Lomustine for treatment of canine transmissible venereal tumor / Eficácia da lomustina no tratamento do tumor venéreo transmissível canino

Canine transmissible venereal tumor (TVTC) is a highly casuistic transmissible neoplasm in Brazil. Chemotherapy with vincristine sulfate is considered the treatment of choice, but the need for weekly applications and hematological monitoring, in addition to costs, are obstacles to owners' adhesion to the treatment. Lomustine is an alkylating class antineoplastic agent, and because it is administered orally, it is a more practical and less costly treatment option for the owners of animals with neoplasms sensitive to the drug. This study evaluated the therapeutic efficacy of lomustine in dogs affected by TVTC. Twelve dogs with cytopathological diagnosis of natural genital TVTC were selected. The dogs were submitted to the experimental protocol with lomustine administration at doses of 70 to 85 mg/m2 orally every 21 days, totaling a maximum of two administration cycles. The animals were reevaluated every 7 days until a maximum of +49 days after the first dose of lomustine, to monitor the regression of neoplastic lesions through measurements. Among the 12 dogs submitted to the lomustine protocol, 8/12 achieved complete remission of the neoplasm and were considered cured (66.6%), 1/12 had partial response to treatment (8.33%) and 3/12 had stable disease (25%). Important adverse effects such as severe neutrophilic leukopenia were detected in 3/12 dogs (25%). The clinical study indicated that lomustine may be a treatment option for TVTC.

O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) é uma neoplasia transmissível de elevada casuística no Brasil. A quimioterapia com sulfato de vincristina é considerada o tratamento de escolha, mas a necessidade de aplicações semanais e acompanhamento hematológico, além dos custos, são obstáculos à adesão dos proprietários ao tratamento. A lomustina é um antineoplásico da classe dos agentes alquilantes e, por ser administrado por via oral, representa um opção de tratamento mais prática e menos onerosa para os proprietários de animais com neoplasias. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia terapêutica da lomustina em cães acometidos por TVTC. Foram selecionados 12 cães com diagnóstico citopatológico de TVTC genital de ocorrência natural. Os cães foram submetidos ao protocolo experimental com administração de lomustina nas doses de 70 a 85 mg/m2 por via oral a cada 21 dias, totalizando no máximo dois ciclos de administração. Os animais foram reavaliados a cada sete dias até um máximo de +49 dias após a primeira dose de lomustina, para monitorar a regressão das lesões neoplásicas por meio de mensuração das lesões. Entre os 12 cães submetidos ao protocolo, 8/12 obtiveram remissão completa da neoplasia e foram considerados curados (66,6%), 1/12 tiveram resposta parcial ao tratamento (8,33%) e 3/12 tiveram doença estável (25%). Efeitos adversos importantes, como leucopenia neutrofílica grave, foram detectados em 3/12 cães (25%). O estudo clínico indicou que a lomustina pode ser uma opção de tratamento para TVTC.

Could dysregulation of RASSF1 expression be a mechanism of tumorigenesis in CTVT? / A desregulação da expressão de RASSF1 pode ser um mecanismo da tumorigênese em TVTC?

Canine transmissible venereal tumor (CTVT) is the oldest known somatic cell lineage. It is a transmissible cancer that propagates naturally in dogs and reportedly contains gene mutations. RASSF1 participates in DNA damage repair, and its downregulation, results in tumor progression. Hence, RASSF1 is a tumor suppressor gene. Its expression was quantified in tumors from seventeen animals and three cell cultures derived from tumors. In general, RASSF1 was underexpressed in 65%, and absent in 35% of tumor samples. Cells from tumor tissue cultures showed decreased expression of RASSF1 in 67% and elevated expression in 33% of samples tested. The tumor tissues showed significantly lower levels of RASSF1 expression compared to cultured cells. Previously we reported that both the tumor microenvironment and the host immune system appear to influence the tumorigenesis and stage of CTVT. This is the first article to demonstrate the expression of RASSF1 in CTVT. Decreased RASSF1 possibly helps tumor progression.

O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) é a linhagem de células somáticas mais antiga conhecida. É um câncer transmissível que se propaga naturalmente em cães e mutações genéticas já foram relatadas. O gene RASSF1 atua no reparo de danos ao DNA e presume-se que, quando suprimido ou com expressão gênica reduzida, o TVTC tende a progredir. A expressão do gene supressor de tumor, como RASSF1, foi quantificada em tecidos de dezessete animais e três culturas de células de tecidos tumorais. Em geral, o gene RASSF1 apresentou prevalência de subexpressão (65%) e ausência em 35% dos demais tecidos analisados. Células isoladas de culturas de tecidos tumorais também demonstraram 67% com expressão diminuída e 33% com expressão elevada, com diferença significativa entre os níveis de expressão gênica em amostras de tecido quando comparadas às culturas de células, com tecidos apresentando níveis mais baixos de expressão gênica em comparação com células. Anteriormente, relatamos que tanto o microambiente tumoral quanto o sistema imunológico do hospedeiro parecem influenciar a tumorigênese e o estágio do TVTC. Este é o primeiro artigo a demonstrar a expressão de RASSF1 no TVTC, possivelmente alterando sua tumorigênese e auxiliando no aumento da progressão tumoral.

Comparison between hematological and biochemical changes caused by conventional and metronomic chemotherapies in the treatment of canine transmissible venereal tumor / Comparação entre as alterações hematológicas e bioquímicas ocasionadas pela quimioterapia convencional e quimioterapia metronômica no tratamento do tumor venéreo transmissível canino

This study aimed to report the hematological and biochemical changes caused by conventional and metronomic chemotherapies, using vincristine sulfate to treat canine Transmissible Venereal Tumor (TVT). Twelve dogs were selected, six of them for the group receiving conventional chemotherapy (G1), and six dogs for the group receiving metronomic chemotherapy (G2). The G1 group received vincristine sulfate once a week at the dose of 0.75mg/m² until the tumor had disappeared with treatment, and the G2 group was treated with vincristine sulfate three times a week at the dose of 0.25mg/m2 until the tumor had disappeared. Before and after chemotherapy treatment, hematological and biochemical blood tests were performed to evaluate the main alterations caused by both chemotherapeutic models. Dogs undergoing conventional chemotherapy had significant leukocyte changes (p<0.05), causing neutropenia and leukopenia. In dogs undergoing metronomic chemotherapy, leukocytes remained within the reference range. Half of the dogs in group G1 had normochromic, normocytic anemia. The only biochemical alteration observed was the increase of urea in group G2. Thus, metronomic chemotherapy for the treatment of TVT with vincristine sulfate proved to be an excellent method for treatment, with fewer adverse effects, especially in maintaining the leukogram of dogs within normal range and reducing the number of anemia in animals during treatment.(AU)

