Leptospirosis in slaughtered cows in the Triangulo Mineiro, Minas Gerais: prevalence, serological profile and renal lesions / Leptospirose em vacas abatidas no Triângulo Mineiro, Minas Gerais: prevalência, perfil sorológico e lesões renais

Leptospirosis is a zoonosis that affects several species of domestic and wild animals and is an important cause of economic losses in cattle in Brazil. In this study, we determined the prevalence of bovine leptospirosis in the Triângulo Mineiro region, Minas Gerais, Brazil, identified the most frequent serovars of Leptospira interrogans, and examine the renal pathological changes associated with the disease. Samples of blood serum and kidney fragments from 100 bovine females were collected in cattle abattoir. In the serological investigation 48% of the cows were positive. The serovars for which there were more reactive animals were Wolffi (24%), Hardjo (21%) and Hebdomadis (18%). Among the positive samples, 14/48 showedantibody titers greater than 1:100, and 70.83% of the seropositive animals responded to more than one Leptospira interrogans serovar. Only one farm did not have seropositive cows and in nine farms studied, six (66.66%) presented seropositive animals to the Hebdomadis serovar. At the histopathological examination, the most frequent microscopic lesions in positive animals were hyalinization (81.25%), congestion (81.25%) and hydropic degeneration (70.83%). However, these histopathological alterations were also found in kidneys of animals negative to serology, such as hyalinization (80.77%), congestion (48.07%) and hydropic degeneration (55.77%) and these findings are unrelated to positivity. Histopathological examination of the kidneys is not indicated to replace the serological diagnosis of leptospirosis, and may be used only as a complementary examination. Despite the low frequency of seropositive animals in the Triângulo Mineiro region, the disease is present in a large number of farms. Noteworthy is the high frequency of serovar Hebdomadis and it can be considered an emerging serovar in the region. The evaluation of the frequency of this serovar in other regions becomes important, and once verified should result in the recommendation of the inclusion of this serovar in the leptospirosis control.

A leptospirose é uma zoonose que afeta várias espécies de animais domésticos e silvestres e importante causa de prejuízos à bovinocultura nacional. Objetivou-se determinar a prevalência da leptospirose e identificar os sorovares de Leptospira interrogans mais freqüentes na região do Triângulo Mineiro, além de avaliar microscopicamente as lesões renais e correlacionar estas lesões com sorovares específicos. Foram coletadas amostras de soro sanguíneo e fragmentos de rim de 100 fêmeas bovinas em abatedouro e, destas 100 amostras, 48% foram positivas. Os sorovares para os quais houve mais animais reagentes foram Wolffi (24%), hardjo (21%) e Hebdomadis (18%). Dentre as amostras positivas, 14/48 apresentaram títulos de anticorpos aglutinantes superiores a 1:100 e notou-se que 70,83% dos animais soropositivos reagiram a mais de um sorovar de Leptospira interrogans. Somente uma propriedade não possuía vacas sororreagentes para leptospirose e das nove propriedades estudadas, seis (66,66%) apresentaram animais soropositivos ao sorovar Hebdomadis. Ao exame histopatológico, as alterações microscópicas mais encontradas em animais positivos foram hialinização (81,25%), congestão (81,25%) e degeneração hidrópica (70,83%). Porém, essas alterações histopatológicas também foram encontradas em rins de animais negativos à sorologia, como hialinização (80,77%), congestão (48,07%) e degeneração hidrópica (55,77%) e estes achados não apresentaram correlação com positividade. O exame histopatológico dos rins não é indicado para substituir o diagnóstico sorológico da leptospirose, podendo ser utilizado somente como um exame complementar. Apesar da frequência de animais sororreagentes ser baixa na região do Triângulo Mineiro, a doença está presente em um grande número depropriedades. Chama a atenção a alta frequência do sorovar Hebdomadis, podendo ser considerado um sorovar emergente na região. A avaliação da frequência deste sorovar em outras regiões se torna importante, pois uma vez verificada, deve resultar na recomendação da inclusão deste sorovar no controle da leptospirose.

Avaliação dos fatores de risco e prevalência da leptospirose em caprinos em municípios do Alto Médio Gurguéia do Estado do Piauí / Evaluation of risk factors and prevalence of leptospirosis in goats in minicipalities of Microrregion of the Upper-middle Gurguéia the State of Piaui

The objective of this study was to evaluate the risk factors and to calculate the prevalence ofLeptospirosis in goats in municipalities of the Upper Gurguéia micro region of the State of Piauí. A total of 143goat samples were collected from four (4) municipalities of the micro-region. Applied an epidemiologicalquestionnaire with possible risk factors. The diagnosis was made by the microscopic sero-agglutination (SAM)technique against 22 pathogenic serovars. The reagents were determined serovar appears when 50% or moreagglutination reaction on the cutting point titer of 1: 100. The overall prevalence was 9.09%. SerumIcterohaemorrhagiae were found in 5.59%, Grippotyphosa in 1.4%, Icterohaemorragiae + Pomona (0.7%),Icterohaemorrhagiae + Canicola (0.7%) and Icterohaemorrhagiae + Autumnalis (0.7%). It is concluded that inthe studied region it has a high prevalence for leptospirosis and that there are no measures of controls tocontain the risk factors.(AU)

Avaliação dos fatores de risco e prevalência da leptospirose em caprinos em municípios do Alto Médio Gurguéia do Estado do Piauí / Evaluation of risk factors and prevalence of leptospirosis in goats in minicipalities of Microrregion of the Upper-middle Gurguéia the State of Piaui

The objective of this study was to evaluate the risk factors and to calculate the prevalence ofLeptospirosis in goats in municipalities of the Upper Gurguéia micro region of the State of Piauí. A total of 143goat samples were collected from four (4) municipalities of the micro-region. Applied an epidemiologicalquestionnaire with possible risk factors. The diagnosis was made by the microscopic sero-agglutination (SAM)technique against 22 pathogenic serovars. The reagents were determined serovar appears when 50% or moreagglutination reaction on the cutting point titer of 1: 100. The overall prevalence was 9.09%. SerumIcterohaemorrhagiae were found in 5.59%, Grippotyphosa in 1.4%, Icterohaemorragiae + Pomona (0.7%),Icterohaemorrhagiae + Canicola (0.7%) and Icterohaemorrhagiae + Autumnalis (0.7%). It is concluded that inthe studied region it has a high prevalence for leptospirosis and that there are no measures of controls tocontain the risk factors.

