Evidence of post-formed structures during systemic Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens infection in resistant Phaseolus vulgaris genotypes / Evidência de estruturas pós-formadas na infecção sistêmica de Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens em genótipos resistentes de Phaseolus vulgaris L

Bacterial wilt of the common bean caused by Curtobacterium flaccumfacienspv. flaccumfaciensresults in economic losses. The aim of this study was to analyze the colonization of C. flaccumfaciens pv. flaccumfaciens in resistant, moderately resistant, and susceptible genotypes of common bean plants. The genotypes OuroBranco and IPA 9 (resistant), Diacol Calima (moderately resistant), and CNFRS 11997 and CNFP 10429 (susceptible) were inoculated in the epicotyl, with 100 µL of bacterial suspension of the BRM 14933(Cff25). Disease severity was evaluated 21 days after inoculation (DAI), on a scale from 1 to 9. Plant samples were prepared for scanning electron microscopy analyses. Ouro Branco and IPA 9 (resistant) plants exhibited low colonization, the formation of filaments surrounding bacterial cells and vestures more developed in the pit the xylem vessels. Diacol Calima (moderately resistant) plants presented lower levels of colonization and filament formation than that of resistant cultivars. CNFC 10429 and CNFRS 11997 (susceptible) showed high levels of colonization in the xylem and vessel obstruction, preventing water and nutrient flow, which explains the symptoms of wilt and plant death. Thus, resistance to C. flaccumfacienspv. flaccumfacienscan be explained by plant's capacity to limit pathogen propagation as a post-formed defense mechanismin this pathosystem.(AU)

Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciensé causadora da murcha-de-curtobacterium, responsável por perdas econômicas.O objetivo deste estudo foi analisara colonização de C. flaccumfaciens pv. flaccumfaciensem genótipos de feijoeiro comumresistente, moderamente resistente e suscetível. Ouro Branco e IPA 9 (resistente), Diacol Calima (moderadamente resistente), CNFRS 11997 e CNFP 10429 (suscetíveis) foram inoculados,no epicótilo,com 100 µL de suspensão bacteriana do isolado BRM 14933(Cff25). A severidade da doença foi avaliada 21 dias após a inoculação, utilizando a escala de 1 a 9. As amostras para MEV foram desidratadas em série alcoólica, secas em ponto crítico com dióxido de carbono (CO2), banhadas em ouro e analisadas em microscópio eletrônico de varredura. As plantas de Ouro Branco e IPA 9 (resistentes) exibiram baixa colonização, formação de filamentos envolvendo células bacterianas e guarnições mais desenvolvidas nas pontoaçõesdos vasos do xilema. Diacol Calima (moderadamente resistente) apresentou menor colonização e formação de filamentos do que as cultivares resistentes. Os genótipos CNFC 10429 e CNFRS 11997 (suscetíveis) mostraram grande colonização no xilema, com vasos obstruídos, impedindo o fluxo de água e nutrientes, explicando os sintomas de murcha e morte da planta. Portanto, a resistência à C. flaccumfacienspv. flaccumfacienspode ser explicada pela capacidade da planta em limitar a multiplicação do patógeno como um mecanismo de defesa celular, sugerindo que este é um dos fatores de resistência estrutural pós-formado que ocorre nesse patossistema.(AU)

Occurrence and diversity of Ralstonia solanacearum populations in Brazil / Ocorrência e diversidade de populações de Ralstonia solanacearum no Brasil

Ralstonia solanacearum is a gram-negative soil-borne bacterium capable of infection of hundreds of vegetable species over more than 50 botanical families, causing bacterial wilt, except for bananas, when the disease is called Moko. It deserves special attention, from all other plant pathogenic bacteria, for its high phenotypic and genotypic plasticity, a characteristic that makes disease control extremely difficult. In this context, frequent and necessary surveys are conduct in the attempt of characterizing the prevailing strains of R. solanacearum in each region where the disease has been reported. However, knowledge about occurrence and diversity of R. solanacearum in Brazil is fragmented and in some cases, based on inconclusive studies with few strains, little representative of a given region. The need to obtain a greater picture guided this review. The occurrence of this bacterium in Brazilian States and the possible causes for its dissemination are presented, with emphasis on studies of genetic variability of populations of R. solanacearum in the country. The compiled results report a wide distribution of the bacterium in Brazil and great variability of its populations among locations. Partly due to the difficulty of detecting small titer of bacteria in samples, paucity of information about the origin of inoculum in certain regions is observed, as well as the need for detecting the presence of the pathogen in asymptomatic plants, potato tubers with latent infections, soil, and water, which are the major causes of bacterial dissemination into areas without any disease history.

