O hormônio antimulleriano e a reserva ovariana: uma revisão integrativa da literatura / The anti-mullerian hormone and the ovarian reserve: an integrative literature review

O hormônio antimulleriano é secretado pelas células da granulosa dos folículos que estão em desenvolvimento no ovário. Por meio da sua dosagem, é possível avaliar a reserva ovariana. A mulher tem seu número máximo de oócitos no perío- do fetal, mas, conforme o tempo passa, existe uma queda do número de células germinativas. Desse modo, para mulheres que têm o desejo de engravidar, a dosa- gem de hormônios e a avaliação da reserva ovariana podem ajudar no processo. O objetivo do estudo foi encontrar evidências na literatura que comprovem que o hormônio antimulleriano é o melhor marcador da reserva ovariana. Para isso, foi realizada uma revisão integrativa, classificada como qualitativa; a busca de da- dos foi realizada no PubMed, utilizando a seguinte palavra-chave: "hormônio anti- mulleriano (HAM)". Foram encontrados oito artigos que abordavam diretamente o tema, e há evidências que corroboram a hipótese de que o hormônio antimulleria- no é um bom marcador da reserva ovariana, sendo necessários mais estudos para determinar a sua superioridade.

The anti-mullerian hormone is secreted by the granulosa cells of follicles that are developing in the ovary. Though its dosage is possible to evaluate the ovarian re- serve. Women have their maximum number of oocytes in the fetal period, but there is a decrease in the number of germinative cells as time goes by. Thus, women that desire to get pregnant can have hormones dosed and the ovarian reserve evalua- ted to help them with this process. The objective of this study was to find evidence in the literature that proves that the anti-mullerian hormone is the best marker of ovarian reserve. For this purpose, an integrative review was conducted, using the key word: "anti-mullerian hormone (AMH)". Eight articles were found on the subject and there is evidence that proves the hypothesis of the anti-mullerian hormone as a good marker, however more studies are needed to determine its superiority.

Efeitos imediatos, tardios e transgeracionais do estresse térmico em gametas / Immediate, late and transgenerational effects of heat stress on gametes

As perdas de produtividade e fertilidade animal associadas ao estresse térmico durante os meses mais quentes do ano é um dos maiores desafios do setor pecuário. Na indústria de leite as perdas econômicas causadas pelo estresse térmico foram estimadas em mais de 1,5 bilhões de dólares por ano. No que tange a reprodução, já foi demonstrado que o estresse térmico exerce múltiplos efeitos deletérios, causando disfunções endócrinas e alterando a sequência orquestrada de eventos importantes para a gametogênese e para o desenvolvimento embrionário inicial. Estudos recentes têm esclarecido o padrão temporal no qual os danos são estabelecidos e carreados dependendo da intensidade do estresse. Enquanto os efeitos imediatos do estresse térmico nos gametas já são bem caracterizados, existem evidências de que alguns danos podem ser carreados de forma tardia e possivelmente entre gerações. Além disso, dados emergentes indicam que o estresse térmico compromete a reprogramação da metilação do DNA que ocorre durante a gametogênese e a programação do desenvolvimento in utero. Dessa forma, esse artigo visa explorar os efeitos imediatos, tardios e transgeracionais do estresse térmico nos gametas.(AU)

The drop on animal productivity and fertility associated with heat stress during the hot months of the year is one of the biggest challenges for the livestock sector. For the dairy industry the economic losses caused by heat stress have been estimated over 1.5 billion dollars per year. It has already been demonstrated that heat stress exerts multiple deleterious effects on reproductive function, causing endocrine dysfunctions as well as changes in the sequence of events required for gametogenesis and early embryonic development. Recent studies have shed a light in the temporal pattern in which heat-induced damage is established and carried forward depending on the intensity of stress. While the immediate effects of heat stress on gametes are well characterized, there is evidence that some damage can be carried over for longer periods and even across generations. Furthermore, emerging data indicate that heat stress compromises DNA methylation reprogramming that occurs during gametogenesis and developmental programming in utero. Thus, this paper aims to explore the immediate, late and transgenerational effects of heat stress on gametes.(AU)

Dynamics of nuclear and cytoplasm maturation of bovine oocytes cultivated in vitro in medium supplemented with fulerol / Dinâmica da maturação nuclear e citoplasmática de oócitos bovinos cultivados in vitro em meio suplementado com fulerol

The aim of this work was to evaluate, in vitro, the dynamics of nuclear and cytoplasmic maturation of bovine oocytes in traditional IVM medium (CT) and supplemented with fullerol (MF50), for 36 hours. The nuclear maturation of CT (n=300) and MF50 (n=270) every 6 hours, stained with Hoechst33342 and cytoplasmic, the mitochondrial distribution of CT (n=197) and MF50 (n=159) at every 12 hours, stained with Mitotracker Orange. At 6 hours, CT oocytes (19%) were in MI (metaphase I), while in MF50 they were in GV (germ vesicle) or GVB (GV breakeage), repeating at 12 hours. At 18 hours, 46.3% were matured in CT, and 20% in MF50. At 24 hours, 43.9% of maturation was observed in the MF50 group, and 63.8% in the CT. At 30 and 36 hours, the maturation pattern was stable, but with the onset of oocyte degeneration. There was a delay in cytoplasmic maturation with 36 hours (P < 0.05) in MF50 (53.9% of mature gametes), compared to CT (69.8%). With immature cytoplasm, they were 10.4% and 31.7% for CT and MF50 (P< 0.05), respectively. It was concluded that fullerol possibly interfered in the expansion of cumulus oophorus cells, as well as delayed the meiotic progression and cytoplasmic maturation.

O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a dinâmica da maturação nuclear e citoplasmática de oócitos bovinos em meio MIV tradicional (TC) e suplementado com fulerol (MF50), durante 36 horas. Na maturação nuclear do TC (n=300) e do MF50 (n=270) a cada seis horas, corados com Hoechst 33342, e na citoplasmática, avaliou-se a distribuição mitocondrial do TC (n=197) e do MF50 (n=159) a cada 12 horas, corados com Mitotracker Orange (Life® Technologies). Às seis horas, oócitos do TC (19%) se encontravam em MI (metáfase I), enquanto no MF50 estavam em VG (vesícula germinativa) ou QVG (quebra VG), repetindo com 12 horas. Às 18 horas, 46,3% estavam maturados no TC, e 20% no MF50. Com 24 horas, verificaram-se 43,9% de maturação no grupo MF50, e 63,8% no TC. Às 30 e 36 horas, o padrão de maturação foi estável, mas com início de degeneração oócitária. Houve retardo na maturação citoplasmática com 36 horas (P<0,05) no MF50 (53,9% de gametas maduros), comparado ao TC (69,8%). Com citoplasma imaturo, foram 10,4% e 31,7% para TC e MF50 (P<0,05), respectivamente. Conclui-se que o fulerol possivelmente interferiu na expansão das células do cumulus oophorus, bem como retardou a progressão meiótica e a maturação citoplasmática dos oócitos.

Morphology and Biochemistry of Ovulation Morfologia e bioquímica da ovulação

Abstract The process of ovulation involves multiple and iterrelated genetic, biochemical, and morphological events: cessation of the proliferation of granulosa cells, resumption of oocyte meiosis, expansion of cumulus cell-oocyte complexes, digestion of the follicle wall, and extrusion of the metaphase-II oocyte. The present narrative review examines these interrelated steps in detail. The combined or isolated roles of the folliclestimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH) are highlighted. Genes indiced by the FSH genes are relevant in the cumulus expansion, and LH-induced genes are critical for the resumption ofmeiosis and digestion of the follicle wall. A nonhuman model for follicle-wall digestion and oocyte release was provided.