Avaliação do teste de aglutinação microscópica utilizando-se como antígeno leptospiras saprófitas para o diagnóstico da leptospirose humana / Evaluation of microscopic agglutination test using saprophytic leptospires for diagnosis of human leptospirosis

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de efetuar o diagnóstico precoce do teste de aglutinação microscópica (MAT) utilizando-se como antígeno leptospiras saprófitas sorovar Patoc (MAT-Patoc). Neste contexto, os resultados obtidos em amostras de soro de casos confirmados de leptospirose foram comparados com aqueles obtidos no teste ELISA IgM. Cento e cinquenta e oito amostras colhidas na fase aguda da doença foram analisadas pelo MAT-Patoc. Os soros com títulos ≥ 50 foram considerados reagentes. A sensibilidade do MAT-Patoc e do ELISA-IgM foi de 13,29% e 28,48%, respectivamente. Nos sete primeiros dias da doença, o MAT-Patoc foi capaz de detectar 12,29% dos casos, enquanto o ELISA-IgM detectou 24,59%. O MAT-Patoc foi reagente em amostras de casos cujos prováveis sorogrupos infectantes foram Icterohaemorrhagiae, Cynopteri e Ballum. Em conclusão, a utilização do teste MAT-Patoc apresentou menor sensibilidade no diagnóstico quando comparado ao ELISA-IgM, embora tenha sido reagente em algumas amostras com resultado não reagente. O MAT-Patoc deve ser utilizado em combinação com ELISA-IgM para melhorar a sensibilidade do diagnóstico de leptospirose na primeira fase da doença, com subsequente confirmação pelo MAT de referência.

The aim of this study was to evaluate the early detection of antibodies by the microscopic agglutination test (MAT) using saprophytic leptospira serovar Patoc (MAT-Patoc), in serum samples from patients with confirmed leptospirosis. The obtained results were compared with those found in ELISA-IgM. A hundred fifty-eight serum samples collected from patients in acute phase of illness were analysed by MAT-Patoc. Samples with titers ≥ 50 were considered positive. The sensitivity of MAT-Patoc and IgM-ELISA was 13.29 % and 28.48 %, respectively. In the first seven days of the disease, MAT-Patoc was positive in 12.29 % of the cases, while the IgM-ELISA was positive in 24.59 %. The MAT-Patoc was positive in sera from confirmed cases, and the infecting serogroups were Icterohaemorrhagiae, Cynopteri and Ballum. In conclusion, the use of MAT-Patoc test showed lower sensitivity for diagnosing leptospirosis when compared with ELISA-IgM, although positive reactivity was found in some samples with negative results. The MAT-Patoc should be used in combination with ELISA-IgM to improve the sensitivity of the diagnosis of leptospirosis in the first phase of the disease, with subsequent confirmation by standard MAT.

Evaluation of microscopic agglutination test using saprophytic leptospires for diagnosis of human leptospirosis / Avaliação do teste de aglutinação microscópica utilizando-se como antígeno leptospiras saprófitas para o diagnóstico da leptospirose humana

The aim of this study was to evaluate the early detection of antibodies by the microscopic agglutination test (MAT) using saprophytic leptospira serovar Patoc (MAT-Patoc), in serum samples from patients with confirmed leptospirosis. The obtained results were compared with those found in ELISA-IgM. A hundred fifty-eight serum samples collected from patients in acute phase of illness were analysed by MAT-Patoc. Samples with titers 50 were considered positive. The sensitivity of MAT-Patoc and IgM-ELISA was 13.29 % and 28.48 %, respectively. In the first seven days of the disease, MAT-Patoc was positive in 12.29 % of the cases, while the IgM-ELISA was positive in 24.59 %. The MAT-Patoc was positive in sera from confirmed cases, and the infecting serogroups were Icterohaemorrhagiae, Cynopteri and Ballum. In conclusion, the use of MAT-Patoc test showed lower sensitivity for diagnosing leptospirosis when compared with ELISA-IgM, although positive reactivity was found in some samples with negative results. The MAT-Patoc should be used in combination with ELISA-IgM to improve the sensitivity of the diagnosis of leptospirosis in the first phase of the disease, with subsequent confirmation by standard MAT(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de efetuar o diagnóstico precoce do teste de aglutinação microscópica (MAT) utilizando-se como antígeno leptospiras saprófitas sorovar Patoc (MAT-Patoc). Neste contexto, os resultados obtidos em amostras de soro de casos confirmados de leptospirose foram comparados com aqueles obtidos no teste ELISA IgM. Cento e cinquenta e oito amostras colhidas na fase aguda da doença foram analisadas pelo MAT-Patoc. Os soros com títulos 50 foram considerados reagentes. A sensibilidade do MAT-Patoc e do ELISA-IgM foi de 13,29 % e 28,48 %, respectivamente. Nos sete primeiros dias da doença, o MAT-Patoc foi capaz de detectar 12,29 % dos casos, enquanto o ELISA-IgM detectou 24,59 %. O MAT-Patoc foi reagente em amostras de casos cujos prováveis sorogrupos infectantes foram Icterohaemorrhagiae, Cynopteri e Ballum. Em conclusão, a utilização do teste MAT-Patoc apresentou menor sensibilidade no diagnóstico quando comparado ao ELISA-IgM, embora tenha sido reagente em algumas amostras com resultado não reagente. O MAT-Patoc deve ser utilizado em combinação com ELISA-IgM para melhorar a sensibilidade do diagnóstico de leptospirose na primeira fase da doença, com subsequente confirmação pelo MAT de referência(AU)

