneos que devem ser analisados através do microscópio. Recentemente, a Comissão Internacional de Padronização em Hematologia (ICSH) produziu uma série de recomendações para unificar a nomenclatura e graduar os achados morfológicos anormais no estudo do sangue periférico. O objetivo deste trabalho foi apresentar aos leitores uma revisão do tema e as últimas recomendações dos grupos de especialistas em nível nacional e internacional para o estudo de anemias através da avaliação da morfologia eritrocitária no esfregaço de sangue periférico.

Investigação clínica e comparação do esfregaço sanguíneo e PCR para diagnóstico de hemoparasitas em equinos de esporte e tração (carroceiros) / Clinical investigation and comparison of blood smear and PCR to diagnose haemoparasites in Sports Horses and Traction Horses (Cart Horses)

Na clínica médica de equinos, explora-se o perfil hematológico do animal, geralmente, com a finalidade de encontrar alterações que não foram constatadas ao exame clínico. A pesquisa de hematozoários em equinos, muitas vezes, apresenta resultados conflitantes entre o quadro clínico apresentado pelo animal e o resultado laboratorial, levantando a hipótese de que a técnica de pesquisa de hematozoários seja a responsável por falhas diagnósticas. Este estudo visa comparar os valores obtidos em exames hematológicos de 15 equinos de esporte e 15 equinos de tração (carroceiros), levando-se em consideração diferenças como características nutricionais, estado de higidez e tipo de atividade realizada, e comparar as diferentes técnicas de pesquisa de hematozoários, como esfregaço sanguíneo e PCR. Verificou-se que apenas os equinos de tração apresentaram valores médios de hemácias, hematócrito e hemoglobina abaixo do considerado fisiológico para a espécie, embora 100% dos animais, de ambos os grupos experimentais, tenham sido considerados positivos para hemoparasitoses por PCR. Verifica-se a superioridade do método de pesquisa de hemoparasitas por PCR, em comparação com esfregaço sanguíneo, realizado por diferentes técnicas, visto que apenas 33,3% dos animais foram considerados positivos para Theileria equi por esta técnica, enquanto que o PCR revelou 100% de positividade, para Theileria equi, Babesia caballi e infecção mista. Nenhum dos animais estudados foi diagnosticado com Anaplasma phagocytophilum (Ehrlichia equi) e Ehrlichia risticcii (Neoricketsia risticii). Verifica-se, então, que muitos dos diagnósticos de ausência de hemoparasitose por exame hematológico e ou esfregaço sanguíneo são errôneos, devido à baixa sensibilidade da técnica e podem repercutir em falha no tratamento ou disseminação dos hemoparasitos e das hemoparasitoses. Ressalta-se, então, a importância de exames como o PCR na elaboração de diagnóstico definitivo.(AU)

The blood profile is usually explored in equine medicine to find changes not detected through clinical examination. The haematozoa search in horses, often presents conflicting results between the clinical picture presented by the animal and the laboratory result, raising the hypothesis that the hematozoa search technique is responsible for diagnostic failures. Thus, this study aims to compare the values obtained from blood tests in 15 sports horses and 15 traction horses (cart horses), taking into account differences such as nutritional characteristics, state of health and type of activity performed, and to compare the different techniques with hematozoa search, as blood smear and PCR. It was found that only the traction horses showed mean values of red blood cells, hematocrit and hemoglobin below the considered physiological for the species, although 100% of the animals of both experimental groups were considered positive for hemoparasitoses by PCR. It was verified the superiority of hemoparasites search method by PCR, compared with blood smear performed by different techniques, since only 33.3% of the horses were considered positive for Theileria equi by this technique, while the PCR showed 100% positive for Theileria equi, Babesia caballi and mixed infection. None of the animals studied was diagnosed with Anaplasma phagocytophilum (Ehrlichia equi) and Ehrlichia risticcii (Neoricketsia risticii). It is shown that many cases of hemoparasitosis absence of diagnostic by hematological exams and or blood smears are erroneous due to the low sensitivity of the technique and may impact on treatment failure or spread of blood parasites and hemoparasitoses. It is noteworthy to stres the importance of tests such as PCR for the definitive diagnosis.(AU)