Ralstonia solanacearum é uma bactéria gram-negativa habitante do solo capaz de infectar centenas de espécies vegetais distribuídas em mais de 50 famílias botânicas, onde causa a murcha-bacteriana, exceto na bananeira, na qual recebe o nome de Moko. Destaca-se entre outras bactérias fitopatogênicas pela sua alta plasticidade fenotípica e genotípica, característica que contribui sobremaneira para dificultar o controle da doença. Nesse contexto, levantamentos frequentes e necessários são conduzidos na tentativa de caracterizar isolados de R. solanacearum prevalentes em cada região onde a doença tem sido relatada. No Brasil, o conhecimento sobre a ocorrência e a variabilidade de R. solanacearum está fragmentado e, em alguns casos, baseado em estudos inconclusivos pelo uso de amostras de isolados pouco representativas de uma região. A necessidade de agrupar essas informações norteou a presente revisão de literatura. A ocorrência da bactéria nos Estados brasileiros e as possíveis causas de sua disseminação são apresentadas, com ênfase nos estudos da variabilidade genética das populações de R. solanacearum no país de acordo com o atual esquema de classificação da bactéria. Os resultados de pesquisa compilados da literatura reportam ampla distribuição da bactéria no Brasil e grande variabilidade de suas populações entre locais. Em parte devido à dificuldade de detectar pequenos números de células bacterianas em amostras, nota-se escassez de informações sobre a origem do inóculo em determinadas regiões, bem como a necessidade de detectar a presença do patógeno em plantas assintomáticas, em tubérculos de batata com infecções latentes, no solo e na água, que são as principais causas da disseminação da bactéria para áreas sem histórico da doença.

Virulência de estirpes (biovar 1 e 2T) de Ralstonia solanaceraum a Eucalyptus spp. / Virulence of Ralstonia solanacearum strains (biovar 1 and 2T) to Eucalyptus spp.

A murcha bacteriana do eucalipto (Raça 3 biovar 2T de Ralstonia solanacearum) foi descrita em 2009 em campo com o híbrido de eucalipto urograndis. O objetivo deste trabalho foi avaliar a virulência de duas estirpes de R. solanacearum a dezessete espécies de Eucalyptus, através do teste de microbiolização de sementes. A análise estatística dentre espécies mostrou que a virulência variou entre as estirpes estudadas. A virulência da R3bv2T foi significativamente maior em: urograndis, E. urophylla, E. grandis x E. camaldulensis, E. grandis, E. microcorys, E. deanei e E. phaeotricha; e maior para R1bv1 somente na espécie E. pellita. Entre espécies de eucalipto, observou-se maior suscetibilidade em "urograndis", E. grandis e E. paniculata para R3bv2T; e em E. cloeziana, E. paniculata, E. botryoides, E. pellita, E. propinqua e E. resinifera devido a R1bv1.

The bacterial wilt of Eucalyptus (Ralstonia solanacearum Race 3 biovar 2T) was reported in field of Eucalyptus hybrid urograndis. The objective of this research was to evaluate the virulence of two R. solanacearum strains to 17 Eucalyptus species, using the seed microbiolization method for pathogen inoculation. The results of the statistical analyses showed that virulence varied between the two R. solanacearum strains. The R3bv2T virulence was higher than the one in R1bv1 in the following Eucalyptus species: urograndis, E. urophylla, E. grandis x E. camaldulensis, E. grandis, E. microcorys, E. deanei, and E. phaeotricha. The virulence of the R1bv1 strain was higher only in E. pellita. Among species of Eucalyptus the following ones were more susceptibles: to R3bv2T strain - urograndis, E. grandis and E. paniculata, and to R1bv1 strain - E. cloeziana, E. paniculata, E. botryoides, E. pellita, E. propinqua and E. resinifera.

