RESUMO
Introduction. The antimicrobial resistance is a significant public health threat, particularly for healthcare-associated infections caused by carbapenem-resistant Gram-negative pathogens which are increasingly reported worldwide. The aim of this study was to provide data on the in vitro antimicrobial activity of cefiderocol and that of commercially available comparator antibiotics against a defined collection of recent clinical multi-drug resistant (MDR) microorganisms, including carbapenem resistant Gram-negative bacteria collected from different regions in Spain and Portugal. Material and methods. A total of 477 clinical isolates of Enterobacterales, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii and Stenotrophomonas maltophilia were prospectively (n=265) and retrospectively (n=212) included (2016-2019). Susceptibility testing was performed using standard broad microdilution and results were interpreted using CLSI-2021 and EUCAST-2021 criteria. Results. Overall, cefiderocol showed a good activity against Enterobacterales isolates, being 99.5% susceptible by CLSI and 94.5% by EUCAST criteria. It also demonstrated excellent activity against P. aeruginosa and S. maltophilia isolates, all being susceptible to this compound considering CLSI breakpoints. Regarding A. baumannii (n=64), only one isolate was resistant to cefiderocol. Conclusions. Our results are in agreement with other studies performed outside Spain and Portugal highlighting its excellent activity against MDR gram-negative bacteria. Cefiderocol is a therapeutic alternative to those available for the treatment of infections caused by these MDR bacteria. (AU)
Introducción. La resistencia a los antimicrobianos constituye una importante amenaza para la salud pública, especialmente en el caso de las infecciones relacionadas con la asistencia sanitaria causadas por patógenos gramnegativos resistentes a los carbapenémicos, las cuales están aumentando en todo el mundo. El objetivo de este estudio fue proporcionar datos sobre la actividad antimicrobiana in vitro de cefiderocol y la de antibióticos comparadores disponibles en el arsenal terapéutico frente a una colección definida de microorganismos multirresistentes (MDR) obtenidos de muestras clínicas, incluidas bacterias gramnegativas resistentes a carbapenemas procedentes de diferentes regiones de España y Portugal. Material y métodos. Se recogieron un total de 477 aislados clínicos de Enterobacterales, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii y Stenotrophomonas maltophilia de forma prospectiva (n=265) y retrospectiva (n=212) (2016-2019). El estudio de sensibilidad se realizó por microdilución standard y los resultados se analizaron empleando criterios del CLSI de 2021 y de EUCAST de 2021. Resultados. En general, cefiderocol demostró una buena actividad frente a aislados de Enterobacterales, siendo 99,5% sensible según criterios del CLSI y 94,5% según los de EUCAST. Cefiderocol demostró una excelente actividad frente a aislados de P. aeruginosa y S. maltophilia, siendo todos ellos sensibles a este compuesto considerando los puntos de corte del CLSI. En relación a A. baumannii (n=64), sólo un aislado fue resistente a cefiderocol. Conclusiones. Nuestros resultados concuerdan con los de otros estudios realizados fuera de España y Portugal en los que se destaca la excelente actividad de cefiderocol frente a bacterias gramnegativas MDR. Cefiderocol constituye una alternativa terapéutica a las disponibles en el tratamiento de las infecciones causadas por estos microorganismos. (AU)
Assuntos
Humanos , Anti-Infecciosos/administração & dosagem , Anti-Infecciosos/uso terapêutico , Unidades de Terapia Intensiva , Espanha , Portugal , Técnicas In VitroRESUMO
El uso de agentes biológicos con fines terroristas constituye una amenaza singular. Aunque poco probable, su materialización puede ser difícilmente evitable en el futuro. Este artículo revisa el fenómeno del bioterrorismo, examinando los posibles riesgos y vulnerabilidades, los mecanismos de respuesta y las nuevas amenazas para la bioseguridad. (AU)
The use of biological agents for terrorist purposes is a unique threat. Although unlikely, it may be difficult to prevent in the future. This article provides an overview of the phenomenon of bioterrorism, examining potential risks and vulnerabilities, response mechanisms and emerging threats to biosecurity. (AU)
Assuntos
Humanos , Bioterrorismo/ética , Bioterrorismo/legislação & jurisprudência , Armas Biológicas/ética , Armas Biológicas/legislação & jurisprudência , Guerra Biológica/ética , Guerra Biológica/legislação & jurisprudênciaRESUMO
Introduction: King grass (Cenchrus purpureus (Schumach.) Morrone, syn. Pennisetum purpuphoides) and pineapple peel (Ananas comosus) silages are food alternatives for livestock in conditions of feed shortage. Objective: To describe the dynamics of the microbiota present in king grass and pineapple silage during the fermentation process using next generation sequencing (NGS) and to evaluate the protective effect of Lacticaseibacillus paracasei_6714 as a silage inoculum against Listeria monocytogenes. Methods: We used an unrestricted randomized design to characterize the microbiota present in silages made from king grass harvested 70 days after regrowth and pineapple peel. We inoculated mixtures of grass and peel with L. paracasei_6714 or L. monocytogenes, or both, with a non-inoculated treatment as control. The nutritional and fermentative profile was evaluated after 30 days. After 15 and 30 days of fermentation, we used 16S rRNA analysis to determine the dynamics and diversity of the microbiota in the inoculated and control silages. Result: Dry matter content and digestibility did not differ significantly; however, there were differences in crude protein, pH and organic acids. We obtained 4432 amplicon sequence variants of Proteobacteria, Firmicutes, Bacterioidetes, Actinobacteria, Verrucomicrobia, Planctomycetes and Patescibacteria. The relative abundance of each phylum varied depending on the material and fermentation period. Phylum similarity was over 70 % (but not greater than 50 % with Bray-Curtis at the species level). Conclusion: These bacterial communities seem to have an important role during silage fermentation. Proper management of silage processing can reduce or eliminate pathogenic bacteria.