Esta pesquisa teve como objetivo relatar as alterações hematológicas e bioquímicas causadas pelo tratamento quimioterápico convencional e pela quimioterapia metronômica, utilizando-se sulfato de vincristina para o tratamento do tumor venéreo transmissível canino(TVTC). Foram selecionados 12 cães, sendo seis para o grupo que recebeu quimioterapia convencional (G1) e seis cães para o grupo que recebeu quimioterapia metronômica (G2). O grupo G1 recebeu sulfato de vincristina, uma vez por semana, na dose de 0,75mg/m2, até o desaparecimento do tumor e o grupo G2 foi tratado com sulfato de vincristina, três vezes por semana, na dose de 0,25mg/m2, até o desaparecimento do tumor. Antes e após o tratamento quimioterápico foram realizados exames hematológicos e bioquímicos sanguíneos para avaliação das principais alterações causadas pelos dois modelos quimioterápicos. Os cães submetidos à quimioterapia convencional tiveram alterações leucocitárias significativas (p<0,05), causando uma leucopenia por neutropenia enquanto nos cães, submetidos à quimioterapia metronômica, os leucócitos mantiveram-se dentro do intervalo de referência. A metade dos cães do grupo G1 tiveram uma anemia do tipo normocítica normocrômica. A única alteração bioquímica observada foi o aumento da ureia no grupo G2. Desta forma, a quimioterapia metronômica para o tratamento do TVT com sulfato de vincristina, demonstrou ser um excelente método para a cura do animal, com menores reduções de efeitos adversos, sobretudo, na manutenção do leucograma dos cães e na redução de animais com anemia.(AU)

Comparison between hematological and biochemical changes caused by conventional and metronomic chemotherapies in the treatment of canine transmissible venereal tumor

ABSTRACT: This study aimed to report the hematological and biochemical changes caused by conventional and metronomic chemotherapies, using vincristine sulfate to treat canine Transmissible Venereal Tumor (TVT). Twelve dogs were selected, six of them for the group receiving conventional chemotherapy (G1), and six dogs for the group receiving metronomic chemotherapy (G2). The G1 group received vincristine sulfate once a week at the dose of 0.75mg/m² until the tumor had disappeared with treatment, and the G2 group was treated with vincristine sulfate three times a week at the dose of 0.25mg/m2 until the tumor had disappeared. Before and after chemotherapy treatment, hematological and biochemical blood tests were performed to evaluate the main alterations caused by both chemotherapeutic models. Dogs undergoing conventional chemotherapy had significant leukocyte changes (p 0.05), causing neutropenia and leukopenia. In dogs undergoing metronomic chemotherapy, leukocytes remained within the reference range. Half of the dogs in group G1 had normochromic, normocytic anemia. The only biochemical alteration observed was the increase of urea in group G2. Thus, metronomic chemotherapy for the treatment of TVT with vincristine sulfate proved to be an excellent method for treatment, with fewer adverse effects, especially in maintaining the leukogram of dogs within normal range and reducing the number of anemia in animals during treatment.

RESUMO: Esta pesquisa teve como objetivo relatar as alterações hematológicas e bioquímicas causadas pelo tratamento quimioterápico convencional e pela quimioterapia metronômica, utilizando-se sulfato de vincristina para o tratamento do tumor venéreo transmissível canino(TVTC). Foram selecionados 12 cães, sendo seis para o grupo que recebeu quimioterapia convencional (G1) e seis cães para o grupo que recebeu quimioterapia metronômica (G2). O grupo G1 recebeu sulfato de vincristina, uma vez por semana, na dose de 0,75mg/m2, até o desaparecimento do tumor e o grupo G2 foi tratado com sulfato de vincristina, três vezes por semana, na dose de 0,25mg/m2, até o desaparecimento do tumor. Antes e após o tratamento quimioterápico foram realizados exames hematológicos e bioquímicos sanguíneos para avaliação das principais alterações causadas pelos dois modelos quimioterápicos. Os cães submetidos à quimioterapia convencional tiveram alterações leucocitárias significativas (p 0,05), causando uma leucopenia por neutropenia enquanto nos cães, submetidos à quimioterapia metronômica, os leucócitos mantiveram-se dentro do intervalo de referência. A metade dos cães do grupo G1 tiveram uma anemia do tipo normocítica normocrômica. A única alteração bioquímica observada foi o aumento da ureia no grupo G2. Desta forma, a quimioterapia metronômica para o tratamento do TVT com sulfato de vincristina, demonstrou ser um excelente método para a cura do animal, com menores reduções de efeitos adversos, sobretudo, na manutenção do leucograma dos cães e na redução de animais com anemia.

Comparison between hematological and biochemical changes caused by conventional and metronomic chemotherapies in the treatment of canine transmissible venereal tumor / Comparação entre as alterações hematológicas e bioquímicas ocasionadas pela quimioterapia convencional e quimioterapia metronômica no tratamento do tumor venéreo transmissível canino

This study aimed to report the hematological and biochemical changes caused by conventional and metronomic chemotherapies, using vincristine sulfate to treat canine Transmissible Venereal Tumor (TVT). Twelve dogs were selected, six of them for the group receiving conventional chemotherapy (G1), and six dogs for the group receiving metronomic chemotherapy (G2). The G1 group received vincristine sulfate once a week at the dose of 0.75mg/m² until the tumor had disappeared with treatment, and the G2 group was treated with vincristine sulfate three times a week at the dose of 0.25mg/m2 until the tumor had disappeared. Before and after chemotherapy treatment, hematological and biochemical blood tests were performed to evaluate the main alterations caused by both chemotherapeutic models. Dogs undergoing conventional chemotherapy had significant leukocyte changes (p<0.05), causing neutropenia and leukopenia. In dogs undergoing metronomic chemotherapy, leukocytes remained within the reference range. Half of the dogs in group G1 had normochromic, normocytic anemia. The only biochemical alteration observed was the increase of urea in group G2. Thus, metronomic chemotherapy for the treatment of TVT with vincristine sulfate proved to be an excellent method for treatment, with fewer adverse effects, especially in maintaining the leukogram of dogs within normal range and reducing the number of anemia in animals during treatment.(AU)

Esta pesquisa teve como objetivo relatar as alterações hematológicas e bioquímicas causadas pelo tratamento quimioterápico convencional e pela quimioterapia metronômica, utilizando-se sulfato de vincristina para o tratamento do tumor venéreo transmissível canino(TVTC). Foram selecionados 12 cães, sendo seis para o grupo que recebeu quimioterapia convencional (G1) e seis cães para o grupo que recebeu quimioterapia metronômica (G2). O grupo G1 recebeu sulfato de vincristina, uma vez por semana, na dose de 0,75mg/m2, até o desaparecimento do tumor e o grupo G2 foi tratado com sulfato de vincristina, três vezes por semana, na dose de 0,25mg/m2, até o desaparecimento do tumor. Antes e após o tratamento quimioterápico foram realizados exames hematológicos e bioquímicos sanguíneos para avaliação das principais alterações causadas pelos dois modelos quimioterápicos. Os cães submetidos à quimioterapia convencional tiveram alterações leucocitárias significativas (p<0,05), causando uma leucopenia por neutropenia enquanto nos cães, submetidos à quimioterapia metronômica, os leucócitos mantiveram-se dentro do intervalo de referência. A metade dos cães do grupo G1 tiveram uma anemia do tipo normocítica normocrômica. A única alteração bioquímica observada foi o aumento da ureia no grupo G2. Desta forma, a quimioterapia metronômica para o tratamento do TVT com sulfato de vincristina, demonstrou ser um excelente método para a cura do animal, com menores reduções de efeitos adversos, sobretudo, na manutenção do leucograma dos cães e na redução de animais com anemia.(AU)