Virulência de estirpes (biovar 1 e 2T) de Ralstonia solanaceraum a Eucalyptus spp.

The bacterial wilt of Eucalyptus (Ralstonia solanacearum Race 3 biovar 2T) was reported in field of Eucalyptus hybrid urograndis. The objective of this research was to evaluate the virulence of two R. solanacearum strains to 17 Eucalyptus species, using the seed microbiolization method for pathogen inoculation. The results of the statistical analyses showed that virulence varied between the two R. solanacearum strains. The R3bv2T virulence was higher than the one in R1bv1 in the following Eucalyptus species: urograndis, E. urophylla, E. grandis x E. camaldulensis, E. grandis, E. microcorys, E. deanei, and E. phaeotricha. The virulence of the R1bv1 strain was higher only in E. pellita. Among species of Eucalyptus the following ones were more susceptibles: to R3bv2T strain - urograndis, E. grandis and E. paniculata, and to R1bv1 strain - E. cloeziana, E. paniculata, E. botryoides, E. pellita, E. propinqua and E. resinifera.

A murcha bacteriana do eucalipto (Raça 3 biovar 2T de Ralstonia solanacearum) foi descrita em 2009 em campo com o híbrido de eucalipto urograndis. O objetivo deste trabalho foi avaliar a virulência de duas estirpes de R. solanacearum a dezessete espécies de Eucalyptus, através do teste de microbiolização de sementes. A análise estatística dentre espécies mostrou que a virulência variou entre as estirpes estudadas. A virulência da R3bv2T foi significativamente maior em: urograndis, E. urophylla, E. grandis x E. camaldulensis, E. grandis, E. microcorys, E. deanei e E. phaeotricha; e maior para R1bv1 somente na espécie E. pellita. Entre espécies de eucalipto, observou-se maior suscetibilidade em "urograndis", E. grandis e E. paniculata para R3bv2T; e em E. cloeziana, E. paniculata, E. botryoides, E. pellita, E. propinqua e E. resinifera devido a R1bv1.

Virulência de estirpes (biovar 1 e 2T) de Ralstonia solanaceraum a Eucalyptus spp

The bacterial wilt of Eucalyptus (Ralstonia solanacearum Race 3 biovar 2T) was reported in field of Eucalyptus hybrid urograndis. The objective of this research was to evaluate the virulence of two R. solanacearum strains to 17 Eucalyptus species, using the seed microbiolization method for pathogen inoculation. The results of the statistical analyses showed that virulence varied between the two R. solanacearum strains. The R3bv2T virulence was higher than the one in R1bv1 in the following Eucalyptus species: urograndis, E. urophylla, E. grandis x E. camaldulensis, E. grandis, E. microcorys, E. deanei, and E. phaeotricha. The virulence of the R1bv1 strain was higher only in E. pellita. Among species of Eucalyptus the following ones were more susceptibles: to R3bv2T strain - urograndis, E. grandis and E. paniculata, and to R1bv1 strain - E. cloeziana, E. paniculata, E. botryoides, E. pellita, E. propinqua and E. resinifera.

A murcha bacteriana do eucalipto (Raça 3 biovar 2T de Ralstonia solanacearum) foi descrita em 2009 em campo com o híbrido de eucalipto urograndis. O objetivo deste trabalho foi avaliar a virulência de duas estirpes de R. solanacearum a dezessete espécies de Eucalyptus, através do teste de microbiolização de sementes. A análise estatística dentre espécies mostrou que a virulência variou entre as estirpes estudadas. A virulência da R3bv2T foi significativamente maior em: urograndis, E. urophylla, E. grandis x E. camaldulensis, E. grandis, E. microcorys, E. deanei e E. phaeotricha; e maior para R1bv1 somente na espécie E. pellita. Entre espécies de eucalipto, observou-se maior suscetibilidade em "urograndis", E. grandis e E. paniculata para R3bv2T; e em E. cloeziana, E. paniculata, E. botryoides, E. pellita, E. propinqua e E. resinifera devido a R1bv1.