Introducción: Los ensilajes del pasto king grass (Cenchrus purpureus (Schumach.) Morrone, syn. Pennisetum purpuphoides) y cáscaras de piña (Ananas comosus) son alternativas de alimento para ganado en condiciones de escasez alimentaria. Objetivo: Describir las dinámicas de la microbiota presente en los ensilajes de king grass y piña durante el proceso de fermentación usando secuenciación de próxima generación (NGS) y evaluar el efecto de protección de Lacticaseibacillus paracasei_6714 como inoculante de ensilaje ante Listeria monocytogenes. Métodos: Usamos un diseño aleatorio no restringido para caracterizar la microbiota presente en ensilajes de king Grass cosechados 70 días después de rebrote y de cáscaras de piña. Inoculamos mezclas de pasto y cáscara con L. paracasei_6714 o L. monocytogenes, o ambos, con un tratamiento control sin inocular. El perfil nutricional y de fermentación fue evaluado luego de 30 días. Después de 15 y 30 días de fermentación, usamos un análisis de para determinar la dinámicas y diversidad de la microbiota en los ensilajes inoculados y control. Resultados: Los contenidos de materia seca y digestibilidad, no difirieron significativamente; sin embargo, hubo diferencias en proteína cruda, pH y ácidos orgánicos. Obtuvimos 4 432 secuencias variantes de amplicon de Proteobacteria, Firmicutes, Bacterioidetes, Actinobacteria, Verrucomicrobia, Planctomycetes y de Patescibacteria. La abundancia relativa de cada filo vario dependiendo del material y periodo de fermentación. Similitudes de filo fueron mayores al 70 % (pero no mayor que 50 % con Bray-Curtis a nivel de especie). Conclusión: Estas comunidades bacterianas parecen cumplir un papel importante durante la fermentación del ensilaje. Un manejo apropiado del proceso de ensilaje puede reducir o eliminar baterías patogénicas.
RESUMO
Abstract Escherichia coli O157:H7 is a foodborne pathogen implicated in numerous outbreaks worldwide that has the ability to cause extra-intestinal complications in humans. The Enteropathogens Division of the Central Public Health Laboratory (CPHL) in Paraguay is working to improve the genomic characterization of Shiga toxin-producing E. coli (STEC) to enhance laboratory-based surveillance and investigation of foodborne disease outbreaks. Whole genome sequencing (WGS) is proposed worldwide to be used in the routine laboratory as a high-resolution tool that allows to have all the results in a single workflow. This study aimed to carry out for the first time, the genomic characterization by WGS of nine STEC O157:H7 strains isolated from human samples in Paraguay. We were able to identify virulence and resistance mechanisms, MLST subtype, and even establish the phylogenetic relationships between isolates. Furthermore, we detected the presence of strains belonging to hypervirulent clade 8 in most of the isolates studied.
Resumen Escherichia coli O157:H7 es un patógeno transmitido por alimentos implicado en numerosos brotes en todo el mundo y es capaz de causar complicaciones extraintestinales en humanos. La sección de «Enteropatógenos¼ del Laboratorio Central de Salud Pública trabaja en mejorar la caracterización genómica de STEC, de modo de potenciar la vigilancia laboratorial y la investigación de brotes de enfermedades transmitidas por alimentos. La secuenciación de genoma completo (WGS, por sus siglas en inglés) se propone a nivel mundial como una herramienta de alta resolución para ser utilizada en el laboratorio de rutina, ya que permite obtener todos los resultados en un único proceso. El objetivo de este trabajo fue llevar a cabo, por primera vez, la caracterización genómica por WGS de nueve cepas STEC O157:H7 aisladas en Paraguay a partir de muestras de origen humano. Pudimos identificar los factores de virulencia, los mecanismos de resistencia, el subtipo MLST, e incluso pudimos establecer la relación filogenética entre los aislamientos. Además, detectamos que la mayoría de las cepas pertenecían al clado hipervirulento 8.
RESUMO
COVID-19, caused by SARS-CoV-2, has been linked to various bacterial and fungal infections. The incidence of mucormycosis has notably increased in individuals with COVID-19, with many cases reported globally, especially in India. The risk factors for developing mucormycosis include uncontrolled diabetes and use of immunosuppressants such as corticosteroids. We report a case of acute invasive fungal rhino-sinusitis (mucormycosis) in a 42 year old patient with no history of diabetes or steroid therapy but recently diagnosed with COVID-19. The patient presented with facial swelling, loose teeth, and imaging findings consistent with mucormycosis. The history, examination, and laboratory investigations were sufficient to exclude other causes of immunocompromised status in the patient. The diagnosis was confirmed through KOH staining of excised tissue, which tested positive for mucor. The patient underwent systemic antifungal therapy and Functional Endoscopic Sinus surgery (FESS) associated with a bilateral maxillectomy to remove the affected tissue. These interventions were successful, and the patient experienced a positive clinical response. This case report details an uncommon presentation of post COVID-19 acute invasive fungal rhino-sinusitis in a patient without typical risk factors for the infection. Therefore, clinicians should have a high index of suspicion for mucormycosis in patients with a recent history of COVID-19 infection, especially those with symptoms such as facial swelling or tooth loss. Prompt detection and management of mucormycosis are critical for improving patient outcomes. However, delays in diagnosis and treatment can lead to significant morbidity and mortality. (AU)
La COVID-19, causada por el virus SARS-CoV-2, se ha relacionado con varias infecciones bacterianas y fúngicas. La incidencia de mucormicosis ha aumentado notablemente en individuos con COVID-19, habiéndose reportado muchos casos a nivel mundial, especialmente en la India. Los factores de riesgo para desarrollar mucormicosis incluyen diabetes descontrolada y el uso de inmunosupresores como los corticosteroides. Presentamos un caso de rinosinusitis fúngica invasiva aguda (mucormicosis) en un paciente de 42 años sin antecedentes de diabetes ni terapia con esteroides, pero recientemente diagnosticado con COVID-19. El paciente presentaba hinchazón facial, movilidad dental y hallazgos de imágenes consistentes con mucormicosis. La historia clínica, el examen físico y las investigaciones de laboratorio fueron suficientes para descartar otras causas de inmunocompromiso en el paciente. El diagnóstico se confirmó mediante tinción con KOH del tejido extirpado, que resultó positiva para mucor. El paciente recibió terapia antifúngica sistémica y se sometió a una cirugía endoscópica funcional de senos paranasales (FESS) junto con una maxilectomía bilateral para extirpar el tejido afectado. Estas intervenciones fueron exitosas y el paciente experimentó una respuesta clínica positiva.Este informe de caso detalla una presentación poco común de rinosinusitis fúngica invasiva aguda post-COVID-19 en un paciente sin factores de riesgo típicos para la infección. Por lo tanto, los médicos deben tener un alto índice de sospecha de mucormicosis en pacientes con antecedentes recientes de infección por COVID-19, especialmente aquellos con síntomas como hinchazón facial o pérdida de dientes. La detección y el manejo oportunos de la mucormicosis son fundamentales para mejorar los resultados del paciente. Sin embargo, los retrasos en el diagnóstico y el tratamiento pueden provocar una morbilidad y mortalidad significativas. (AU)
Assuntos
Humanos , Masculino , Adulto , Pandemias , Infecções por Coronavirus/epidemiologia , Mucormicose/cirurgia , Mucormicose/terapia , Coronavírus Relacionado à Síndrome Respiratória Aguda Grave , Antifúngicos , EndoscopiaRESUMO
INTRODUCTION: The role of Aeromonas species in gastrointestinal disease is controversial. The aim was to analyze not only the virulence genes between different species of Aeromonas isolated from feces, but the distribution of these virulence genes between enterotoxigenic strains and co-pathogen strains. METHODS: Retrospective study of isolates of Aeromonas spp. in feces (2016-2021). The protocol included coproculture, identification by MALDI-TOF and confirmation by multiplex PCR. SPSS Statistics program was used. RESULTS: A total of 288 strains were studied for the virulence genes between different species of Aeromonas. To compare virulence genes between Aeromonas as co-pathogen and those isolated alone, 218 strains of the global set were used; 52 as co-pathogens compared with 166 Aeromonas without associated pathogen as controls. CONCLUSIONS: We found no significant differences in the distribution of virulence genes versus co-existence of co-pathogens or not. A. hydrophila is the potentially most virulent species of our set.