Fatores de risco associados à infecção pela Leptospira spp. sorovar Hardjo em rebanhos exclusivos de ovinos e nos consorciados com bovinos / Risk factors associated to Leptospira spp. serovar Hardjo infection in sheep-only herds and in sheep-cattle herds

A infecção por Leptospira spp. sorovar Hardjo é endêmica nos rebanhos bovinos brasileiros. A introdução de animal infectado em rebanhos livres, acesso a aguadas e pastejo consorciado entre ovinos e bovinos têm sido apontados como os principais fatores de risco. Objetivou-se investigar quais fatores de risco envolvem a infecção pelo sorovar Hardjo em rebanhos exclusivos de ovinos e consorciados com bovinos nas condições criatórias extensivas e semi-intensivas adotadas na região de Sorocaba, São Paulo. Amostras sorológicas de oito rebanhos, não vacinados contra leptospirose: cinco com criação consorciada entre ovinos e bovinos e três exclusivas de ovinos foram examinadas pela reação de soroaglutinação microscópica. Um questionário epidemiológico foi aplicado considerando-se manejos sanitário e zootécnico e condições ambientais. Todos os rebanhos apresentaram animais reatores para Leptospira spp.: 51,16% (22/43) dos animais consorciados e 70,83% (17/24) dos ovinos (p = 0,191), mas apenas os rebanhos consorciados apresentaram pelo menos um animal reator ao sorovar Hardjo. A condição consorciada foi a única com significância para a presença sorológica do sorovar Hardjo (p = 0,018). Quando avaliado o total de ovinos em condições criatórias exclusivas frente aos ovinos consorciados com bovinos, o risco associado à consorciação foi significante para a presença do sorovar Hardjo (p = 0,005). Conclui-se que o sorovar Hardjo estava relacionado à presença de bovinos e independente de outros fatores de risco.

Leptospira spp. serovar Hardjo infection is endemic in Brazilian cattle herds. The main risk factors for infection by serovar Hardjo are introduction of infected bovine into free herds, access to surface water and grazing sheep and cattle together. The present study investigated the risk factors involved in serovar Hardjo infection in sheep-only herds and in sheep grazing together with cattle herds in the region of Sorocaba, state of São Paulo, Brazil. Serum samples from eight herds not vaccinated against leptospirosis, five consisting of cattle and sheep and three with sheep only, were examined by microscopic agglutination test. An epidemiological questionnaire was applied taking into account sanitary and zootechnical management and environmental conditions. All herds showed reactors to Leptospira spp.: 51.16% (22/43) in cattle-sheep herds and 70.83% (17/24) in sheep-only herds (p = 0.191); but only the cattle-sheep herds showed at least one reactor to the serovar Hardjo, which was absent in all the sheep-only herds. Grazing cattle and sheep together was the only significant risk factor for serovar Hardjo infection (p = 0.018). When the total of sheep raised in sheep-only herds was compared with those raised with cattle, the risk associated with grazing these species together was significant for the presence of serovar Hardjo (p = 0.005). It was concluded that serovar Hardjo in sheep was directly related to the presence of bovines, regardless of other risk factors.

Caracterização das proteínas de superfície de membrana externa da sorovariedade Hardjo isolada de bovinos em Minas Gerais / Characterization of outer membrane proteins of serovar Hardjo isolated from cattle in Minas Gerais, Brazil

Foram identificadas diferenças no perfil protéico das amostras de Sponselee, Norma e Hardjoprajitno, com bandas protéicas entre 175, 47 kDA e 12,10 kDa. A amostra Sponselee foi a que apresentou maior número de bandas (12), seguida da Norma que apresentou 11 bandas e de Hardjoprajitno que apresentou 9 bandas. Todas as bandas observadas na amostra Sponselee possuíam correspondentes nas outras duas amostras. A amostra Norma não apresentou uma banda em torno de 35,77 kDa e a Hardjoprajitno não apresentou bandas em torno de 89,59 kDa, 35,77 kDa e 12,10 kDa. O reconhecimento dessas proteínas por soros hiperimunes contra cada uma das amostras também mostrou diferenças, sendo que o maior número de proteínas reconhecido em todas as amostras por todos os soros se encontrou entre 35,83 kDa e 29,19 kDa. Os soros contra bovino na amostra Norma só reconheceu proteínas de baixa massa molecular nas amostras Norma (6,80 kDa) e Hardjoprajitno (6,80 kDa e 5,30 kDa). Soro bovino contra a amostra Hardjoprajitno reconheceu uma proteína de 44,33 kDa todas às amostras e proteínas de 4,22 kDa nas amostras Sponselee e Norma e de 10,49 kDa e 6,16 kDa na Hardjoprajitno. As diferentes proteínas identificadas poderiam se constituir em alvos específicos para o desenvolvimento de testes diagnósticos e vacinas contra leptospirose bovina.