Resumo O processo de ovulação envolve modificações genéticas, bioquímicas e morfológicas múltiplas e interrelacionadas: suspensão da proliferação das células da granulosa, reinício da meiose do oócito, expansão das células do complexo cumulus-oócito, digestão da parede folicular, e extrusão do oócito. Esta revisão narrativa examina em detalhes cada um desses eventos e os principais genes e proteínas envolvidos. Mais importante, a ação combinada ou isolada do hormônio folículo-estimulante (HFE) e do hormônio luteinizante (HL) é destacada. Detalha-se o papel do HFE na expansão do cumulus e do HL na digestão da parede folicular, permitindo a extrusão do oócito na superfície ovariana. Proveu-se um modelo não humano para explicar a digestão da parede folicular.

Ex vivo retrieval of mature oocytes for fertility preservation in a patient with bilateral borderline ovarian tumor / Recuperação ex vivo de oócitos maduros para preservação da fertilidade em paciente com tumor ovariano borderline bilateral

Abstract We report a case of ultrasound-guided ex vivo oocyte retrieval for fertility preservation in a woman with bilateral borderline ovarian tumor, for whom conventional transvaginal oocyte retrieval was deemed unsafe because of the increased risk of malignant cell spillage. Ovarian stimulation with gonadotropins was performed. Surgery was scheduled according to the ovarian response to exogenous gonadotropic stimulation; oophorectomized specimens were obtained by laparoscopy, and oocyte retrieval was performed ~ 37 hours after the ovulatory trigger. The sum of 20 ovarian follicles were aspirated, and 16 oocytes were obtained.We performed vitrification of 12 metaphase II oocytes and 3 oocytes matured in vitro. Our result emphasizes the viability of ex vivo mature oocyte retrieval after controlled ovarian stimulation for those with high risk of malignant dissemination by conventional approach.

Resumo Relatamos um caso de obtenção ex vivo de óvulos, guiada por ultrassonografia, para preservação da fertilidade em uma mulher com tumor ovariano borderline bilateral, para quem a recuperação transvaginal convencional foi considerada insegura, devido ao aumento do risco de disseminação de célulasmalignas. Foi realizada estimulação ovariana com gonadotrofinas. A cirurgia foi agendada de acordo com a resposta ovariana à estimulação gonadotrófica exógena; após ooforectomia por laparoscopia, ~ 37 horas após a maturação folicular, procedeu-se à recuperação extracorpórea de oócitos. Umtotal de 20 folículos ovarianos foi aspirado e 16 complexos cumulus foramobtidos, resultando na vitrificação de 12 oócitos maduros e de 3 oócitos imaturos amadurecidos in vitro. Nosso resultado enfatiza a viabilidade da recuperação ex vivo de oócitos maduros após estimulação ovariana controlada para mulheres com alto risco de disseminação maligna pela captação oocitária realizada convencionalmente pela via transvaginal.

Técnicas de substituição de DNA mitocondrial para reduzir a transmissão da Síndrome de Leigh / Mitochondrial DNA replacement techniques to reduce Leigh syndrome transmission

A Síndrome de Leigh (SL) é uma doença neuro-metabólica congênita, que faz parte do grupo das encefalopatias fatais, com progressão e morte dentro de 2 anos, em média. A SL é causada por mutações no DNA que causam alterações na geração de ATP celular pelas mitocôndrias. As mitocôndrias contêm seu próprio DNA (mtDNA) e, ao contrário do DNA nuclear, o mtDNA é herdado somente da mãe. Mulheres portadores de mutações causadoras da SL podem vivenciar experiências muito tristes ao tentarem realizar o sonho da maternidade. As técnicas de substituição de mtDNA mutado com mtDNA saudável de doadora, oferecem a essas mulheres a possibilidade de terem uma criança geneticamente relacionada sem a SL. O desenvolvimento e a aplicação clínica de terapias de substituição de mtDNA já são uma realidade, tendo o primeiro bebê gerado a partir da técnica nascido em 2016. Mas será que essas técnicas são seguras? Neste trabalho, revisamos a SL e algumas técnicas de substituição de mtDNA já aplicadas em humanos, que envolvem a transferência de pronúcleos de zigotos ou de fuso acromático de oócitos. Concluímos que, apesar dos resultados promissores, ainda é cedo para assegurar a aplicabilidade clínica de técnicas de substituição de mtDNA em seres humanos. (AU)

Leigh syndrome (SL) is a congenital neurometabolic disease included in the group of fatal encephalopathies, with progression and death within 2 years on average. SL is caused by mutations in the DNA that cause changes in the generation of cellular ATP by mitochondria. Mitochondria contain their own DNA (mtDNA) and, unlike nuclear DNA, mtDNA is inherited only from the mother. Women with SL mutations may experience mournful situations when attempting to fulfill the dream of motherhood. Techniques for replacing mutant mtDNA with healthy donor mtDNA provide these women with the possibility of having a genetically related child without SL. The development and clinical application of mtDNA replacement therapies is a reality, and the first baby generated using the technique was born in 2016. However, are these techniques safe? In this article, we review SL and some mtDNA replacement techniques that have been used in humans, which involve zygote pronuclear transfer or oocyte spindle transfer. We conclude that, despite the promising results, it is too early to ensure that mtDNA replacement techniques are clinically applicable to humans. (AU)

In vitro embryo production in Nelore cows supplemented with calcium salts of long-chain fatty acid / Produção de embriões in vitro em vacas Nelore suplementadas com sais de cálcio e ácidos graxos de cadeia longa

This study was performed to evaluate the effects of supplementation of lactating Nelore cows with calcium salts of long-chain fatty acids (Ca-LCFA) of soybean oil on in vitro oocytes competency, cleavage rate, embryo production rate, pregnancy rate, and sex ratio of transferred embryos. Fifteen multiparous Nelore cows grazed on a Tifton 85 pasture were allotted to two treatments: (1) supplement without fat inclusion (CONT, n = 6) and (2) supplement containing 47.2 g Ca-LCFA /kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) based on dry matter (n = 9). Animals were subjected to 2.53 ± 1.35 rounds of consecutive ovum pick up at intervals of 27.65 ± 21.72 days. Oocytes were morphologically evaluated, selected, maturated, fertilized, and cultivated for embryo production in vitro and then transferred into recipients who had previously undergone an embryo transfer protocol at a fixed time. The number of aspirated oocytes, the proportion of viable oocytes, cleavage rate, embryo percentage, pregnancy rate, and sex ratio were not affected when Nelore cows were supplemented with Ca-LCFA of soybean oil compared with non-supplemented Nelore cows. In conclusion, our results suggest that feeding a supplement containing 47.2 g Ca-LCFA/kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) to Nelore cows does not affect in vitro embryo production in lactating Nelore cows. However, further studies...(AU)

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da suplementação de vacas Nelores em lactação com sais de cálcio de ácidos graxos de cadeia longa (Ca-SCACL) feitos com óleo de soja sobre a competência in vitro de oócitos, taxa de clivagem, taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e proporção de sexo de embriões transferidos. Foram utilizadas 15 vacas Nelore (lactantes, multíparas e mantidas em pastagem de Tifton 85) distribuídas em dois tratamentos: (1) suplemento sem inclusão de lipídios (CONT, n = 6) e (2) suplemento contendo 47,2 g Ca-SCACL/kg (para proporcionar uma ingestão de 0,2 kg Ca-SCACL/ dia) com base na matéria seca (n = 9). Os animais foram submetidos a 2,53 ± 1,35 rodadas consecutivas de aspiração folicular a intervalos de 27,65 ± 21,72 dias. Os oócitos foram avaliados morfologicamente, selecionados, maturados, fertilizados e cultivados para produção de embriões in vitro. Em seguida, os embriões foram transferidos para receptoras previamente submetidas a um protocolo de transferência de embriões em tempo fixo. O número de oócitos aspirados, a proporção de oócitos viáveis, a taxa de clivagem, a porcentagem de embriões, a taxa de prenhez e a proporção de sexo de embriões não foram afetados quando as vacas Nelore foram suplementadas com Ca-SCACL de óleo de soja em comparação com as vacas Nelore não suplementadas. Em conclusão, nossos resultados sugerem que suplemento contendo 47,2 g de Ca-SCACL/kg (para fornecer uma ingestão de 0,2 kg de Ca-SCACL) não afeta a produção in vitro de embriões de vacas Nelore em lactação. No entanto, novos estudos utilizando doses mais altas de gordura na dieta poderiam ser úteis para determinar o seu potencial sobre produção embrionária in vitro.(AU)