Investigação clínica e comparação do esfregaço sanguíneo e PCR para diagnóstico de hemoparasitas em equinos de esporte e tração (carroceiros) / Clinical investigation and comparison of blood smear and PCR to diagnose haemoparasites in Sports Horses and Traction Horses (Cart Horses)

Na clínica médica de equinos, explora-se o perfil hematológico do animal, geralmente, com a finalidade de encontrar alterações que não foram constatadas ao exame clínico. A pesquisa de hematozoários em equinos, muitas vezes, apresenta resultados conflitantes entre o quadro clínico apresentado pelo animal e o resultado laboratorial, levantando a hipótese de que a técnica de pesquisa de hematozoários seja a responsável por falhas diagnósticas. Este estudo visa comparar os valores obtidos em exames hematológicos de 15 equinos de esporte e 15 equinos de tração (carroceiros), levando-se em consideração diferenças como características nutricionais, estado de higidez e tipo de atividade realizada, e comparar as diferentes técnicas de pesquisa de hematozoários, como esfregaço sanguíneo e PCR. Verificou-se que apenas os equinos de tração apresentaram valores médios de hemácias, hematócrito e hemoglobina abaixo do considerado fisiológico para a espécie, embora 100% dos animais, de ambos os grupos experimentais, tenham sido considerados positivos para hemoparasitoses por PCR. Verifica-se a superioridade do método de pesquisa de hemoparasitas por PCR, em comparação com esfregaço sanguíneo, realizado por diferentes técnicas, visto que apenas 33,3% dos animais foram considerados positivos para Theileria equi por esta técnica, enquanto que o PCR revelou 100% de positividade, para Theileria equi, Babesia caballi e infecção mista. Nenhum dos animais estudados foi diagnosticado com Anaplasma phagocytophilum (Ehrlichia equi) e Ehrlichia risticcii (Neoricketsia risticii). Verifica-se, então, que muitos dos diagnósticos de ausência de hemoparasitose por exame hematológico e ou esfregaço sanguíneo são errôneos, devido à baixa sensibilidade da técnica e podem repercutir em falha no tratamento ou disseminação dos hemoparasitos e das hemoparasitoses. Ressalta-se, então, a importância de exames como o PCR na elaboração de diagnóstico definitivo.(AU)

The blood profile is usually explored in equine medicine to find changes not detected through clinical examination. The haematozoa search in horses, often presents conflicting results between the clinical picture presented by the animal and the laboratory result, raising the hypothesis that the hematozoa search technique is responsible for diagnostic failures. Thus, this study aims to compare the values obtained from blood tests in 15 sports horses and 15 traction horses (cart horses), taking into account differences such as nutritional characteristics, state of health and type of activity performed, and to compare the different techniques with hematozoa search, as blood smear and PCR. It was found that only the traction horses showed mean values of red blood cells, hematocrit and hemoglobin below the considered physiological for the species, although 100% of the animals of both experimental groups were considered positive for hemoparasitoses by PCR. It was verified the superiority of hemoparasites search method by PCR, compared with blood smear performed by different techniques, since only 33.3% of the horses were considered positive for Theileria equi by this technique, while the PCR showed 100% positive for Theileria equi, Babesia caballi and mixed infection. None of the animals studied was diagnosed with Anaplasma phagocytophilum (Ehrlichia equi) and Ehrlichia risticcii (Neoricketsia risticii). It is shown that many cases of hemoparasitosis absence of diagnostic by hematological exams and or blood smears are erroneous due to the low sensitivity of the technique and may impact on treatment failure or spread of blood parasites and hemoparasitoses. It is noteworthy to stres the importance of tests such as PCR for the definitive diagnosis.(AU)

Bovine babesiosis and anaplasmosis complex: diagnosis and evaluation of the risk factors from Bahia, Brazil / Complexo tristeza parasitária bovina: diagnóstico e avaliação dos fatores de risco na Bahia, Brasil