Tumor venéreo transmisible canino de presentación atípica. reporte de caso clínico / Canine transmissible venereal tumor of atypical presentation. clinical case report

RESUMEN Se describe el caso de un paciente canino macho entero, raza Bóxer, de ocho años de edad y 30 kg de peso vivo, que ingresó a consulta en el hospital Clínico Veterinario de la Universidad Santo Tomás, sede Santiago, por un aumento de volumen en el ojo derecho, signo clínico con un curso de dos meses de evolución que no respondió al tratamiento con prednisona oral (0,7 mg/kg, dos veces al día (BID), ni a dexametasona y tobramicina en ungüento oftálmico (1 gota, tres veces al día, TID). Al examen físico se observó una masa en el tercer párpado que desplazaba el ojo lateralmente, además de una masa que se palpaba en la base lateral del pene. Se realizó una ecografía ocular que indicó la presencia de una masa de aspecto irregular con parénquima heterogéneo y características neoplásicas en la zona medial del globo ocular derecho y una ecografía abdominal que permitió detectar una masa dorsal a la vejiga. Al realizar citología ecoguiada de las masas intraabdominal y ocular, bajo sedación, se constató una inflamación supurativa, necrosis y displasia epitelial en la masa periorbitaria sugerente de neoplasia, la cual no se pudo diagnosticar fehacientemente; por su parte, la citología de la masa intraabdominal indicó la presencia de Tumor Venéreo Transmisible (TVT). El tratamiento se inició con vincristina (ocho aplicaciones i.v. de 0,7 mg/m2 cada 7 días) lográndose remisión parcial. Ante una posible resistencia al efecto de la quimioterapia, se decidió modificar la terapia a doxorrubicina (30 mg/m2) la cual tuvo respuesta positiva alcanzando remisión completa con una aplicación única.

ABSTRACT An 8 years old, 30 kg live weight, intact male, Boxer breed, was presented at the Santo Tomas Veterinary Teaching Hospital because of a volume increase in his right eye of 2 months of duration; which didn't respond to oral prednisone (0.7 mg/kg, twice a day (BID), or dexamethasone and tobramycin in ophthalmic ointment (1 drop, three times a day, TID). On physical exam, a mass in the third eyelid and another on the base of the penis were noted. Besides that, ocular ultrasonography showed an irregular mass with neoplastic characteristics in the medial area of the eyeball and abdominal ultrasound indicated a mass dorsal to the bladder. Fine needle aspiration of the eye and abdomen masses were done under sedation; cytology of the tumor in the abdomen was compatible with transmissible venereal tumor (TVT) and in the eye the results were suppurative inflammation, necrosis and epithelial dysplasia. Neoplasia couldn't be rule out or confirmed. Initial treatment was started with vincristine (8 applications i.v of 0.7 mg/m2 every 7 days) obtaining a parcial remission; so, considering a possible resistance of the cells to this drug, doxorrubicin (30 mg/rrr2) was used. The patient had a positive response to doxorrubicin achieving complete remission with a single aplication.

Immunohistochemical, lectin histochemical and ultrastructural studies of canine transmissible venereal tumor in Brazil / Estudos imuno-histoquímico, lectino-histoquímico e ultraestrutural do Tumor Venéreo Transmissível Canino no Brasil

Canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a naturally occurring contagious round-cell neoplasia, with poorly understood origin and transmission. This study aims to further investigate the tumor nature through immunohistochemistry, lectin histochemistry and transmission electron microscopy (TEM) analysis, and to provide support for diagnostic and differential diagnoses of CTVT. Immunohistochemistry was performed in 10 genital and six exclusively extragenital tumors, which were previously diagnosed by citology and histopathology. CTVT samples were incubated with biotinylated antibodies to specific membrane and cytoplasmic antigens (anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-vimentin, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3, polyclonal anti-CD117, polyclonal CD3 and anti-CD79a), followed by the avidin-biotin-peroxidase complex technique. The lectins Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, JSA, PSA, PHA-L, PHA-E and RCA were additionally tested in four genital CTVTs and TEM was performed in eight genital tumors. The anti-vimentin antibody revealed strong immunoreactivity to neoplastic cells in all the assessed samples (16/16). The polyclonal anti-CD3 antibodies showed moderate to strong immunoreactivity in fourteen (14/16) and the polyclonal anti-CD117 in fifteen cases (15/16). There was no immunoreactivity to anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3 and anti-CD79a antibodies. At lectin histochemistry, it was observed strong staining of tumor cells to Con-A, PHA-L and RCA. There was no histopathological and immunoreactivity differences between genital and extragenital CTVTs. These findings do not support the hypothesis of histiocytic origin of CTVT. In contrast, the lectin histochemical results were similar to cells from lymphoid/myeloid origin.(AU)

O Tumor Venéreo Transmissível Canino (CTVT) é uma neoplasia de células células redondas, contagiosa, com origem e transmissão ainda mal compreendidas. Com a finalidade de aprofundar a investigação sobre a natureza (origem) do TVTC, bem como fornecer subsídios para o estabelecimento do diagnóstico e diagnóstico diferencial, realizaram-se avaliações imuno-histoquímica, lectino-histoquímica e ultraestrutural de TVTC(s). A avaliação imuno-histoquímica foi feita em 10 TVTCs genitais e em 6 exclusivamente extragenitais previamente diagnosticados através de citologia e da histopatologia. Os TVTCs foram testados para reagentes específicos de antígenos de membrana e citoplasmáticos (anti-lisozima, anti-macrófago, anti-vimentina, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79, anti-CD117) com utilização da técnica complexo avidina-biotina-peroxidase. Adicionalmente, foram utilizadas as lectinas Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, SJA, PSA, PHA-L, PHA-E e RCA em quatro TVTCs genitais. Microscopia eletrônica foi realizada em oito TVTC genitais. Em 100% dos tumores testados (16/16) com anticorpo anti-vimentina (mono e policlonal) houve forte imuno-reatividade. Não houve reatividade para os anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79a e anti-CD117 quando empregamos anticorpos monoclonais, entretanto, com a utilização de anticorpos policlonais verificou-se marcação dos tumores com os anticorpos anti-CD3 e anti-CD117. Na avaliação lectino-histoquímica foi verificada forte marcação das células tumorais com Con-A, PHA-L e RCA. Não houve diferença histopatológica e de imuno-reatividade entre os TVTCs genitais e extragenitais. Estes achados não corroboram com a hipótese da origem histiocítica do CTVT (ausência de reatividade dos anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago e anti-CD18), entretanto, os resultados da avaliação lectino-histoquímica foram em parte similares aos obtidos quando células de origem linfóide/mielóide (ConA, PHA-L e RCA) foram analisadas (Gimeno et al. 1995).(AU)

