Valores de referência para níveis séricos do fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-I) numa população adulta do Estado do Rio de Janeiro, Brasil / Reference ranges for serum levels of insulin-like growth Factor I (IGF-I) in an adult population of Rio de Janeiro State, Brazil

O nível sérico do Fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-I) é fundamental para auxiliar no dignóstico e controle terapêutico dos transtornos relacionados à secreção do Hormônio de Crescimento (GH), bem como no diagnóstico e seguimento de outras doenças. Estabelecer valores de referência para as dosagens séricas de IGF-I por um ensaio imunoquimioluminométrico (ICMA), utilizando o sistema automatizado Immulite 2000/Diagnostic Products Corporation (DPC), e por um ensaio imunoradiométrico (IRMA), utilizando o kit comercial ACTIVE IGF-I/Diagnostic System Laboratories (DSL)-5600, numa população brasileira adulta da cidade do Rio de Janeiro. Este estudo, aprovado pelo Comitê de Ética do Instituto Estadual de Hematologia Arthur de Siqueira Cavalcanti, Rio de Janeiro, Brasil, incluiu amostras de 484 indivíduos saudáveis (251 homens e 233 mulheres) com idades entre 18 e 70 anos. As amostras foram estudadas por ICMA- Immulite 2000/DPC and IRMA- ACTIVE IGF-I/DSL-5600. Para análise dos dados foram utilizados modelos específicos para idade e sexo, após transformação dos dados de IGF-I. Foi observada uma lenta diminuição dos níveis de IGF-I com a idade usando ambos os ensaios. Os níveis de IGF-I foram signicativamente (p=0,0181) mais elevados em mulheres do que em homens, quando as amostras foram analisadas usando ICMA. Não houve diferença significativa dos níveis de IGF-I entre homens e mulheres quando as amostras foram analisadas usando IRMA. Este estudo estabeleceu valores de referência de IGF-I específicos para idade e sexo, determinados com o sistema automatizado ICMA-Immulite 2000/DPC, e valores de referência de IGF-I específicos para idade, determinados com o kit comercial IRMA- ACTIVE IGF-I/DSL-5600, em uma população adulta brasileira, da cidade do Rio de Janeiro

Serum level of insulin-like growth factor I (IGF-I) is fundamental in order to aid in the diagnosis and follow-up of growth hormone (GH)-related disorders, as well as in the diagnosis and follow-up of other diseases. The aim of this investigation was to determine reference values for IGF-I using an automated immunochemiluminometric assay (ICMA) system Immulite 2000/Diagnostic Products Corporation (DPC); and an immunoradiometric assay (IRMA), using the commercial kit ACTIVE IGF-I/Diagnostic System Laboratories (DSL)-5600, in an adult Brazilian population of Rio de Janeiro city. The study, approved by the Ethical Committee of the Instituto Estadual de Hematologia Arthur de Siqueira Cavalcanti, Rio de Janeiro, Brazil, included samples of blood taken from 484 healthy subjects (251men, 233 women) aged from 18 up to 70. The samples were analyzed by ICMA- Immulite 2000/DPC and IRMA- ACTIVE IGF-I/DSL-5600. For statistical analysis, age and sex-specific models were fitted after transformation of IGF-I values. In adulthood, a slow age-dependent decrease was found, using both assays. IGF-I in women were significantly (p=0,0181) higher than in men when samples were analayzed using ICMA.There was no significant difference between men and women IGF-I values when samples were analayzed using IRMA. The present study established age- and sex specific IGF-I reference values, determined with the automated system: ICMA-Immulite 2000/DPC and age-specific IGF-I reference values determined with the IRMA- ACTIVE IGF-I/DSL-5600, in an adult Brazilian population of Rio de Janeiro city

Estado actual y perspectiva de las pruebas relacionadas con el estudio de la función tiroidea / Present state and prospects of tests related to the thyroid function study