Differences in the protein profile of Leptospira sp. strains Sponselee, Norma and Hardjoprajitno were observed, with bands ranging from 175.47 kDa to 12.10 kDa. Strain Sponselee presented a 12-band profile, while strain Norma showed 11 and strain Hardjoprajitno showed 9 bands in the profile. All bands observed in Sponselee strain profile could match bands in the other two strains. Strain Norma lacks a band at 35.77 kDa and strain Hardjoprajitno lacks the bands at 89.59 kDa, 35.77 kDa and 12.10 kDa. The recognition profile from hyperimmune sera was also different for the studied serovar Hadjo strains. The majority of recognized proteins was in the range of 35.83 kDa to 29.19 kDa. Cattle sera against strain Norma only recognized low molecular mass proteins in strains Norma (6.80 kDa) and Hardjoprajitno (6.80 kDa and 5.30 kDa). Bovine sera against strain Hardjoprajitno recognized a 44.33 kDa protein in all studied strains and proteins of 4.22 kDa in strains Sponselee and Norma and of 10.49 kDa and 6.16 kDa in strain Hadjoprajitno. The different identified proteins could become specific targets to the development of diagnostic tests and vaccines against bovine leptospirosis.

Caracterização das proteínas de superfície de membrana externa da sorovariedade Hardjo isolada de bovinos em Minas Gerais / Characterization of outer membrane proteins of serovar Hardjo isolated from cattle in Minas Gerais, Brazil

Foram identificadas diferenças no perfil protéico das amostras de Sponselee, Norma e Hardjoprajitno, com bandas protéicas entre 175, 47 kDA e 12,10 kDa. A amostra Sponselee foi a que apresentou maior número de bandas (12), seguida da Norma que apresentou 11 bandas e de Hardjoprajitno que apresentou 9 bandas. Todas as bandas observadas na amostra Sponselee possuíam correspondentes nas outras duas amostras. A amostra Norma não apresentou uma banda em torno de 35,77 kDa e a Hardjoprajitno não apresentou bandas em torno de 89,59 kDa, 35,77 kDa e 12,10 kDa. O reconhecimento dessas proteínas por soros hiperimunes contra cada uma das amostras também mostrou diferenças, sendo que o maior número de proteínas reconhecido em todas as amostras por todos os soros se encontrou entre 35,83 kDa e 29,19 kDa. Os soros contra bovino na amostra Norma só reconheceu proteínas de baixa massa molecular nas amostras Norma (6,80 kDa) e Hardjoprajitno (6,80 kDa e 5,30 kDa). Soro bovino contra a amostra Hardjoprajitno reconheceu uma proteína de 44,33 kDa todas às amostras e proteínas de 4,22 kDa nas amostras Sponselee e Norma e de 10,49 kDa e 6,16 kDa na Hardjoprajitno. As diferentes proteínas identificadas poderiam se constituir em alvos específicos para o desenvolvimento de testes diagnósticos e vacinas contra leptospirose bovina.(AU)

Differences in the protein profile of Leptospira sp. strains Sponselee, Norma and Hardjoprajitno were observed, with bands ranging from 175.47 kDa to 12.10 kDa. Strain Sponselee presented a 12-band profile, while strain Norma showed 11 and strain Hardjoprajitno showed 9 bands in the profile. All bands observed in Sponselee strain profile could match bands in the other two strains. Strain Norma lacks a band at 35.77 kDa and strain Hardjoprajitno lacks the bands at 89.59 kDa, 35.77 kDa and 12.10 kDa. The recognition profile from hyperimmune sera was also different for the studied serovar Hadjo strains. The majority of recognized proteins was in the range of 35.83 kDa to 29.19 kDa. Cattle sera against strain Norma only recognized low molecular mass proteins in strains Norma (6.80 kDa) and Hardjoprajitno (6.80 kDa and 5.30 kDa). Bovine sera against strain Hardjoprajitno recognized a 44.33 kDa protein in all studied strains and proteins of 4.22 kDa in strains Sponselee and Norma and of 10.49 kDa and 6.16 kDa in strain Hadjoprajitno. The different identified proteins could become specific targets to the development of diagnostic tests and vaccines against bovine leptospirosis.(AU)

FATORES DE RISCO ASSOCIADOS À INFECÇÃO PELA LEPTOSPIRA SPP. SOROVAR HARDJO EM REBANHOS EXCLUSIVOS DE OVINOS E NOS CONSORCIADOS COM BOVINOS

ABSTRACT Leptospira spp. serovar Hardjo infection is endemic in Brazilian cattle herds. The main risk factors for infection by serovar Hardjo are introduction of infected bovine into free herds, access to surface water and grazing sheep and cattle together. The present study investigated the risk factors involved in serovar Hardjo infection in sheep-only herds and in sheep grazing together with cattle herds in the region of Sorocaba, state of São Paulo, Brazil. Serum samples from eight herds not vaccinated against leptospirosis, five consisting of cattle and sheep and three with sheep only, were examined by microscopic agglutination test. An epidemiological questionnaire was applied taking into account sanitary and zootechnical management and environmental conditions. All herds showed reactors to Leptospira spp.: 51.16% (22/43) in cattle-sheep herds and 70.83% (17/24) in sheep-only herds (p = 0.191); but only the cattle-sheep herds showed at least one reactor to the serovar Hardjo, which was absent in all the sheep-only herds. Grazing cattle and sheep together was the only significant risk factor for serovar Hardjo infection (p = 0.018). When the total of sheep raised in sheep-only herds was compared with those raised with cattle, the risk associated with grazing these species together was significant for the presence of serovar Hardjo (p = 0.005). It was concluded that serovar Hardjo in sheep was directly related to the presence of bovines, regardless of other risk factors.