Assuntos
Aeromonas , Aeromonas/genética , Virulência/genética , Estudos Retrospectivos , Espanha/epidemiologia , FezesRESUMO
Escherichia coli O157:H7 is a foodborne pathogen implicated in numerous outbreaks worldwide that has the ability to cause extra-intestinal complications in humans. The Enteropathogens Division of the Central Public Health Laboratory (CPHL) in Paraguay is working to improve the genomic characterization of Shiga toxin-producing E. coli (STEC) to enhance laboratory-based surveillance and investigation of foodborne disease outbreaks. Whole genome sequencing (WGS) is proposed worldwide to be used in the routine laboratory as a high-resolution tool that allows to have all the results in a single workflow. This study aimed to carry out for the first time, the genomic characterization by WGS of nine STEC O157:H7 strains isolated from human samples in Paraguay. We were able to identify virulence and resistance mechanisms, MLST subtype, and even establish the phylogenetic relationships between isolates. Furthermore, we detected the presence of strains belonging to hypervirulent clade 8 in most of the isolates studied.
Assuntos
Infecções por Escherichia coli , Escherichia coli O157 , Proteínas de Escherichia coli , Escherichia coli Shiga Toxigênica , Humanos , Escherichia coli O157/genética , Tipagem de Sequências Multilocus , Infecções por Escherichia coli/epidemiologia , Filogenia , Paraguai/epidemiologia , Sequenciamento Completo do Genoma/métodosRESUMO
Introducción: El género Salmonella está conformado por patógenos alimentarios causantes de salmonelosis, una enfermedad de distribución cosmopolita, que afecta a todos los grupos poblacionales, tanto en los países desarrollados como en los que están en vía de desarrollo, siendo un problema de salud pública. Con relación a esto, los biomarcadores moleculares se convierten en una herramienta útil para su diagnóstico y seguimiento. Objetivo: Describir los marcadores moleculares del género Salmonella y las diferentes técnicas moleculares empleadas para su detección en la actualidad. Metodología: Se realizó una búsqueda bibliográfica en las bases de datos Science direct, PubMed, Proquest y Ovid, utilizando 5 palabras clave, las cuales se combinaron de diferentes maneras para finalmente obtener 50 referencias bibliográficas. Resultados: Se evidencia gran variedad de biomarcadores del género Salmonella, los cuales son detectados por pruebas moleculares, como la técnica de PCR, que permite la detección directa de genes que codifican para los antígenos somáticos O y flagelares H de Salmonella y la determinación de los posibles serovares implicados en las enfermedades transmitidas por alimentos, de una manera rápida y precisa. Cabe resaltar las ventajas de los métodos moleculares frente a la serotipificación en cuanto al costo-beneficio, estandarización óptima, alta sensibilidad, especificidad y rapidez en la obtención de los resultados. Conclusiones: Los biomarcadores moleculares se consideran una herramienta de referencia para la identificación de serovares de Salmonella y su serotipificación, a través de la PCR, con un alto nivel de especificidad y sensibilidad en los resultados, aportando información relevante a nivel epidemiológico.
Introduction: The Salmonella genus is composed of food pathogens that cause salmonellosis, a disease of cosmopolitan distribution that affects all population groups, both in developed and developing countries, being a public health problem. In this regard, molecular biomarkers become a useful tool for its diagnosis and monitoring. Objective: Describe which are the molecular markers of the Salmonella genus and their determination through different molecular techniques currently used. Methodology: A bibliographic search was performed in databases such as Pubmed, Science direct, Elsevier, NCBI, Proquest and Ovid, using 5 keywords, which were combined in different ways to finally obtain 50 bibliographic references from the year 2005 to currently, selecting articles in English and Spanish. Results: A great variety of biomarkers of the Salmonella genus are evident, which are detected by molecular tests such as the PCR technique, this allows the direct detection of the genes that encode the somatic O and flagellar H antigens of Salmonella and quickly allows the determination of the possible serovars involved in food-borne diseases, in a fast and precise way, in addition to highlighting the advantages of the described molecular methods compared to serotyping in terms of cost-benefit, optimal standardization, high sensitivity, specificity and speed in the results. Conclusions: Molecular biomarkers are considered a reference tool for the identification of Salmonella serovars and their serotyping, through molecular techniques such as PCR, with a high level of specificity and sensitivity in the results, which are of epidemiological importance.