Direct diagnoses were made by using - blood smears and nested PCR (nPCR) tests on 309 blood samples from crossbred dairy cattle in the municipality of Ibicaraí, Bahia. From diagnostic blood smear slides, the observed parasitic frequencies were 31.1% for Anaplasma marginale and 20.4% for Babesia sp. From nPCR diagnoses, they were 63% for A. marginale, 34% for Babesia bigemina and 20.4% for Babesia bovis. There were significant differences (P <0.01) between the two diagnostic methods (nPCR and blood smear slides). The compliance obtained from the kappa test was 0.41 and 0.48 for A. marginale and Babesia sp., respectively. The tick samples from the six farms analyzed using nPCR were only positive for A. marginale. Evaluation of the risk factors relating to the presence of ticks and the age of the animals showed that there was a significant association (P <0.01) with the frequency of animals infected with both pathogens. Therefore, under the conditions studied, nPCR proved to be a good tool for diagnosing the agents of the bovine babesiosis and anaplasmosis complex because of its sensitivity and specificity in comparison with blood smears. The municipality of Ibicaraí is an area with endemic prevalence of bovine babesiosis and anaplasmosis confirmed by nPCR and A. marginale is the main agent of the disease.

Realizou-se o diagnóstico direto por esfregaço sanguíneo e nested PCR (nPCR) em 309 amostras de sangue de bovinos mestiços leiteiros provenientes do município de Ibicaraí, Bahia. A frequência observada no diagnóstico por lâminas de esfregaço sanguíneo foi 31,1% para Anaplasma marginale e 20,4% para Babesia sp. Enquanto que no diagnóstico por nPCR foi 63% para A. marginale, 34% para Babesia bigemina e 20,4% Babesia bovis. Verificaram-se diferenças significativas (P<0,01) na comparação entre os dois métodos de diagnósticos (nPCR e esfregaço sanguíneo). A concordância ao teste KAPPA obtida foi de 0,41 e 0,48 para A. marginale e Babesia sp., respectivamente. As amostras de carrapatos das seis propriedades analisadas por nPCR foram positivas apenas para A. marginale. Na avaliação dos fatores de risco verificou-se que a presença de carrapato e idade dos animais apresentaram associação significativa (P<0,01) com a frequência de animais infectados por ambos os patógenos analisados por nPCR. Portanto, nas condições estudadas, a nPCR revelou-se uma boa ferramenta para diagnóstico dos agentes do complexo tristeza parasitária bovina (TPB) devido a sensibilidade e especificidade, quando comparado ao esfregaço sanguíneo. O município de Ibicaraí apresenta-se como uma área endêmica para TPB com prevalência comprovada através de nPCR e, A. marginale o principal agente encontrado.

Bovine babesiosis and anaplasmosis complex: diagnosis and evaluation of the risk factors from Bahia, Brazil / Complexo tristeza parasitária bovina: diagnóstico e avaliação dos fatores de risco na Bahia, Brasil

Direct diagnoses were made by using - blood smears and nested PCR (nPCR) tests on 309 blood samples from crossbred dairy cattle in the municipality of Ibicaraí, Bahia. From diagnostic blood smear slides, the observed parasitic frequencies were 31.1% for Anaplasma marginale and 20.4% for Babesia sp. From nPCR diagnoses, they were 63% for A. marginale, 34% for Babesia bigemina and 20.4% for Babesia bovis. There were significant differences (P <0.01) between the two diagnostic methods (nPCR and blood smear slides). The compliance obtained from the kappa test was 0.41 and 0.48 for A. marginale and Babesia sp., respectively. The tick samples from the six farms analyzed using nPCR were only positive for A. marginale. Evaluation of the risk factors relating to the presence of ticks and the age of the animals showed that there was a significant association (P <0.01) with the frequency of animals infected with both pathogens. Therefore, under the conditions studied, nPCR proved to be a good tool for diagnosing the agents of the bovine babesiosis and anaplasmosis complex because of its sensitivity and specificity in comparison with blood smears. The municipality of Ibicaraí is an area with endemic prevalence of bovine babesiosis and anaplasmosis confirmed by nPCR and A. marginale is the main agent of the disease.