RESUMO A infecção por Leptospira spp. sorovar Hardjo é endêmica nos rebanhos bovinos brasileiros. A introdução de animal infectado em rebanhos livres, acesso a aguadas e pastejo consorciado entre ovinos e bovinos têm sido apontados como os principais fatores de risco. Objetivou-se investigar quais fatores de risco envolvem a infecção pelo sorovar Hardjo em rebanhos exclusivos de ovinos e consorciados com bovinos nas condições criatórias extensivas e semi-intensivas adotadas na região de Sorocaba, São Paulo. Amostras sorológicas de oito rebanhos, não vacinados contra leptospirose: cinco com criação consorciada entre ovinos e bovinos e três exclusivas de ovinos foram examinadas pela reação de soroaglutinação microscópica. Um questionário epidemiológico foi aplicado considerando-se manejos sanitário e zootécnico e condições ambientais. Todos os rebanhos apresentaram animais reatores para Leptospira spp.: 51,16% (22/43) dos animais consorciados e 70,83% (17/24) dos ovinos (p = 0,191), mas apenas os rebanhos consorciados apresentaram pelo menos um animal reator ao sorovar Hardjo. A condição consorciada foi a única com significância para a presença sorológica do sorovar Hardjo (p = 0,018). Quando avaliado o total de ovinos em condições criatórias exclusivas frente aos ovinos consorciados com bovinos, o risco associado à consorciação foi significante para a presença do sorovar Hardjo (p = 0,005). Conclui-se que o sorovar Hardjo estava relacionado à presença de bovinos e independente de outros fatores de risco.

Anticorpos anti-Leptospira spp. em ovinos do município de Monte Negro, estado de Rondônia / Anti-Leptospira spp. antibodies in ovines from Monte Negro municipality, Rondonia state, Brazil

O presente estudo determinou a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. em ovinos do Município de Monte Negro, RO. Foram examinados soros de 141 ovinos de raça, idade e sexo variados provenientes de 15 fazendas, pela técnica de Soroaglutinação Microscópica. Doze (80,0%) propriedades apresentaram pelo menos um animal reagente. Títulos de anticorpos iguais ou superiores a 100 foram detectados em 47 (33,3%) animais, e os sorovares mais frequentes foram Patoc (29,7%), Autumnalis (14,8%), Pyrogenes (10,6%), Australis (4,2%), Bratislava (4,2%), Hardjo (4,2%), Icterohaemorrhagiae (4,2%), Castellonis (2,1%) e Hebdomadis (2,1%). Em 11 (23,4%) soros não foi possível a determinação do provável sorovar envolvido na reação. Alerta-se também para a possibilidade de infecção no homem, tendo em vista as características regionais de fronteira agrícola amazônica.

The present study determined the prevalence of anti-Leptospira spp.antibodies in 141 ovines from 15 farms of the Monte Negro Municipality, Rondonia State, Brazil, by the microscopic agglutination test. Twelve (80.0%) farms presented at least 1 reactive animal. Antibodies titers of ? 100 were detected in 47 (33.3%) animals, the most frequent serovars being Patoc (29.7%), Autumnalis (14.8%), Pyrogenes (10.6%), Australis (4.2%), Bratislava (4.2%), Hardjo (4.2%), Icterohaemorrhagiae (4.2%), Castellonis (2.1%) and Hebdomadis (2.1%). In 11 (23.4%) sera it was not possible to determine the most frequent serovar involved. The results raise a warning as to the possibility of infection in the human being by Leptospira in light of the regional characteristics of the Amazon agricultural frontier.

Estabelecimento da leptospirose por infecção experimental em hamsters (Mesocricetus auratus) com leptospira interrogans sorovar canicola, estirpe LO4, por exposição cutânea integra e com abrasões / Development of the leptospirosis by experimental infection in hamsters (Mesocricetus auratus) with leptospira interrogans serovar canicola, strain LO4, by intact and scratched skin exposures

O estabelecimento e a evolução da leptospirose em hamster (Mesocricetus auratus) pela infecção experimental com Leptospira interrogans sorovar Canicola, estirpe LO4, pela exposição cutânea íntegra e escarificada, tendo como controle a via intraperitoneal foram avaliados. Foram utilizados 120 hamsters, fêmeas, distribuídas em dois grupos de acordo com a via de inoculação (pele escarificada e pele íntegra). O inóculo infeccioso foi constituído por uma cultura pura de L. interrogans sorovar Canicola (estirpe LO4), isolada do fígado de um suíno de abatedouro em Londrina, Estado do Paraná e tipificada pela técnica de adsorção de aglutininas com o kit de anticorpos monoclonais no Royal Tropical Institute, Amsterdã, Holanda. Os animais foram observados duas vezes ao dia, durante 21 dias. Os animais que vieram a óbito foram necropsiados e colhidos assepticamente rins, fígado, sistema genital (útero e ovário) e cérebro. Os animais sobreviventes foram eutanasiados após 21 dias. Foram ainda colhidas amostras de soro sanguíneo por punção cardíaca para a pesquisa de aglutininas antileptospiras nos animais sobreviventes, pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM). Para a detecção de leptospiras, foram utilizados microscopia direta a fresco e cultivo microbiológico. A via cutânea escarificada induziu maior letalidade quando comparada com a pele integra, com estabelecimento e evolução da leptospirose. Por outro lado, a via cutânea íntegra induziu mais frequentemente o estado de portador renal e/ou genital para leptospirose. A estirpe LO4 apresentou baixo poder imunogênico, induzindo soroconversão na SAM em apenas um animal.