Immunohistochemical, lectin histochemical and ultrastructural studies of canine transmissible venereal tumor in Brazil / Estudos imuno-histoquímico, lectino-histoquímico e ultraestrutural do Tumor Venéreo Transmissível Canino no Brasil

Canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a naturally occurring contagious round-cell neoplasia, with poorly understood origin and transmission. This study aims to further investigate the tumor nature through immunohistochemistry, lectin histochemistry and transmission electron microscopy (TEM) analysis, and to provide support for diagnostic and differential diagnoses of CTVT. Immunohistochemistry was performed in 10 genital and six exclusively extragenital tumors, which were previously diagnosed by citology and histopathology. CTVT samples were incubated with biotinylated antibodies to specific membrane and cytoplasmic antigens (anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-vimentin, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3, polyclonal anti-CD117, polyclonal CD3 and anti-CD79a), followed by the avidin-biotin-peroxidase complex technique. The lectins Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, JSA, PSA, PHA-L, PHA-E and RCA were additionally tested in four genital CTVTs and TEM was performed in eight genital tumors. The anti-vimentin antibody revealed strong immunoreactivity to neoplastic cells in all the assessed samples (16/16). The polyclonal anti-CD3 antibodies showed moderate to strong immunoreactivity in fourteen (14/16) and the polyclonal anti-CD117 in fifteen cases (15/16). There was no immunoreactivity to anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3 and anti-CD79a antibodies. At lectin histochemistry, it was observed strong staining of tumor cells to Con-A, PHA-L and RCA. There was no histopathological and immunoreactivity differences between genital and extragenital CTVTs. These findings do not support the hypothesis of histiocytic origin of CTVT. In contrast, the lectin histochemical results were similar to cells from lymphoid/myeloid origin.(AU)

O Tumor Venéreo Transmissível Canino (CTVT) é uma neoplasia de células células redondas, contagiosa, com origem e transmissão ainda mal compreendidas. Com a finalidade de aprofundar a investigação sobre a natureza (origem) do TVTC, bem como fornecer subsídios para o estabelecimento do diagnóstico e diagnóstico diferencial, realizaram-se avaliações imuno-histoquímica, lectino-histoquímica e ultraestrutural de TVTC(s). A avaliação imuno-histoquímica foi feita em 10 TVTCs genitais e em 6 exclusivamente extragenitais previamente diagnosticados através de citologia e da histopatologia. Os TVTCs foram testados para reagentes específicos de antígenos de membrana e citoplasmáticos (anti-lisozima, anti-macrófago, anti-vimentina, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79, anti-CD117) com utilização da técnica complexo avidina-biotina-peroxidase. Adicionalmente, foram utilizadas as lectinas Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, SJA, PSA, PHA-L, PHA-E e RCA em quatro TVTCs genitais. Microscopia eletrônica foi realizada em oito TVTC genitais. Em 100% dos tumores testados (16/16) com anticorpo anti-vimentina (mono e policlonal) houve forte imuno-reatividade. Não houve reatividade para os anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79a e anti-CD117 quando empregamos anticorpos monoclonais, entretanto, com a utilização de anticorpos policlonais verificou-se marcação dos tumores com os anticorpos anti-CD3 e anti-CD117. Na avaliação lectino-histoquímica foi verificada forte marcação das células tumorais com Con-A, PHA-L e RCA. Não houve diferença histopatológica e de imuno-reatividade entre os TVTCs genitais e extragenitais. Estes achados não corroboram com a hipótese da origem histiocítica do CTVT (ausência de reatividade dos anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago e anti-CD18), entretanto, os resultados da avaliação lectino-histoquímica foram em parte similares aos obtidos quando células de origem linfóide/mielóide (ConA, PHA-L e RCA) foram analisadas (Gimeno et al. 1995).(AU)

Immunohistochemical, lectin histochemical and ultrastructural studies of canine transmissible venereal tumor in Brazil

ABSTRACT: Canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a naturally occurring contagious round-cell neoplasia, with poorly understood origin and transmission. This study aims to further investigate the tumor nature through immunohistochemistry, lectin histochemistry and transmission electron microscopy (TEM) analysis, and to provide support for diagnostic and differential diagnoses of CTVT. Immunohistochemistry was performed in 10 genital and six exclusively extragenital tumors, which were previously diagnosed by citology and histopathology. CTVT samples were incubated with biotinylated antibodies to specific membrane and cytoplasmic antigens (anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-vimentin, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3, polyclonal anti-CD117, polyclonal CD3 and anti-CD79a), followed by the avidin-biotin-peroxidase complex technique. The lectins Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, JSA, PSA, PHA-L, PHA-E and RCA were additionally tested in four genital CTVTs and TEM was performed in eight genital tumors. The anti-vimentin antibody revealed strong immunoreactivity to neoplastic cells in all the assessed samples (16/16). The polyclonal anti-CD3 antibodies showed moderate to strong immunoreactivity in fourteen (14/16) and the polyclonal anti-CD117 in fifteen cases (15/16). There was no immunoreactivity to anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3 and anti-CD79a antibodies. At lectin histochemistry, it was observed strong staining of tumor cells to Con-A, PHA-L and RCA. There was no histopathological and immunoreactivity differences between genital and extragenital CTVTs. These findings do not support the hypothesis of histiocytic origin of CTVT. In contrast, the lectin histochemical results were similar to cells from lymphoid/myeloid origin.

RESUMO: O Tumor Venéreo Transmissível Canino (CTVT) é uma neoplasia de células células redondas, contagiosa, com origem e transmissão ainda mal compreendidas. Com a finalidade de aprofundar a investigação sobre a natureza (origem) do TVTC, bem como fornecer subsídios para o estabelecimento do diagnóstico e diagnóstico diferencial, realizaram-se avaliações imuno-histoquímica, lectino-histoquímica e ultraestrutural de TVTC(s). A avaliação imuno-histoquímica foi feita em 10 TVTCs genitais e em 6 exclusivamente extragenitais previamente diagnosticados através de citologia e da histopatologia. Os TVTCs foram testados para reagentes específicos de antígenos de membrana e citoplasmáticos (anti-lisozima, anti-macrófago, anti-vimentina, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79, anti-CD117) com utilização da técnica complexo avidina-biotina-peroxidase. Adicionalmente, foram utilizadas as lectinas Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, SJA, PSA, PHA-L, PHA-E e RCA em quatro TVTCs genitais. Microscopia eletrônica foi realizada em oito TVTC genitais. Em 100% dos tumores testados (16/16) com anticorpo anti-vimentina (mono e policlonal) houve forte imuno-reatividade. Não houve reatividade para os anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79a e anti-CD117 quando empregamos anticorpos monoclonais, entretanto, com a utilização de anticorpos policlonais verificou-se marcação dos tumores com os anticorpos anti-CD3 e anti-CD117. Na avaliação lectino-histoquímica foi verificada forte marcação das células tumorais com Con-A, PHA-L e RCA. Não houve diferença histopatológica e de imuno-reatividade entre os TVTCs genitais e extragenitais. Estes achados não corroboram com a hipótese da origem histiocítica do CTVT (ausência de reatividade dos anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago e anti-CD18), entretanto, os resultados da avaliação lectino-histoquímica foram em parte similares aos obtidos quando células de origem linfóide/mielóide (ConA, PHA-L e RCA) foram analisadas (Gimeno et al. 1995).