Greenhouse evaluation of Bacillus subtilis AP-01 and Trichoderma harzianum AP-001 in controlling tobacco diseases / Avaliação em estufa de dois agentes biológicos de controle de doenças do tabaco

Two biological control agents, Bacillus subtilis AP-01 (LarminarTM) and Trichoderma harzianum AP-001 (TrisanTM) alone or/in combination were investigated in controlling three tobacco diseases, including bacterial wilt (Ralstonia solanacearum), damping-off (Pythium aphanidermatum), and frogeye leaf spot (Cercospora nicotiana). Tests were performed in greenhouse by soil sterilization prior to inoculation of the pathogens. Bacterial-wilt and damping off pathogens were drenched first and followed with the biological control agents and for comparison purposes, two chemical fungicides. But for frogeye leaf spot, which is an airborne fungus, a spraying procedure for every treatment including a chemical fungicide was applied instead of drenching. Results showed that neither B. subtilis AP-01 nor T. harzianum AP-001 alone could control the bacterial wilt, but when combined, their controlling capabilities were as effective as a chemical treatment. These results were also similar for damping-off disease when used in combination. In addition, the combined B. subtilis AP-01 and T. harzianum AP-001 resulted in a good frogeye leaf spot control, which was not significantly different from the chemical treatment.

Dois agentes de controle biológico, Bacillus subtilis AP-01 (Larminar®) e Trichoderma harzianum AP-001 (Trisan®) foram avaliados separadamente ou em combinação quanto à capacidade de controlar três doenças do tabaco: murcha bacteriana (bacterial wilt, Ralstonia solanacearum), tombamento de mudas (damping-off, Pythium aphanidermatum), e mancha olho-de-rã (frogeye leaf spot, Cercospora nicotiana). Os testes foram realizados em estufa, esterilizando-se o solo antes da inoculação dos patógenos. Os patógenos causadores da murcha bacteriana e tombamento de mudas foram inicialmente encharcados e acompanhados com os agentes de controle biológico e, para comparação, com um fungicida químico. Para a mancha olho-de-rã, causada por um fungo anemófilo, utilizou-se um processo de spray ao invés do encharcamento. Os resultados indicaram que nenhum dos dois agentes de controle biológico, aplicado isoladamente, foi capaz de controlar a murcha bacteriana, mas quando em combinação a capacidade de controle foi similar ao do tratamento químico. Resultados semelhantes foram obtidos para o tombamento de mudas. Além disso, a combinação de Bacillus subtilis AP-01 e Trichoderma harzianum AP-001 resultou em um controle muito eficiente da mancha olho-de-rã, que não diferiu significativamente daquele obtido com o tratamento químico.

Greenhouse evaluation of Bacillus subtilis AP-01 and Trichoderma harzianum AP-001 in controlling tobacco diseases

Two biological control agents, Bacillus subtilis AP-01 (LarminarTM) and Trichoderma harzianum AP-001 (TrisanTM) alone or/in combination were investigated in controlling three tobacco diseases, including bacterial wilt (Ralstonia solanacearum), damping-off (Pythium aphanidermatum), and frogeye leaf spot (Cercospora nicotiana). Tests were performed in greenhouse by soil sterilization prior to inoculation of the pathogens. Bacterial-wilt and damping off pathogens were drenched first and followed with the biological control agents and for comparison purposes, two chemical fungicides. But for frogeye leaf spot, which is an airborne fungus, a spraying procedure for every treatment including a chemical fungicide was applied instead of drenching. Results showed that neither B. subtilis AP-01 nor T. harzianum AP-001 alone could control the bacterial wilt, but when combined, their controlling capabilities were as effective as a chemical treatment. These results were also similar for damping-off disease when used in combination. In addition, the combined B. subtilis AP-01 and T. harzianum AP-001 resulted in a good frogeye leaf spot control, which was not significantly different from the chemical treatment.