RESUMO
Introduction: Diarrhea caused by severe acute gastroenteritis is one of the main causes of infant mortality in children under 5 years of age. Therefore, it is interesting to perform a preclinical and clinical validation of the efficacy of B. longum subsp. infantis IM-1® against various gastrointestinal pathogens. B. infantis IM-1® was evaluated against different gastrointestinal pathogens that cause diarrhea in infants, using in vitro models, animal models, and clinical studies. B. infantis IM-1® is able in an in vitro model of MA-104 and HT-29 cells to inhibit rotavirus replication (up to 36.05%) as well as to protect cells from infection due to rotavirus (up to 48.50 %). An 11-amino acid peptide (MHQPHQPLPPT) with a molecular mass of 1,282 KDa produced by this probiotic with antirotaviral capacity has been identified. In a murine model, the IM-1® strain has been shown to provide in vivo protection against rotavirus infection. In adhesion experiments with HT29, IM-1® was able to displace some pathogens from the enterocyte, especially Cronobacter sakazakii and Salmonella enterica, and prevent the adhesion of C. sakazakii and Shigella sonnei. In a clinical study with 190 babies under 3 months of age, IM-1® reduced episodes of diarrhea, being safe, well tolerated and associated with a lower prevalence of constipation. B. infantis IM-1® is a safe, well tolerated and effective probiotic in reducing episodes of diarrhea caused by the main gastrointestinal pathogens in infants.
Introducción: La diarrea causada por gastroenteritis agudas graves es una de las principales causas de mortalidad infantil en niños menores de 5 años. Por ello es interesante realizar una validación preclínica y clínica de la eficacia de B. longum subsp. infantis IM-1® frente a diversos patógenos gastrointestinales. El B. infantis IM-1® fue evaluado frente a diferentes patógenos gastrointestinales causantes de diarrea en bebés utilizando modelos in vitro, modelos animales y estudios clínicos. B. infantis IM-1® es capaz en un modelo in vitro de células MA-104 y HT-29 de inhibir la replicación de rotavirus (hasta un 36,05 %), así como de proteger las células de la infección por rotavirus (hasta un 48,50 %). Se ha identificado un péptido de 11 aminoácidos (MHQPHQPLPPT) con una masa molecular de 1282 KDa producido por este probiótico con capacidad antirotaviral. En un modelo murino, la cepa IM-1® ha demostrado proporcionar protección in vivo contra la infección por rotavirus. En experimentos de adhesión con HT29, IM-1® fue capaz de desplazar algunos patógenos del enterocito, especialmente C. sakazakii y Salmonella entérica, e impedir la adhesión de C. sakazakii y Shigella sonnei. En un estudio clínico con 190 bebés de menos de 3 meses de edad IM-1® redujo los episodios de diarrea. Fue seguro, se toleró bien y se asoció con una menor prevalencia de estreñimiento. B. infantis IM-1® es un probiótico seguro, que se tolera bien y es eficaz en la reducción de los episodios de diarrea causados por los principales patógenos gastrointestinales en bebés.
Assuntos
Bifidobacterium longum subspecies infantis , Probióticos , Animais , Diarreia/tratamento farmacológico , Fezes/microbiologia , Humanos , Intestinos , Camundongos , Probióticos/uso terapêuticoRESUMO
Abstract The study of outer membrane vesicles (OMVs) became relevant because of theirprobable important role in the transfer of virulence factors to host cells. Campylobacter fetusis mainly a mammal pathogen whose virulence characterization is still limited. The aim of thisstudy was to evaluate and to characterize the secretion of OMVs in this bacterium. By trans-mission electron microscopy, we confirmed the production of OMVs in all the strains assayed.Purified OMVs showed a spherical shape and variable size, although comparable to those ofother gram-negative bacteria. We also confirmed the presence of the S-layer on the surface ofthe OMVs of all the strains assayed with the exception of those derived from the NTCC referencestrain. In addition, we demonstrated their immunoreactivity by the dot-blot assay. Hence, C.fetus OMVs could contribute to the modulation of the host response and constitute a candidateto be evaluated as an adjuvant of current vaccines used in the veterinary field. This work rep-resents a platform to drive future studies towards the role of these subcellular structures in C.fetus-host interaction.
Resumen El estudio de las vesículas de membrana externa (VME) tomó un rol protagónico, yaque se las ha relacionado con la transferencia de factores de virulencia a la célula hospedadora.Campylobacter fetus es, principalmente, un patógeno de mamíferos cuya virulencia solo hasido caracterizada de forma limitada. El objetivo de este trabajo fue evaluar y caracterizar la secreción de VME en esta bacteria. Mediante microscopía electrónica de transmisión confir-mamos la producción espontánea de VME en todas las cepas estudiadas. Las VME purificadasmostraron una morfología esférica y un tama˜no variable, pero compatible con el reporte deotras bacterias gram negativas. Asimismo, hemos demostrado que estas vesículas conservanla capa S en todas las cepas, menos en la cepa de referencia NCTC y hemos confirmado suinmunorreactividad por dot-blot inmunoblot. Estas VME de C. fetus podrían contribuir a la mod-ulación de la respuesta del hospedador y constituir un buen candidato como adyuvante de lasactuales vacunas empleadas en el campo veterinario. Este trabajo representa una plataformapara impulsar estudios futuros en torno al rol de estas estructuras subcelulares en la interfaseC. fetus-hospedador.
RESUMO
RESUMEN La actual pandemia de COVID-19 fue inducida por la emergencia de un coronavirus en un animal reservorio. De esta manera, es de gran importancia conocer como ocurre la evolución de estos agentes virales en la naturaleza. En este artículo, son presentados los principales mecanismos asociados a la evolución de los coronavirus considerando las especies de animales que actúan como reservorios o huéspedes evolutivos, los mecanismos genéticos virales arrollados en la generación de variantes virales y la contribución de las acciones humanas que puedan generar nuevos coronavirus recombinantes con potencial pandémico. Considerando los puntos discutidos en este artículo, concluimos que la generación de nuevos coronavirus podrá ser evitada con la implementación de políticas públicas que propongan acciones de salud única y así solo habrá salud humana habiendo salud ambiental y salud animal.