Las enfermedades tiroideas pueden ser diagnosticadas, en la mayoría de los casos, por la clínica. Sin embargo, existen situaciones que requieren de las pruebas de función tiroidea con el fin de valorar correctamente al paciente en las etapas iniciales de la disfunción de esta glàndula, con el fin de establecer el tratamiento adecuado de forma individual y el seguimiento de la evolución de la enfermedad. En esta revisión hacemos referencia a las pruebas empleadas para valorar el estado de la función tiroidea y se señalan sus ventajas, limitaciones y tendencias actuales. La determinación de TSH por procederes de segunda y tercera generaciones permite establecer el diagnóstico del hipertiroidismo e hipotiroidismo primarios, aún en las formas subclínicas de ambos, al mostrar inhibición o hipersecreción, respectivamente, así como la dosis adecuada de l-levotiroxina y orientar a una causa hipofisaria de esta disfunción. La determinación de T4 es de gran valor para conocer la intensidad de la disfunción tiroidea y para valorar la eficacia del tratamiento en las primeras semanas de iniciado. La determinación de T3 tiene su principal indicación ante la sospecha de la presencia del llamado hipertiroidismo por T3. La determinación de T4 y T3 totales da lugar a una interpretación incorrecta en cuanto a las situaciones que modifican la globulina transportadora de tiroxina (TBG). La tendencia actual es al empleo de TSHs como prueba inicial para el diagnóstico de la disfunción tiroidea, la cual se debe indicar teniendo siempre en cuenta la clínica y, de ser necesario, asociarla a la determinación de T4 o T3 libres(AU)

The thyroid diseases may be diagnosed in most of cases by the clinics. However, there are circumstances that required thyroid function tests to correctly assess the patient in initial stages of thyroid dysfunction and give an adequate treatment on an individual basis and the follow-up of the disease. This review makes reference to the tests used to assess the condition of the thyroid function and mentions their advantages, limitations and present trends. The determination of TSH by second and third generation procedures allow setting up diagnoses of primary hyperthyroidism and hypothyroidism, even in the subclinical forms of both entities since or hypersecretion or inhibition are respectively exposed, and they also allow prescribing the right dose of 1-Levothyroxine and orienting towards a hypophyseal cause of thyroid dysfunction. T4 determination is of great value for finding out the intensity of thyroid dysfunction and furthermore assessing the effectiveness of the treatment in the first weeks. T3 determination is mainly indicated when the so-called T3-caused hyperthyroidism is suspected. The determination of total T4 and T3 gives rise to a wrong interpretation regarding the conditions that change the thyroxine-transporting globulin (TBG). The present trend is the use of TSH as an initial test for diagnosing the thyroid dysfunction, which should be indicated taking the clinic into account, and if necessary, it should be associated with the determination of free T4 or free T3(AU)

Homeostasis del calcio: rol de la parathormona y el péptido relacionado a la parathormona. Aplicaciones clínicas y ensayos específicos / Calcium homeostasis: parathormone and parathormone related protein clinical usefulness and specific assays

Para comprender los desórdenes del metabolismo óseo y mineral es necesario tener un conocimiento integrado del sistema hormeostático del calcio y la regulación que sobre él ejercen las hormonas calciotrópicas. Esta revisión presenta un informe actualizado sobre el complejo sistema homeostático que regula y mantiene constante las concentraciones intra y extracelulares de calcio. Hace mención al sensor de calcio que a su vez regula la síntesis y liberación de la parathormona (PTH), principal hormona calciotrópica. También se analizan los mecanismos celulares involucrados en la síntesis, secreción y metabolismo de la PTH, así como sus mecanismos celulares y moleculares que dan lugar a la acción a nivel de los órganos efectores. Se presenta el rol del péptido relacionado a la PTH (PTHrp) sobre el metabolismo óseo y mineral. Dicho péptido es el responsable, en condiciones patológicas, de la hipercalcemia tumoral, pero, además, presenta una acción en condiciones fisiológicas normales tal como ocurre durante el embarazo y la lactancia. Ambas hormonas utilizan el mismo receptor y desencadenan respuestas similares sobre la homeostasis del calcio. Se analizan las dificultades para la determinación bioquímica de la PTH y PTHrp así como los inmunoensayos actualmente disponibles. Finalmente se hace mención a la aplicación clínica de los ensayos de PTH y PTHrp

Homeostasis del calcio: rol de la parathormona y el péptido relacionado a la parathormona. Aplicaciones clínicas y ensayos específicos / Calcium homeostasis: parathormone and parathormone related protein clinical usefulness and specific assays