Dois agentes de controle biológico, Bacillus subtilis AP-01 (Larminar®) e Trichoderma harzianum AP-001 (Trisan®) foram avaliados separadamente ou em combinação quanto à capacidade de controlar três doenças do tabaco: murcha bacteriana (bacterial wilt, Ralstonia solanacearum), tombamento de mudas (damping-off, Pythium aphanidermatum), e mancha olho-de-rã (frogeye leaf spot, Cercospora nicotiana). Os testes foram realizados em estufa, esterilizando-se o solo antes da inoculação dos patógenos. Os patógenos causadores da murcha bacteriana e tombamento de mudas foram inicialmente encharcados e acompanhados com os agentes de controle biológico e, para comparação, com um fungicida químico. Para a mancha olho-de-rã, causada por um fungo anemófilo, utilizou-se um processo de spray ao invés do encharcamento. Os resultados indicaram que nenhum dos dois agentes de controle biológico, aplicado isoladamente, foi capaz de controlar a murcha bacteriana, mas quando em combinação a capacidade de controle foi similar ao do tratamento químico. Resultados semelhantes foram obtidos para o tombamento de mudas. Além disso, a combinação de Bacillus subtilis AP-01 e Trichoderma harzianum AP-001 resultou em um controle muito eficiente da mancha olho-de-rã, que não diferiu significativamente daquele obtido com o tratamento químico.

Densidade populacional de Ralstonia solanacearum em cultivares de batata a campo

The occurrence of latent populations of Ralstonia solanacearum on potato (Solanum tuberosum) plants may represent inoculum source of unknown potential. Besides, it is also unknown if the latent population of the bacterium is lower in resistant than in susceptible cultivars. In order to study these points, an experiment was conducted in the field in two locations in Rio Grande do Sul State, Brazil. The objective was to verify the relationship between R. solanacearum population density and the potato cultivar resistance. The experiment was conducted in Eldorado do Sul, during the Spring, and in Caxias do Sul, during the Fall. Tubers of Achat, Baronesa, Elvira, Macaca, Monte Bonito, and Trapeira cultivars were inoculated with a R. solanacearum strain, biovar II, and planted in the field. Population density of the bacterium was estimated in the assymptomatic and wilted plants, by ELISA and imunofluorescence techniques. No evidence of relationship between population density of R. solanacearum and cultivar was found. Besides, the population density on Achat, known as the most resistant, one was similar to the other cultivars.

A ocorrência de populações latentes de Ralstonia solanacearum em plantas de batata (Solanum tuberosum) pode representar fonte de inóculo de potencial desconhecido. Além disso, também é desconhecido se a população latente da bactéria é menor em cultivares resistentes do que em cultivares suscetíveis. Com a finalidade de estudar estes aspectos, um experimento foi conduzido a campo em dois locais no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. O objetivo foi verificar se havia relação entre a densidade populacional e o grau de resistência de cultivares de batata. O experimento foi conduzido em Eldorado do Sul, durante o período de primavera, e em Caxias do Sul, durante o período de outono. Tubérculos das cultivares Achat, Baronesa, Elvira, Macaca, Monte Bonito e Trapeira foram inoculados com uma estirpe de R. solanacearum, biovar II, e plantados a campo. A densidade populacional da bactéria foi estimada em plantas com e sem sintomas de murcha, através de ELISA e imunofluorescência. Não houve evidência da relação entre densidade populacional da bactéria e cultivar. Além disso, a densidade populacional na cultivar Achat, caracterizada como a mais resistente entre as cultivares testadas, foi igual à registrada nas outras cultivares.

Densidade populacional de Ralstonia solanacearum em cultivares de batata a campo

The occurrence of latent populations of Ralstonia solanacearum on potato (Solanum tuberosum) plants may represent inoculum source of unknown potential. Besides, it is also unknown if the latent population of the bacterium is lower in resistant than in susceptible cultivars. In order to study these points, an experiment was conducted in the field in two locations in Rio Grande do Sul State, Brazil. The objective was to verify the relationship between R. solanacearum population density and the potato cultivar resistance. The experiment was conducted in Eldorado do Sul, during the Spring, and in Caxias do Sul, during the Fall. Tubers of Achat, Baronesa, Elvira, Macaca, Monte Bonito, and Trapeira cultivars were inoculated with a R. solanacearum strain, biovar II, and planted in the field. Population density of the bacterium was estimated in the assymptomatic and wilted plants, by ELISA and imunofluorescence techniques. No evidence of relationship between population density of R. solanacearum and cultivar was found. Besides, the population density on Achat, known as the most resistant, one was similar to the other cultivars.