ABSTRACT The current COVID-19 pandemic was induced by the emergence of a coronavirus from an animal as a reservoir. Thus, it is of great importance to know how the evolution of these viral agents occurs in the nature. In this article, the main mechanisms associated with the evolution of coronaviruses were presented, indicating the animal species that act as reservoirs or evolutionary hosts, the viral genetic mechanisms involved in the generation of viral variants, the contribution of human actions to generate recombinant coronaviruses with pandemic potential. From the points discussed in the article, we conclude that the generation of new coronaviruses can be avoided with the implementation of public policies that propose health actions and thus there will only be human health if there is environmental health and animal health.
RESUMO
Abstract The present study outlines the conditioning of various parameters for the efficient removal of the apoplastic fraction of carnation enriched in polar compounds, mainly phenolics. Several studies can apply the described workflow to different plant species in the particular or global analysis of those metabolites in this peripheral extracellular space. Hence, using carnation (Dianthus caryophyllus L) roots and stems, we evaluated different infiltration solutions for removing apoplastic metabolites. The best outcome was obtained by using the buffer solution NaH2PO4-Na2HPO4 0.1 M pH 6.5/NaCl 50 mM, since the highest amount of apoplastic phenolic metabolites can be obtained with the slightest contamination of intracellular compounds. The metabolites were separated using HPLC-DAD-ESI-MS, affording chromatographic profiles with reasonable quality parameters based on resolution, selectivity, and number of theoretical plates. It was possible to identify eight differential compounds (one flavone and seven flavonols), whose core moieties consisted of (iso)pratol, kaempferide, (dihydro)kaempferol, quercetin, and myricetin-type flavonoids according to the test organ and the cultivar. We deduced that identified flavonoids are related to phytoanticipin-type metabolites in carnation, such as hydroxy-methoxyflavone, di-o-benzoylquercetin, and kaempferide disalicyloylrhamnoside, which are abundantly present in the resistant cultivar. The conditions described in this work are fundamental for delving into the role of apoplastic phenolic metabolites related to the defense mechanisms of this ornamental plant.
Resumen En el presente estudio se describe el acondicionamiento de algunos parámetros con fines de obtención eficiente de extractos apoplásticos enriquecidos en compuestos polares, principalmente fenólicos. Este flujo de trabajo descrito, incluso, puede ser aplicado a diferentes especies vegetales para ser empleado en el análisis particular o global de metabolitos en este espacio extracelular periférico. Para ello, usando raíces y tallos de clavel (Dianthus cariophyllus L), se evaluaron diferentes soluciones de infiltración para la extracción de los metabolitos apoplásticos. El mejor resultado se logró con la disolución amortiguadora NaH2PO4-Na2HPO4 0,1 M pH 6,5/NaCl 50 mM, porque se obtiene la mayor cantidad de metabolitos fenólicos apoplásticos, con la menor contaminación de compuestos intracelulares. Los metabolitos se separaron mediante HPLC-DAD-ESI-MS, obteniendo perfiles cromatográficos con parámetros de calidad razonables basados en resolución, selectividad y número de platos teóricos. Con estas condiciones, fue posible identificar ocho compuestos diferenciales (una flavona y siete flavonoles), cuyas estructuras básicas comprendían flavonoides del tipo (iso)pratol, kaempférido, (dihidro) kaempferol, quercetina y miricetina, según el órgano de prueba y la variedad. Los flavonoides identificados están relacionados con metabolitos de tipo fitoanticipina en el clavel, como hidroxi-metoxiflavona, di-o-benzoilquercetina y kaempférido disaliciloilrhamnósido, abundantemente presentes en la variedad resistente. Las condiciones descritas en este trabajo son fundamentales para profundizar en el papel de los metabolitos fenólicos apoplásticos relacionados con los mecanismos de defensa de esta planta ornamental.
Resumo O presente estudo descreve o condicionamento de alguns parâmetros para a obtenção eficiente de extratos apoplásticos enriquecidos em compostos polares, principalmente fenólicos. Este fluxo de trabalho descrito pode até mesmo ser aplicado a diferentes espécies de plantas para serem usadas na análise particular ou global de metabólitos neste espaço extracelular periférico. Para isso, utilizando raízes e caules de craveiro (Dianthus cariophyllus L), diferentes soluções de infiltração foram avaliadas para a extração de metabólitos apoplásticos. O melhor resultado foi obtido com a solução tampão NaH2PO4-Na2HPO40 0.1 M pH 6.5/NaCl 50 mM, pois a maior quantidade de metabólitos fenólicos apoplásticos é extraída. Os metabólitos foram separados por HPLC-DAD-ESI-MS, obtendo-se perfis cromatográficos com parâmetros de qualidade razoáveis baseados na resolução, seletividade e número de pratos teóricos. Nessas condições, foi possível identificar oito compostos diferenciais (uma flavona e sete flavonóis), cujas estruturas básicas compreendem flavonóides do tipo (iso) pratol, kaempferida, (dihidro)kaempferol, quercetina e miricetina, de acordo com o órgão e a variedade de craveiro utilizado. Os flavonóides identificados estão relacionados a metabólitos do tipo fitoanticipinas no craveiro, como hidroxi-metoxiflavona, di-O-benzoilquercetina e kaempférido disaliciloilramnósido, abundantemente ocorridos na cultivar resistente. As condições descritas neste trabalho são essenciais para se aprofundar no papel dos metabólitos fenólicos apoplásticos relacionados aos mecanismos de defesa dessa planta ornamental.
RESUMO
The study of outer membrane vesicles (OMVs) became relevant because of their probable important role in the transfer of virulence factors to host cells. Campylobacter fetus is mainly a mammal pathogen whose virulence characterization is still limited. The aim of this study was to evaluate and to characterize the secretion of OMVs in this bacterium. By transmission electron microscopy, we confirmed the production of OMVs in all the strains assayed. Purified OMVs showed a spherical shape and variable size, although comparable to those of other gram-negative bacteria. We also confirmed the presence of the S-layer on the surface of the OMVs of all the strains assayed with the exception of those derived from the NTCC reference strain. In addition, we demonstrated their immunoreactivity by the dot-blot assay. Hence, C. fetus OMVs could contribute to the modulation of the host response and constitute a candidate to be evaluated as an adjuvant of current vaccines used in the veterinary field. This work represents a platform to drive future studies towards the role of these subcellular structures in C. fetus-host interaction.