Para comprender los desórdenes del metabolismo óseo y mineral es necesario tener un conocimiento integrado del sistema hormeostático del calcio y la regulación que sobre él ejercen las hormonas calciotrópicas. Esta revisión presenta un informe actualizado sobre el complejo sistema homeostático que regula y mantiene constante las concentraciones intra y extracelulares de calcio. Hace mención al sensor de calcio que a su vez regula la síntesis y liberación de la parathormona (PTH), principal hormona calciotrópica. También se analizan los mecanismos celulares involucrados en la síntesis, secreción y metabolismo de la PTH, así como sus mecanismos celulares y moleculares que dan lugar a la acción a nivel de los órganos efectores. Se presenta el rol del péptido relacionado a la PTH (PTHrp) sobre el metabolismo óseo y mineral. Dicho péptido es el responsable, en condiciones patológicas, de la hipercalcemia tumoral, pero, además, presenta una acción en condiciones fisiológicas normales tal como ocurre durante el embarazo y la lactancia. Ambas hormonas utilizan el mismo receptor y desencadenan respuestas similares sobre la homeostasis del calcio. Se analizan las dificultades para la determinación bioquímica de la PTH y PTHrp así como los inmunoensayos actualmente disponibles. Finalmente se hace mención a la aplicación clínica de los ensayos de PTH y PTHrp (AU)

Cuantificación de tirotropina. Ensayo inmunorradiométrico versus inmunoquimioluminimétrico / Quantificación de tyrotropin. Immunoradiometric versus inmmunochemoheminometric assays

Con el propósito de evaluar métodos opcionales al ensayo inmunorradiométrico -establecido como método de referencia en medicina nuclear- en la cuantificación de analitos cuya concentración en sangre es en nano o picogramos/mL, se comparó la determinación de tirotropina por ensayo inmunoquimioluminimétrico. Por los métodos mencionados se analizaron simultáneamente 36 muestras séricas de pacientes atendidos en consulta externa del Hospital de Especialidades, Centro Médico Nacional Siglo XXI, seleccionados en forma aleatoria. Los resultados obtenidos mediante la aplicación de parámetros estadísticos demostraron excelente correlación entre ambos métodos. A través del análisis de la concentración sérica de tirotropina por los dos procedimientos, se obtuvo el mismo número de pacientes eutiroideos y de pacientes con valores anormales. De acuerdo con los resultados se puede concluir que ambos métodos poseen sensibilidad y especificidad similares y determinan la misma concentración sérica de tirotropina.

Sensitive human thyrotropin immunoradiometric assay set up by the identification and minimization of nonspecific bindings.

An immunoradiometric assay (IRMA) of human thyrotropin (hTSH), based on magnetic solid phase separation, was studied especially in terms of its nonspecific bindings (B0) which were identified as a product of the interaction between an altered form of radioiodinated anti-hTSH monoclonal antibody (125I-mAB) and the uncoupled magnetizable cellulose particle (matrix). Preincubation with the same matrix, solid phase saturation with milk proteins, tracer storage at 4 degrees C and serum addition during incubation were found to be particularly effective in preventing their formation. These findings were used to reproducibly decrease nonspecific bindings to values < 0.1% (or < 70 cpm), thus increasing the signal-to-noise ratio (B60/B0) up to values of 300-500. This way hTSH radioassays were obtained with functional sensitivities of about 0.05 mIU/L and analytical sensitivities of the order of 0.02 mIU/L. Such sensitivities, and, more importantly, a general improvement in assay performance, were obtained in a highly reproducible manner and all over the useful tracer life.

Development of an immunoradiometric assay for quantitative determination of CrylA(b) protein in transgenic sugarcane plants.

An immunoradiometric assay (IRMA) system was performed to quantify the recombinant CrylA(b) protein produced by transgenic sugarcane lines. The method allowed detection of 0.1-1 ng CrylA(b) per 25 micrograms of soluble protein in leaf extracts from plants transformed with an expression vector containing a truncated version of the CrylA(b) gene from Bacillus thuringiensis. The technique was based upon the use of radioiodinated immunopurified antibodies specific to natural CrylA proteins in a one-step sandwich procedure by direct simultaneous incubation of the leaf extracts with the detecting antibody solution. This IRMA system provides a simple routine method to quantify the CrylA proteins in transgenic plants with different expression levels. We suggest that the methodology presented herein may become an efficient tool to quantify heterologous or native plant proteins, present at low levels in tissue extracts.

Normal ranges for immunochemiluminometric gonadotropin assays.