A ocorrência de populações latentes de Ralstonia solanacearum em plantas de batata (Solanum tuberosum) pode representar fonte de inóculo de potencial desconhecido. Além disso, também é desconhecido se a população latente da bactéria é menor em cultivares resistentes do que em cultivares suscetíveis. Com a finalidade de estudar estes aspectos, um experimento foi conduzido a campo em dois locais no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. O objetivo foi verificar se havia relação entre a densidade populacional e o grau de resistência de cultivares de batata. O experimento foi conduzido em Eldorado do Sul, durante o período de primavera, e em Caxias do Sul, durante o período de outono. Tubérculos das cultivares Achat, Baronesa, Elvira, Macaca, Monte Bonito e Trapeira foram inoculados com uma estirpe de R. solanacearum, biovar II, e plantados a campo. A densidade populacional da bactéria foi estimada em plantas com e sem sintomas de murcha, através de ELISA e imunofluorescência. Não houve evidência da relação entre densidade populacional da bactéria e cultivar. Além disso, a densidade populacional na cultivar Achat, caracterizada como a mais resistente entre as cultivares testadas, foi igual à registrada nas outras cultivares.

PROGRESSO NA SELEÇÃO DE PROGÊNIES DE TOMATE RESISTENTES À MURCHA BACTERIANA ATRAVÉS DA AVALIAÇÃO EPIDEMIOLÓGICA DA DOENÇA

Data from experiments carried out during the decade 83/92 by the Tomato Breeding Program of the were utilized to evaluate the efficience of the epidemiologic parameter Infection Rate to select resistant progenies to Pseudomonas solanacearum. Evidence were obtained that selected progenies from one to the sequence generation showed increased levels of resistance to the pathogen and yield capacity under infested soils cultivation, using standards of susceptible (Santa Cruz group) or resistente (Caraiba) varieties. The Infection Rate is able to detect high number of significant contrasts when compared to another parameter which do no consider the resistance as a resultant of a process which the expression change with the time.

Dados obtidos em experimentos realizados durante a década 83/92 pelo Programa de Melhoramento Genético do Tomateiro foram utilizados para avaliar a eficiência da utilização do parâmetro epidemiológico Taxa de Infecçâo para seleção de progênies resistentes ao patógeno Pseudomonas solanacearum. Foram obtidas evidências que as progênies selecionadas de uma geração para a seguinte apresentaram níveis crescentes de resistência e maior capacidade produtiva sob condição de cultivo em solos infestados pelo patógeno, usando-se como padrões de susceptibilidade variedades do grupo Santa Cruz e de resistência a variedade Caraiba. A Taxa de Infecção consegue detectar elevado número de contrastes significativos quando comparada com outros parâmetros que não consideram a resistência como resultante de um processo na qual a expressão é modificada com o tempo.

Progresso na seleção de progênies de tomate resistentes à murcha bacteriana através da avaliação epidemiológica da doença

Data from experiments carried out during the decade 83/92 by the Tomato Breeding Program of the were utilized to evaluate the efficience of the epidemiologic parameter Infection Rate to select resistant progenies to Pseudomonas solanacearum. Evidence were obtained that selected progenies from one to the sequence generation showed increased levels of resistance to the pathogen and yield capacity under infested soils cultivation, using standards of susceptible (Santa Cruz group) or resistente (Caraiba) varieties. The Infection Rate is able to detect high number of significant contrasts when compared to another parameter which do no consider the resistance as a resultant of a process which the expression change with the time.

Dados obtidos em experimentos realizados durante a década 83/92 pelo Programa de Melhoramento Genético do Tomateiro foram utilizados para avaliar a eficiência da utilização do parâmetro epidemiológico Taxa de Infecçâo para seleção de progênies resistentes ao patógeno Pseudomonas solanacearum. Foram obtidas evidências que as progênies selecionadas de uma geração para a seguinte apresentaram níveis crescentes de resistência e maior capacidade produtiva sob condição de cultivo em solos infestados pelo patógeno, usando-se como padrões de susceptibilidade variedades do grupo Santa Cruz e de resistência a variedade Caraiba. A Taxa de Infecção consegue detectar elevado número de contrastes significativos quando comparada com outros parâmetros que não consideram a resistência como resultante de um processo na qual a expressão é modificada com o tempo.