Assuntos
Proteínas da Membrana Bacteriana Externa , Campylobacter fetus , Animais , Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/química , Bactérias Gram-Negativas , Mamíferos , Virulência , Fatores de VirulênciaRESUMO
La diarrea causada por gastroenteritis agudas graves es una de las principales causas de mortalidad infantil en niños menores de 5 años. Por ello es interesante realizar una validación preclínica y clínica de la eficacia de B. longum subsp. infantis IM-1® frente a diversos patógenos gastrointestinales. El B. infantis IM-1® fue evaluado frente a diferentes patógenos gastrointestinales causantes de diarrea en bebés utilizando modelos in vitro, modelos animales y estudios clínicos.B. infantis IM-1® es capaz en un modelo in vitro de células MA-104 y HT-29 de inhibir la replicación de rotavirus (hasta un 36,05 %), así como de proteger las células de la infección por rotavirus (hasta un 48,50 %). Se ha identificado un péptido de 11 aminoácidos (MHQPHQPLPPT) con una masa molecular de 1282 KDa producido por este probiótico con capacidad antirotaviral. En un modelo murino, la cepa IM-1® ha demostrado proporcionar protección in vivo contra la infección por rotavirus. En experimentos de adhesión con HT29, IM-1® fue capaz de desplazar algunos patógenos del enterocito, especialmente C. sakazakii y Salmonella entérica, e impedir la adhesión de C. sakazakii y Shigella sonnei. En un estudio clínico con 190 bebés de menos de 3 meses de edad IM-1® redujo los episodios de diarrea. Fue seguro, se toleró bien y se asoció con una menor prevalencia de estreñimiento.B. infantis IM-1® es un probiótico seguro, que se tolera bien y es eficaz en la reducción de los episodios de diarrea causados por los principales patógenos gastrointestinales en bebés. (AU)
Diarrhea caused by severe acute gastroenteritis is one of the main causes of infant mortality in children under 5 years of age. Therefore, it is interesting to perform a preclinical and clinical validation of the efficacy of B. longum subsp. infantis IM-1R against various gastrointestinal pathogens. B. infantis IM-1R was evaluated against different gastrointestinal pathogens that cause diarrhea in infants, using in vitro models, animal models, and clinical studies.B. infantis IM-1R is able in an in vitro model of MA-104 and HT-29 cells to inhibit rotavirus replication (up to 36.05%) as well as to protect cells from infection due to rotavirus (up to 48.50 %). An 11-amino acid peptide (MHQPHQPLPPT) with a molecular mass of 1,282 KDa produced by this probiotic with antirotaviral capacity has been identified. In a murine model, the IM-1R strain has been shown to provide in vivo protection against rotavirus infection. In adhesion experiments with HT29, IM-1R was able to displace some pathogens from the enterocyte, especially Cronobacter sakazakii and Salmonella enterica, and prevent the adhesion of C. sakazakii and Shigella sonnei. In a clinical study with 190 babies under 3 months of age, IM-1R reduced episodes of diarrhea, being safe, well tolerated and associated with a lower prevalence of constipation.B. infantis IM-1R is a safe, well tolerated and effective probiotic in reducing episodes of diarrhea caused by the main gastrointestinal pathogens in infants. (AU)
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Recém-Nascido , Lactente , Pré-Escolar , Bifidobacterium longum subspecies infantis , Noxas , Intestinos , Gastroenterite , Microbiota , Probióticos , DiarreiaRESUMO
Este estudo teve o objetivo de indicar estratégias de melhoria contínua dos processos de higienização de superfícies hospitalares de uma unidade de terapia intensiva através de abordagem Lean Healthcare. É um estudo de caráter exploratório, descritivo, observacional, em que a coleta de dados ocorreu no período de julho de 2021 a janeiro de 2022 por observações in loco e entrevistas com cinco profissionais do serviço de higienização. Utilizaram-se as ferramentas: Gemba, mapeamento de fluxo de valor e diagrama do espaguete adaptado, árvore da realidade atual (ARA), Matriz GUT, Matriz de esforço impacto e 5W2H, para levantar, analisar problemas e propor intervenções para futuras melhorias. Como indicador de qualidade do processo optou-se pelo uso de marcadores fluorescentes com análise de 10 higienizações terminais. Para tratamento dos dados utilizou-se o software Miro®, o Excel® e uma planta física projetada da área. Atendeu parcialmente às diretrizes SQUIRE 2.0 através do uso de ferramentas Lean com foco na melhoria da qualidade, segurança e cuidados em saúde. Identificou-se o uso inadequado de desinfetante e de equipamento de proteção individual, manejo incorreto de perfurocortante, além da ordem, técnica e movimentos incorretos. O percentual do indicador completo/correto do processo de higienização terminal foi de 70%. Além disso, o teste do marcador fluorescente demonstrou apenas 33% de conformidade da limpeza, concluindo que não houve padrão em nenhuma higienização terminal observada. Além disso, identificou-se inadequações que comprometeram a qualidade do processo de limpeza e desinfecção de leitos, o que é uma premissa básica para otimização do trabalho e sustentabilidade institucional. Nesse contexto, os resultados sumarizados neste estudo demonstraram que a utilização das ferramentas Lean contribuiu para a proposição de intervenções objetivas baseadas nos reais problemas identificados e analisados.
This study aimed to adjust strategies for continuous improvement of hospital equipment management processes in an intensive care unit through Lean Healthcare approch. It is exploratory, descriptive, observational in which data collection took place from July 2021 to January 2022 through on-site observations and interviews with five professionals from the hygiene service. Use as tools: Gemba, value mapping and adapted flow flow, current reality tree (ARA), GUT Matrix, Impact Effort Matrix and 5W2H, to raise, analyze problems and propose interventions for future improvements. As an indicator of process quality, we chose to use fluorescent indicators with analysis of 10 cleaning terminals. To use Miro® software, Excel® and an area data treatment plant. Attended health services. Inadequate use of disinfectant and personal protective equipment, inadequate sharps, in addition to incorrect order, techniques and movements were identified. The percentage of the indicator/correct in the evaluation process of the complete terminal was 70%. In addition, the fluorescent marker test is only 33% cleaning compliance, concluding that there was no pattern in any terminal cleaning observed. In addition, the necessary adaptations to guarantee the sustainability and quality of the bed cleaning process, which is basic for the optimization of work and institutional infection. In these summaries, in this study, the results are calculated and the use of Lean tools designed to propose objective interventions in real problems and estimates.