Realizou-se o diagnóstico direto por esfregaço sanguíneo e nested PCR (nPCR) em 309 amostras de sangue de bovinos mestiços leiteiros provenientes do município de Ibicaraí, Bahia. A frequência observada no diagnóstico por lâminas de esfregaço sanguíneo foi 31,1% para Anaplasma marginale e 20,4% para Babesia sp. Enquanto que no diagnóstico por nPCR foi 63% para A. marginale, 34% para Babesia bigemina e 20,4% Babesia bovis. Verificaram-se diferenças significativas (P<0,01) na comparação entre os dois métodos de diagnósticos (nPCR e esfregaço sanguíneo). A concordância ao teste KAPPA obtida foi de 0,41 e 0,48 para A. marginale e Babesia sp., respectivamente. As amostras de carrapatos das seis propriedades analisadas por nPCR foram positivas apenas para A. marginale. Na avaliação dos fatores de risco verificou-se que a presença de carrapato e idade dos animais apresentaram associação significativa (P<0,01) com a frequência de animais infectados por ambos os patógenos analisados por nPCR. Portanto, nas condições estudadas, a nPCR revelou-se uma boa ferramenta para diagnóstico dos agentes do complexo tristeza parasitária bovina (TPB) devido a sensibilidade e especificidade, quando comparado ao esfregaço sanguíneo. O município de Ibicaraí apresenta-se como uma área endêmica para TPB com prevalência comprovada através de nPCR e, A. marginale o principal agente encontrado.

Estudo longitudinal dos fatores de risco para anaplasmose e transmissão transplacentária em rebanhos bovinos / Longitudinal study of risk factors for anaplasmosis and transplacental transmission in herd cattle

Anaplasma marginale, bacteria that occurs in tropical and subtropical areas throughout the world, isresponsible for causing a disease that is one of the most constraint to cattle production in many countries.The present work aimed to investigate potential risk factors for anaplasmosis and the occurrence oftransplacental transmission by molecular and serological assays in cattle. A total of 22 calves wererandomly sampled and monitored during four years; the presence of infection/exposure to A. marginalewas assessed by a semi-nested PCR assay targeting msp-5 gene of A. marginale, indirect ELISA fordetection of IgG antibodies to A. marginale and blood smears. The A. marginale infection prevalencedata were analyzed in relation to risk factors, using chi-squared, odds ratio and multiple logisticregressions. DNA amplification results revealed a frequency of infection with A. marginale of 41%(9/22) in the newborn calves before colostrum suckling. However, only 14% (3/22) of newborn calveswere seropositive for A. marginale. All calves were positive to A. marginale by PCR and microscopicexamination of blood smears before the two and fourth month of age, respectively. The main risk factorsassociated with seroprevalence were breed (OR=36.2), tick infestation (OR=3.44) and stocking density(OR=3.28). The results indicated that exposure of cattle to A. marginale was common in dairy herdsand endemic instability situation probably is due to inadequate antibody production in cows or geneticvariability of pathogen. This study still demonstrated that in addition to transmission of A. marginaleby ticks and flies, the transplacental transmission is very important and should be the target of diseasecontrol programs in Brazil.(AU)

Anaplasma marginale, bactéria que ocorre em regiões tropicais e subtropicais do mundo, é responsávelpor causar uma das doenças que mais restringem a criação de bovinos em diversos países. O presentetrabalho teve como objetivo investigar potenciais fatores de risco para a anaplasmose e a ocorrênciade transmissão transplacentária por ensaios moleculares e sorológicos em bovinos. Um total de 22animais foram amostrados e acompanhados durante quatro anos; a presença de infecção / exposiçãoa A. marginale, foi avaliada pelo semi-nested PCR alvejando o gene MSP-5 de A. marginale, peloELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-A. marginale e esfregaço sanguíneo. Os dadosde prevalência de infecção por A. marginale foram analisados em relação aos fatores de risco, usando x², odds ratio e regressão logística múltipla. A amplificação de DNA revelou uma frequência de infecçãopor A. marginale de 41% (9/22) nos bezerros recém-nascidos antes de ingerirem colostro. No entanto,apenas 14% (3/22) dos bezerros recém-nascidos eram soropositivos para A. marginale. Todos osbezerros foram positivos para A. marginale por PCR e no exame microscópico de esfregaço sanguíneo,antes do segundo e quarto mês de idade, respectivamente. Os principais fatores de risco associadosa soroprevalência foram raça (OR = 36,2), infestação por carrapatos (OR = 3,44) e densidade (OR =3,28). Os resultados indicaram que a exposição de gado para A. marginale era comum nos rebanhosleiteiros e a situação de instabilidade endêmica provavelmente se faz devido à produção inadequada deanticorpos em vacas ou a variabilidade genética do patógeno. Este estudo demonstra ainda que, além datransmissão de A. marginale por carrapatos e moscas, a transmissão transplacentária é muito importantee deve ser alvo de programas de controle da doença no Brasil.(AU)