Tumor venéreo transmisible canino: análisis de casos de 2008- 2014 en el Hospital Veterinario de Botucatu / Canine transmissible venereal tumor: casuistic analisis of 2008- 2014 at the Veterinary Hospital of Botucatu / Tumor venéreo transmissível canino: análise da casuística 2008- 2014 no Hospital Veterinário de Botucatu

El Tumor Venéreo Transmisible (TVT) es un tumor de células redondas de origen incierta, su diseminación ocurre principalmente por el contacto sexual o por el trasplante directo de células neoplásicas. Con el objetivo de establecer parámetros según la predisposición sexual, racial, etaria y la localización extragenital de mayor incidencia de ese tumor en perros atendidos en el Hospital Veterinario de Botucatu, fue realizado un estudio retrospectivo con 260 casos de ocurrencia natural de TVT durante el periodo de 6 años. Los machos, sin raza definida (SRD) y con edad superior a 7 años fueron los más afectados. La región más afectada fue la genital, seguida por la región nasal, este último aspecto, lleva al TVT a un nuevo nivel en la lista de diagnósticos diferenciales cuando consideramos los signos clínicos de epistaxis uni y/o bilaterar, dispnea compensatoria, secreción mucopurulenta a serosanguinolenta y obstrucción nasal.

The Transmissible Venereal Tumor (TVT) is a round cell tumor with uncertain origin, which is spread by sexual contact or by direct transplantation of neoplastic cells. In order to establish parameters according to sexual, racial, age predisposition and mainly to the extragenital location with the highest incidence of this tumor in dogs, a retrospective study of 260 cases of naturally occurring TVT was performed during the period of 6 years. The most affected dogs were male, with mixed breed and over the age of 7 years. The most frequent involvement region is the genitalia, followed by the nasal region, a fact that leads the TVT to a new level in differential diagnosis considering the clinical signs of uni and/or bilateral epistaxis, compensatory dyspnea, sanguinopurulent or mucopurulent discharge and nasal obstruction.

O Tumor Venéreo Transmissível (TVT) é um tumor de células redondas de origem incerta, cuja disseminação ocorre principalmente por contato sexual ou por transplante direto de célula neoplásica. Com o objetivo de estabelecerem-se parâmetros segundo a predisposição sexual, racial, etária e principalmente quanto à localização extragenital de maior incidência desse tumor em cães, foi realizado um estudo retrospectivo de 260 casos de ocorrência natural de TVT no período de 6 anos. Os cães mais acometidos foram os machos, sem raça definida (SRD) e com idade acima de 7 anos. A região de acometimento mais frequente é a genitália, seguida pela região nasal, fato esse que leva o TVT a um novo patamar na lista de diagnósticos diferenciais quando consideramos os sinais clínicos de epistaxe uni e/ou bilateral, dispneia compensatória, secreção mucopurulenta a serosanguinolenta e obstrução nasal.

Immunocytochemical characterization of primary cell culture in canine transmissible venereal tumor / Caracterização imunocitoquímica de culturas primárias de tumor venéreo transmissível canino

Immunochemistry with anti-vimentin, anti-lysozyme, anti-alpha 1 antitrypsin, anti-CD3 and anti-CD79α antibodies has been used for characterization of primary cell culture in the transmissible venereal tumor (TVT). Samples for primary cell culture and immunohistochemistry assays were taken from eight dogs with cytological and clinical diagnosis of TVT. To validate the immunochemical results in the primary cell culture of TVT, a chromosome count was performed. For the statistical analysis, the Mann-Whitney test with p<0.05 was used. TVT tissues and culture cells showed intense anti-vimentin immunoreactivity, lightly to moderate immunoreactivity for anti-lysozyme, and mild for anti-alpha-antitrypsin. No marking was achieved for CD3 and CD79α. All culture cells showed chromosomes variable number of 56 to 68. This is the first report on the use of immunocytochemical characterization in cell culture of TVT. Significant statistic difference between immunochemistry in tissue and culture cell was not established, what suggests that the use of this technique may provide greater certainty for the confirmation of tumors in the primary culture. This fact is particularly important because in vitro culture of tumor tissues has been increasingly used to provide quick access to drug efficacy and presents relevant information to identify potential response to anticancer medicine; so it is possible to understand the behavior of the tumor.(AU)

Os anticorpos anti-vimentina, anti-lisozima, anti-alfa 1 antitripsina, anti-CD3 e anti-CD79α foram empregados para a caracterização de culturas primárias de tumor venéreo transmissível canino (TVT). Amostras para cultura primária e imuno-histoquímica foram coletadas de oito cães com diagnóstico clínico e citológico de TVT. Para validar o resultado inmunocitoquímico nas culturas de TVT foi realizada a contagem de cromossomos. Para a análise estatística o teste de Mann-Whitney foi empregado a um nível de significância de p<0.05. As culturas e os tecidos de TVT apresentaram intensa reatividade para vimentina, moderada a leve para Lisozima, moderada para alfa-antitripsina e não houve marcação para CD3 e CD79α. Finalmente, todas as culturas apresentaram números de cromossomos que variaram de 56 a 68. Este é o primeiro relato que apresenta o uso da immunocitoquímica para a caracterização de culturas de TVT. Assim, e devido ao fato de se observar semelhança entre a imunomarcação em células e tecidos, sugere-se que o uso desta técnica possa auxiliar na confirmação de culturas primárias do tumor, fato muito importante porque a utilização da cultura do tumor pode permitir o acesso a informação relevante sobre resposta potencial a um tratamento e conhecimento do comportamento biológico do tumor.(AU)

Tumor venéreo transmisible canino: análisis de casos de 2008- 2014 en el Hospital Veterinario de Botucatu / Canine transmissible venereal tumor: casuistic analisis of 2008- 2014 at the Veterinary Hospital of Botucatu / Tumor venéreo transmissível canino: análise da casuística 2008- 2014 no Hospital Veterinário de Botucatu