Assuntos
Humanos , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Qualidade da Assistência à Saúde , Desinfecção , Avaliação de Processos em Cuidados de Saúde , Gestão da Qualidade Total , Unidades de Terapia Intensiva , Melhoria de Qualidade , Segurança do Paciente , Zeladoria HospitalarRESUMO
INTRODUCTION: An increase in recent years in the isolation of Vagococcus spp. is suggestive of emerging infection by this pathogen in our hospital. METHODS: Prospective, descriptive study. PERIOD: July 2014-January 2019. Phenotypic identification of 15 isolates of Vagococcus spp. was performed by conventional biochemical tests, automated methodology and mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Molecular identification was achieved by sequencing the 16S rRNA gene. The Vitek™ 2C automated system was used to test antibiotic susceptibility. RESULTS: The molecular method identified 11 Vagococcus fluvialis, one Vagococcus lutrae and three Vagococcus spp. MALDI-TOF MS facilitated the rapid recognition of the genus. The most active antibiotics were ampicillin, trimethoprim/sulfamethoxazole, vancomycin, teicoplanin and linezolid. Most of the cases of isolation were associated with skin and soft tissue or osteoarticular infections in patients with diabetes. CONCLUSION: This article is the most extensive review of cases of Vagococcus spp. infection reported in the literature and highlights the microbiological and clinical aspects of this pathogen.
Assuntos
Enterococcaceae , Humanos , Estudos Prospectivos , RNA Ribossômico 16S/genéticaRESUMO
Introducción: En los últimos años un aumento en la frecuencia de aislamiento de Vagococcus spp. estaría indicando la urgencia de la infección por este patógeno en nuestra institución. Métodos: Estudio prospectivo y descriptivo que abarca el periodo de julio de 2014 a enero de 2019. La identificación fenotípica de 15 aislados de Vagococcus spp. se realizó por pruebas bioquímicas convencionales, por metodología automatizada y por espectrometría de masas (MALDI-TOF MS). La identificación molecular por secuenciación del gen ARNr 16S. La sensibilidad antibiótica fue realizada utilizando el sistema automatizado Vitek® 2C. Resultados: Se identificaron 11 Vagococcus fluvialis, un Vagococcus lutrae y tres Vagococcus spp. por metodología molecular. MALDI-TOF MS permitió el rápido reconocimiento de este género. Los antibióticos más activos fueron ampicilina, trimetoprima/sulfametoxazol, vancomicina, teicoplanina y linezolid. La mayoría de los aislamientos se asociaron con infecciones en la piel y partes blandas u osteoarticulares en pacientes diabéticos. Conclusión: Esta comunicación representa la mayor revisión de casos de infecciones por Vagococcus spp. reportados en la literatura, en la que se destacan los aspectos microbiológicos y clínicos de este patógeno.(AU)
Introduction: An increase in recent years in the isolation of Vagococcus spp. is suggestive of emerging infection by this pathogen in our hospital. Methods: Prospective, descriptive study. Period: July 2014-January 2019. Phenotypic identification of 15 isolates of Vagococcus spp. was performed by conventional biochemical tests, automated methodology and mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Molecular identification was achieved by sequencing the 16S rRNA gene. The Vitek 2C automated system was used to test antibiotic susceptibility. Results: The molecular method identified 11 Vagococcus fluvialis, one Vagococcus lutrae and three Vagococcus spp. MALDI-TOF MS facilitated the rapid recognition of the genus. The most active antibiotics were ampicillin, trimethoprim/sulfamethoxazole, vancomycin, teicoplanin and linezolid. Most of the cases of isolation were associated with skin and soft tissue or osteoarticular infections in patients with diabetes. Conclusion: This article is the most extensive review of cases of Vagococcus spp. infection reported in the literature and highlights the microbiological and clinical aspects of this pathogen.(AU)
Assuntos
Humanos , Bactérias Gram-Positivas , Variação Biológica da População , Antibacterianos , Ampicilina , Combinação Trimetoprima e Sulfametoxazol , Vancomicina , Teicoplanina , Espectrometria de Massas , Estudos Prospectivos , Epidemiologia Descritiva , Doenças Transmissíveis , Microbiologia , Diabetes MellitusRESUMO
RESUMEN Los Lactobacillus inhiben múltiples agentes patógenos causales de toxiinfecciones alimentarias, relacionándose su mecanismo de acción con la modulación del sistema inmune. Por su parte, E. coli O157:H7 es considerado un microorganismo causal de alteraciones, principalmente, a nivel intestinal y renal y es encontrado, por lo general, en matrices alimentarias contaminadas o en mal estado. La incidencia de este tipo de problemática se ha relacionado a la resistencia a los antibióticos, que limita su control y mitigación de manera eficaz. Por lo tanto, el objetivo del trabajo fue evaluar el efecto inhibitorio de Lactobacillus plantarum microencapsulado in vitro sobre Escherichia coli O157:H7, con el fin de encontrar estrategias inocuas para el control de agentes patógenos. Se determinó la cinética de fermentación, evaluando variables, como consumo de azúcar, producción de proteínas, acidez, pH y fase logarítmica (UFC/mL). La microencapsulación, se realizó mediante la técnica de spray drying, utilizando inulina y maltodextrina, como materiales encapsulantes. Se determinó la viabilidad de L. plantarum bajo condiciones gastrointestinales simuladas. Además, se evaluaron las características físicas del microorganismo microencapsulado y el efecto inhibitorio de L. plantarum y su sobrenadante sobre E. coli O157:H7. Posteriormente, se valoró la susceptibilidad de ambas cepas a diferentes antibióticos. Como resultado, se encontró resistencia de ambas cepas a algunos antibióticos evaluados, como penicilina. La cepa láctica y el sobrenadante inhibieron el crecimiento de E. coli O157:H7. L. plantarum presentó una viabilidad óptima a condiciones gastrointestinales simuladas después de 45 días de almacenamiento (1,4x107-3,0x1010UFC/150µL). La microencapsulación incrementa su vialidad y su establecimiento en el huésped.