OBJECTIVE: We sought to establish normative data for spontaneous and gonadotropin-releasing hormone (GnRH)-stimulated serum luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH) levels measured by new immunochemiluminometric assays (ICMA) in children and adolescents. METHODS: Random serum samples were obtained from 375 normal subjects (0.1 to 17.7 years, 230 female subjects). Intravenous GnRH stimulation tests were performed in 41 normal subjects (4.8 to 18 years, 20 female subjects). Normal ranges were calculated by age and Tanner stage. Immunochemiluminometric assays of LH and FSH concentrations were compared with levels obtained by a sensitive immunofluorometric assay and a less sensitive radioimmunoassay. RESULTS: Random gonadotropin concentrations in normal children followed the pattern of transient elevation in infancy, low but measurable prepubertal levels, and markedly increased values at puberty. Spontaneous LH levels were higher in male infants but were not statistically different in boys and girls after infancy. Mean prepubertal LH was 0.04 +/- 0.04 IU/L (n = 66), rising 100-fold during puberty. Spontaneous FSH levels were much higher than LH values, were higher in female infants, and rose threefold at puberty. Peak GnRH-stimulated LH was identical in prepubertal boys and girls (1.8 +/- 1.3 IU/L, n = 17) and increased 20-fold at puberty. Mean peak GnRH-stimulated FSH was highest in prepubertal female subjects. Luteinizing hormone values measured by ICMA and immunofluorometric assay were highly correlated, but radioimmunoassay levels diverged markedly from ICMA levels at lower concentrations. Because absolute levels were higher, FSH values correlated adequately in the three assays throughout the normal physiologic range. CONCLUSIONS: Measurement of LH by ICMA is much more sensitive than older assay methods. Spontaneous LH can be accurately measured by ICMA to the very low levels present in normal prepubertal children, providing a potentially important biochemical discriminator of pubertal status. An ICMA GnRH-stimulated LH level greater than 5 IU/L is suggestive of maturing gonadotropin secretion. The ICMA LH assays provide significant enhancement in sensitivity; these assays should be used when levels may be low, and by their accuracy may reduce the time and expense of testing procedures.

Detección precoz de hipotiroidismo congénito en Chile: resultados en 24 meses / Neonatal early screening of congenital hypothyroidism in Chile: results in 24 months

Se informa el resultado de 2 años de aplicación en las regiones Metropolitana y VI de Chile, de un plan de rastreo masivo de hipotiroidismo congénito en recién nacidos, financiado por el Ministerio de Salud. Se midió TSH por ensayo radioinmunométrico en sangre obtenida de punción del talón y recolectada en papel filtro, de 130 383 recién nacidos entre los 2 y 5 días de vida, con coberturas de 58,9 en el primero y 98,8 por ciento en el segundo año de aplicación del programa. Se rellamaron los 66 niños cuya concentración sérica de TSH fue igual o mayor a 20 mUI/I para realizar examen de confirmación en suero con TSH por IRMA y T4 por radioinmunoensayo y simultáneamente cintigrafía tiroidea con Tc99. Ocho niños rellamados no respondieron, 21 (0,016 por ciento) resultaron falsos positivos y 37 (0,028 por ciento) tenían TSH > 10 mUI/I en el examen de comprobación. De estos últimos, 23 tenían hipotiroidismo congénito y 14 hipertirotropinemia. En el segumiento de los casos de hipertirotropinemia se pesquisaron otros 8 de hipotiroidismo congénito compensado, 3 de hipertirotropinemia transitoria y 3 continuaron siendo sospechosos de hipotiroidismo congénito. En total se pesquisaron 31 casos de hipotiroidismo congénito, incidencia de 1/4 206 RN vivos, proporción de 25:6 entre mujeres y varones. La cintigrafía tiroidea mostró agenesia en 3 pacientes (10,34 por ciento), ectopia en 16 (55,17 por ciento), bocio en 7 (24,14 por ciento), en uno había sólo disminución de concentración de Tc99 (3,4 por ciento) y en dos no existían alteraciones cintilográficas (6,9 por ciento). El tratamiento con levotiroxina 10 a 15 µgúkg se inició a la edad de 19,74 días, promedio. Sólo un caso se trató después de un mes, a los 73 días de edad. La psicometría (prueba de Bayley y Stanford Binet) y el examen neurológico fueron normales en todos los casos, excepto en el caso que se trató tardíamente

Valores de TSH neonatal en una población rural / TSH neonatal values in a rural area

El hipotiroidismo congénito es una causa importante de retardo mental prevenible y se presenta en uno de cada 3 por 4.000 nacidos vivos. Su detección y tratamiento oportuno evita el daño neurológico. En el trabajo se presentan los resultados de la determinación de TSH neonatal en 13.953 muestras de sangre obtenidas de recién nacidos del Area Occidente. Los niveles de TSH fueron determinados por ensayo inmunorradiométrico (IRMA), utilizando anticuerpos monoclonales. La técnica es efectiva, rápida y de alta especificidad. En el 0,2% de las muestras analizadas se encontraron niveles de TSH mayores de 20 mUI/1. Se detectaron casos de hipotiroidismo congénito (1 por 2.791 recién nacidos estudiados) los que están en tratamiento