In vitro performance of Zebu (Bos indicus) and Taurus (Bos taurus) donor cow embryos / Desempenho de vacas doadoras zebuínas (Bos indicus) e taurinas (Bos taurus) na produção de embrião in vitro

In this study, the in vitro production of bovine embryos from zebu and taurine donors was compared. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were obtained from 167 Bos taurus and 161 Bos indicus donors by ovum pick-up. COCs were classified based on their morphological quality, matured in incubators for 22 to 24 h in maturation medium, and then fertilized for 18 to 22 h. The zygotes were transferred to the culture medium for seven days. The embryos were classified as morula (OM), initial blastocyst (BI), blastocyst (BL), and expanded blastocyst (BX), before being transferred to synchronized recipient cows. Pregnancy was diagnosed 30-45 days post-transfer. The Bos indicus donors had a higher oocyte yield (n = 2556) than Bos taurus donors (n = 1903) (P = 0.008). The COCs from zebu donors had a better morphological quality than those from taurine donors (n = 689 vs. 444 for grade 1 COC, P < 0.0001; n = 681 vs. 509 for grade 2 COC, P = 0.010, for zebu and taurine donors, respectively). There were differences in embryo production percentages obtained from OM (0.44% from zebu and 6.42% from taurine, P = 0.017), BL (14.18% from zebu and 3.74% from taurine, P < 0.0001), and BX (81.43% from zebu and 75.13% from taurine, P < 0.0001). No significant difference was observed for embryo production from BI and pregnancy rate (P > 0.05). The Bos indicus cows showed greater oocyte recovery, number of viable oocytes, and production of viable embryos than the Bos taurus cows.(AU)

O objetivo foi avaliar a produção in vitro de embriões bovinos a partir de doadoras zebuína e taurina. Os complexos cumulus oócitos (COCs) foram obtidos de 167 doadoras Bos taurus e 161 Bos indicus, por meio de Ovum pick-up. Os COCs foram classificados quanto à qualidade morfológica, maturados em incubadora por 22 a 24h em meio de maturação, e encaminhados à fertilização entre 18 e 22h. Os zigotos foram transferidos para meio de cultivo, onde permaneceram durante sete dias. Os embriões foram classificados em mórula (MO), blastocisto inicial (BI), blastocisto (BL) e blastocisto expandido (BX), envasados em palhetas contendo meio de cultivo, e inovulados em receptoras sincronizadas. Após 30 e 45 dias da inovulação, realizou-se o diagnóstico de gestação. Os animais Bos indicus apresentaram maior produção oocitária (n = 2556) em comparação aos Bos taurus (n = 1903) (P = 0,008). Os COCs das doadoras zebu apresentaram melhor qualidade morfológica do que das doadoras taurina (n = 689 vs. 444 para COCs grau I, P < 0,0001; n = 681 vs. 509 para COCs grau II, P = 0,010, para doadoras zebu e taurina, respectivamente). Quanto à produção de embriões, houve diferença nas porcentagens obtidas de MO (0,44% zebuínas e 6,42% taurinas, P = 0,017), BL (14,18% zebuínas e 3,74% taurinas, P < 0,0001) e BX (81,43% zebuínas e 75,13% taurinas, P < 0,0001). Não foi observado diferença para BI e taxa de prenhez (P > 0,05). Os animais Bos indicus apresentaram maior recuperação oocitária e maior número de oócitos viáveis em comparação às vacas Bos taurus, como também, maior produção de embriões viáveis.(AU)

In vitro performance of Zebu (Bos indicus) and Taurus (Bos taurus) donor cow embryos / Desempenho de vacas doadoras zebuínas (Bos indicus) e taurinas (Bos taurus) na produção de embrião in vitro

In this study, the in vitro production of bovine embryos from zebu and taurine donors was compared. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were obtained from 167 Bos taurus and 161 Bos indicus donors by ovum pick-up. COCs were classified based on their morphological quality, matured in incubators for 22 to 24 h in maturation medium, and then fertilized for 18 to 22 h. The zygotes were transferred to the culture medium for seven days. The embryos were classified as morula (OM), initial blastocyst (BI), blastocyst (BL), and expanded blastocyst (BX), before being transferred to synchronized recipient cows. Pregnancy was diagnosed 30-45 days post-transfer. The Bos indicus donors had a higher oocyte yield (n = 2556) than Bos taurus donors (n = 1903) (P = 0.008). The COCs from zebu donors had a better morphological quality than those from taurine donors (n = 689 vs. 444 for grade 1 COC, P 0.05). The Bos indicus cows showed greater oocyte recovery, number of viable oocytes, and production of viable embryos than the Bos taurus cows.

O objetivo foi avaliar a produção in vitro de embriões bovinos a partir de doadoras zebuína e taurina. Os complexos cumulus oócitos (COC’s) foram obtidos de 167 doadoras Bos taurus e 161 Bos indicus, por meio de Ovum pick-up. Os COC’s foram classificados quanto à qualidade morfológica, maturados em incubadora por 22 a 24h em meio de maturação, e encaminhados à fertilização entre 18 e 22h. Os zigotos foram transferidos para meio de cultivo, onde permaneceram durante sete dias. Os embriões foram classificados em mórula (MO), blastocisto inicial (BI), blastocisto (BL) e blastocisto expandido (BX), envasados em palhetas contendo meio de cultivo, e inovulados em receptoras sincronizadas. Após 30 e 45 dias da inovulação, realizou-se o diagnóstico de gestação. Os animais Bos indicus apresentaram maior produção oocitária (n = 2556) em comparação aos Bos taurus (n = 1903) (P = 0,008). Os COCs das doadoras zebu apresentaram melhor qualidade morfológica do que das doadoras taurina (n = 689 vs. 444 para COCs grau I, P 0,05). Os animais Bos indicus apresentaram maior recuperação oocitária e maior número de oócitos viáveis em comparação às vacas Bos taurus, como também, maior produção de embriões viáveis.

In vitro embryo production in Nelore cows supplemented with calcium salts of long-chain fatty acid / Produção de embriões in vitro em vacas Nelore suplementadas com sais de cálcio e ácidos graxos de cadeia longa

This study was performed to evaluate the effects of supplementation of lactating Nelore cows with calcium salts of long-chain fatty acids (Ca-LCFA) of soybean oil on in vitro oocytes competency, cleavage rate, embryo production rate, pregnancy rate, and sex ratio of transferred embryos. Fifteen multiparous Nelore cows grazed on a Tifton 85 pasture were allotted to two treatments: (1) supplement without fat inclusion (CONT, n = 6) and (2) supplement containing 47.2 g Ca-LCFA /kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) based on dry matter (n = 9). Animals were subjected to 2.53 ± 1.35 rounds of consecutive ovum pick up at intervals of 27.65 ± 21.72 days. Oocytes were morphologically evaluated, selected, maturated, fertilized, and cultivated for embryo production in vitro and then transferred into recipients who had previously undergone an embryo transfer protocol at a fixed time. The number of aspirated oocytes, the proportion of viable oocytes, cleavage rate, embryo percentage, pregnancy rate, and sex ratio were not affected when Nelore cows were supplemented with Ca-LCFA of soybean oil compared with non-supplemented Nelore cows. In conclusion, our results suggest that feeding a supplement containing 47.2 g Ca-LCFA/kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) to Nelore cows does not affect in vitro embryo production in lactating Nelore cows. However, further studies...