The establishment and evolution of leptospirosis in hamster (Mesocricetus auratus) by experimental infection with Leptospira interrogans serovar Canicola, LO4 strain, by intact and scratched skin exposures, having as control the intraperitoneal route, were evaluated. Hundred-twenty female hamsters distributed in two groups according to inoculation route (intact and scratched skin) were used. Infectious inoculum was constituted by a pure culture of L. interrogans serovar Canicola (strain LO4), isolated from liver from a slaughtered swine in Londrina, Paraná state and typified by agglutinins adsortion technique with monoclonal antibody kit at the Royal Tropical Institute, Amsterdam, the Netherlands. The animals were observed twice a day during 21 days. Animals that died were necropsied and kidneys, liver, genital tract (uterus and ovaries) and brain were aseptically collected. On the 21st post-inoculation day, surviving animals were euthanized. In these animals, serum samples were also collected by cardiac puncture to antileptospires agglutinins research using microscopic agglutination test (MAT). Fresh direct microscopy and microbiological culture were used for the detection of leptospires. Scratched skin route induced larger lethality when compared to intact skin route, with establishment and evolution of leptospirosis. On the other hand, intact skin route induced renal and/or genital carrier state more frequently. LO4 strain presented low immunogenic power, characterized by soroconversion at the MAT in only one inoculated animal.

ANTICORPOS ANTI-LEPTOSPIRA SPP. EM OVINOS DO MUNICÍPIO DE MONTE NEGRO, ESTADO DE RONDÔNIA

ABSTRACT The present study determined the prevalence of anti-Leptospira spp.antibodies in 141 ovines from 15 farms of the Monte Negro Municipality, Rondonia State, Brazil, by the microscopic agglutination test. Twelve (80.0%) farms presented at least 1 reactive animal. Antibodies titers of ? 100 were detected in 47 (33.3%) animals, the most frequent serovars being Patoc (29.7%), Autumnalis (14.8%), Pyrogenes (10.6%), Australis (4.2%), Bratislava (4.2%), Hardjo (4.2%), Icterohaemorrhagiae (4.2%), Castellonis (2.1%) and Hebdomadis (2.1%). In 11 (23.4%) sera it was not possible to determine the most frequent serovar involved. The results raise a warning as to the possibility of infection in the human being by Leptospira in light of the regional characteristics of the Amazon agricultural frontier.

RESUMO O presente estudo determinou a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp. em ovinos do Município de Monte Negro, RO. Foram examinados soros de 141 ovinos de raça, idade e sexo variados provenientes de 15 fazendas, pela técnica de Soroaglutinação Microscópica. Doze (80,0%) propriedades apresentaram pelo menos um animal reagente. Títulos de anticorpos iguais ou superiores a 100 foram detectados em 47 (33,3%) animais, e os sorovares mais frequentes foram Patoc (29,7%), Autumnalis (14,8%), Pyrogenes (10,6%), Australis (4,2%), Bratislava (4,2%), Hardjo (4,2%), Icterohaemorrhagiae (4,2%), Castellonis (2,1%) e Hebdomadis (2,1%). Em 11 (23,4%) soros não foi possível a determinação do provável sorovar envolvido na reação. Alerta-se também para a possibilidade de infecção no homem, tendo em vista as características regionais de fronteira agrícola amazônica.

Leptospirosis in stray dogs found in university campus: serological evaluation and urine direct exam / Leptospirose em cães errantes encontrados em campus universitário: avaliação sorológica e exame direto da urina

The aim of this study was to demonstrate the Leptospirosis occurrence in stray dogs found in the campus of Universidade Estadual de Londrina PR., from July to September 2007. The MAT (Microscopic Agglutination Test) was made as diagnostic serological test in 33 serum samples and the direct dark-field microscopy (DFM) in 10 urine samples. In the MAT, seven samples (21,21%) reacted and antibodies against the serovars Canicola, Pyrogenes and Castellonis were detected with titles of 200 to 400. In the DFM, were visualized typical Leptospira spp. morphology and motility structures in one sample. These data indicate the necessity of stray dogs population control because it may represents a public health problem in the university campus population.

O objetivo deste estudo foi demonstrar a ocorrência de anticorpos anti leptospira em cães errantes encontrados entre julho e setembro de 2007, no campus da Universidade Estadual de Londrina PR. Para o diagnóstico da leptospirose foi realizada a soroaglutinação microscópica (SAM) em 33 amostras de soro e o exame direto da urina em microscópio de campo escuro (CE) em 10 amostras. Na SAM, foram reagentes sete (21,21%) amostras e anticorpos contra os sorovares Canicola, Pyrogenes e Castellonis foram detectados com títulos de 200 a 400. No CE foram visualizadas células com morfologia e movimentos compatíveis com Leptospira spp. em uma amostra. Os resultados deste trabalho indicam a necessidade de controle de cães errantes, pois eles podem representar um problema de saúde pública para a população do campus universitário.

Estabelecimento da leptospirose por infecção experimental em hamsters (Mesocricetus auratus) com Leptospira interrogans sorovar Canicola, estirpe LO4, por exposição cutânea integra e com abrasões / Development of the leptospirosis by experimental infection in hamsters (Mesocricetus auratus) with Leptospira interrogans serovar Canicola, strain LO4, by intact and scratched skin exposures