Estudo longitudinal dos fatores de risco para anaplasmose e transmissão transplacentária em rebanhos bovinos / Longitudinal study of risk factors for anaplasmosis and transplacental transmission in herd cattle

Anaplasma marginale, bacteria that occurs in tropical and subtropical areas throughout the world, isresponsible for causing a disease that is one of the most constraint to cattle production in many countries.The present work aimed to investigate potential risk factors for anaplasmosis and the occurrence oftransplacental transmission by molecular and serological assays in cattle. A total of 22 calves wererandomly sampled and monitored during four years; the presence of infection/exposure to A. marginalewas assessed by a semi-nested PCR assay targeting msp-5 gene of A. marginale, indirect ELISA fordetection of IgG antibodies to A. marginale and blood smears. The A. marginale infection prevalencedata were analyzed in relation to risk factors, using chi-squared, odds ratio and multiple logisticregressions. DNA amplification results revealed a frequency of infection with A. marginale of 41%(9/22) in the newborn calves before colostrum suckling. However, only 14% (3/22) of newborn calveswere seropositive for A. marginale. All calves were positive to A. marginale by PCR and microscopicexamination of blood smears before the two and fourth month of age, respectively. The main risk factorsassociated with seroprevalence were breed (OR=36.2), tick infestation (OR=3.44) and stocking density(OR=3.28). The results indicated that exposure of cattle to A. marginale was common in dairy herdsand endemic instability situation probably is due to inadequate antibody production in cows or geneticvariability of pathogen. This study still demonstrated that in addition to transmission of A. marginaleby ticks and flies, the transplacental transmission is very important and should be the target of diseasecontrol programs in Brazil.

Anaplasma marginale, bactéria que ocorre em regiões tropicais e subtropicais do mundo, é responsávelpor causar uma das doenças que mais restringem a criação de bovinos em diversos países. O presentetrabalho teve como objetivo investigar potenciais fatores de risco para a anaplasmose e a ocorrênciade transmissão transplacentária por ensaios moleculares e sorológicos em bovinos. Um total de 22animais foram amostrados e acompanhados durante quatro anos; a presença de infecção / exposiçãoa A. marginale, foi avaliada pelo semi-nested PCR alvejando o gene MSP-5 de A. marginale, peloELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-A. marginale e esfregaço sanguíneo. Os dadosde prevalência de infecção por A. marginale foram analisados em relação aos fatores de risco, usando x², odds ratio e regressão logística múltipla. A amplificação de DNA revelou uma frequência de infecçãopor A. marginale de 41% (9/22) nos bezerros recém-nascidos antes de ingerirem colostro. No entanto,apenas 14% (3/22) dos bezerros recém-nascidos eram soropositivos para A. marginale. Todos osbezerros foram positivos para A. marginale por PCR e no exame microscópico de esfregaço sanguíneo,antes do segundo e quarto mês de idade, respectivamente. Os principais fatores de risco associadosa soroprevalência foram raça (OR = 36,2), infestação por carrapatos (OR = 3,44) e densidade (OR =3,28). Os resultados indicaram que a exposição de gado para A. marginale era comum nos rebanhosleiteiros e a situação de instabilidade endêmica provavelmente se faz devido à produção inadequada deanticorpos em vacas ou a variabilidade genética do patógeno. Este estudo demonstra ainda que, além datransmissão de A. marginale por carrapatos e moscas, a transmissão transplacentária é muito importantee deve ser alvo de programas de controle da doença no Brasil.