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da suplementação de vacas Nelores em lactação com sais de cálcio de ácidos graxos de cadeia longa (Ca-SCACL) feitos com óleo de soja sobre a competência in vitro de oócitos, taxa de clivagem, taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e proporção de sexo de embriões transferidos. Foram utilizadas 15 vacas Nelore (lactantes, multíparas e mantidas em pastagem de Tifton 85) distribuídas em dois tratamentos: (1) suplemento sem inclusão de lipídios (CONT, n = 6) e (2) suplemento contendo 47,2 g Ca-SCACL/kg (para proporcionar uma ingestão de 0,2 kg Ca-SCACL/ dia) com base na matéria seca (n = 9). Os animais foram submetidos a 2,53 ± 1,35 rodadas consecutivas de aspiração folicular a intervalos de 27,65 ± 21,72 dias. Os oócitos foram avaliados morfologicamente, selecionados, maturados, fertilizados e cultivados para produção de embriões in vitro. Em seguida, os embriões foram transferidos para receptoras previamente submetidas a um protocolo de transferência de embriões em tempo fixo. O número de oócitos aspirados, a proporção de oócitos viáveis, a taxa de clivagem, a porcentagem de embriões, a taxa de prenhez e a proporção de sexo de embriões não foram afetados quando as vacas Nelore foram suplementadas com Ca-SCACL de óleo de soja em comparação com as vacas Nelore não suplementadas. Em conclusão, nossos resultados sugerem que suplemento contendo 47,2 g de Ca-SCACL/kg (para fornecer uma ingestão de 0,2 kg de Ca-SCACL) não afeta a produção in vitro de embriões de vacas Nelore em lactação. No entanto, novos estudos utilizando doses mais altas de gordura na dieta poderiam ser úteis para determinar o seu potencial sobre produção embrionária in vitro.

Consumo de agua tratada de producción petrolera en la fertilidad del bovino macho del sistema doble propósito / Consumption of treated water from oil production in male bovine fertility of the double purpose system / Consumo de água tratada na produção de óleo no sistema de dupla finalidade de fertilidade bovina masculina

Resumen El objetivo de este estudio fue evaluar el consumo de agua tratada proveniente de la producción petrolera en la calidad seminal del macho bovino reproductor, para ello se seleccionaron 16 toros entre 4 y 5 años distribuidos en dos grupos en los centros de investigaciones La Libertad de Agrosavia en Villavicencio y el Área de sostenibilidad agroenergetica, ASA en Acacias con disponibilidad de agua tratada de los campos petroleros, Apiay (A) y Castilla (C) respectivamente. Los animales seleccionados fueron distribuidos al azar para cada localidad en 4 tratamientos: 1) Consumo del 100 % agua de producción tratada; 2) consumo de mezcla 50 % agua de producción tratada y 50 % agua cruda; 3) consumo de mezcla 25 % agua de producción tratada y 75 % agua cruda; y 4) consumo 100 % agua cruda. Las variables consideradas fueron: calidad seminal para A y C determinadas por un sistema computarizado y de fertilidad in vitro para A evaluada por tinción fluorescente, Hoechst 33342. Los datos se analizaron estadística descriptiva, análisis de varianza (ANOVA) y pruebas de comparación de medias, Tukey, en un modelo de medidas repetidas en el tiempo. Los resultados indicaron, para calidad seminal, que los tratamientos que consumieron A y C en cada localidad presentaron diferencias (P < 0,05) para motilidad, 75,00±4,50, 69,24±4,13, espermatozoides motiles/100 células evaluadas, en el tratamiento dos respectivamente y en A para morfología, 76,67±2,06 espermatozoides normales/100 en el tratamiento cuatro, el índice de calidad espermática (ICE) no mostró diferencia (P > 0,05). Los resultados de unión espermatozoide - zona pelúcida mostraron diferencias entre tratamientos (P < 0,05), al igual que en fecundación in vitro, sin embargo, el comportamiento de estos cambios no indica asociación con el consumo de este tipo de agua. El estudio muestra que no se observan cambios contundentes o negativos que demuestren efecto en la fertilidad del toro por consumo de agua de producción tratada.

Abstract The objective of this study was to evaluate the consumption of treated water from oil production in the seminal quality of the breeding male; To this end, 16 bulls between 4 and 5 years old were selected, distributed in two groups at Agrosavia's La Libertad centers in Villavicencio and the Agroenergetic Sustainability Area, ASA in Acacias with availability of treated water from the oil fields, Apiay (A) and Castilla (C) respectively. The selected animals were distributed randomly to each location in 4 treatments: 1) Consumption of 100% treated production water; 2) 50% consumption of treated production water and 50% raw water consumption; 3) mixing consumption 25% treated production water and 75% raw water; and 4) 100% raw water consumption. The variables considered were: seminal quality for A and C determined by a computerized system, and in vitro fertility for A evaluated by fluorescent staining, Hoechst 33342. The data were analyzed descriptive statistics, analysis of variance (ANOVA) and means comparison tests, Tukey, in a model of measures repeated over time. The results indicated, for seminal quality, that the treatments that consumed A and C in each locality presented differences (P <0,05) for motility, 75,00 ± 4,50, 69,24 ± 4,13, motile sperm / 100 cells evaluated, in treatment two respectively and in A for morphology, 76,67 ± 2,06 normal sperm / 100 in treatment four, the sperm quality index (SQI) showed no difference (P> 0,05). The results of sperm-pellucid zone binding showed differences between treatments (P <0,05), as in in vitro fertilization, however, the behavior of these changes does not indicate an association with the consumption of this type of water. The study shows that there are no strong or negative changes that show an effect on the fertility of the bull due to the consumption of treated production water.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar o consumo de água tratada da produção de óleo na qualidade seminal do macho reprodutor; Para tanto, foram selecionados 16 touros entre 4 e 5 anos, distribuídos em dois grupos nos centros de La Libertad de Agrosavia em Villavicencio e na Área de Sustentabilidade Agroenergética, ASA em Acacias com disponibilidade de água tratada dos campos de petróleo, Apiay (A ) e Castilla (C) respectivamente. Os animais selecionados foram distribuídos aleatoriamente para cada local em 4 tratamentos: 1) Consumo de água de produção tratada 100%; 2) 50% de consumo de água de produção tratada e 50% de consumo de água bruta; 3) consumo de mistura 25% de água de produção tratada e 75% de água bruta; e 4) 100% de consumo de água bruta. As variáveis ​​consideradas foram: qualidade seminal para A e C, determinada por sistema computadorizado, e fertilidade in vitro para A, avaliada por coloração fluorescente, Hoechst 33342. Os resultados indicaram, para qualidade seminal, que os tratamentos que consumiram A e C em cada localidade apresentaram diferenças (P <0,05) para motilidade, 75,00 ± 4,50, 69,24 ± 4,13, espermatozóides móveis / 100 células avaliadas, no tratamento dois respectivamente e em A para morfologia, 76,67 ± 2,06 espermatozóides normais / 100 no tratamento quatro, o índice de qualidade espermática (IQE) não apresentou diferença (P> 0,05). Os resultados de ligação das zonas pelúcidas de espermatozóides mostraram diferenças entre os tratamentos (P <0,05), como na fertilização in vitro, entretanto, o comportamento dessas mudanças não indica uma associação com o consumo desse tipo de água. O estudo mostra que não há mudanças fortes ou negativas que mostram um efeito sobre a fertilidade do touro devido ao consumo de água de produção tratada.