O estabelecimento e a evolução da leptospirose em hamster (Mesocricetus auratus) pela infecção experimental com Leptospira interrogans sorovar Canicola, estirpe LO4, pela exposição cutânea íntegra e escarificada, tendo como controle a via intraperitoneal foram avaliados. Foram utilizados 120 hamsters, fêmeas, distribuídas em dois grupos de acordo com a via de inoculação (pele escarificada e pele íntegra). O inóculo infeccioso foi constituído por uma cultura pura de L. interrogans sorovar Canicola (estirpe LO4), isolada do fígado de um suíno de abatedouro em Londrina, Estado do Paraná e tipificada pela técnica de adsorção de aglutininas com o kit de anticorpos monoclonais no Royal Tropical Institute, Amsterdã, Holanda. Os animais foram observados duas vezes ao dia, durante 21 dias. Os animais que vieram a óbito foram necropsiados e colhidos assepticamente rins, fígado, sistema genital (útero e ovário) e cérebro. Os animais sobreviventes foram eutanasiados após 21 dias. Foram ainda colhidas amostras de soro sanguíneo por punção cardíaca para a pesquisa de aglutininas antileptospiras nos animais sobreviventes, pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM). Para a detecção de leptospiras, foram utilizados microscopia direta a fresco e cultivo microbiológico. A via cutânea escarificada induziu maior letalidade quando comparada com a pele integra, com estabelecimento e evolução da leptospirose. Por outro lado, a via cutânea íntegra induziu mais frequentemente o estado de portador renal e/ou genital para leptospirose. A estirpe LO4 apresentou baixo poder imunogênico, induzindo soroconversão na SAM em apenas um animal. (AU)

The establishment and evolution of leptospirosis in hamster (Mesocricetus auratus) by experimental infection with Leptospira interrogans serovar Canicola, LO4 strain, by intact and scratched skin exposures, having as control the intraperitoneal route, were evaluated. Hundred-twenty female hamsters distributed in two groups according to inoculation route (intact and scratched skin) were used. Infectious inoculum was constituted by a pure culture of L. interrogans serovar Canicola (strain LO4), isolated from liver from a slaughtered swine in Londrina, Paraná state and typified by agglutinins adsortion technique with monoclonal antibody kit at the Royal Tropical Institute, Amsterdam, the Netherlands. The animals were observed twice a day during 21 days. Animals that died were necropsied and kidneys, liver, genital tract (uterus and ovaries) and brain were aseptically collected. On the 21st post-inoculation day, surviving animals were euthanized. In these animals, serum samples were also collected by cardiac puncture to antileptospires agglutinins research using microscopic agglutination test (MAT). Fresh direct microscopy and microbiological culture were used for the detection of leptospires. Scratched skin route induced larger lethality when compared to intact skin route, with establishment and evolution of leptospirosis. On the other hand, intact skin route induced renal and/or genital carrier state more frequently. LO4 strain presented low immunogenic power, characterized by soroconversion at the MAT in only one inoculated animal. (AU)

Leptospirosis in stray dogs found in university campus: serological evaluation and urine direct exam / Leptospirose em cães errantes encontrados em campus universitário: avaliação sorológica e exame direto da urina

The aim of this study was to demonstrate the Leptospirosis occurrence in stray dogs found in the campus of Universidade Estadual de Londrina PR., from July to September 2007. The MAT (Microscopic Agglutination Test) was made as diagnostic serological test in 33 serum samples and the direct dark-field microscopy (DFM) in 10 urine samples. In the MAT, seven samples (21,21%) reacted and antibodies against the serovars Canicola, Pyrogenes and Castellonis were detected with titles of 200 to 400. In the DFM, were visualized typical Leptospira spp. morphology and motility structures in one sample. These data indicate the necessity of stray dogs population control because it may represents a public health problem in the university campus population.

O objetivo deste estudo foi demonstrar a ocorrência de anticorpos anti leptospira em cães errantes encontrados entre julho e setembro de 2007, no campus da Universidade Estadual de Londrina PR. Para o diagnóstico da leptospirose foi realizada a soroaglutinação microscópica (SAM) em 33 amostras de soro e o exame direto da urina em microscópio de campo escuro (CE) em 10 amostras. Na SAM, foram reagentes sete (21,21%) amostras e anticorpos contra os sorovares Canicola, Pyrogenes e Castellonis foram detectados com títulos de 200 a 400. No CE foram visualizadas células com morfologia e movimentos compatíveis com Leptospira spp. em uma amostra. Os resultados deste trabalho indicam a necessidade de controle de cães errantes, pois eles podem representar um problema de saúde pública para a população do campus universitário.

Investigação da genotoxicidade de larvicidas biológicos e sínteticos utilizados para o controle de Aedes aegypti / Genotoxicity investigation of biologic and synthetic larvicide utilized for the control of Aedes aegypti

A dengue é atualmente considerada a mais importante arbovirose que afeta o homem. O agravamento desta situação epidemiológica tem acarretado um aumento expressivo no uso de inseticidas organofosforados no combate ao vetor, principalmente o temefós, que é amplamente e sistematicamente aplicado em ambientes urbanos em reservatórios de água, até para o consumo humano. Este projeto propôs investigar efeito genotóxico (clastogênico) em células de mamíferos, induzido pela exposição ao temefós (grau técnico 95,5%), e ao biolarvicida Bacillus thuringiensis sorovar israelenses (Bti) - IPS 82, ambos empregados no controle do Aedes aegypti. Na avaliação genotóxica foram utilizadas células da medula óssea de camundongos albinos Swiss Webster de ambos os sexos, empregando-se os testes de metáfase e de micronúcleos para detecção dos danos cromossômicos: aberrações cromossômicas e micronúcleos. Os camundongos foram tratados com temefós (grau técnico 95,5%) nas concentrações de 27,75; 55,5 e 111 mg/kg ou com água destilada 10 ml/kg, via gavagem, como controle negativo ou com Ciclofosfamida a 25 mg/kg, via i.p., como controle positivo por 24, 48 e 72h, em dose única ou em 9 doses repetidas (1 dose/semana). Outros grupos foram tratados com Bti nas doses de 204 e 122,4 UFC (Unidade Formadora de Colônia) ou água destilada (200 ?l) como controle negativo, via gavagem, por 24 e 48h. Os resultados observados confirmaram a ação genotóxica induzida pelo inseticida temefós em camundongos de ambos os sexos, com a formação de micronúcleo em eritrócitos policromáticos (PCE MN), em todas as concentrações testadas 24h após o tratamento único. Na concentração de 111,00 mg/kg induziu PCE MN também após 48 e 72h em dose única e após tratamento com 9 doses. O temefós induziu também aberrações cromossômicas nas células em metáfases, em todas as concentrações testadas, 24h após tratamento único, e na concentração de 111,00 mg/kg, também após 48 e 72h de tratamento...