El Tumor Venéreo Transmisible (TVT) es un tumor de células redondas de origen incierta, su diseminación ocurre principalmente por el contacto sexual o por el trasplante directo de células neoplásicas. Con el objetivo de establecer parámetros según la predisposición sexual, racial, etaria y la localización extragenital de mayor incidencia de ese tumor en perros atendidos en el Hospital Veterinario de Botucatu, fue realizado un estudio retrospectivo con 260 casos de ocurrencia natural de TVT durante el periodo de 6 años. Los machos, sin raza definida (SRD) y con edad superior a 7 años fueron los más afectados. La región más afectada fue la genital, seguida por la región nasal, este último aspecto, lleva al TVT a un nuevo nivel en la lista de diagnósticos diferenciales cuando consideramos los signos clínicos de epistaxis uni y/o bilaterar, dispnea compensatoria, secreción mucopurulenta a serosanguinolenta y obstrucción nasal.(AU)

The Transmissible Venereal Tumor (TVT) is a round cell tumor with uncertain origin, which is spread by sexual contact or by direct transplantation of neoplastic cells. In order to establish parameters according to sexual, racial, age predisposition and mainly to the extragenital location with the highest incidence of this tumor in dogs, a retrospective study of 260 cases of naturally occurring TVT was performed during the period of 6 years. The most affected dogs were male, with mixed breed and over the age of 7 years. The most frequent involvement region is the genitalia, followed by the nasal region, a fact that leads the TVT to a new level in differential diagnosis considering the clinical signs of uni and/or bilateral epistaxis, compensatory dyspnea, sanguinopurulent or mucopurulent discharge and nasal obstruction.(AU)

O Tumor Venéreo Transmissível (TVT) é um tumor de células redondas de origem incerta, cuja disseminação ocorre principalmente por contato sexual ou por transplante direto de célula neoplásica. Com o objetivo de estabelecerem-se parâmetros segundo a predisposição sexual, racial, etária e principalmente quanto à localização extragenital de maior incidência desse tumor em cães, foi realizado um estudo retrospectivo de 260 casos de ocorrência natural de TVT no período de 6 anos. Os cães mais acometidos foram os machos, sem raça definida (SRD) e com idade acima de 7 anos. A região de acometimento mais frequente é a genitália, seguida pela região nasal, fato esse que leva o TVT a um novo patamar na lista de diagnósticos diferenciais quando consideramos os sinais clínicos de epistaxe uni e/ou bilateral, dispneia compensatória, secreção mucopurulenta a serosanguinolenta e obstrução nasal.(AU)

Immunocytochemical characterization of primary cell culture in canine transmissible venereal tumor / Caracterização imunocitoquímica de culturas primárias de tumor venéreo transmissível canino

Immunochemistry with anti-vimentin, anti-lysozyme, anti-alpha 1 antitrypsin, anti-CD3 and anti-CD79 antibodies has been used for characterization of primary cell culture in the transmissible venereal tumor (TVT). Samples for primary cell culture and immunohistochemistry assays were taken from eight dogs with cytological and clinical diagnosis of TVT. To validate the immunochemical results in the primary cell culture of TVT, a chromosome count was performed. For the statistical analysis, the Mann-Whitney test with p 0.05 was used. TVT tissues and culture cells showed intense anti-vimentin immunoreactivity, lightly to moderate immunoreactivity for anti-lysozyme, and mild for anti-alpha-antitrypsin. No marking was achieved for CD3 and CD79. All culture cells showed chromosomes variable number of 56 to 68. This is the first report on the use of immunocytochemical characterization in cell culture of TVT. Significant statistic difference between immunochemistry in tissue and culture cell was not established, what suggests that the use of this technique may provide greater certainty for the confirmation of tumors in the primary culture. This fact is particularly important because in vitro culture of tumor tissues has been increasingly used to provide quick access to drug efficacy and presents relevant information to identify potential response to anticancer medicine; so it is possible to understand the behavior of the tumor.(AU)

Os anticorpos anti-vimentina, anti-lisozima, anti-alfa 1 antitripsina, anti-CD3 e anti-CD79 foram empregados para a caracterização de culturas primárias de tumor venéreo transmissível canino (TVT). Amostras para cultura primária e imuno-histoquímica foram coletadas de oito cães com diagnóstico clínico e citológico de TVT. Para validar o resultado inmunocitoquímico nas culturas de TVT foi realizada a contagem de cromossomos. Para a análise estatística o teste de Mann-Whitney foi empregado a um nível de significância de p 0.05. As culturas e os tecidos de TVT apresentaram intensa reatividade para vimentina, moderada a leve para Lisozima, moderada para alfa-antitripsina e não houve marcação para CD3 e CD79. Finalmente, todas as culturas apresentaram números de cromossomos que variaram de 56 a 68. Este é o primeiro relato que apresenta o uso da immunocitoquímica para a caracterização de culturas de TVT. Assim, e devido ao fato de se observar semelhança entre a imunomarcação em células e tecidos, sugere-se que o uso desta técnica possa auxiliar na confirmação de culturas primárias do tumor, fato muito importante porque a utilização da cultura do tumor pode permitir o acesso a informação relevante sobre resposta potencial a um tratamento e conhecimento do comportamento biológico do tumor.(AU)

Tumor venéreo transmissível com metástase em baço: relato de caso / Transmissible Venereal Tumor with metastatic spleen: case report / Tumor Venéreo Transmisible con bazometastásico: reporte de un caso

O Tumor Venéreo Transmissível (TVT) é uma neoplasia que é transmitida através do ato sexual, pelo contato das células tumorais com o epitélio previamente lesado. Em sua maioria se desenvolvem na genitália externa das fêmeas e no pênis no macho, o diagnóstico é baseado no exame clínico e no exame citológico.Esse trabalho tem como objetivo relatar o caso de uma cadela com sinais compatíveis com TVT, onde através do exame ultrassonográfico foi descoberto que o animal também possuía uma massa na região do baço. Após ter sido encaminhado ao setor cirúrgico, foi realizada a esplenectomia, onde posteriormente foi confirmado através do exame histopatológico que o tumor do baço era metástase do tumor vaginal. A literatura cita que cerca de 5% dos casos causam metástase em outros órgãos, fazendo desse caso um relato incomum na rotina clínica veterinária.(AU)

Transmissible Venereal Tumor (TVT) is a neoplasm that is transmitted through sexual intercourse, through contact of tumor cells with the previously injured epithelium. Mostly develop on the external female genitalia and penis in the male, the diagnosis is based on clinical examination and cytology.This paper aims to report the case of a dog with signs consistent with TVT, which by ultrasonographic examination was also discovered that the animal had a mass in the splenic region. After being taken to the operating sector, splenectomy, which was later confirmed by histopathological examination the tumor was the spleen metastasis vaginal tumor was performed. The literature suggests that about 5% of cases cause metastasis in other organs, making this an unusual case reported in clinical routine.(AU)

Tumor Venéreo Transmisible (TVT) es una neoplasia que se transmite a través de la cimasexual, a través del contacto de las células tumorales con el epitelio previamente lesionada, sobre todo si desenvolve los genitales externos de la mujer y el pene dei macho, el diagnóstico se basa en examen y la citología clínica. Este trabajo es objeito reportar el caso de una perra con compativos signos con TVT,donde a través de la ecografía se descubrió que el animal también tenía una masa en la región dei bazo. Después de ser llevado ai sector operativo se realizó esplenectomía, que fue confirmado más tarde por el examen histopatológico la metástasis tumoral bazo era el tumor vaginal. La literatura sugiere que aproximadamente el 5 % de los casos causan metástasis en otros órganos, por lo que un informe de caso inusual en la rutina clínica.(AU)