Ovarian development and spawning of Macrobrachium amazonicum (Crustacea, Decapoda)

Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) is the most important species for aquaculture native to South America. This study evaluates the phenotypic plasticity of females of Macrobrachium amazonicum with respect to the gonadal development, and determines the spawning type. Our study consisted of macro and microscopic analysis of the reproductive tract. Ovaries exhibited the following reproductive cells in developmental sequence: oogonia (OO) - mean diameter and standard deviation of 25.4 ± 6.5 m; previtellogenic oocyte (PVO) - 61.7 ± 10.7 m, vitellogenic oocyte (VO) - 113.9 ± 24.5 m; and mature oocyte (MO) - 308.7 ± 56.3 m. Ovaries increased in volume due to vitellogenesis and changing of basophilic to acidophilic composition. Follicular cells, atresic oocytes and postovulatory follicles were also analyzed. By combining macro and microscopic analysis, the ovaries of M. amazonicum were classified into six stages: Immature, In maturation, Mature, Spawned in maturation, Spawned and Resting. The ovarian development of M. amazonicum followed a standard pattern even among different populations. Considering our results and the evidence in literature, we conclude that spawning for this species is parceled or multiple, that is, synchronous in more than two groups (clutches of oocytes). Such observations provide basis for further studies addressing sustainable management strategies for species conservation and contribute to elucidate the biology of their specimens.(AU)

Das espécies nativas de camarões da América do Sul, Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) é a mais importante para fins de aquicultura, possuindo elevado valor comercial. Devido à sua importância, este estudo objetivou avaliar a plasticidade fenotípica de fêmeas da espécie em relação ao desenvolvimento gonadal, e determinar o tipo de desova. Para tal, foi realizada análise macro e microscópica do aparelho reprodutor. Observaram-se ovários apresentando as seguintes células reprodutivas em sequência de desenvolvimento: oogônias (OO) com diâmetro médio e desvio padrão de 25,4 ± 6,5 µm, oócito pré-vitelogênico (OPV) com 61,7 ± 10,7 µm, oócito vitelogênico (OV) com 113,9 ± 24,5 µm, e oócito maturo (OM) com 308,7 ± 56,3 µm, havendo um aumento do volume devido ao processo de vitelogênese e uma alteração de composição basófila para acidófila. Além destas células, observaram-se células foliculares, oócitos atrésicos e folículos pós-ovulatórios. Unindo análise macro e microscópica, os ovários de M. amazonicum puderam ser classificados em seis estágios: Imaturo, Em maturação, Maturo, Desovado em maturação, Desovado e Repouso. Verificou-se que o desenvolvimento ovariano de M. amazonicum segue um padrão para as diferentes populações. Diante dos resultados encontrados e evidências na literatura, constata-se que a desova para esta espécie é do tipo parcelada ou múltipla, ou seja, sincrônica em mais de dois grupos (lotes de oócitos). Estas observações oferecem uma base para estudos que contribuirão para a criação de medidas de manejo sustentáveis para a manutenção da espécie na natureza, bem como contribuem para elucidar a biologia de seus indivíduos.(AU)

Criopreservação de tecido ovariano e/ou folículos pré-antrais: uma alternativa para salvaguardar o material genético e a fertilidade de ovelhas e cabras valiosas / Cryopreservation of ovarian tissue and/or preantral follicles: an alternative to safeguard the genetic material and fertility of valuable sheep and goats

A redução da biodiversidade tem levado a uma preocupação emergencial frente a conservação do material biológico de animais geneticamente valiosos. Para tanto, a implantação de bancos de germoplasma, como embriões, gametas e tecido gonadal e somáticos, tem sido uma alternativa para auxiliar na manutenção da biodiversidade. No tocante ao material genético de fêmeas, a criopreservação de folículos pré-antrais isolados ou inclusos no tecido ovariano associada ao uso de tecnologias de reprodução assistida, como cultivo, fertilização in vitro e produção de embriões in vitro, poderá auxiliar na conservação da fertilidade de animais domésticos de interesse econômico com dificuldades reprodutivas ou animais ameaçados de extinção. Além disso, a criopreservação de tecido ovariano seguida de transplante pode ser uma alternativa promissora, uma vez que permite a restauração da função ovariana e reprodutiva. Estudos realizados em humanos relataram o nascimento de 130 indivíduos após o transplante de tecido ovariano previamente criopreservado. Apesar desse sucesso, a criopreservação de ovário ainda é considerada uma técnica experimental. Especialmente em caprinos e ovinos, a grande maioria dos estudos tem usado essas espécies como modelo experimental para a espécie humana. Nessas espécies, o sucesso da criopreservação de folículos ovarianos já foi evidenciado, o que nos dá esperança para o uso dessa tecnologia, vislumbrando, não somente a conservação do material genético, mas a obtenção de embriões e nascimento de crias mesmo após a morte de um animal geneticamente valioso. Assim, todos os esforços atuais estão voltados para a avaliação adequada da qualidade de protocolos de criopreservação que assegurem que esses recursos genéticos permaneçam como parte funcional dos sistemas de produção e conservação das espécies.(AU)

Reducing biodiversity has led to an emergency concern over the conservation of biological material from genetically valuable animals. Therefore, the establishment of gene banks, such as embryos, gametes and somatic and ovarian tissue has been an alternative to assist in maintaining biodiversity. Concerning the genetic material of females, the cryopreservation of preantral follicles isolated or included in the ovarian tissue associated with the use of assisted reproduction technologies, such as culture, in vitro fertilization and in vitro embryo production, may help to preserve the fertility of domestic animals of economic interest with reproductive difficulties or animals threatened with extinction. In addition, cryopreservation of ovarian tissue followed by transplantation may be a promising alternative, since it allows the restoration of ovarian and reproductive function. Studies in humans have reported the birth of 130 individuals after previously cryopreserved ovarian tissue transplantation. Despite this success, ovary cryopreservation is still considered an experimental technique. Especially in goats and sheep, the vast majority of studies have used these species as an experimental model for the human species. In these species, the success of cryopreservation of ovarian follicles has already been shown, which gives us hope for the use of this technology, noting not only the conservation of the genetic material, but the obtaining of embryos and the birth of youngsters even after the death of a genetically valuable animal. Thus, all current efforts are focused on the proper evaluation of the quality of cryopreservation protocols that ensure that these genetic resources remain as a functional part of the systems of production and conservation of the species.(AU)

Criopreservação de tecido ovariano e/ou folículos pré-antrais: uma alternativa para salvaguardar o material genético e a fertilidade de ovelhas e cabras valiosas / Cryopreservation of ovarian tissue and/or preantral follicles: an alternative to safeguard the genetic material and fertility of valuable sheep and goats

A redução da biodiversidade tem levado a uma preocupação emergencial frente a conservação do material biológico de animais geneticamente valiosos. Para tanto, a implantação de bancos de germoplasma, como embriões, gametas e tecido gonadal e somáticos, tem sido uma alternativa para auxiliar na manutenção da biodiversidade. No tocante ao material genético de fêmeas, a criopreservação de folículos pré-antrais isolados ou inclusos no tecido ovariano associada ao uso de tecnologias de reprodução assistida, como cultivo, fertilização in vitro e produção de embriões in vitro, poderá auxiliar na conservação da fertilidade de animais domésticos de interesse econômico com dificuldades reprodutivas ou animais ameaçados de extinção. Além disso, a criopreservação de tecido ovariano seguida de transplante pode ser uma alternativa promissora, uma vez que permite a restauração da função ovariana e reprodutiva. Estudos realizados em humanos relataram o nascimento de 130 indivíduos após o transplante de tecido ovariano previamente criopreservado. Apesar desse sucesso, a criopreservação de ovário ainda é considerada uma técnica experimental. Especialmente em caprinos e ovinos, a grande maioria dos estudos tem usado essas espécies como modelo experimental para a espécie humana. Nessas espécies, o sucesso da criopreservação de folículos ovarianos já foi evidenciado, o que nos dá esperança para o uso dessa tecnologia, vislumbrando, não somente a conservação do material genético, mas a obtenção de embriões e nascimento de crias mesmo após a morte de um animal geneticamente valioso. Assim, todos os esforços atuais estão voltados para a avaliação adequada da qualidade de protocolos de criopreservação que assegurem que esses recursos genéticos permaneçam como parte funcional dos sistemas de produção e conservação das espécies.