Leishmaniose visceral canina diagnóstico parasitológico: relato de caso / Canine visceral leishmaniasis parasitological diagnosis

Objetivou-se relatar o diagnóstico parasitológico para Leishmaniose Visceral Canina realizado através da punção de linfonodo e em lâmina de esfregaço sanguíneo em um cão atendido no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia-MG. No exame clínico, observou-se rarefação pilosa generalizada, principalmente na região periocular, lesões crostosas na face e extremidades das orelhas, mucosas oral e ocular levemente hipocoradas e aumento dos linfonodos sub-mandibular, pré- escapulares e poplíteos, além de onicogrifose em todos os membros. No exame parasitológico foram visualizadas formas parasitárias de Leishmania sp. tanto na punção aspirativa por agulha fina (PAAF) quanto na lâmina de esfregaço sanguíneo. Conclui-se que o teste parasitológico, é um método eficaz no diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC), pois é uma técnica de baixo custo, rápida execução e elevada sensibilidade, porém em cães assintomáticos pode levar a resultados falso-negativos devido ao baixo número de parasitos contidos nas amostras, logo a associação entre os parâmetros clínicos, epidemiológicos, e sorológicos são necessários para um diagnóstico definitivo.(AU)

This study aimed to report the parasitological diagnosis for Canine Visceral Leishmaniasis performed by puncture of lymph and blood smears in a dog treated at the veterinary hospital of Federal University of Uberlândia. On examination, was observed generalized pilosa rarefaction, especially in the periocular region, crusted lesions on the face and extremities of the ears, ocular and oral mucous membranes were pale and slightly swollen lymph nodes in submandibular pre-scapular and popliteal, and in all onychogryphosis members. In parasitological examination were viewed parasitic forms of Leishmania sp. both in fine needle aspiration (FNA) as the blade blood smears. We conclude that the parasitological test is an effective method in the diagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL), because it is a low cost technique, rapid implementation and high sensitivity, but in asymptomatic dogs can lead to false-negative results due to low number of parasites contained in the samples, then the association between the clinical, epidemiological, serological and are required for a definitive diagnosis.(AU)

Leishmaniose visceral canina – diagnóstico parasitológico: relato de caso / Canine visceral leishmaniasis – parasitological diagnosis

Objetivou-se relatar o diagnóstico parasitológico para Leishmaniose Visceral Canina realizado através da punção de linfonodo e em lâmina de esfregaço sanguíneo em um cão atendido no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia-MG. No exame clínico, observou-se rarefação pilosa generalizada, principalmente na região periocular, lesões crostosas na face e extremidades das orelhas, mucosas oral e ocular levemente hipocoradas e aumento dos linfonodos sub-mandibular, pré- escapulares e poplíteos, além de onicogrifose em todos os membros. No exame parasitológico foram visualizadas formas parasitárias de Leishmania sp. tanto na punção aspirativa por agulha fina (PAAF) quanto na lâmina de esfregaço sanguíneo. Conclui-se que o teste parasitológico, é um método eficaz no diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC), pois é uma técnica de baixo custo, rápida execução e elevada sensibilidade, porém em cães assintomáticos pode levar a resultados falso-negativos devido ao baixo número de parasitos contidos nas amostras, logo a associação entre os parâmetros clínicos, epidemiológicos, e sorológicos são necessários para um diagnóstico definitivo.

This study aimed to report the parasitological diagnosis for Canine Visceral Leishmaniasis performed by puncture of lymph and blood smears in a dog treated at the veterinary hospital of Federal University of Uberlândia. On examination, was observed generalized pilosa rarefaction, especially in the periocular region, crusted lesions on the face and extremities of the ears, ocular and oral mucous membranes were pale and slightly swollen lymph nodes in submandibular pre-scapular and popliteal, and in all onychogryphosis members. In parasitological examination were viewed parasitic forms of Leishmania sp. both in fine needle aspiration (FNA) as the blade blood smears. We conclude that the parasitological test is an effective method in the diagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL), because it is a low cost technique, rapid implementation and high sensitivity, but in asymptomatic dogs can lead to false-negative results due to low number of parasites contained in the samples, then the association between the clinical, epidemiological, serological and are required for a definitive diagnosis.

Evaluation of platelet count by automatic blood counter QBC Vet Autoread® compared with blood smear estimative and count by hemocytometer / Avaliação da contagem plaquetária pelo contador automático QBC Vet Autoread® comparado com estimativa em esfregaço sanguíneo e contagem em hemocitômetro