Identificação da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados, para a alta e baixa produção de anticorpos, através da técnica de imunoperoxidase em tecido renal e isolamento bacteriano em meio de Fletcher / Identification of Leptospira interrogans serovar pomona in mice genetically selected for high and low antibody production, by means of the immunoperoxidase technique in renal tissue and bacterial isolation in Fletcher medium

O presente trabalho teve por objetivo identificar a presença da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados para a alta e baixa resposta a anticorpos. Todos os animais foram submetidos ao isolamento bacteriano, imunohistoquímica (imunoperoxidase) em cortes de tecido renal e coloração através da hematoxilina-eosina. A técnica de imunoperoxidase apresentou-se pouco mais sensível em relação ao cultivo, entretanto, ambas foram bons parâmetros de identificação do agente. Presença de lesões renais mais intensas ocorreram em períodos em que houve maior número de bactérias isoladas em meio de cultivo. Camundongos da linhagem HIV-A conseguiram eliminar as leptospiras com maior eficiência e rapidez em relação as linhagem LIV-A, entretanto o estudo demonstrou que ambas linhagens da seleção IV-A foram eficientes em controlar o processo infeccioso.

The present work had the objective of identifying the presence of Leptospira interrogans serovar pomona in mice that had been genetically selected for high and low response to antibodies. All the animals were subjected to bacterial isolation, immunohistochemical analysis (immunoperoxidase) in renal tissue sections and hematoxylin-eosin staining. The immunoperoxidase technique was little more sensitive than culturing, but both were good parameters for agent identification. More severe renal lesions were present at times when there were greater numbers of bacteria isolated in culture medium. Mice of the lineage HIV-A were able to eliminate the Leptospira more efficiently and faster than the lineage LIV-A could. However, the study demonstrated that both lineages of the IV-A selection were efficient in controlling the infectious process.

Salmonella spp. em fígado e cortes de frangos comercializados em áreas do município do Rio de Janeiro, RJ / Salmonella spp. in liver of chickens traded in city Rio de Janeiro

O presente trabalho teve como objetivo investigar a ocorrência e distribuição de sorovares de Salmolla em fígado e cortes de carcaça de frangos (Carne Mecanicamente Separada - CMS), comercializados em diferentes estabelecimentos (supermercados e feiras-livres) no município do Rio de Janeiro, levando-se em consideração as condições de conservação (refrigerados e congelados). Uma investigação paralela foi efetuada para determinar a presença de Salmonella no fluido acumulado no interior da embalagem de acondicionamento dos fígados e naquele obtido no balcão das feiras. Em um total de 25 colheitas realizadas em feiras-livres (8) e supermercado (17), foram efetuadas 70 análises sendo 24 de espécimes obtidos de fígado, 22 de coxa e 24 do fluido. A metodologia empregada incluiu o enriquecimento em Caldo Tetrationato e Caldo Rappaport-Vassiliadis. Simultaneamente, foi feito pré-enriquecimento em água peptonada a 1 por cento, seguido de enriquecimento seletivo. O crescimento de cada caldo de enriquecimento foi semeado em Agar Eosina-Azul de Metileno, Agar entérico Hektoen e Agar Rambach. Foram obtidos isolamentos em 11 (44,0 por cento) das 25 coletadas, correspondendo a um total de 16 (22,8 por cento) das 70 análises. Dos sorovares identificados (Enteritidis, Saintpaul, Albany, Typhimurium, Derby, Ohio, Tennessee, Paaraná, Salmonella O: 21 e Salmonella 3, 10:-: 1, 6). Destacou-se a S. Enteritidis nas amostras de supermercados. Entre as combinações de meios, o binômio Kauffmann - Ramback apresentou o mais alto nível de positividade (50 por cento dos isolados), seguido de Kauffmann- Hektoen (6 amostras - 30,0 por cento).(AU)

The objective of this study was to watch the presence and distribution of Salmonella s serovar in liver and poultry carcass traded in differents establishment (supermarkets and free markets)in the Rio de Janeiro city, from March of 2002 to May of 2003 considering condition of conservation (cold or freeze). Other research was made to to watch the presence of Salmonella in the liver fluids inside the package and in the free market balcony. In a total of 25 harvest, made in free markets (8) and supermarkets (17),70 analysis were made , being 24 of liver, 22 of carcass and 24 of fluido The methodology includes the enrichment media withTetrionate medium and Rappaport- Vassiladis medium. 5imultaneously was made the pre- enrichment with peptoned water 1%followed by the enrichment media. The enrichment media growing was spread in Eosine Metilene - Blue Agar, Hektoen Enteric Agar and Ramback Agar. The 5almonella presence were showed in 16 (22,8%)of the 70 analysis. These serovars found were Enteritidis, 5aintfXluAl, lbany, Typhimurium, Derby, Ohio, Tenesse, Panama and two Salmonella spp (SalmonellaO: 21 and Salmonella 3, 10:- :1,6). The best combination media was Kauffmann- Ramback (50,0%of the total isolated)followed by Kauffmann-Hektoen (6- 30,0%). (AU)