Reducing biodiversity has led to an emergency concern over the conservation of biological material from genetically valuable animals. Therefore, the establishment of gene banks, such as embryos, gametes and somatic and ovarian tissue has been an alternative to assist in maintaining biodiversity. Concerning the genetic material of females, the cryopreservation of preantral follicles isolated or included in the ovarian tissue associated with the use of assisted reproduction technologies, such as culture, in vitro fertilization and in vitro embryo production, may help to preserve the fertility of domestic animals of economic interest with reproductive difficulties or animals threatened with extinction. In addition, cryopreservation of ovarian tissue followed by transplantation may be a promising alternative, since it allows the restoration of ovarian and reproductive function. Studies in humans have reported the birth of 130 individuals after previously cryopreserved ovarian tissue transplantation. Despite this success, ovary cryopreservation is still considered an experimental technique. Especially in goats and sheep, the vast majority of studies have used these species as an experimental model for the human species. In these species, the success of cryopreservation of ovarian follicles has already been shown, which gives us hope for the use of this technology, noting not only the conservation of the genetic material, but the obtaining of embryos and the birth of youngsters even after the death of a genetically valuable animal. Thus, all current efforts are focused on the proper evaluation of the quality of cryopreservation protocols that ensure that these genetic resources remain as a functional part of the systems of production and conservation of the species.

Ovarian development and spawning of Macrobrachium amazonicum (Crustacea, Decapoda)

Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) is the most important species for aquaculture native to South America. This study evaluates the phenotypic plasticity of females of Macrobrachium amazonicum with respect to the gonadal development, and determines the spawning type. Our study consisted of macro and microscopic analysis of the reproductive tract. Ovaries exhibited the following reproductive cells in developmental sequence: oogonia (OO) - mean diameter and standard deviation of 25.4 ± 6.5 m; previtellogenic oocyte (PVO) - 61.7 ± 10.7 m, vitellogenic oocyte (VO) - 113.9 ± 24.5 m; and mature oocyte (MO) - 308.7 ± 56.3 m. Ovaries increased in volume due to vitellogenesis and changing of basophilic to acidophilic composition. Follicular cells, atresic oocytes and postovulatory follicles were also analyzed. By combining macro and microscopic analysis, the ovaries of M. amazonicum were classified into six stages: Immature, In maturation, Mature, Spawned in maturation, Spawned and Resting. The ovarian development of M. amazonicum followed a standard pattern even among different populations. Considering our results and the evidence in literature, we conclude that spawning for this species is parceled or multiple, that is, synchronous in more than two groups (clutches of oocytes). Such observations provide basis for further studies addressing sustainable management strategies for species conservation and contribute to elucidate the biology of their specimens.

Das espécies nativas de camarões da América do Sul, Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) é a mais importante para fins de aquicultura, possuindo elevado valor comercial. Devido à sua importância, este estudo objetivou avaliar a plasticidade fenotípica de fêmeas da espécie em relação ao desenvolvimento gonadal, e determinar o tipo de desova. Para tal, foi realizada análise macro e microscópica do aparelho reprodutor. Observaram-se ovários apresentando as seguintes células reprodutivas em sequência de desenvolvimento: oogônias (OO) com diâmetro médio e desvio padrão de 25,4 ± 6,5 µm, oócito pré-vitelogênico (OPV) com 61,7 ± 10,7 µm, oócito vitelogênico (OV) com 113,9 ± 24,5 µm, e oócito maturo (OM) com 308,7 ± 56,3 µm, havendo um aumento do volume devido ao processo de vitelogênese e uma alteração de composição basófila para acidófila. Além destas células, observaram-se células foliculares, oócitos atrésicos e folículos pós-ovulatórios. Unindo análise macro e microscópica, os ovários de M. amazonicum puderam ser classificados em seis estágios: Imaturo, Em maturação, Maturo, Desovado em maturação, Desovado e Repouso. Verificou-se que o desenvolvimento ovariano de M. amazonicum segue um padrão para as diferentes populações. Diante dos resultados encontrados e evidências na literatura, constata-se que a desova para esta espécie é do tipo parcelada ou múltipla, ou seja, sincrônica em mais de dois grupos (lotes de oócitos). Estas observações oferecem uma base para estudos que contribuirão para a criação de medidas de manejo sustentáveis para a manutenção da espécie na natureza, bem como contribuem para elucidar a biologia de seus indivíduos.

Ovarian development and spawning of Macrobrachium amazonicum (Crustacea, Decapoda)

ABSTRACT Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) is the most important species for aquaculture native to South America. This study evaluates the phenotypic plasticity of females of Macrobrachium amazonicum with respect to the gonadal development, and determines the spawning type. Our study consisted of macro and microscopic analysis of the reproductive tract. Ovaries exhibited the following reproductive cells in developmental sequence: oogonia (OO) - mean diameter and standard deviation of 25.4 ± 6.5 m; previtellogenic oocyte (PVO) - 61.7 ± 10.7 m, vitellogenic oocyte (VO) - 113.9 ± 24.5 m; and mature oocyte (MO) - 308.7 ± 56.3 m. Ovaries increased in volume due to vitellogenesis and changing of basophilic to acidophilic composition. Follicular cells, atresic oocytes and postovulatory follicles were also analyzed. By combining macro and microscopic analysis, the ovaries of M. amazonicum were classified into six stages: Immature, In maturation, Mature, Spawned in maturation, Spawned and Resting. The ovarian development of M. amazonicum followed a standard pattern even among different populations. Considering our results and the evidence in literature, we conclude that spawning for this species is parceled or multiple, that is, synchronous in more than two groups (clutches of oocytes). Such observations provide basis for further studies addressing sustainable management strategies for species conservation and contribute to elucidate the biology of their specimens.

RESUMO Das espécies nativas de camarões da América do Sul, Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) é a mais importante para fins de aquicultura, possuindo elevado valor comercial. Devido à sua importância, este estudo objetivou avaliar a plasticidade fenotípica de fêmeas da espécie em relação ao desenvolvimento gonadal, e determinar o tipo de desova. Para tal, foi realizada análise macro e microscópica do aparelho reprodutor. Observaram-se ovários apresentando as seguintes células reprodutivas em sequência de desenvolvimento: oogônias (OO) com diâmetro médio e desvio padrão de 25,4 ± 6,5 µm, oócito pré-vitelogênico (OPV) com 61,7 ± 10,7 µm, oócito vitelogênico (OV) com 113,9 ± 24,5 µm, e oócito maturo (OM) com 308,7 ± 56,3 µm, havendo um aumento do volume devido ao processo de vitelogênese e uma alteração de composição basófila para acidófila. Além destas células, observaram-se células foliculares, oócitos atrésicos e folículos pós-ovulatórios. Unindo análise macro e microscópica, os ovários de M. amazonicum puderam ser classificados em seis estágios: Imaturo, Em maturação, Maturo, Desovado em maturação, Desovado e Repouso. Verificou-se que o desenvolvimento ovariano de M. amazonicum segue um padrão para as diferentes populações. Diante dos resultados encontrados e evidências na literatura, constata-se que a desova para esta espécie é do tipo parcelada ou múltipla, ou seja, sincrônica em mais de dois grupos (lotes de oócitos). Estas observações oferecem uma base para estudos que contribuirão para a criação de medidas de manejo sustentáveis para a manutenção da espécie na natureza, bem como contribuem para elucidar a biologia de seus indivíduos.