The platelet blood count in laboratorial routine provides to the clinician important information about the hemostasis of the patient. There are many techniques described, however the gold standard techniques realized in hemocytometer spent a lot of time, making this technique impracticable in great routines. This research had the intent to evaluate if the automatic veterinary blood counter QBC Vet Autoread®, whose results get five minutes to be ready, is capable to offer a trustworthy platelet count number. To this end, were evaluated the correlations among three different forms of platelets count in dogs: count in automatic blood counter QBC Vet Autoread®, estimative in blood smear and the gold standard method by manual count in hemocytometer. The viability and confidence use of automatic blood counters of the medicine veterinary routine. Seventeen dogs were chosen randomly way, in the medical and surgical routine of HOVET-USP. The analysis revel high correlation between the hemocytometer and the estimative in blood smear (r=0,875) and between the hemocytometer and automatic blood count by QBC Vet Autoread® (r=0,939). Conclude that the platelet blood cont by QBC Vet Autoread®, in addition to be fast, its more truthful when compared with estimative in blood smear, although the latter one also had elevated correlation. However, morphological analysis through the smears cannot b

A contagem plaquetária na rotina laboratorial fornece ao clínico importantes informações sobre a hemostasia do paciente. Há várias técnicas descritas, entretanto a técnica padrão realizada em hemocitômetro demanda muito tempo, inviabilizando sua realização em rotinas volumosas. Este estudo visou avaliar se o aparelho automatizado veterinário QBC VetAutoread, cujo resultado leva cerca de cinco minutos, é capaz de fornecer o número de plaquetas de forma confiável. Para tal, avaliou-se a correlação entre três diferentes formas de determinação do número de plaquetas em cão: a contagem pelo contador de células automático QBC Vet Autoread ®, estimativa em esfregaço sanguíneo corado e o método padrão considerado prova ouro de contagem manual em hemocitômetro. Determinou-se também a viabilidade e confiabilidade do uso da contagem automática na rotina laboratorial da medicina veterinária. Foram avaliados 17 cães, escolhidos de forma aleatória de acordo com a rotina de colheita do Banco de sangue e rotina da clínica médica e cirúrgica do HOVET USP. As análises revelaram alta correlação entre a contagem em hemocitômetro comparados a estimativa em esfregaço sangüíneo (r=0,875) e entre a contagem em hemocitômetro e a contagem automática do QBC Vet Autoread ® (r=0,939). Conclui-se a contagem plaquetária pelo QBC Vet Autoread ®, além de rápida, é mais confiável quando comparada com a estima

Evaluation of platelet count by automatic blood counter QBC Vet Autoread® compared with blood smear estimative and count by hemocytometer / Avaliação da contagem plaquetária pelo contador automático QBC Vet Autoread® comparado com estimativa em esfregaço sanguíneo e contagem em hemocitômetro

The platelet blood count in laboratorial routine provides to the clinician important information about the hemostasis of the patient. There are many techniques described, however the gold standard techniques realized in hemocytometer spent a lot of time, making this technique impracticable in great routines. This research had the intent to evaluate if the automatic veterinary blood counter QBC Vet Autoread®, whose results get five minutes to be ready, is capable to offer a trustworthy platelet count number. To this end, were evaluated the correlations among three different forms of platelets count in dogs: count in automatic blood counter QBC Vet Autoread®, estimative in blood smear and the gold standard method by manual count in hemocytometer. The viability and confidence use of automatic blood counters of the medicine veterinary routine. Seventeen dogs were chosen randomly way, in the medical and surgical routine of HOVET-USP. The analysis revel high correlation between the hemocytometer and the estimative in blood smear (r=0,875) and between the hemocytometer and automatic blood count by QBC Vet Autoread® (r=0,939). Conclude that the platelet blood cont by QBC Vet Autoread®, in addition to be fast, its more truthful when compared with estimative in blood smear, although the latter one also had elevated correlation. However, morphological analysis through the smears cannot b

A contagem plaquetária na rotina laboratorial fornece ao clínico importantes informações sobre a hemostasia do paciente. Há várias técnicas descritas, entretanto a técnica padrão realizada em hemocitômetro demanda muito tempo, inviabilizando sua realização em rotinas volumosas. Este estudo visou avaliar se o aparelho automatizado veterinário QBC VetAutoread, cujo resultado leva cerca de cinco minutos, é capaz de fornecer o número de plaquetas de forma confiável. Para tal, avaliou-se a correlação entre três diferentes formas de determinação do número de plaquetas em cão: a contagem pelo contador de células automático QBC Vet Autoread ®, estimativa em esfregaço sanguíneo corado e o método padrão considerado prova ouro de contagem manual em hemocitômetro. Determinou-se também a viabilidade e confiabilidade do uso da contagem automática na rotina laboratorial da medicina veterinária. Foram avaliados 17 cães, escolhidos de forma aleatória de acordo com a rotina de colheita do Banco de sangue e rotina da clínica médica e cirúrgica do HOVET USP. As análises revelaram alta correlação entre a contagem em hemocitômetro comparados a estimativa em esfregaço sangüíneo (r=0,875) e entre a contagem em hemocitômetro e a contagem automática do QBC Vet Autoread ® (r=0,939). Conclui-se a contagem plaquetária pelo QBC Vet Autoread ®, além de rápida, é mais confiável quando comparada com a estima