Tumor venéreo transmissível com metástase em baço: relato de caso / Transmissible Venereal Tumor with metastatic spleen: case report / Tumor Venéreo Transmisible con bazometastásico: reporte de un caso

O Tumor Venéreo Transmissível (TVT) é uma neoplasia que é transmitida através do ato sexual, pelo contato das células tumorais com o epitélio previamente lesado. Em sua maioria se desenvolvem na genitália externa das fêmeas e no pênis no macho, o diagnóstico é baseado no exame clínico e no exame citológico.Esse trabalho tem como objetivo relatar o caso de uma cadela com sinais compatíveis com TVT, onde através do exame ultrassonográfico foi descoberto que o animal também possuía uma massa na região do baço. Após ter sido encaminhado ao setor cirúrgico, foi realizada a esplenectomia, onde posteriormente foi confirmado através do exame histopatológico que o tumor do baço era metástase do tumor vaginal. A literatura cita que cerca de 5% dos casos causam metástase em outros órgãos, fazendo desse caso um relato incomum na rotina clínica veterinária.

Transmissible Venereal Tumor (TVT) is a neoplasm that is transmitted through sexual intercourse, through contact of tumor cells with the previously injured epithelium. Mostly develop on the external female genitalia and penis in the male, the diagnosis is based on clinical examination and cytology.This paper aims to report the case of a dog with signs consistent with TVT, which by ultrasonographic examination was also discovered that the animal had a mass in the splenic region. After being taken to the operating sector, splenectomy, which was later confirmed by histopathological examination the tumor was the spleen metastasis vaginal tumor was performed. The literature suggests that about 5% of cases cause metastasis in other organs, making this an unusual case reported in clinical routine.

Tumor Venéreo Transmisible (TVT) es una neoplasia que se transmite a través de la cimasexual, a través del contacto de las células tumorales con el epitelio previamente lesionada, sobre todo si desenvolve los genitales externos de la mujer y el pene dei macho, el diagnóstico se basa en examen y la citología clínica. Este trabajo es objeito reportar el caso de una perra con compativos signos con TVT,donde a través de la ecografía se descubrió que el animal también tenía una masa en la región dei bazo. Después de ser llevado ai sector operativo se realizó esplenectomía, que fue confirmado más tarde por el examen histopatológico la metástasis tumoral bazo era el tumor vaginal. La literatura sugiere que aproximadamente el 5 % de los casos causan metástasis en otros órganos, por lo que un informe de caso inusual en la rutina clínica.

Transmissible venereal tumor (TVT) with metastasis to the mammary gland / Tumor venéreo transmissível (TVT) com metástase para a glândula mamária

Background: Transmissible venereal tumour (TVT) is a malignancy that in natural conditions develops in the genitalia of the dog. The nature of this transplantable tumor has been extensively studied, but it has not been possible to associate any viral particle to the development and spread of the disease. Coitus is considered the main form of transmission, related to the presentation of the classic TVT in the external genitalia of dogs, but although rare, it can cause metastasis. The aim of this study was to report two cases of genital presentation of this neoplasm, with metastatic lesions in the mammary gland, to contribute to the better understanding of its biological behavior. Cases: Two bitches, one mixed breed, with five years old and another, Pit Bull breed, with one year old, were presented with vulvar bleeding for eight months and 15 days, respectively. Lesions were observed in the vulva and inguinal mammary glands. Clinical examination showed, in two patients, a reddish mass located in the vulva. However, nodules of smooth consistency were identified in the right and left inguinal mammary glands of both dogs. With the exception of mammary lesion located in the right inguinal mixed breed bitch whose cytological diagnosis was lipoma, other lesions were diagnosed as TVT, once samples showed hypercellularity with homogeneous population of round cells with eccentric and...(AU)

Transmissible venereal tumor (TVT) with metastasis to the mammary gland / Tumor venéreo transmissível (TVT) com metástase para a glândula mamária

Background: Transmissible venereal tumour (TVT) is a malignancy that in natural conditions develops in the genitalia of the dog. The nature of this transplantable tumor has been extensively studied, but it has not been possible to associate any viral particle to the development and spread of the disease. Coitus is considered the main form of transmission, related to the presentation of the classic TVT in the external genitalia of dogs, but although rare, it can cause metastasis. The aim of this study was to report two cases of genital presentation of this neoplasm, with metastatic lesions in the mammary gland, to contribute to the better understanding of its biological behavior. Cases: Two bitches, one mixed breed, with five years old and another, Pit Bull breed, with one year old, were presented with vulvar bleeding for eight months and 15 days, respectively. Lesions were observed in the vulva and inguinal mammary glands. Clinical examination showed, in two patients, a reddish mass located in the vulva. However, nodules of smooth consistency were identified in the right and left inguinal mammary glands of both dogs. With the exception of mammary lesion located in the right inguinal mixed breed bitch whose cytological diagnosis was lipoma, other lesions were diagnosed as TVT, once samples showed hypercellularity with homogeneous population of round cells with eccentric and...

Immunohistochemical study of genital and extragenital forms of canine transmissible venereal tumor in Brazil / Estudo imuno-histoquímico de formas genitais e extragenitais do tumor venéreo transmissível canino no Brasil

Aiming to provide insight and discussing the problems related to the diagnosis and differential diagnosis of canine transmissible venereal tumor (CTVT), especially in its extragenital form, immunohistochemical evaluation was performed and a comparison was established by analysis of the microscopic appearance of 10 genital CTVTs and 13 exclusively extragenital CTVTs previously diagnosed by cytology and histopathology. CTVTs samples were incubated with biotinylated antibodies raised against specific membrane (anti-macrophage) and cytoplasmic antigens (anti-lysozyme, anti-S-100 protein, anti-vimentin and anti-CD18) and subsequently developed using streptavidin-biotin peroxidase and streptavidin-biotin-alkaline phosphatase methods. A strong reactivity with the anti-vimentin antibody was found in 100% of the tumors tested (22/22). No reactivity was found for the anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-S-100 protein and anti-CD18. No histopathological or immunoreactivity differences between genital and extragenital CTVTs were found. These findings do not corroborate the hypothesis of histiocytic origin of CTVT (no reactivity to anti-lysozyme, anti-macrophage and anti-CD 18 antibodies). In addition, the antibody panel used is useful to narrow the differential diagnosis for lymphomas, histiocytic tumors, amelanotic melanomas, and poorly differentiated epithelial neoplasias, among others.(AU)