¿Cuál es el punto de corte más significativo de hormona antimülleriana como predictor de la respuesta ovárica, tasa de embarazo y nacido vivo? / What is the most significant cutting point of antimüllerian hormone as a predictor of the ovarian response, pregnancy rate and living born?

Resumen OBJETIVO: Evaluar la eficacia de la hormona antimülleriana en la predicción de la respuesta ovárica, tasa de embarazo y nacido vivo. MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio retrospectivo, analítico y observacional efectuado para evaluar los ciclos de estimulación ovárica de pacientes atendidas entre el 1 de enero de 2010 y el 30 de junio de 2017 en el Centro de Reproducción Hisparep. Criterios de inclusión: límites de edad 20 y 44 años y tener ciclos menstruales regulares. Criterios de exclusión: factor masculino alterado, cavidad uterina alterada, trastornos endocrinos, antecedente de daño ovárico. Variables de estudio: concentraciones de hormona antimülleriana, ovocitos recuperados, maduros, fecundados, embriones, tasa de embarazo y nacido vivo. Las variables cuantitativas se analizaron mediante una comparación de medias con t de Student, las variables porcentuales mediante comparación de percentiles. RESULTADOS: Se evaluaron 223 ciclos, divididos en grupos según diferentes puntos de corte. En cualquier punto de corte la hormona antimülleriana predice mayor recuperación de ovocitos maduros y fecundados: 1.25 ng/mL fue el punto de corte más significativo porque predijo mayor obtención de embriones. Se observó relación entre las tasas de embarazo clínico y nacido vivo, aunque su poder predictivo fue débil. Tomar como referencia un punto de corte de 0.5 ng/mL parece predecir bajas probabilidades de nacido vivo. CONCLUSIONES: La hormona antimülleriana fue el mejor marcador de respuesta ovárica; el punto de corte más significativo fue el de 1.25 ng/mL. Hacen falta más estudios para evaluar su eficacia como predictor de bajas tasas de nacido vivo.

Abstract OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of antimülleriana hormone in prediction of the ovarian response, pregnancy rate and live birth. MATERIALS AND METHODS: In this retrospective, analytical and observational study, ovarian stimulation cycles were evaluated at the Hisparep Reproduction Center, in a period from January 1, 2010 to June 30, 2017, the inclusion criteria were; Age from 20 to 44 years and regular menstrual cycles. The exclusion criteria; altered male factor, altered uterine cavity, endocrine disorders, antecedent of ovarian damage. The study variables; antimüllerian hormone, oocytes recovered, mature, fertilized, embryos, pregnancy rate and live birth. The quantitative variables were analyzed by means of a comparison of means, using the Student's T test, the percentage variables by means of comparison of percentiles. RESULTS: 223 cycles were evaluated, divided into groups using different cut points. It was determined that Antimullerian Hormone predicts a greater recovery of mature and fertilized oocytes using any cut point, we consider that 1.25 ng / mL was the most significant cutoff point, since it predicts higher embryo obtaining, relationship was observed in pregnancy rates clinical and live birth, although its predictive power is weak, however, using a cutoff of 0.5 ng / mL seems to predict low odds of live birth CONCLUSIONS: Antimullerian hormone is the best marker of ovarian response, we consider that 1.25 ng /mL is the most significant cut-off point, more studies are needed to evaluate its efficacy as a predictor of low rates of live birth.

In vitro maturation of collared peccary (Pecari tajacu) oocytes after different incubation times / Maturação in vitro de oócitos de cateto (Pecari tajacu) após diferentes períodos de incubação

Oocyte in vitro maturation (IVM) is the first step of the in vitro reproductive technologies that enables mature oocytes to be generated ex vivo and after used for embryo production. In this sense, the establishment of culture environment, as oocyte incubation time, is essential for the success of the IVM. Therefore, the study was carried out to investigate the relationship between the meiotic potential and the IVM times of collared peccary oocytes, wild mammals of great commercial and ecological interest. Thus, ovaries were collected of females derived from captivity and transported to the laboratory within 1 hour of slaughtering. The oocytes derived from follicles (3-6mm in diameter) were recovered by aspirated and sliced. Good quality oocytes (evenly granulated cytoplasm with a least one layer of surrounding cumulus cells) were selected and subjected to culture in TCM 199 supplemented with 10µg/mL FSH, 10% FBS and 100µM cysteamine at 38.5°C, 5% CO2 and maximum humidity for 24 or 48 hours. After the incubation period, the nuclear status, the presence of first polar body and the expansion of cumulus cells of oocytes were assessed. The data obtained were analyzed by Fisher exact test (P<0.05). A total of four sessions (2-3 females per session) were performed, resulting in eighteen aspirated and sliced ovaries with normal morphological characteristics. An oocyte recovery rate of about 83.1% (59/71) was obtained with 3.3 oocytes/ovary and 2.3 viable oocytes/ovary. After different incubation times, differences (P<0.05) were observed in 24 and 48 hours for expansion of the cumulus cells (38.1% vs. 100%), presence of first polar body (52.4% vs. 90.5%) and nuclear status in second metaphase (19.0% vs. 76.2%), respectively. In conclusion, 48 hours is suitable time for the in vitro maturation of oocytes derived from collared peccaries when compared to the time of 24 hours, according to the meiotic potential observed. Additional studies should be conducted to improve the quality of the oocyte culture environment, as medium composition, aiming to obtain viable mature oocytes for other in vitro biotechnologies.(AU)

A maturação in vitro (MIV) oocitária é a primeira etapa das tecnologias reprodutivas in vitro que permite que oócitos maturados sejam gerados ex vivo e depois usados para a produção de embriões. Nesse sentido, o estabelecimento do ambiente de cultivo, como o período de incubação de oócitos, é essencial para o sucesso da MIV. Portanto, o estudo foi realizado para investigar a relação entre o potencial meiótico e os períodos de MIV de oócitos derivados de catetos, mamíferos silvestres de grande interesse comercial e ecológico. Para tanto, os ovários foram coletados de fêmeas derivadas de cativeiro e transportados ao laboratório dentro de 1 h após o abate. Os oócitos derivados de folículos (3-6mm de diâmetro) foram recuperados por aspiração e fatiados. Oócitos de boa qualidade (citoplasma uniformemente granulado com pelo menos uma camada circundante de células cumulus) foram selecionados e submetidos ao cultivo em TCM 199 suplementado com 10µg/mL de FSH, 10% de SFB e 100μM de cisteamina a 38,5°C, 5% de CO2 e umidade máxima por 24 e 48 h. Após o período de incubação, o estado nuclear, a presença do primeiro corpúsculo polar e a expansão das células do cumulus dos oócitos foi avaliada. Os dados obtidos foram analisados pelo teste exato de Fisher (P<0,05). Um total de quatro sessões (2-3 fêmeas por sessão) foi realizado, resultando em dezoito ovários aspirados e fatiados com características morfológicas normais. Uma taxa de recuperação oocitária de aproximadamente 83,1% (59/71) foi obtida com 3,3 oócitos/ovário e 2,3 oócitos viáveis/ovário. Após diferentes períodos de incubação, diferenças (P<0,05) foram observadas entre 24 e 48 h para a expansão das células cumulus (38,1% vs. 100%), presença de primeiro corpúsculo polar (52,4% vs. 90,5%) e estado nuclear na segunda metáfase (19,0% vs. 76,2%), respectivamente. Em conclusão, 48 h é o período adequado para a maturação in vitro de oócitos derivados de catetos quando comparado ao tempo de 24 h, de acordo com o potencial meiótico observado. Estudos adicionais devem ser conduzidos para melhorar a qualidade do ambiente de cultivo oocitário, como a composição de meio, objetivando obter oócitos maturados viáveis para outras biotecnologias in vitro.(AU)