ABSTRACT Lactobacillus inhibit multiple pathogens that cause food poisoning, and their mechanism of action is related to the modulation of the immune system. E. coli O157:H7 is considered a causal microorganism of alterations, mainly at intestinal and renal level, and is generally found in contaminated or spoiled food matrices. The incidence of this type of problem has been related to antibiotic resistance, which limits its effective control and mitigation. Therefore, the objective of this work was to evaluate the inhibitory effect of microencapsulated Lactobacillus plantarum in vitro on Escherichia coli O157:H7, in order to find innocuous strategies for the control of pathogens. Fermentation kinetics were determined by evaluating variables such as sugar consumption, protein production, acidity, pH and logarithmic phase (CFU/mL). Microencapsulation was performed by spray drying, using inulin and maltodextrin as encapsulating materials. The viability of L. plantarum was determined under simulated gastrointestinal conditions. In addition, the physical characteristics of the microencapsulated microorganism and the inhibitory effect of L. plantarum and its supernatant on E. coli O157:H7 were evaluated. Subsequently, the susceptibility of both strains to different antibiotics was evaluated. As a result, resistance of both strains to some of the antibiotics evaluated, such as penicillin, was found. The lactic strain and the supernatant inhibited the growth of E. coli O157:H7. L. plantarum showed optimal viability at simulated gastrointestinal conditions after 45 days of storage (1.4x107-3.0x1010CFU/150µL). Microencapsulation increases its viability and establishment in the host.
RESUMO
La enfermedad del Legionario es causada por bacterias pertenecientes al género Legionella, siendo la especie pneumophila el principal agente etiológico de esta patología. Esta bacteria se describió por primera vez en 1977 como causa de un brote de neumonía grave registrado en 1976 en un centro de convenciones en los Estados Unidos de América. La enfermedad se presenta como una neumonía atípica, responsable del 1 al 15 % de los casos de neumonías adquiridas en la comunidad (NAC), del 5 al 10% de neumonías del adulto y del 1% en menores de 15 años. Los miembros de la familia Legionellaceae son bacilos aeróbicos gramnegativos que crecen lentamente y se encuentran ampliamente distribuidos en cuerpos de agua. La forma más común de transmisión de Legionella spp es la inhalación de aerosoles contaminados generados a partir de fuentes de agua artificiales. Se asocian con la aparición de brotes esporádicos y epidémicos en la comunidad y en infecciones nosocomiales. Las especies pertenecientes al género Legionella se consideran patógenos emergentes transmitidos por el agua. El objetivo de este trabajo es realizar una revisión sobre las manifestaciones y presentaciones clínicas de la infección causada por L. pneumophila, en virtud de que es considerado mundialmente un patógeno emergente y por existir evidencias de su presencia en sistemas de almacenamiento de agua tratada en la región nordeste de la República Argentina, razón primordial para alertar y actualizar conocimientos al respecto
Legionnaires' disease is caused by bacteria belonging to the genus Legionella, being the pneumophila specie the main etiological agent of this pathology. This bacterium was first described in 1977 as the cause of a severe pneumonia outbreak in 1976 at a convention center in the United States of America. The disease presents as an atypical pneumonia, responsible for 1% to 15% of cases of community-acquired pneumonia (CAP), 5% to 10% of pneumonia in adults and 1% in children under 15 years of age. Members of the Legionellaceae family are aerobic, gram-negative rods that grow slowly and are widely distributed in water bodies. The most common way of transmission of Legionella spp is the inhalation of contaminated aerosols generated from artificial water sources. They are associated with the appearance of sporadic and epidemic outbreaks in the community and in nosocomial infections. Species belonging to the genus Legionella are considered emerging waterborne pathogens.The aim of this work is to carry out a review on the manifestations and clinical presentations of the infection caused by L. pneumophila, due to that it is considered an emerging pathogen worldwide and because there is evidence of its presence in storage systems of treated water in the Northeast region of the Argentine Republic, primary reason to alert and update knowledge in this regard.
Assuntos
Humanos , Doença dos Legionários/prevenção & controle , Doença dos Legionários/transmissão , Armazenamento de Água , Crescimento Bacteriano/prevenção & controleRESUMO
Resumen Se realizó un diagnóstico patológico de un cultivo de Mora de Castilla en la vereda Pascote, municipio de Gutiérrez Cundinamarca, Colombia. Las muestras vegetales se tomaron de las hojas, tallo, flor, fruto y raíz; las cuales, se procesaron en identificaron en el laboratorio de fitopatología de la Universidad de los Llanos. En el campo se evaluó incidencia de cada síntoma. Se encontraron cuatro patógenos fungosos Colletrotrichum . gloesporoides (Penz.) Penz. con 40.00% de incidencia, Peronospora sparsa Berk con una incidencia del 20.00 %, Oidium sp, con 12.50% de incidencia y Botrytis cinérea Perms., con una incidencia del 7.50 %.
Abstract A pathological diagnosis was made of an Andean blackberry crop (Rubus glaucus Bentham) in the rural area of Pascote, in the municipality of Gutiérrez, Cundinamarca, Colombia. Samples were taken from blackberry leaves, stems, flowers, fruit and roots; they were processed and identified in the Universidad de Los Llanos' plant pathology laboratory. Pathogen/disease symptom incidence was evaluated in the field. Four fungal pathogens were found and identified: Colletotrichum gloesporoides (Penz.) Penz (anthracnose), 40% incidence, Peronospora sparsa Berk (downy mildew), 20% incidence, Oidium sp. (powdery mildew), 12.5% incidence, and Botrytis cinerea Perms (gray mold disease), 7.5% incidence.
Resumo Realizou-se um diagnóstico fitopatológico num cultivo de amora preta no Vilarejo de Pascote, município de Gutiérrez, Cundinamarca, Colômbia. As amostras vegetais foram colhidas das folhas, caule, flor, fruto e raiz; que foram processados e identificados no laboratório de patologia vegetal da Universidad de los Llanos. A incidência de cada sintoma foi avaliada no campo. Foram encontrados quatro patógenos fúngicos: Colletrotrichum. gloesporoides (Penz.) Penz. com uma incidência de 40,00%; Peronospora sparsa Berk com uma incidência de 20,00%; Oidium sp, com uma incidência de 12,50%; e Botrytis cinérea Perms., com uma incidência de 7,50%.