Com a finalidade de fornecer subsídios e discutir os problemas referentes ao diagnóstico e ao diagnóstico diferencial do tumor venéreo transmissível canino (TVTC), principalmente em sua forma extragenital, foi realizada a avaliação imuno-histoquímica e estabelecido termo de comparação com o aspecto microscópico em 10 TVTCs genitais e em 13 exclusivamente extragenitais previamente diagnosticados através de citologia e histopatologia. Os TVTCs foram testados para reagentes específicos de antígenos de membrana (anti-macrófago) e citoplasmáticos (anti-lisozima, anti-proteína S-100, anti-alfa-1-antitripsina, anti-vimentina e anti-CD18) com a utilização da técnica complexo avidina-biotina-peroxidase e estreptavidina-biotina-fosfatase Em 100% dos tumores testados (22/22) com anticorpo anti-vimentina houve forte imuno-reatividade. Não houve reatividade para os anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago, anti-proteína S-100 e anti-CD18. Não houve diferença histopatológica e de imuno-reatividade entre os TVTCs genitais e extragenitais. Estes achados indicam que os TVTCs avaliados não são de origem histiocítica (ausência de reatividade dos anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago e anti-CD18). O painel de anticorpos utilizado é útil para o diagnóstico diferencial deste tumor com linfomas, tumores histiocíticos, melanomas amelanóticos e neoplasias de origem epitelial pobremente diferenciadas, entre outros.(AU)

Immunohistochemical study of genital and extragenital forms of canine transmissible venereal tumor in Brazil / Estudo imuno-histoquímico de formas genitais e extragenitais do tumor venéreo transmissível canino no Brasil

Aiming to provide insight and discussing the problems related to the diagnosis and differential diagnosis of canine transmissible venereal tumor (CTVT), especially in its extragenital form, immunohistochemical evaluation was performed and a comparison was established by analysis of the microscopic appearance of 10 genital CTVTs and 13 exclusively extragenital CTVTs previously diagnosed by cytology and histopathology. CTVTs samples were incubated with biotinylated antibodies raised against specific membrane (anti-macrophage) and cytoplasmic antigens (anti-lysozyme, anti-S-100 protein, anti-vimentin and anti-CD18) and subsequently developed using streptavidin-biotin peroxidase and streptavidin-biotin-alkaline phosphatase methods. A strong reactivity with the anti-vimentin antibody was found in 100% of the tumors tested (22/22). No reactivity was found for the anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-S-100 protein and anti-CD18. No histopathological or immunoreactivity differences between genital and extragenital CTVTs were found. These findings do not corroborate the hypothesis of histiocytic origin of CTVT (no reactivity to anti-lysozyme, anti-macrophage and anti-CD 18 antibodies). In addition, the antibody panel used is useful to narrow the differential diagnosis for lymphomas, histiocytic tumors, amelanotic melanomas, and poorly differentiated epithelial neoplasias, among others.

Com a finalidade de fornecer subsídios e discutir os problemas referentes ao diagnóstico e ao diagnóstico diferencial do tumor venéreo transmissível canino (TVTC), principalmente em sua forma extragenital, foi realizada a avaliação imuno-histoquímica e estabelecido termo de comparação com o aspecto microscópico em 10 TVTCs genitais e em 13 exclusivamente extragenitais previamente diagnosticados através de citologia e histopatologia. Os TVTCs foram testados para reagentes específicos de antígenos de membrana (anti-macrófago) e citoplasmáticos (anti-lisozima, anti-proteína S-100, anti-alfa-1-antitripsina, anti-vimentina e anti-CD18) com a utilização da técnica complexo avidina-biotina-peroxidase e estreptavidina-biotina-fosfatase Em 100% dos tumores testados (22/22) com anticorpo anti-vimentina houve forte imuno-reatividade. Não houve reatividade para os anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago, anti-proteína S-100 e anti-CD18. Não houve diferença histopatológica e de imuno-reatividade entre os TVTCs genitais e extragenitais. Estes achados indicam que os TVTCs avaliados não são de origem histiocítica (ausência de reatividade dos anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago e anti-CD18). O painel de anticorpos utilizado é útil para o diagnóstico diferencial deste tumor com linfomas, tumores histiocíticos, melanomas amelanóticos e neoplasias de origem epitelial pobremente diferenciadas, entre outros.

Expression of P-glycoprotein, multidrug resistance-associated protein, glutathione-S-transferase pi and p53 in canine transmissible venereal tumor / Expressão da glicoproteína-P, proteína associada à múltiplas drogas, glutationa-S-transferase pi e p53 no tumor venéreo transmissível canino

The overexpression of proteins P-glycoprotein (P-gp), multidrug resistance-associated protein (MRP1), mutant p53, and the enzyme glutathione-S-transferase (GSTpi) are related to resistance to chemotherapy in neoplasms. This study evaluated the expression of these markers by immunohistochemistry in two groups of canine TVT, without history of prior chemotherapy (TVT1, n=9) and in TVTs presented unsatisfactory clinical response to vincristine sulfate (TVT2, n=5). The percentage of specimens positively stained for P-gp, MRP1, GSTpi and p53 were, respectively 88.8%, 0%, 44.5% and 22.2% in TVT1 and 80%, 0%, 80% and 0% in TVT2. In TVT1, one specimen presented positive expression for three markers and four specimens for two markers. In TVT2, three specimens expressed P-gp and GSTpi. In conclusion, the canine TVTs studied expressed the four markers evaluated, but just P-gp and GSTpi were significantly expressed, mainly at cytoplasm and cytoplasm and nuclei, respectively, either before chemotherapy as after vincristine sulfate exposure. Future studies are needed to demonstrate the function of these two markers in conferring multidrug resistance (MDR) or predict the response to chemotherapy in canine TVT.(AU)

A superexpressão das proteínas glicoproteína-P (Gp-P), proteína associada à resistência à múltiplas drogas 1 (MRP1) e p53 mutante e a enzima glutationa-S-transferase pi (GSTpi) está relacionada com resistência à quimioterapia em neoplasias humanas e caninas. Este estudo avaliou a expressão, por meio da imuno-histoquímica desses marcadores em espécimes de TVT caninos sem histórico de quimioterapia prévia (TVT1, n=9) e em TVT caninos que apresentaram resposta clínica insatisfatória ao sulfato de vincristina (TVT2, n=5). A porcentagem de espécimes positivos para Gp-P, MRP1, GSTpi e p53 foram, respectivamente 88,8%, 0%, 44,5% e 22,2% no grupo TVT1 e 80%, 0%, 80% e 0% no grupo TVT2. No TVT1, um espécime apresentou expressão positiva para três marcadores e quatro para dois marcadores. No TVT2, três espécimes expressaram a Gp-P e GSTpi. Em conclusão, os TVTs caninos estudados expressaram os quatro marcadores avaliados, no entanto apenas a Gp-P e GSTpi foram significativamente expressas, principalmente no citoplasmas e no citoplasma e no núcleo, respectivamente, tanto antes da quimioterapia quanto após à exposição ao sulfato de vincristina. Estudos futuros são necessários para demonstrar a função desses dois marcadores em conferir resistência à multiplas drogas (RMD) ou predizer a resposta a quimioterapia no TVT canino.(AU)