Babesia spp. infection in dogs from rural areas of São Paulo State, Brazil / Infecção por Babesia spp. em cães de áreas rurais do estado de São Paulo, Brasil

The status of Babesia spp. infection in dogs from rural areas of São Paulo State, Brazil was studied. For this, 150 animals were examined by blood smears and by PCR; the presence of tick infestation was also investigated. By the blood smear examination, 3 animals (2 percent) were detected positive and by PCR for Babesia spp. 12 (8 percent) were positive, with bands visualized in 450 bp. Rhipicephalus sanguineus or Amblyomma spp. were found on 36 (24 percent) of the 150 dogs. Amblyomma species found were A. cajennense (9/36-25 percent) and A. ovale (9/36-25 percent). It was not possible to correlate the presence of R. sanguineus and the infection with Babesia spp. The sequencing of four positive samples demonstrated close identity with B. canis vogeli already characterized in Brazil.

A presença de infecção por Babesia spp. em cães de áreas rurais do Estado de São Paulo, Brasil foi investigada. Para tanto, 150 cães foram examinados por técnicas parasitológicas de esfregaços sanguíneos e moleculares (PCR), e também, foi verificada a presença de carrapatos nestes animais. Pela análise de esfregaços sanguíneos, 3 (2 por cento) dos cães estavam infectados, enquanto pela PCR, 12 (8 por cento) dos animais foram positivos com bandas aproximadas de 450 pares de base (pb). Foram observados 36 (24 por cento) cães infestados com Rhipicephalus sanguineus ou com Amblyomma spp. As espécies de Amblyomma observadas foram A. cajennense (25 por cento) e A. ovale (25 por cento). Não foi possível correlacionar a presença de R. sanguineus com a infecção por Babesia spp. O seqüenciamento de quatro amostras positivas demonstrou alta identidade com B. canis vogeli, já caracterizada no Brasil.

Babesia spp. infection in dogs from rural areas of São Paulo State, Brazil

The status of Babesia spp. infection in dogs from rural areas of São Paulo State, Brazil was studied. For this, 150 animals were examined by blood smears and by PCR; the presence of tick infestation was also investigated. By the blood smear examination, 3 animals (2%) were detected positive and by PCR for Babesia spp. 12 (8%) were positive, with bands visualized in 450 bp. Rhipicephalus sanguineus or Amblyomma spp. were found on 36 (24%) of the 150 dogs. Amblyomma species found were A. cajennense (9/36-25%) and A. ovale (9/36-25%). It was not possible to correlate the presence of R. sanguineus and the infection with Babesia spp. The sequencing of four positive samples demonstrated close identity with B. canis vogeli already characterized in Brazil.

A presença de infecção por Babesia spp. em cães de áreas rurais do Estado de São Paulo, Brasil foi investigada. Para tanto, 150 cães foram examinados por técnicas parasitológicas de esfregaços sanguíneos e moleculares (PCR), e também, foi verificada a presença de carrapatos nestes animais. Pela análise de esfregaços sanguíneos, 3 (2%) dos cães estavam infectados, enquanto pela PCR, 12 (8%) dos animais foram positivos com bandas aproximadas de 450 pares de base (pb). Foram observados 36 (24%) cães infestados com Rhipicephalus sanguineus ou com Amblyomma spp. As espécies de Amblyomma observadas foram A. cajennense (25%) e A. ovale (25%). Não foi possível correlacionar a presença de R. sanguineus com a infecção por Babesia spp. O seqüenciamento de quatro amostras positivas demonstrou alta identidade com B. canis vogeli, já caracterizada no Brasil.