In vitro maturation of collared peccary (Pecari tajacu) oocytes after different incubation times / Maturação in vitro de oócitos de cateto (Pecari tajacu) após diferentes períodos de incubação

Oocyte in vitro maturation (IVM) is the first step of the in vitro reproductive technologies that enables mature oocytes to be generated ex vivo and after used for embryo production. In this sense, the establishment of culture environment, as oocyte incubation time, is essential for the success of the IVM. Therefore, the study was carried out to investigate the relationship between the meiotic potential and the IVM times of collared peccary oocytes, wild mammals of great commercial and ecological interest. Thus, ovaries were collected of females derived from captivity and transported to the laboratory within 1 hour of slaughtering. The oocytes derived from follicles (3-6mm in diameter) were recovered by aspirated and sliced. Good quality oocytes (evenly granulated cytoplasm with a least one layer of surrounding cumulus cells) were selected and subjected to culture in TCM 199 supplemented with 10µg/mL FSH, 10% FBS and 100µM cysteamine at 38.5°C, 5% CO2 and maximum humidity for 24 or 48 hours. After the incubation period, the nuclear status, the presence of first polar body and the expansion of cumulus cells of oocytes were assessed. The data obtained were analyzed by Fisher exact test (P<0.05). A total of four sessions (2-3 females per session) were performed, resulting in eighteen aspirated and sliced ovaries with normal morphological characteristics. An oocyte recovery rate of about 83.1% (59/71) was obtained with 3.3 oocytes/ovary and 2.3 viable oocytes/ovary. After different incubation times, differences (P<0.05) were observed in 24 and 48 hours for expansion of the cumulus cells (38.1% vs. 100%), presence of first polar body (52.4% vs. 90.5%) and nuclear status in second metaphase (19.0% vs. 76.2%), respectively. In conclusion, 48 hours is suitable time for the in vitro maturation of oocytes derived from collared peccaries when compared to the time of 24 hours, according to the meiotic potential observed. Additional studies should be conducted to improve the quality of the oocyte culture environment, as medium composition, aiming to obtain viable mature oocytes for other in vitro biotechnologies.(AU)

A maturação in vitro (MIV) oocitária é a primeira etapa das tecnologias reprodutivas in vitro que permite que oócitos maturados sejam gerados ex vivo e depois usados para a produção de embriões. Nesse sentido, o estabelecimento do ambiente de cultivo, como o período de incubação de oócitos, é essencial para o sucesso da MIV. Portanto, o estudo foi realizado para investigar a relação entre o potencial meiótico e os períodos de MIV de oócitos derivados de catetos, mamíferos silvestres de grande interesse comercial e ecológico. Para tanto, os ovários foram coletados de fêmeas derivadas de cativeiro e transportados ao laboratório dentro de 1 h após o abate. Os oócitos derivados de folículos (3-6mm de diâmetro) foram recuperados por aspiração e fatiados. Oócitos de boa qualidade (citoplasma uniformemente granulado com pelo menos uma camada circundante de células cumulus) foram selecionados e submetidos ao cultivo em TCM 199 suplementado com 10µg/mL de FSH, 10% de SFB e 100μM de cisteamina a 38,5°C, 5% de CO2 e umidade máxima por 24 e 48 h. Após o período de incubação, o estado nuclear, a presença do primeiro corpúsculo polar e a expansão das células do cumulus dos oócitos foi avaliada. Os dados obtidos foram analisados pelo teste exato de Fisher (P<0,05). Um total de quatro sessões (2-3 fêmeas por sessão) foi realizado, resultando em dezoito ovários aspirados e fatiados com características morfológicas normais. Uma taxa de recuperação oocitária de aproximadamente 83,1% (59/71) foi obtida com 3,3 oócitos/ovário e 2,3 oócitos viáveis/ovário. Após diferentes períodos de incubação, diferenças (P<0,05) foram observadas entre 24 e 48 h para a expansão das células cumulus (38,1% vs. 100%), presença de primeiro corpúsculo polar (52,4% vs. 90,5%) e estado nuclear na segunda metáfase (19,0% vs. 76,2%), respectivamente. Em conclusão, 48 h é o período adequado para a maturação in vitro de oócitos derivados de catetos quando comparado ao tempo de 24 h, de acordo com o potencial meiótico observado. Estudos adicionais devem ser conduzidos para melhorar a qualidade do ambiente de cultivo oocitário, como a composição de meio, objetivando obter oócitos maturados viáveis para outras biotecnologias in vitro.(AU)

Shared oocyte donation: ideas and expectations in a bioethical context based on a qualitative survey of brazilian women / Doação compartilhada de oócitos: ideias e expectativas em um contexto bioético com base em um levantamento qualitativo de mulheres brasileiras

Abstract Objective Assisted reproduction combines innovative technologies and new forms of procreation through gamete donation; however, it also leads to moral and ethical issues and to the wide application of referential bioethics. The objective of the present study was to understand the bioethical context of shared oocyte donation. Methods The present qualitative study used the Collective Subject Discourse methodology to interview donors and recipients in Brazil. Results Donors suffer from infertility, and in vitro fertilization opens the possibility of having a child; however, the cost is high, and helping the recipient is more important than the financial cost. The recipients regret delaying motherhood; adopting a child is their last option, and they desire to feel the physical stages of pregnancy. The recipients find the rules unfair regarding the lack of an oocyte bank and the fact that the treatment must be performed in shared cycles; however, oocyte donation makes it possible to realize the common dream of motherhood. Conclusion The obtained data showed that the patients are suffering and frustrated due to infertility, and they realize that in vitro fertilization may be the treatment they need. These women believe that children are essential in the constitution of the family, and scientific advances bring about innovative technologies and new forms of family constitution, with repercussions in the social, economic, political, and family contexts that lead to bioethical questions in Postmodernity.

Resumo Objetivo A reprodução assistida agrega tecnologias inovadoras e novas formas de procriação pormeio da doação de gametas; no entanto, também leva a questões éticas e morais e à ampla aplicação da bioética referencial. O objetivo deste estudo foi compreender o contexto bioético da doação compartilhada de oócitos. Métodos Este estudo qualitativo utilizou a metodologia do Discurso do Sujeito Coletivo para entrevistar doadoras e receptoras no Brasil. Resultados As doadoras sofrem de infertilidade, e a fertilização in vitro abre a possibilidade de ter um filho; no entanto, o custo é alto, e ajudar a receptora é mais importante do que o custo financeiro. As receptoras se arrependem de retardar a maternidade; adotar uma criança é sua última opção, e elas desejam sentir os estágios físicos da gravidez. As receptoras consideramas regras injustas emrelação à falta de um banco de oócitos e ao fato de que o tratamento deve ocorrer emciclos compartilhados; no entanto, a doação de oócitos possibilita a realização do sonho comum da maternidade. Conclusão Os dados obtidosmostraram que as pacientes estão sofrendo e frustradas devido à infertilidade, e percebem que a fertilização in vitro pode ser o tratamento de que necessitam. Essas mulheres acreditam que as crianças são essenciais na constituição da família, e os avanços científicos agregam tecnologias inovadoras e novas formas de constituição familiar com repercussões nos contextos sociais, econômicos, políticos e familiares que levam a questões bioéticas na Pós-modernidade.